不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌与慢性牙周炎相关性的研究

目的检测不同fimA基因型牙龈卟啉单胞菌在我国慢性牙周炎患者中的分布状况,及其与牙周炎的相关性。方法收集101例慢性牙周炎患者的龈下菌斑,采用P．gingivalis 16S rRNA和5种五mA基因型的特异引物,用PCR法检测不同fima基因型P．gingivalis的分布;记录取样牙六个位点（近颊、颊正中、远颊、近舌、舌正中、远舌）的牙周临床指标,包括牙周探诊深度,临床附着丧失和探诊出血。结果16S rRNAPCR,P．gingivalis检出率为88．1％。大多数受检牙龈下菌斑只检测出一种fimA基因型（65．1％）,ⅡfimA的总检出率最高为43．8％,其次为Ⅳ fimA,检出率为40．4％;ⅡfimA型和ⅣfimA型P．gingivalis在轻中度和重度牙周组的检出率均最高。结论ⅡfimA型和ⅣfimA型P．gingivalis是我国牙周炎患者龈下菌斑中的优势菌株,表明Ⅱfima型和ⅣfimA型P．gingivalis与我国人群牙周炎的发生发展密切相关。     

牙周炎患者唾液和龈下菌斑3种厌氧微生物的检测

目的：分析不同类型牙周炎患者唾液和集合龈下菌斑中3种厌氧微生物（包括牙龈卟啉单胞菌、福赛坦氏菌和齿垢密螺旋体）的检出率,并探讨唾液中3种微生物的存在状况与牙周临床指标的关系。方法：收集50例侵袭性牙周炎（aggressive periodontitis, AgP）、48例慢性牙周炎（chronic periodontitis, CP）患者和25例非牙周炎者的非刺激性唾液和集合龈下菌斑,应用PCR技术检测两种样本中的牙龈卟啉单胞菌、福赛坦氏菌和齿垢密螺旋体。结果：3种微生物在AgP组、CP组唾液和龈下菌斑中的检出率均显著高于非牙周炎组（P<0.01）。牙龈卟啉单胞菌在龈下菌斑和唾液中的检出率分别为：AgP组100% vs 100%,CP组93.8% vs 93.8%,非牙周炎组为32% vs 48%。福赛坦氏菌在龈下菌斑和唾液中的检出率为：AgP组96% vs 88%,CP组97.9% vs 89.6%,非牙周炎组为32% vs 24%。齿垢密螺旋体在龈下菌斑和唾液中的检出率为：AgP组94% vs 86%,CP组89.6% vs 70.8%,非牙周炎组12% vs 16%。3种微生物在同一患者两种样本检测结果的一致性均较高。唾液中存在3种微生物均与牙龈出血指数密切相关,其中牙龈卟啉单胞菌的OR值高达13.5。结论：牙龈卟啉单胞菌、福赛坦氏菌和齿垢密螺旋体广泛存在于AgP和CP患者的唾液和龈下菌斑中。唾液中牙龈卟啉单胞菌、福赛坦氏菌和齿垢密螺旋体的检出状况与牙周临床指标密切相关,唾液样本可以用于口腔内牙龈卟啉单胞菌、福赛坦氏菌和齿垢密螺旋体的检测。     

牙周炎患者口腔内环境变化对牙菌斑内幽门螺杆菌生长的影响

目的：探讨口腔内环境改变对牙菌斑内幽门螺杆菌（Hp）生长的影响。方法：采用尿素酶试验和甲苯胺蓝染色，对40例牙周炎患者治疗前后牙菌斑内Hp进行检测。结果：牙周炎患者治疗前Hp检出率高于牙周健康者（χ^2=7.81,P＜0．01）；治疗后随着探诊浓度减少和出血指数值减少，龈下菌斑Hp检出率降低（χ^2=12.83,P＜0．01），且龈下菌斑HP检出率又高于龈上菌斑。结论：Hp在口腔内生长与其相应环境有密切关系。     

常见牙周致病菌在唾液与龈下菌斑中检出率的比较

目的 探讨用唾液取代龈下菌斑采集牙周致病菌样本的可能性.方法 选择侵袭性牙周炎和慢性牙周炎患者各36例,应用16S rRNA PCR技术分别检测患者龈下菌斑和唾液中的伴放线放线杆菌(A.a)、牙龈卟啉单胞菌(P.g) 和福赛斯坦纳菌(T.f).以21名牙周健康者作为对照.结果 A.a在侵袭性牙周炎患者唾液和龈下菌斑中的检出率分别为41.67%和50%,与其他两组相比均有显著性差异(P＜0.05);P.g在侵袭性牙周炎和慢性牙周炎患者唾液中的检出率分别为66.67%和50%,在龈下菌斑中的检出率分别为83.33%和91.67%,与对照组的30% 和51.74%比较均有显著差异(P＜0.05);T.f在侵袭性牙周炎、慢性牙周炎和健康对照者龈下菌斑中的检出率分别91.67%、91.67%和85.71%;在唾液中的检出率分别为75%、66.67%和71.43%;三组间比较均无显著性差异(P＞0.05).结论 牙周炎患者的非刺激性全唾液是龈下菌斑样本的集合,可以取代龈下菌斑用于采集细菌样本检测牙周病原菌.     

