益气养精小复方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:探讨益气养精小复方对Lewis肺癌荷瘤小鼠免疫功能的影响及其作用机制。方法:建立Lewis肺癌细胞C57小鼠皮下移植瘤模型,将造模后的荷瘤小鼠随机分为模型组、中药组、顺铂组和中药+顺铂组。模型组不予药物干预,中药组予益气养精小复方中药灌胃,顺铂组予顺铂腹腔注射,中药+顺铂组予顺铂腹腔注射配合益气养精小复方中药灌胃,连续灌胃给药14 d。比较各组荷瘤小鼠体内抑瘤作用;采用流式细胞术检测荷瘤小鼠外周血T细胞亚群和NK细胞水平;双抗体夹心ELISA法检测荷瘤小鼠血清IFN-γ及IL-10浓度。结果:中药组、顺铂组、中药+顺铂组平均瘤重均显著低于模型组(P0.05),而该3组之间差异无统计学意义(P0.05),该3组抑瘤率依次为37.75%、44.59%和45.47%。药物干预后,顺铂组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著低于模型组(P0.05),其CD8+T细胞百分比显著高于模型组(P0.05);中药组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著高于顺铂组(P0.05),而其CD8+T细胞百分比显著低于顺铂组(P0.05);中药+顺铂组的CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值及NK细胞水平均显著高于顺铂组(P0.05)且低于中药组(P0.05),其CD8+T细胞百分比显著高于中药组(P0.05)。中药组与中药+顺铂组血清IFN-γ浓度均显著高于模型组和顺铂组(P0.05),而IL-10浓度则显著低于模型组与顺铂组(P0.05)。结论:由生黄芪、黄精、灵芝组成的益气养精小复方能够有效升高小鼠CD4+T细胞百分比、CD4+/CD8+比值与NK细胞水平,正向调节IFN-γ浓度,降低CD8+T细胞百分比与IL-10浓度,进而协同发挥抑制肿瘤生长的作用。     

ADSCs对辐射诱发C57小鼠胸腺瘤免疫功能的影响及其机制

目的:观察脂肪来源干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)对辐射诱发小鼠胸腺瘤免疫功能的影响及其可能的机制,方法:清洁级C57BL/6小鼠32只,随机分为4组:对照组、照射组、照射+ADSCs组、假照射+ADSCs组,各8只,末次照射后第7天后分别处死4组小鼠,计算小鼠胸腺指数.刀豆素A(ConA)诱导的胸腺淋巴细胞转化率采用MTY法测定,运用流式细胞仪检测胸腺淋巴细胞的细胞周期以及T淋巴细胞亚群的变化.结果:照射+ ADSCs组相对于照射组小鼠的胸腺淋巴细胞转化率和胸腺指数显著增高(P＜0.05),并且CD4+T淋巴细胞的含量显著增加(P＜0.05),CD8+T淋巴细胞明显下降(P＜0.05),CD4+/CD8+T淋巴细胞比值显著升高(P＜0.05).结论:ADSCs可能通过调节小鼠胸腺内细胞水平的变化,保护小鼠胸腺细胞的免疫功能.     

益气解毒中药对急性辐射损伤的防护作用研究

目的研究以益气解毒为主要功效的中药复方对急性辐射损伤小鼠的防护作用。方法设空白组、模型组、氨磷汀组、安多霖组和益气解毒中药复方高、低剂量组,给药14 d。第14天给药后,除空白组外,对其他各组小鼠利用4 Gy60Coγ射线进行全身一次性照射。分别于照射后第3、7、14天检测小鼠外周血白细胞数,胸腺指数,脾脏指数,脾脏病理切片,外周血T淋巴细胞CD4+/CD8+比值,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量。结果γ射线全身照射后,模型组小鼠外周血白细胞数显著降低,免疫脏器指数显著下降,脾脏有明显的病理改变,CD4+/CD8+比值显著升高,SOD活力显著下降,MDA含量显著升高,机体免疫力下降;于照后7 d,SOD活力和MDA含量自行恢复至正常水平;于照后14 d脾脏指数恢复至正常水平。与模型组比较,给药组脾脏病理改变较轻;照后3 d,低剂量组小鼠肝SOD活力显著增强(P0.01),MDA含量显著降低(P0.05);照后7 d,低剂量组和高剂量组小鼠脾脏指数显著提高(P0.05),低剂量组外周血T淋巴细胞CD4+/CD8+比值显著降低(P0.05);照后14 d,低剂量组小鼠胸腺指数显著提高(P0.05)。结论低剂量的益气解毒中药复方对γ射线所致的小鼠急性辐射损伤具有一定的保护作用。     

