上颌窦炎及咽炎患者肺炎链球菌带菌及耐药性调查

目的调查急慢性上颌窦炎及咽炎患者肺炎链球菌带菌及耐药情况. 方法用E-test法及纸片扩散法测定耐药情况. 结果 86株肺炎链球菌中,对青霉素敏感64株(74.4%),低度耐药18株(20.9%),高度耐药4株(4.7%),青霉素耐药菌株对红霉素、氯霉素、复方新诺明及四环素的耐药率比青霉素敏感株高,所有菌株对万古霉素敏感. 结论了解细菌耐药性的变化是合理应用抗生素的重要依据.     

肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱的相关性

目的 了解肺炎链球菌对青霉素和其它抗生素的耐药情况；对40株青霉素敏感菌株和30株青霉素不敏感菌株进行pbp2b基因扩增产物RFLP图谱相关性研究。方法 采用肉汤稀释法、E-试验和K-B纸片法进行抗生素药物敏感试验；通过用特异性引物pF和pR对肺炎链球菌进行PCR扩增，并对扩增产物进行限制性内切酶HaeⅢ消化反应。结果 肺炎链球菌对青霉素的不敏感率为9．9％～14．6％；40株青霉素敏感菌株(MICs≤0．094μg/ml)中的39株(97．5％)为s1、s2和s3三种之一，1株为r1；30株青霉素不敏感菌株(MICs≥0．12μg/ml)中的26株(86．7％)为r1-16六种之一，其余4株为s1。结论 青霉素和β-内酰胺酶类抗生素对北京地区的肺炎链球菌具有活性；肺炎链球菌的耐药性和pbp2b基因扩增产物图谱之间有相关性。     

广州地区肺炎住院患儿感染肺炎链球菌的血清型分布及耐药性研究

目的了解广州地区肺炎住院的患儿感染肺炎链球菌的耐药性及血清型分布情况。方法用吸痰法采集患儿痰标本进行涂片，革兰氏染色镜检，合格痰标本划线接种血平板，用E-test法检测分离到的肺炎链球菌对青霉素、阿莫西林、头孢曲松、头孢呋辛、亚胺培南、氧氟沙星、万古霉素、红霉素和克林霉素9种药物的耐药性，采用K-B法检测四环素、复方新诺明的耐药性，并采用荚膜肿胀技术对分离到的79株肺炎链球菌进行血清分型。结果79株肺炎链球菌中青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）11．4％，青霉素中介肺炎链球菌（PISP）77．2％，青霉素敏感肺炎链球菌（PSSP）11．4％，对红霉素、克林霉素的耐药率分别为100％和93．7％，对阿莫西林、氧氟沙星、万古霉素的耐药率均为0，对头孢曲松、头孢呋辛、亚胺培南的耐药率分别为3．8％、72．2％、2．5％。79株肺炎链球菌中只有1株PSSP仅对红霉素耐药．78株肺炎链球菌对两种以上药物耐药．多重耐药率为98．7％（78／79），同时对克林霉素、红霉素、四环素、复方新诺明耐药的菌株65株，占82．3％（65／79）。79株肺炎链球菌血清型分别为19F（70．9％），23F（16．5％），6B（5．1％），4（2．5％），15B（2．5％），不能分型（2．5％），7价疫苗涵盖率为94．9％（75／79）。结论广州地区肺炎住院患儿肺炎链球菌对大环内脂类抗生素红霉素和林可酰胺类抗生素克林霉素耐药情况严重，对二代头孢菌素头孢呋辛耐药率居高，临床治疗儿童肺炎链球菌感染的肺炎应首选阿莫西林和三代头孢菌素。7价疫苗覆盖率高。预防儿童肺炎链球菌感染所致的肺炎，采用7价疫苗可以达到很好效果。     