牙龈卟啉单胞菌fimA基因型在高原和平原地区慢性牙周炎患者中分布差异的研究

目的 分析高原地区和平原地区慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)Fimbrilline(fimA)基因分型的差异.方法 采用分层抽样方法选取高原人群(海拔3700m,高原组)和平原人群(海拔400 m,平原组)各80例慢性牙周炎患者.采用16S rRNA PCR法分别检测高原和平原组慢性牙周炎患者龈下菌斑中的P.gingivalis,应用fimA基因引物特异性的PCR方法对P.gingivalis阳性样本进行基因分型检测.结果 高原组检测出P.gingivalis 77例,平原组检测出70例,高原组检出率高于平原组,差异有统计学意义(P＜0.05).高原组牙周炎P.gingivalis各fimA基因型总检出率:Ⅰ型27例(35.1％),Ⅰb型24例(31.2％),Ⅱ型66例(85.7％),Ⅲ型10例(13.0％),Ⅳ型16例(20.8％),V型未检出,其中,ⅡfimA型的检出率最高,与其他各型比较,差异有统计学意义(P＜0.05);平原组样本中,Ⅰ型13例(18.6％),Ⅰb型21例(30.0％),Ⅱ型39例(55.7％),Ⅲ型8例(11.4％),Ⅳ型19例(27.1％),V型未检出,其中,ⅡfimA型的检出率最高,与其他各型比较,差异有统计学意义(P＜0.05).与平原组ⅡfimA型基因的检出率比较,高原组的检出率更高(P＜0.05).结论 高原组龈下菌斑中P.gingivalis的fimA基因型以Ⅱ型为主,且检出率高于平原组,但同时存在多态性,可能与高原地区慢性牙周炎的发生、发展关系密切.     

女性生殖道沙眼衣原体感染的检验方法对比

目的 研究不同方法对女性生殖道宫颈拭子样本沙眼衣原体的检测价值。方法采集450例19—49岁无感染症状女性宫颈分泌物，分别进行培养、直接荧光抗体检测抗原及核酸扩增三种方法检测，且分别确定阳性标准。结果450例受检查者，培养、DFA、PCR敏感性分别为44．0％、27．8％、28．9％，PCR法检测的阳性率明显好于DFA法与培养法（P〈0．05）。结论核酸扩增技术检测CT的检出率远远高出DFA法和细胞分离培养法的检出率，但应用单一实验诊断CT感染仍具有很大的局限性。     

荧光定量聚合酶链反应法和液体培养法检测新生儿解脲支原体的临床意义

目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）法和液体培养法检测新生儿解脲支原体（Uu）的临床意义。方法采用FQ—PCR法和液体培养法检测新生儿痰中Uu,比较两者阳性检出率,及治疗后Uu含量的变化。结果FQ—PCR法、液体培养法Uu阳性检出率分别为32．87％、22．69％,FQ—PCR法明显高于液体培养法（χ^2=5．58,P〈0．05）。治疗后Uu阳性检出率为8．33％,且拷贝数明显下降。Uu对大环内酯类克拉霉素敏感率最高,为93．88％;对喹诺酮类环丙沙星耐药率最高,为89．80％。结论FQ—PCR联合液体培养法检测Uu对诊治新生儿Uu感染有临床指导意义。     

微孔渗漏法与聚合酶链反应联合检测解脲脲原体

目的：探索一种快速、经济、敏感的方法用来诊断泌尿生殖道中解脲脲原体（Uu）。方法：用微孔渗漏法与聚合酶链反应（PCR）联合检测泌尿生殖道中Uu。结果：微孔渗漏法阳性162例（67．5％），聚合酶链反应阳性181例（75．4％），液体培养法阳性159例（66．3％）。且微孔渗漏法不需要特殊仪器，测定时间短，工作量小，灵敏度高，它与液体培养法二者差异无统计学意义（P〉0．05）。PCR与液体培养法二者阳性率差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：可用微孔渗漏法筛选患者，如阴性者用聚合酶链反应进一步检测解脲脲原体，两种方法联合检测具有简便、快速、检出率高的优点。     