灵芝孢子油体内抗 Friend 鼠白血病病毒的实验研究

目的 探讨灵芝孢子油体内抗 Friend 鼠白血病病毒 (Friend murine leukemia virus, Fr.MuLV) 感染的疗效和作用机制。方法 用 Fr.MuLV 感染 BALB/C 雌性小鼠,造模小鼠 ig 给药 21 d,比较各组动物的体质量、脾指数、胸腺指数,CD4+、CD8+、CD4、+/CD8+ 等指标变化情况。结果 小鼠感染 Fr.MuLV 后体质量严重减轻,脾明显肿大,胸腺萎缩,CD4+、CD8+、CD4+/CD8+值均显著降低。灵芝孢子油 50、100、200 mg/kg 剂量均可显著改善体质量增长抑制、脾肿大及胸腺萎缩 (P＜0.01),100、200 mg/kg 剂量组 CD4+、CD8+、CD4+/CD8+ 值均有明显升高(P＜0.01、0.05)。结论 灵芝孢子油对 Fr.MuLV 感染小鼠有保护作用,能够改善体质量增长抑制,抑制脾肿大及胸腺萎缩,升高感染小鼠的 T 淋巴细胞。     

异基因小鼠胚胎胸腺移植治疗红斑狼疮的实验观察

目的探讨胚胎胸腺组织移植对系统性红斑狼疮(SLE)模型鼠的治疗效果。方法将21只符合要求的BALB/c×C57BL/6F1小鼠经尾静脉注射亲代淋巴细胞混合悬液后随机分成3(A~C)组,于SLE模型建立成功后接受相应治疗方案,第25天处死模型小鼠,采用流式细胞技术检测各组小鼠外周血中CD4+/CD8+T细胞的比值;电子天平称取小鼠胸腺湿质量后计算胸腺指数;直接免疫荧光法检测肾冰冻切片免疫复合物的荧光强度;间接免疫荧光法检测血清中抗核抗体(ANA)的荧光滴度。结果①C组外周血中CD4+/CD8+T细胞的比值显著高于A组(P<0.05),但A组与B组相比,差异无显著性(P>0.05);②C组胸腺指数与B组相比,无显著性差异(P>0.05),但显著高于A组(P<0.05);③C组肾脏冰冻切片荧光强度及外周血ANA荧光滴度均低于A组和B组(P<0.05)。结论胚胎胸腺移植对SLE模型鼠有显著治疗效果,有望运用于临床SLE的治疗。     

应用环孢菌素A制备BALB/C小鼠肺癌模型的实验研究

目的 探讨环孢菌素A(CsA)对建立皮下肺腺癌异种移植的BALB/C小鼠模型成瘤率的影响.方法 取50只BALB/C小鼠腋窝皮下接种人肺腺癌细胞系A549后,随机分为实验组和对照组各25只.实验组于接种第24h起每天腹腔注射CsA,连续10天.对照组则给予腹腔注射同体积的生理盐水.比较两组的成瘤率以及胸腺、脾脏重量指数、CD4+、CD8+T移植瘤免疫组化细胞数.结果 实验组移植成瘤率为88.00％,显著高于对照组的52.00％(P＜0.05).与对照组相比,实验组胸腺指数显著降低(P＜0.05),CD4+、CD8+T细胞数以及CD4+/CD8+T细胞比值亦显著降低(P均＜0.01),但脾脏指数差异无显著性(P＞0.05).结论 使用CsA可以提高人肺腺癌细胞系A549制备皮下异种移植的BALB/C小鼠肺癌模型的成功率.     

肺痨康对小鼠结核病模型的免疫指标观察

[目的]通过肺痨康(FLK)对实验性结核小鼠免疫指标的观察,研究肺痨康的免疫调节抗结核作用,为肺痨康治疗肺结核提供实验依据。[方法]动物造模后,随机分为FLK高剂量组、FLK中剂量组、利福平组,另设空白对照组,分别给予肺痨康、利福平、生理盐水灌胃28天,观察实验小鼠胸腺指数、T淋巴细胞亚群、IFN-r、IgG改变情况。[结果]FLK高剂量组能明显增加小鼠胸腺指数(P0.05);FLK高剂量组CD4+T细胞数显著升高(P0.01,P0.05);CD8+各组之间比较差异无显著性(P0.05);模型组CD4+/CD8+比值显著降低,其差异有显著性(P0.01),FLK高剂量组明显减轻CD4+/CD8+比值下降,其差异有显著性(P0.01);FLK高剂量组增加小鼠结核模型血浆IFN-r和IgG水平(P0.05)。[结论]肺痨康具有明显免疫调节抗结核的作用。     

