高效液相色谱法测定武当玉兰中木兰脂素的含量

目的:建立反相高效液相色谱法测定武当玉兰中木兰脂素含量的方法.方法:采用Agilent HCC8(250 mm ×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-四氢呋喃-水(35∶ 1∶64),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为278 nm.结果:武当玉兰中木兰脂素在0.05 ～ 1.02 mg/mL(r=0.9998)范围内线性关系良好,平均加样回收率为97.9％;RSD不大于2.0％.结论:本方法快速,简便,重复性好,可用于武当玉兰及其制剂中木兰脂素的含量测定.     

高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量

目的 建立高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠尿液中草酸含量。方法 将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组(n=12)和乙二醇组(n=12)。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C₁₈(250×4.6 mm,5 μm),以甲醇(0.1 mol/L)、醋酸铵水溶液(15∶85)为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20 ℃。结果 大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x+378730,R²=0.9984和y=7810.5x-16635,R²=0.9967;最低检测浓度为5 μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50~2000.00 μg/ml,低浓度线性范围为6.25~100.00 μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%~10.8%和3.8%~9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度:(736.35±254.52)μg/ml比(51.56±36.34)μg/ml,(687.35±234.53)μg/ml比(50.24±42.34)μg/ml;24 h尿草酸含量:(11.23±4.12)mg比(0.87±0.45)mg,(9.89±3.55)mg比(0.77±0.65)mg;P均＜0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义(P均＞0.05)。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。     

高效液相色谱法测定草酸钙结石大鼠尿中草酸含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠尿液中草酸含量。方法将SPF级雄性健康Wistar大鼠24只采用随机数字表法分为空白对照组(n=12)和乙二醇组(n=12)。空白对照组给予去离子水喂养,每天以1 ml生理盐水灌胃;乙二醇组给予1%乙二醇自由饮水喂养,每天2%氯化铵2 ml灌胃。造模28 d后收集两组大鼠24 h尿液,采用HPLC法测定尿中草酸含量,并与铬酸钾氧化甲基红催化光度法的结果进行比较。HPLC法采用色谱柱Aglient 5TC-C18(250×4.6 mm,5μm),以甲醇(0.1 mol/L)、醋酸铵水溶液(15∶85)为流动相,流速为1.2 ml/min,紫外检测波长为314 nm,柱温20℃。结果大鼠尿液中高、低浓度草酸标准曲线分别为y=5909.1x+378730,R2=0.9984和y=7810.5x-16635,R2=0.9967;最低检测浓度为5μg/ml,大鼠尿液中草酸高浓度线性范围为62.50~2000.00μg/ml,低浓度线性范围为6.25~100.00μg/ml。平均回收率为95.1%,日内及日间精密度分别为3.4%~10.8%和3.8%~9.4%。HPLC法和铬酸钾氧化甲基红催化光度法均显示乙二醇组大鼠尿草酸浓度和24 h尿草酸含量显著高于空白对照组[尿草酸浓度:(736.35±254.52)μg/ml比(51.56±36.34)μg/ml,(687.35±234.53)μg/ml比(50.24±42.34)μg/ml;24 h尿草酸含量:(11.23±4.12)mg比(0.87±0.45)mg,(9.89±3.55)mg比(0.77±0.65)mg;P均<0.01];两种方法检测出的尿草酸浓度和24 h尿草酸含量差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 HPLC法简单快速、回收率高、精密度好,与铬酸钾氧化甲基红催化光度法检测结果一致,适用于大鼠尿中草酸含量的测定。     

高效液相色谱法测定人尿乳果糖及甘露醇

目的：建立一项快速、灵敏测定人尿乳果糖（Ｌ）及甘露醇（Ｍ）的实验方法。方法：烧伤病人口服给药：乳果糖１０ｇ，甘露醇５ｇ，高效液相色谱示差（ＨＰＬＣ－ＲＩ）检测法测定各时段Ｌ、Ｍ的排出量。结果：Ｌ、Ｍ的线性范围为４～５００ｍｇ／Ｌ，平均回收率为９６．３９％～９８．３７％，精密度（ＣＶ％）为２．６８～３．７４，最低检测限０．０５ｍｇ／Ｌ。结论：Ｌ／Ｍ的值增大，可示肠通透性增高     