FQ—PCR法与IBT法在人巨细胞病毒检测中的价值比较

目的对荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）方法与免疫印迹法（IBT）检测人巨细胞病毒进行比较分析。方法分别应用FQ—PCR和IBT检测疑似人巨细胞病毒（HCMV）感染小儿和成人各42例尿HCMVDNA和血清HCMV IgM。结果42例小儿尿HCMVDNA阳性检出率为57．14％,血HCMV IgM阳性检出率为35．71％。前者的诊断阳性率高于后者（χ2=3．88,P〈0．05）,有统计学差异;42例成人尿HCMVDNA阳性检出率为14．29％,血HCMVIsM阳性检出率为71．43％。后者的诊断阳性率显著高于前者（χ2=28,P〈0．005）,有统计学差异;84例患者尿HCMVDNA阳性检出率为38．10％,血HCMVIgM阳性检出率为48．81％。2种方法检测HCMV活动性感染的差异无统计学意义（χ2=1．96,P〉0．1）。结论FQ—PCR检测HCMVDNA是早期诊断小儿HCMV感染的有效的方法;免疫印迹法检测血清HCMV IgM水平对于判断成人HCMV活动性感染具有一定意义;做人群HCMV普查时,免疫印迹法有较好的应用价值。     

慢性胃炎患者口腔与胃内幽门螺杆菌的检测分析

目的 研究胃炎患者口腔内是否存在幽门螺杆菌（Hp),并分析口腔内Hp与胃内Hp的基因型的异同。方法 依据Hp特异的尿素酶C和cagA基因设计引物,建立PCR方法。检测和鉴定32例慢性胃炎患者不同牙齿的龈上和龈下菌斑（每人检查6个牙12份菌斑）中的Hp,并用单链构象多态性（SSCP）分析菌斑和胃内Hp的基因型异同。结果 32例患者中有27例口腔内至少一份牙菌斑中检出Hp,共计384份菌斑有113份（29．4％）检测出Hp,龈下菌斑中Hp检出率（37％）,显著高于龈上菌斑（21．9％）（P＜0．01）。同一家庭4例患者中有3例菌斑与胃内Hp的SSCP带型相同,4例患者菌斑中至少有一种相同SSCP带型的Hp。结论 口腔Hp可能是胃Hp感染的重要来源。     

口腔常见微生物不同定量分析方法的比较

目的探索口腔微生物定量分析的理想方法。方法选择3种口腔常见微生物变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的标准菌种厌氧培养24 h,经倍比稀释,涂板菌落形成单位(CFU)计数。将相应体积的菌液固定后,分别运用3种非培养方法对上述细菌进行定量分析(实时PCR、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪)。结果细菌定量结果由大至小排列,分别为实时PCR分析、激光共聚焦显微镜观察、CFU计数、流式细胞仪检测。每种细菌的实时PCR标准曲线均显示具备较好的线性关系。结论本研究中的3种非培养方法均适用于口腔微生物的定量分析。其中实时PCR分析和激光共聚焦显微镜观察的结果显著优于传统的CFU计数方法,而以实时PCR的敏感度最高。     

84例慢性牙周炎患者病变牙袋内厌氧菌分布及耐药性分析

［摘要］目的　研究慢性牙周炎患者牙袋内厌氧菌的分布及对抗生素的耐药情况,为临床慢性牙周炎患者的抗感染治疗提供参考依据．方法　以84例牙周炎患者为研究对象,对患者病变牙袋内的厌氧菌进行分离培养和鉴定,并用琼脂稀释法检测所分离的厌氧菌对甲硝唑、青霉素、头孢美唑等7种抗生素的敏感性．结果　从84例慢性牙周炎患者的牙周袋内共分离出305株可疑致病菌,所有患者均检出厌氧菌感染．检出菌中革兰氏阴性菌占59.34%,革兰氏阳性菌占40.66%．产黑色素雷沃菌和牙龈卟啉单胞菌的检出率最高,分别为51.19%和55.95%,其次为中间普雷沃菌（36.90%）,微小消化链球菌（35.71%）,具核梭杆菌（33.33%）,二氧化碳嗜纤维菌（27.38%）,放线菌（10.71%）等．药敏结果显示,所检出菌株对氯霉素和亚胺培南全部敏感,对阿莫西林敏感率为98.03%,对头孢美唑和甲硝唑的敏感率在76%～88%之间,而对克林霉素和青霉素的敏感度最低为65.91%和55.73%．结论　厌氧菌感染与慢性牙周炎的发生密切相关,产黑色素雷沃菌和牙龈卟啉单胞菌是其中的优势菌,分离菌对氯霉素和亚胺培南的敏感度较高,两者可作为治疗慢性牙周炎的辅助用药．     