murM基因变异与肺炎链球菌青霉素高度耐药及头孢曲松耐药的相关性

目的　研究肺炎链球菌murM基因变异与青霉素及头孢曲松耐药的相关性。方法　应用PCR技术扩增肺炎链球菌murM基因并进行基因测序。选取肺炎链球菌株 5 5株 ,包括青霉素敏感株 10株 (MIC≤ 0 .0 6 μg/ml) ;青霉素耐药株 4 5株 ,其中低水平耐药 10株 (MIC 0 .12～ 1μg /ml) ,高水平耐药 35株 (MIC≥ 2 μg/ml) ,在青霉素高水平耐药菌株中 ,对头孢曲松耐药 13株 (MIC≥ 2 μg/ml)。用敏感株R36AmurM基因序列作为比较标准。结果　 5 5株肺炎链球菌murM基因PCR产物测序结果 ,16株murM基因发生显著变异 (变异率≥ 3% ) ,1株青霉素MIC 3μg/ml、头孢曲松MIC 2 μg/ml的菌株 ,其murM基因变异率 3.4 % ;15株青霉素MIC≥ 8μg/ml或头孢曲松MIC≥ 2 μg/ml的菌株 ,murM基因变异率达 10 % ,呈嵌合式变异。murM基因变异与肺炎链球菌青霉素及头孢曲松MIC显著相关 (χ2 =36 .5 32 ,P <0 .0 1;χ2 =37.116 ,P <0 .0 1)。结论　肺炎链球菌murM基因变异与青霉素高度耐药 (MIC≥8μg/ml)及头孢曲松耐药 (MIC≥ 2 μg/ml)有显著的相关性。     

79株肺炎链球菌的耐药性测定

目的调查北京地区肺炎链球菌对青霉素等抗生素的耐药率。方法用Ｅｔｅｓｔ及琼脂稀释法测定临床分离的７９株肺炎链球菌１５种抗生素的最低抑制浓度（ＭＩＣ）。结果Ｅｔｅｓｔ测得１０株（１２．７％）低耐青霉素（ＭＩＣ０．１２５～１μｇ／ｍｌ），１株（１．３％）高耐青霉素（ＭＩＣ４μｇ／ｍｌ）；仅１株处于头孢曲松、头孢噻肟中介范围（ＭＩＣ１μｇ／ｍｌ）．琼脂稀释法测得阿莫西林、阿莫西林／棒酸、头孢呋肟、环丙沙星、氯霉素、四环素、红霉素的耐药率分别为１．３％、１．３％、２．５％、２．５％、１６．５％、４９．４％、４０．５％，所有菌株对头孢曲松、万古霉素敏感。结论北京地区１４％的肺炎链球菌耐青霉素，耐三代头孢菌素及多重耐药株罕见。     

广州地区老年人肺炎链球菌临床分离株的青霉素耐药研究与分子分型

目的调查广州地区老年患者肺炎链球菌分离株对青霉素的敏感性，并分析其亲缘关系。方法K—B纸片法对33株分离自老年住院病人的肺炎链球菌进行青霉素药敏试验；应用PCR技术检测青霉素结合蛋白基因pbp1a，pbp2x，pbp2b；用盒式PCR（BOX—PCR）分析菌株间亲缘关系。用多位点测序分型技术（multilocus sequence typing，MLST）检测青霉素耐药菌株的分子分型。结果青霉素的耐药率为3．03％（1／33）：用PCR方法鉴定PSSP的准确率为68．75％；BOX-PCR可将这33株肺炎链球菌分为21型。MIST分型显示，青霉素耐药菌株属ST271型。结论广州地区老年患者肺炎链球菌对青霉素耐药率较低．用PCR方法检测PSSP有一定的可行性。BOX—PCR显示了较高的分辨率，能快速可靠地检测菌株间的亲缘关系。广州地区流行的耐药克隆与Taiwan^19F-14株同源。     

妇幼医院无乳链球菌临床分布情况及药敏结果分析

目的了解妇幼医院无乳链球菌（GBS）感染的临床分布和药敏情况，为临床感染的预防及治疗提供依据。方法收集妇幼医院临床患者各类临床标本作无乳链球菌培养，经法国生物梅里埃VITEK-2全自动细菌鉴定分析仪进行鉴定和药敏分析的菌株171株。结果171株无乳链球菌株中血培养和泌尿生殖道分泌物标本中分离率最高，其次为脐带分泌物，临床分布以新生儿病区最高，其次为产科病区。药敏结果显示171株无乳链球菌对青霉素、氨苄青霉素敏感或中度敏感，对万古霉素、头孢菌素类抗生素均敏感，对四环素、克林霉素和红霉素的耐药率分别为100％、70．8％和55．6％。结论为防止无乳链球菌感染和新耐药菌株的出现，临床应重视对无乳链球菌的培养检测，并根据药敏结果选择抗生素进行预防和治疗。     