高效液相色谱测定大鼠早孕组织多胺的含量

目的：建立大鼠早孕组织中发含量ＨＰＬＣ测定的方法。方法：大鼠早孕组织中多胺用１０％三氯乙酸提取，苯甲酰氯柱前衍生，反相ＨＰＬＣ测定。结果：多胺中腐胺、精脒和精胺能较好分离；腐胺检测限可达１ｎｍｏｌ、精脒和精胺可达５ｎｍｏｌ；腐胺在１￣１０００ｎｍｏｌ、精脒和精胺在５￣１０００ｎｍｏｌ范围内线性良好；腐胺、精脒和精胺平均生物样本回收率分别为９５．８％、９２．８％和８１．７％，日内变异数（ＣＶ％）分别     

血清中罗红霉素浓度反相高效液相色谱测定法的改进

OBJECTIVE: To make better the RP-HPLC method for the determination of roxithromycin(RM) in human serum. METHODS: RM and clarithromycin (internal standard) were extracted from alkalinized serum sample (500 microliters) with methylene chloride. After evaporation of the organic layer, the residue was dissolved in 100 microliters of acetonitrile-ammonium phosphate (1:1, pH 6.0) and washed with n-hexane, then 20 microliters was injected onto a column (5 microns, 15 cm x 4.6 mm) of Penomenex luna C18. The mobile phase was acetonitrile-0.05 mol/L phosphoric acid (39:19:42, adjusted to pH 7.2 with ammonia water) pumped at 1.2 ml/min through the column. The variable wavelength UV detector operated at 0.01 aufs and the wavelength was set at 210 nm. RESULTS: The retention times for RM and clarithromycin were 4.4 min and 5.0 min, respectively. Standard curve was linear in the concentration range of 0.25 to 32 mg/L. The detection limit in serum was 0.06 mg/L; the average method recovery 97.4%; the inter-day RSD less than 3.0%. CONCLUSION: This method was found to be simple, rapid, sensitive and accurate for determination of RM in human serum.     

人血浆百草枯浓度的高效液相色谱测定法

目的建立高效、灵敏的百草枯血浆浓度高效液相色谱检测法。方法流动相为乙腈-水(8:92),水相中含3.0 mmol.L-1辛烷磺酸钠、0.1 mol.L-1磷酸,二乙胺调pH值为3.0,流速为1.0 mL.min-1;检测波长258 nm;柱温28℃;内标物为Ethyl Viologen Dibromide。血浆沉淀蛋白处理后,进行高效液相色谱分析。结果色谱图基质干扰少,峰形好,线性范围0.1~10μg.mL-1,最低检测线0.01μg.mL-1,方法回收率96.65%~99.42%。结论高效液相色谱内标检测法适用于百草枯中毒患者的血药浓度检测。     

血清中罗红霉素浓度反相高效液相色谱测定法的改进

目的　对测定血清中罗红霉素浓度的高效液相色谱法进行改进。方法　其改进要点是 :采用Penom enex L una C1 8分析柱 (5 μm,15 0 m m× 4.6 m m) ,以乙腈 -甲醇 - 0 .0 5 m ol/ L 磷酸 (39∶ 19∶ 42 ,用氨水调 p H至7.2 )为流动相 ,克拉霉素作内标。血清样品碱化后用二氯甲烷提取浓集 ,再经进一步纯化后进样 ,在 2 10 nm波长处检测 ,按内标法定量。结果　本法与原方法的标准曲线线性范围分别为 0 .2 5～ 32 mg/ L 和 0 .2 5～ 16 m g/ L,最低检出量分别为 5 ng和 2 0 ng,罗红霉素保留时间分别为 5 .0分钟和 13.2 7分钟 ,日内 RSD小于 2 .5 %和 7.5 % ,日间RSD小于 3.0 %和 5 .5 % ,萃取回收率和方法回收率一致。结论　本法与原法相比具有快速简便、灵敏准确等优点     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中游离脂肪酸浓度

目的建立大鼠血浆中游离脂肪酸 (FFAs)浓度的测定方法。方法以十七烷酸为内标 ,用 ψ(异丙醇∶正庚烷∶2mol/L磷酸 ) =(4 0∶10∶1)提取 ,溴苯乙酮衍生化 ,流动相为 ψ(乙腈∶水 ) =(81∶19) ,流速 1.0mL/min ,柱温 5 5℃ ,分析柱Nova pakC18(2 5 0mm× 4 .6mm ,4 μm) ,紫外检测波长 2 4 2nm。 结果各FFAs最低检测限为 0 .6 μmol/L ,平均回收率为 (10 0 .1± 2 0 ) % ,批内、批外RSD <6 .5 %。结论本法稳定、灵敏、可靠 ,适用于大鼠血浆中FFAs浓度测定     

HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱的浓度

目的建立HPLC测定大鼠血浆中钩藤碱浓度的方法。方法色谱柱为ZORBAX SB C18柱（150mm×4.6 mm,5 m）。以甲醇-水（80：20）（含0.0025 mol.L-1三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）为流动相,检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为20 l。结果钩藤碱与内源性杂质有较好分离度,钩藤碱在0.39~12.50g/ml浓度范围内呈良好线性关系;最低检测浓度为0.39 g/ml;回收率大于95%;日内和日间RSD均小于7%。结论此方法准确可靠,可用于测定钩藤碱的血药浓度。     

大鼠体内黄芩苷分析方法的建立

目的：：建立黄芩苷在SD大鼠体内的分析方法。方法：采用高效液相色谱法,使用色谱柱为ODS C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈：2%冰醋酸=20：80,流速为1.0ml/min,检测波长为278nm,柱温35℃,对黄芩苷对照品及模拟生物样品进行测定。结果：黄芩苷的浓度在0.015μg/ml-37.5μg/ml范围线性关系良好(r=0.9996）,高(37.5μg/ml）、中(7.5μg/ml）、低(0.75μg/ml）三个模拟生物样品的平均提取回收率分别为90%、96.12%、99.91%。结论：本研究建立的黄芩苷在大鼠体内的分析方法简便快捷、专属性好,精密度、准确度、重复性、稳定性和提取回收率等各项分析指标能够达到生物样品中药物定量分析研究的方法学要求。     

大鼠N-乙酰基转移酶Ⅱ(NAT2)活性测定方法的建立

目的 建立大鼠乙酰基转移酶Ⅱ(NAT2)的活性测定方法.方法 借助反相高效液相法,通过对实验条件进行相关设定,建立大鼠尿中咖啡因的3种代谢产物[5-乙酰氨基-6-甲酰氨基-3-甲基嘧啶(AFMU)、1-甲基尿酸(1U)和1-甲基黄嘌呤(1X)]测定方法.通过所建方法测定3种代谢产物含量,以AFMU/(AFMU+1U+1...     

尿白蛋白检测对糖尿病性肾病早期诊断的意义

本文报告208例糖尿病（Ⅱ型）常规法尿蛋白阴性者及177例正常健康人所测得的尿白蛋白排出量。结果表明208例患者中的131例（62．98％）尿白蛋白排出量显著高于正常健康人（P＜0．001）。尿白蛋白含量随病程和血糖的增加而增高、尿白蛋白排出量与血糖控制程度有关。63例患者经正规抗糖尿病治疗后，尿白蛋白的排出量逐渐降低，治疗3个月后，与正常健康人相比已无显著差异，P＞0．05。研究表明，尿白蛋白测定可作为糖尿病肾病早期诊断的指标及早期糖尿病肾病尿白蛋白可以逆转。     

HPLC法同时测定复方北豆根氨酚那敏片中咖啡因和对乙酰氨基酚的含量

目的：探讨高效液相色谱法（HPLC）建立复方北豆根氨酚那敏片的质量控制方法。方法采用C18（4．6mm×150mm ,5μm）色谱柱;流动相为甲醇（A）：水（B）＝25：75;检测波长：214nm ;柱温：25℃;流速：0．6ml/min ;进样量：10μl。结果咖啡因和对乙酰氨基酚分别在0．030～0．295μg、0．763～7．625μg范围内呈良好的线性关系,线性回归方程分别为：y ＝1．0×107x -8728．1,r ＝1．0000和 y ＝3．6×106x＋6．1×105,r ＝0．9995。回收率分别为100．60％和98．33％, RSD分别为0．59％和0．52％（ n ＝9）。结论该方法科学、简便、快速、准确,能同时对复方北豆根氨酚那敏片中咖啡因和对乙酰氨基酚两种成分有效地进行质量控制。     

HPLC法测定尿液中2,3-吲哚醌的含量

①目的建立一种准确可靠的尿液中2,3-吲哚醌浓度的测定方法。②方法原尿用乙酸乙酯提取,提取液挥干后加盐酸溶解后进样,采用高效液相色谱仪检测2,3-吲哚醌的含量。③结果2,3-吲哚醌在200~5000μg/L范围内线性关系良好,回归方程为c=10.52x+129.62,r=0.9989,最低检测限为10ng。日内、日间变异系数均≤7%,平均回收率为98.4%。④结论该测定方法准确可靠,可用于尿液中2,3-吲哚醌的含量测定。     