沉默miRNA-16对肺结核模型小鼠免疫功能的调控作用及其机制研究

目的研究沉默miR-16对肺结核模型小鼠免疫功能的调控作用及其机制。方法选取CD2F1雌性小鼠40只,分为正常组、模型组、过表达组、沉默组各10只,模型组、过表达组、沉默组建立肺结核模型,建模成功后,过表达组、沉默组小鼠肺部无菌注射10μL miR-16慢病毒悬液。检测肺组织中T淋巴细胞亚群、胸腺指数、肺部炎症因子以及Toll样受体(TLRs)信号通路因子水平。结果过表达组小鼠CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、胸腺指数、IL-10水平低于模型组,CD8+、IL-6、TNF-α、TLR2、TLR4、NF-κB水平高于模型组(P 0. 05)。沉默组小鼠CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、胸腺指数、IL-10水平高于模型组,CD8+、IL-6、TNF-α、TLR2、TLR4、NF-κB水平低于模型组(P0. 05)。沉默组小鼠CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、胸腺指数、IL-10水平高于过表达组,CD8+、IL-6、TNF-α、TLR2、TLR4、NF-κB水平低于过表达组(P0. 05)。结论沉默miR-16可能通过作用于TLRs信号通路,抑制通路因子的异常表达,调节机体免疫反应,改善机体免疫障碍而起到调控肺结核小鼠免疫功能的作用。     

黄芩苷对复发性流产小鼠的保胎作用及子宫免疫微环境的调节

目的观察黄芩苷对复发性流产(RSA)的影响,探索其陕西,宝鸡调节母胎界面免疫微环境的可能机制,为中药学"黄芩安胎"提供理论依据。方法分别将SPF级CBA/J雌鼠随机分为正常妊娠组(A)、复发性流产(RSA)对照组(B)和黄芩苷处理组(C)。比较各组流产率、胚胎吸收率;经免疫组化、ELISA方法检测CD4~+、CD8~+T淋巴细胞、IFN-γ、IL-4的含量,并对比统计分析。结果 C组较B组流产率及胚胎吸收率明显降低(P 0.01);C组CD4~+/CD8~+T比值及Th1/Th2比值均与正常妊娠A组近似,但与B组相比差异具有显著性(P 0.05),B组表现为CD4~+/CD8~+比值和Th1/Th2比值均升高(P 0.01)。结论黄芩苷通过调节子宫母胎界面免疫状态机制,促使Th1/Th2平衡偏向Th2型发展,明显有效降低CD4~+/CD8~+比值,能有效抑制复发性流产(RSA)行为的发生。     

生地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究

目的:探讨生地黄多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制模型小鼠的免疫调节作用。方法:将60只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组以及生地黄多糖低、中、高剂量组,每组10只。除对照组外,其他各组小鼠腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺,每日1次,连续2 d。实验第3天起,阳性对照组小鼠灌胃给予50 mg/kg香菇多糖溶液,生地黄多糖各剂量组小鼠分别灌胃给予5、10、20 g/kg生地黄多糖溶液,连续7 d。末次给药后,取血,分离肝脏、脾脏、胸腺;碳粒廓清实验评价单核细胞吞噬能力;血细胞分析仪检测白细胞数、红细胞数、血小板数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、单核细胞数;ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-17水平;流式细胞术检测脾脏淋巴细胞CD3~+CD4~+与CD3~+CD8~+细胞的比例。结果:与对照组相比,模型小鼠的体质量、脾脏指数和胸腺指数明显下降(P0.05,P0.01),廓清系数K和吞噬指数α显著降低(P0.05);体内白细胞数、红细胞数、血小板数、淋巴细胞数、中性粒细胞数均明显减少(P0.01),而单核细胞数显著升高(P0.05);血清TNF-α、IL-17水平显著升高(P0.01),而IFN-γ和IL-4水平显著降低(P0.05,P0.01);CD3~+CD4~+细胞表达明显降低(P0.01),CD3~+CD8~+细胞表达明显升高(P0.05),CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值显著降低(P0.01)。与模型组相比,生地黄多糖各剂量组小鼠的脾脏指数明显升高(P0.01),高剂量组的廓清系数K和吞噬指数α均明显升高(P0.05,P0.01),白细胞数、血小板数、淋巴细胞数、中性粒细胞数均显著升高(P0.05,P0.01)。生地黄多糖作用可显著降低模型小鼠血清TNF-α、IL-17水平,促进IFN-γ、IL-4、IL-10表达(P0.05,P0.01);同时上调脾淋巴细胞CD3~+CD4~+细胞的表达水平,降低CD3~+CD8~+细胞表达水平,提高CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值(P0.05,P0.01)。结论:生地黄多糖能够增强环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫功能。