肺炎链球菌耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn的检测

目的 研究耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn在携带肺炎链球菌的北京儿童中分布特点。方法对185株呼吸道感染患儿鼻咽部分离的肺炎链球菌进行以下检测：E-test、琼脂稀释或纸片扩散法测定对大环内酯类、四环素、β-内酰胺类及头孢类等15种抗生素的药物敏感性。PCR检测大环内酯类耐药基因ermB和mef/A，四环素耐药基因tetM以及转座子Tn1545的整合酶基因intTn。结果185株肺炎链球菌的药敏结果显示，对红霉素、克林霉素、四环素和复方磺胺甲基异嗯唑的耐药率较高，分别为78．9％、76．2％、86．0％和78．7％，对阿莫西林，克拉维酸、头孢克洛、头孢曲松和头孢呋辛耐药率较低，分别为2．2％、15．5％、2．8％和14．1％。所有红霉素耐药株均检出ermB和／或mefA，其中79．5％为ermB阳性，17．8％为ermB和mefA同时阳性，2．7％为mefA阳性。tetM基因在分离株中的阳性率是87％，四环素耐药组的tetM基因携带率是96．9％，高于敏感组（26．9％）。四环素耐药株的红霉素耐药率（90．0％）亦高于敏感株组（11．5％）。87．6％的肺炎链球菌存在intTn基因，intTn基因阳性组的红霉素、四环素、氯霉素、复方磺胺甲基异嗯唑和环丙沙星的耐药率较intTn基因阴性组高。分离株最常见的基因组合是intTn＋terM＋ermB，占58．4％。结论北京地区呼吸道感染儿童鼻咽部肺炎链球菌耐大环内酯类抗生素的主要原因是ermB编码的23S rRNA甲基化酶致靶位改变。tetM基因编码蛋白质的核糖体保护作用，是肺炎链球菌四环素耐药的重要机制。接合性转座子Tn1545的存在与菌株的红霉素和四环素耐药关系密切，可能是肺炎链球菌多重耐药的重要机制之一。     

肺炎链球菌青霉素结合蛋白基因pbp2x新的变异与青霉素及头孢噻肟耐药

目的 调查研究肺炎链球菌临床分离株的pbp2x基因和氨基酸序列的变异特点,探讨本地区的肺炎链球菌对青霉素及头孢噻肟的耐药机制.方法 2006年1月-2007年2月收集肺炎链球菌临床分离株34株,进行青霉素及头孢噻肟药敏试验,对青霉素不敏感的肺炎链球菌(PNSP)的青霉素结合蛋白pbp2x基因进行PCR扩增和测序,并进行BLAST分析.结果 有12株PNSP(青霉素及头孢噻肟MIC≥0.5 mg/L)发生了2个重要位点的氨基酸的替换:第一个保守基序STMK内Thr338→Ala及第三个保守基序KSG之前的Leu546→Val氨基酸替换.另外,菌株15发生了第二个保守基序SSN之前的His394→Leu氨基酸替换,而且本研究首次发现了紧邻第一个保守基序STMK后,Met342→Ile位点的氨基酸替换.有17个菌株的pbp2x基因的核苷酸及氨基酸序列出现了新的变异,已向GenBank提交,获得序列号:EU044831、EU089706-EU089709、EU106881-EU106884、EU124672.结论 本地区大多数PNSP的pbp2x核苷酸及氨基酸变异序列高度相似,提示肺炎链球菌对青霉素及头孢噻肟的耐药与pbp2x基因变异相关.     

肺炎链球菌pbp2B基因突变与耐药表型关系的研究

肺炎链球菌主要通过青霉素结合蛋白基因突变，从而改变细胞壁上高相对分子质量青霉素结合蛋白（PBP）的结构，降低了其对抗生素分子的亲和性而产生对青霉素等B内酰胺类抗生素的耐药性。我们对分离自本院的30株肺炎链球菌（青霉素敏感4株，中介5株，耐药21株）用聚合酶链反应（PCR）扩增p6p2B基因，对PCR产物直接进行DNA测序，并与青霉素敏感的SpR6株序列（GenBank登录号NC003098）相比较。     

黏液型肺炎链球菌的表型和遗传学特征

目的了解儿童临床标本中分离的黏液型肺炎链球菌的表型和遗传学特点。方法用奥普托欣试验、乳胶凝集试验和菊糖发酵试验鉴定肺炎链球菌,用纸片扩散法(KirbyBauer法)和Etest法完成菌株的药敏试验,用BOXPCR技术和青霉素结合蛋白基因PCR扩增及限制性内切酶消化分析菌株的遗传学特点。结果分离到黏液型肺炎链球菌5株,占同期肺炎链球菌临床株的2.1%。5株菌株均对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟、甲氧苄啶磺胺异唑、红霉素、氯霉素、利福平、氧氟沙星和万古霉素敏感,仅3株对四环素中介。5株菌株的BOX图谱各不相同,其中1例同时分离到黏液型和非黏液型菌落,两者具有相同的BOX图谱。5株黏液型菌株3种青霉素结合蛋白基因指纹图谱均彼此相同。结论黏液型肺炎链球菌在儿科临床不常见,且对常用抗生素往往敏感,5株黏液型菌株系不同的克隆。     