种植和野生甘西鼠尾草中丹参酮Ⅰ 测定方法的建立和含量比较

目的 建立种植和野生甘西鼠尾草中丹参酮Ⅰ的测定方法并行含量比较.方法 借助高效液相法,通过摸索试验条件建立相关试验方法.结果 丹参酮Ⅰ进样量在(0.05～3.2)μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系.回归方程为y=18748.96x+ 116.71,r=0.9963.回收率为97.75％,种植甘西鼠尾草丹参酮Ⅰ含量...     

锦州市健康人发尿硒含量的测定

本文立用930型荧光光度计测定锦州市51例健康人发硒,43例健康人尿硒含量分别为0.325±0.025μg/g,0.021±0.018μg /ml(X±SD),重复实验变异系数为5.1％和4.8％。回收率分别为90％、86％。     

大鼠酒精性肝损伤模型的制备及观察

目的探讨大鼠酒精性肝损伤模型的建立方法,为研究酒精性肝病提供理想的动物模型。方法将30只雄性Wistar清洁级大鼠随机分为对照组和模型组,各15只。模型组采用40%及50%的酒精,分别灌胃4周,共8周。8周后测定大鼠血清ALT、AST、TG、TCH;第4、6、8周各解剖1只模型组大鼠,观察大鼠肝脏的组织学改变和超微结构的改变。结果 8周后,对照组大鼠的肝指数为(2.77±0.26),模型组大鼠的肝指数为(3.63±0.75),模型组高于对照组(P<0.01);模型组大鼠ALT、AST、TG、TCH较对照组明显增高(P<0.01),肝脏组织有炎症、坏死、脂肪变性。结论酒精灌胃法制备大鼠酒精性肝损伤模型稳定,病理改变与临床类似,可为临床酒精性肝病的研究提供方便。     

钩藤药材中钩藤碱含量测定方法的建立

目的：建立钩藤药材钩藤碱含量HPLC测定方法。方法：分别对HPLC的色谱柱、流动相、检测波长等色谱条件进行摸索,对样品索式、回流和超声提取方法进行摸索,并采用正交设计的方法考察超声提取的药材破碎度、溶剂浓度、溶剂量和时间。结果：HPLC色谱条件为色谱柱：Gemini C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相∶甲醇—水（含0.002 mol/L三乙胺,冰乙酸调pH至7.5）（64∶36）,流速：1.0 mL/min,检测波长：254 nm。样品供试液制备方法为：药材破碎度为过60目筛的粉末,提取溶剂为75%甲醇,溶剂加入量为15 mL,超声处理40 min。该方法钩藤碱在0.020 9-1.672 0μg范围内有良好线性关系,平均回收率为98.96%,RSD=0.69%（n=6）。结论：建立的含量测定方法简易、准确,可作为钩藤药材钩藤碱含量测定方法。     

HPLC法测定SHR血清中硝苯地平浓度及其药代动力学研究

目的建立血清中硝苯地平浓度的ＨＰＬＣ测定法，研究其在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）体内的药动学。方法ＳＨＲ灌胃给与硝苯地平１０ｍｇ／ｋｇ，用ＨＰＬＣ法测定硝苯地平血清浓度。用乙酸乙酯提取出血清中的硝苯地平，在５０℃水浴中用氮气吹干，残渣用流动相溶解后进样。选用ｓｈｉｍＰａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ柱，甲醇－水（６∶４）作流动相，检测波长２３５ｎｍ。结果：硝苯地平最低检出浓度为０．０２μｇ／ｍｌ，标准曲线线性范围为０．０２～５．０μｇ／ｍｌ（ｒ＝０．９９９７），血样平均回收率为９８．０９％。硝苯地平在大鼠体内的药动学符合一定开放模型，其参数为Ｔ１／２ｋａ＝０．８２８±０．５５ｈ，Ｔ１／２ｋｅ＝３．１７±２．３２ｈ，Ｔｍａｘ＝２．１２±１．４７ｈ，Ｃｍａｘ＝２．７８±１．５０μｇ／ｍｌ和ＡＵＣ＝２４．５±２９．２ｈ·μｇ／ｍｌ。结论本法能满足血清中硝苯地平浓度测定及药动学研究的需要。