155例牙周炎患者致病菌及药敏试验临床分析

目的　评价洛阳地区成人牙周炎患者的常见菌群及对抗生素的敏感性 ,选择牙周炎治疗的最佳药物。方法　采用横断面调查方法 ,对本地区常住居民的 15 5例成人牙周炎患者进行细菌培养及药敏试验。结果　15 5例成人牙周炎患者中 ,主要由牙龈卟啉单胞菌、中间型普氏菌、粘性放线菌和巨核梭形杆菌引起的混合性感染 ,多数细菌对强力霉素、环丙沙星比较敏感 ,敏感率分别是 87.7%和 91.6 %。结论　洛阳地区成人牙周炎患者常见感染为混合性感染 ,治疗时应当首选强力霉素和环内沙星等药物     

淋病奈瑟氏菌三种检测方法的结果比较

目的：分析评价聚合酶链反应（PCR）、细菌培养、直接涂片染色3种方法检测淋病奈瑟氏菌（neisseria gonorrboeae,NG）的应用效果。方法：分别采用PCR检测法、细菌培养法、直接涂片染色法分别对366份女性阴道分泌物以及325份男性尿道分泌物进行检测,并对三种方法的阳性检测结果进行比较分析。结果：PCR检测180份女性阴道分泌物标本,NG-DNA阳性率为21.67%,150份男性尿道分泌物,NG-DNA阳性率为44.67%,经统计学处理,男女之间差异有统计学意义（P〈0.001）;细菌培养：108份女性阴道分泌物进行细菌培养,NG的检出率为16.64%,95份男性尿道分泌物进行细菌培养,NG的检出率为22.85%;直接涂片Gram染色：80份男性尿道分泌物进行Gram染色,NG的检出率为21.49%,78份女性阴道分泌物,NG的检出率为10.79%。3种检测方法经统计学处理,差异具有统计学意义（P〈0.01）。结论：PCR检测法特异性强,灵敏度高,可作为慢性淋病检测的首选方法。细菌培养检出率次之,直接涂片Gram染色的检出率最低。直接涂片Gram染色的检出率虽较低,但特异性高,在基层医院无PCR设备及细菌培养条件者可首选,是一种经济实用、简便易行的检测方法。     

慢性牙周炎患者口腔幽门螺杆菌对胃幽门螺杆菌感染复发率的影响

目的探讨慢性牙周炎患者口腔幽门螺杆菌（Hp）对胃Hp感染复发率的影响。方法选择140例有腹部不适症状、并经全口牙周检查有不同程度慢性牙周炎的患者进行胃镜检查,每例患者均取口腔唾液标本进行口腔Hp检测。对胃Hp感染患者根治后半年分别复查胃Hp的感染状况,胃Hp检测采用^14C呼气试验。结果胃Hp阳性慢性牙周炎患者1：3腔Hp检出率比胃Hp阴性患者高（P〈0．05）,并与牙周炎的严重程度有一定的关系,重度牙周炎患者口腔Hp检出率比轻度牙周炎患者高,差异有统计学意义（P〈0.05）。94例胃Hp阳性患者经药物治疗后半年进行复查,胃Hp感染复发率13腔Hp阳性者与Hp阴性者的差异有统计学意义（P〈0．05）。重度牙周炎患者的胃Hp感染复发率显著高于轻中度牙周炎患者（P〈0．05）。结论牙周炎患者口腔Hp与胃Hp感染密切相关．胃Hp的感染复发率受口腔Hp存在的影响：口腔Hp阳性者的胃Hp感染复发率显著高于口腔Hp阴性者,并与牙周炎的严重程度有一定的关系．     

2型糖尿病患者慢性牙周炎的细菌学特点

为研究 2型糖尿病患者慢性牙周炎的细菌学特点及其与血糖、糖化血红蛋白的关系 ,应用细菌学厌氧培养、PCR检测技术 ,对 42例 2型糖尿病慢性牙周炎患者和 2 1例健康人的龈下菌斑进行专性及兼性厌氧培养并计数。发现 :2型糖尿病患者慢性牙周炎的龈下细菌中牙周优势菌为产黑菌、二氧化碳噬纤维菌、核梭杆菌、中间普氏菌 ;产黑菌、二氧化碳噬纤维菌数量随患者空腹血糖、糖化血红蛋白的升高而增加。提示 :2型糖尿病患者慢性牙周炎的龈下菌群以厌氧菌为主 ,龈下菌斑中致病菌数量与糖尿病患者代谢控制情况密切相关     