2012年深圳市光明新区人民医院细菌耐药监测

目的了解2012年深圳市光明新区人民医院临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性。方法采用Microscanauto4鉴定及药敏系统对临床常规细菌进行监测．按CLSl2009年版标准判断药敏结果．并用WHONET5．4软件统计分析。结果全年共分离细菌1818株,其中革兰阳性菌占35．6％,革兰阴性菌占58．O％。葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）占18．3％,凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）占71．9％。肺炎链球菌中青霉素非敏感的肺炎链球菌（PNSSP）占20．7％。大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌产ESBLs菌株分别占43．2％和22．4％。检出5株亚胺培南耐药的肠杆科细菌。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对头孢他啶、哌拉西林、妥布霉素、阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南的耐药率均低于10％。结论本院常见致病菌耐药性不是十分严重,尤其是院内感染的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物耐药率较低。     

脑膜炎奈瑟氏菌对青霉素耐药性监测及其机理的初步研究

对１９６６年～１９９３年２１个省分离的２１８株Ａ、Ｂ和Ｃ群脑膜炎奈瑟氏菌（Ｎｍ）检查对青霉素的耐药情况及其机理，耐药菌株和敏感菌株的ｐｅｎＡ基因扩增后经ＨｐａⅡ消化并比较了它们的酶切图谱。１０８株Ａ群Ｎｍ中有２株耐药，它们是１９８７年和１９８８年分离的；１０１株Ｂ群Ｎｍ中有６株耐药，１９８３年以前仅１株，其余５株是以后的，耐药菌株从３．８％上升到６．７％；９株Ｃ群Ｎｍ中分离出１株耐药菌株，为７０年代分离的。上述耐药菌株中，１株Ａ群和５株Ｂ群为病人菌株，其余皆为携带者菌株。耐药的Ａ群和Ｃ群Ｎｍ与其敏感菌株ｐｅｎＡ基因的ＨｐａⅡ酶切图谱相同，但耐药的Ｂ群Ｎｍ的ｐｅｎＡ基因酶切图谱显出５种谱型，它们与敏感菌株的图谱明显不同。实验结果初步表明我国所分离的少数Ｎｍ对青霉素耐药，Ｂ群Ｎｍ较Ａ群耐药明显些，前者对青霉素耐药可能是ｐｅｎＡ基因的改变所致，关于Ａ群和Ｃ群Ｎｍ对青霉素的耐药机理尚需进一步探讨。     

青岛地区部分医院2005-2008年肺炎链球菌的耐药性分析

目的 监测青岛地区肺炎链球菌的耐药性,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法 采集青岛地区部分医院2005年1月到2008年12月门诊与住院感染患者呼吸道、血液、脑脊液等标本,培养、分离和鉴定肺炎链球菌.根据NCCLS的推荐,采用琼脂微茸稀释法测定分离出的231株肺炎链球菌对11种常用抗菌药物的耐药性,分析耐药趋势及年龄差异.结果 231株肺炎链球菌对青霉素不敏感率为23.38%[耐青霉素肺炎链球菌(PRSP):9.52%;低耐青霉素肺炎链球菌(PISP):13.85%].对头孢噻肟耐药率最低为9.96%(23/231),其次阿莫西林为12.55%(29/231).对红霉素耐药率最高为90.48%(209/231).14岁以下患者PRSP检出率为27.91%(12/43),明显高于成人的PRSP检出率5.38%(10/186).结论 本地区PRSP检出率较2004年前明显增加,并有逐年增加的趋势,肺炎链球菌的耐药性也有逐年上升的趋势.本地区对感染低耐青霉素肺炎链球菌的患者头孢噻肟、阿莫西林可为首选药物.     

儿童感染肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K—B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18．5％;157株产ESBLs,阳性率为63．3％;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18．1％。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药。耐药率达80％～100％;对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56．5％～93．5％之间：但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30％以下,对亚胺培南全部敏感。产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50％-91．7％之间,但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感。ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81．2％以上。产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高。结论广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出：产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和／或ESBLs肺炎克雷伯菌感染的经验用药。     

脑膜炎奈瑟氏菌对青霉素耐药性监测及其机理的初步…

对１９６６年～１９９３年２１个省分离的２１８株Ａ、Ｂ和Ｃ群脑膜炎奈瑟氏菌（Ｎｍ）检查对青霉素的耐药情况及其机理，耐药菌株和敏感菌株的ｐｅｎＡ基因扩增后经ＨｐａＩＩ消化并比较了它们的酶切图谱。１０８株Ａ群Ｎｍ中有２株耐药，它们是１９８７年和１９８８年分离的；１０１株Ｂ群Ｎｍ中有６株耐药，１９８３年以前仅１株，其余５株是以后的，耐药菌株从３．８％上升的６．７％；９株群Ｎｍ中分离出１株耐药菌株，为７０年     

广州地区儿童急性呼吸道感染鼻咽部常见病原菌及其耐药性分析

目的了解儿童急性呼吸道感染（ARTIS）鼻咽部常见的病原菌及其耐药性．方法对285例取鼻咽拭子进行培养，分离鉴定病原菌，同时对肺炎链球菌和流感嗜血杆菌（Hi）进行耐药性监测．结果285例中共检出病原菌161株。肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉氏菌、金黄色葡萄球菌的分离率分别为20．4％、16．5％、13．0％、6．7％．肺炎链球菌对青霉素耐药率高达57．5％，同时对非B一内酰胺类抗生素复方新诺明、四环素、红霉素的耐药率已高达79．2％．89．5％，对头孢曲松、阿莫西林／棒酸尚具有较好的敏感性（85．1％－93．3％）．Hi对氨苄西林的耐药率为13.3％。对头孢克洛、头孢曲松、头孢呋新、阿莫西林／棒酸均有很好的敏感性（96．4％-100％），对四环素、复方新诺明的耐药范围分别为25．3％-56．6％．结论肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、卡他莫拉氏菌和金黄色葡萄球菌是广州地区儿童急性呼吸道感染的常见病原菌．肺炎链球菌和流感嗜血杆菌耐药形势严峻，抗生素合理应用尤为重要．     

呼吸道感染患儿咽拭子细菌培养及药敏情况分析

目的：通过对呼吸道感染住院患儿咽拭子细菌培养及药敏情况的调查，以了解病原菌及其对抗生素敏感情况，方法：每天早上对新入院患儿进行咽拭子采集标本，培养并进行药敏试验．结果：1030例病例中，检出的病原菌最多为肺炎链球菌，共868例(84．3％)，敏感率最高的为头孢曲松，占82．04％．结论：常用抗生素如青霉素、头孢拉定等均有很高的耐药性，值得临床医生关注。     

神经外科医院感染及产超广谱β-内酰胺酶菌株感染分析

目的 研究神经外科医院感染的主要病原菌分布及其耐药情况，以及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌株感染特点，为临床治疗提供依据。方法 通过对患者病历及细菌培养和药敏试验结果的统计分析，计算各种病原菌的构成比和各种抗菌药物的耐药率，不同年份比例的变化趋势采用趋势检验。结果 2003～2005年神经外科281倒患者分离菌株共408株，其中革兰阴性菌占77．2％，革兰阳性菌22．8％。G^-菌对常用的大多数头孢类抗生素耐药率极高，对亚胺硫霉素的敏感率93．7％。G^＋菌对青霉素类抗生素已基本耐药，对万古霉素的敏感率80．6％。分离产ESBLs菌株36株，各年产ESBLs菌占各年总菌株数的比例呈逐年上升趋势。36株产ESBLs菌株对临床常用抗生素耐药率普遍较高，对亚胺硫霉素无耐药。结论 G^- 菌是神经外科医院感染的主要病原菌；病原菌耐药性普遍较高；产ESBLs菌株引起的感染率逐年升高；预防细菌耐药．必须积极采取综合措施，建立细菌耐药监测系统，合理使用抗菌素，以求达到控制或延缓细菌耐药。     

新生儿病房呼吸机相关性肺炎病原菌变迁及药物敏感性分析

目的探讨近年新生儿层流病房应用后新生儿呼吸机相关性肺炎（VAP）的病原菌变迁及药物敏感性情况。方法系统回顾我院新生儿重症监护病房（NICU）近4年接受机械通气〉48h的287例患儿的I临床资料,以发生时间先后分成两组,分析其VAP发病情况、痰培养病原学、药敏结果及治疗转归等。结果近4年NICU的VAP发生率为15．68％．培养出致病菌株共32株．依次为缓症链球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、溶血葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。前两年病原菌以革兰阳性菌为主,主要是缓症链球菌和葡萄球菌属,近两年以革兰阴性杆菌为主,尤以嗜麦芽窄食单胞菌居多。以万古霉素、环丙沙星、氧氟沙星为主要敏感药物,对青霉素类抗生素及第二、三代头孢菌素普遍耐药。结论近年VAP致病菌谱发生显著改变,以耐药性条件致病菌为主,强调综合治疗,预防为主,尽早使用敏感药物。