淋病奈瑟氏菌3种检测方法的结果对照思路

目的对比直接涂片法、细菌培养法、PCR检测法在淋病奈瑟氏菌检测中的应用效果。方法选取广东省惠州市惠东县慢性病防治站2011年9月～20I3年9月收治的100例确诊或疑为淋病的患者作为研究对象,取100例患者的分泌物,分别使用直接涂片法、细菌培养法、PCFL检测法进行检测,对比、分析3种检测方法的检测结果。结果PCE检测的NC-阳性率为81.0％,明显高于细菌培养法（61.0％）及直接涂片法（43o％）（χ2=9．71、χ2=30.65）,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;与直接涂片法相比,细菌培养法的NC-阳性率更高（χ2=6.49）,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论在直接涂片法、细菌培养法、PCE检测法3种检测法中,PCR检测法的灵敏度最高、特异性最强,是临床检测淋病的理想方法。     

STUDY ON ADHERENCE ABILITY OF PERIODONTAL PATHOGENS AND CARIOGENIC BACTERIA TO HYDROXYAPATITE DISKS

Objective To study the adherence activity of six representative periodontopathic and cariogenic bacteria to hydroxyapatite disks. Methods Six periodontopathic and cariogenic bacteria of P. gingivalis, A. actinomycetemcomitans, F. nucleatum, S. sanguis, A. viscosus and S. mutans were cultured in modified MD-300 chemostat according to total fifteen experimental groups of single-specie and each pair of periodontal pathogens and cariogenic bacteria, respectively. After 1 h attached live bacteria on removable hydroxyapatite disks was analyzed by culture technologies to evaluate the adherence level. Results The adherence activity of periodontopathic and cariogenic bacteria to HA was in the following order： S. sanguis 〉 A. viscosus 〉 S. mutans 〉 A. actinomycetemcomitans 〉 F. nucleatum 〉 P. gingivalis. The number of periodontopathic bacteria to HA was enhanced by S. sanguis and A. viscosus, respectively. When mix-cultivated with S. mutans, the colonization of P. gingivalis was reduced significantly（ P 〈 0. 001 ）. Periodontopathic bacteria had no effect on the adherence activity of S. mutans and A. viscosus, except S. sanguis. Conclusion It was showed that the adherence activity of periodontal pathogens was weaker than that of cariogenic bacteria and emphasized the importance of bacterial adherence in determining the level of bacterial colonization on tooth surfaces. It was suggested that periodontopathic bacteria can utilize initial colonizers to become those predominant bacteria in periodontal ecosystem, which maybe have close relation to the periodontopathic mechanism.     

PCR定量检测肺炎支原体在肺炎支原体肺炎中的应用分析

目的:探讨PCR定量检测在肺炎支原体肺炎诊断中的可行性及优越性。方法:选取186例接受治疗的肺炎患者,分别用MP快速培养法和实时PCR进行检测。记录并比较两组检测方法下的灵敏度及特异性等相关数据。结果:快速培养法与实时PCR法诊断肺炎支原体肺炎的灵敏度、阳性预测值、假阴性率及诊断符合率差异无统计学意义(P>0.05);实时PCR法诊断肺炎支原体肺炎的特异性为85.5%(65/76),明显高于快速培养法的77.6%(59/76),假阳性率为14.5%(11/76),明显低于快速培养法的22.4%(17/76),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:快速培养法与实时PCR法诊断肺炎支原体肺炎的敏感度差别不大,而实时PCR法的特异性优于快速培养法。临床上应用这两种不同原理的检测方法组合检测,取长补短,在提高肺炎支原体感染检出率的同时,还可以互相佐证,减少实验误差,提高检测的准确性。     

胃Hp阳性人群与口腔Hp和牙周病发生关系的研究

目的研究并探讨胃Hp阳性人群与口腔Hp和牙周炎的关联性。方法选择2012年1月～5月上海市松江区中心医院尿素14C呼气实验阳性患者102例,分为牙周炎组（n=60）与牙周健康组（n=42）,检查口腔牙周情况,并提取牙菌斑与含漱液进行Hp检测。结果口腔Hp阳性与胃Hp阳性为正关联（OR=3.90,P=0.002）;口腔Hp检出与牙周炎为正关联（χ2=5.571,OR=4.53,P=0.003）。结论胃和口腔Hp与牙周炎为正关联,牙周炎者胃内Hp检出率高于牙周健康者。