酶联免疫吸附法检测艾滋病抗体室内质控血清的制备和应用

EL ISA法检测抗 - HIV的诊断试剂虽然经过中国药品生物制品检定所批批检的检测 ,但由于很多因素都会影响到 EL ISA法检测结果的准确性 ,所以每次检测都应进行室内质控 [1 ] 。因此我们试制了抗 - HIV室内质控血清 ,考核了其在不同温度存放时的稳定性和精密性 ,并与卫生部临床检测中心所购抗 - HIV室内质控血清进行了对照。结果显示该方法制备的室内质控血清具有较好的稳定性和精密性 ,比较适合在抗 - HIV初筛试验室中推广应用 ,现介绍如下。1　材料和方法1.1　试剂　 EL ISA检测抗 - HIV试剂盒 :上海科华 ,批号为2 0 0 10 915 ,…     

两种方法检测抗-HIV在献血者中的应用

国产 ELISA抗 - HIV体外免疫诊断试剂盒有间接法和双抗原夹心法两种。为了加强对献血者抗 - HIV检测的质量控制 ,笔者对 1 997年～ 2 0 0 1年 5月间本站用 EL ISA抗 - HIV间接法筛选的结果进行了分析 ,同时又对 2 0 0 1年 1～ 5月间用两种不同厂家的 ELISA抗 - HIV间接法检测呈现阳性反应的 1 8份血标本 ,再次用多家 ELISA抗 - HIV的间接法试剂和多家双抗原夹心法试剂进行对比检测分析 ,现将结果报告如下。材料与方法1　抗 - HIV诊断试剂盒　 EL ISA抗 - HIV间接法所采用的试剂盒分别来自北京吉比爱生物技术有限公司 ,批…     

国产ELISA试剂检测抗-HIV假阳性原因分析

酶联免疫吸附试验 (EL ISA)是检测人类免疫缺陷病毒抗体 (抗 - HIV)最常用的方法 ,国产 EL ISA试剂以其较高的敏感性和较好的特异性以及价格低廉为国内许多初筛实验室所采用。但在实际工作中我们有时会遇到假阳性的困扰 ,结合近几年国内试剂的发展 ,就其影响因素进行分析如下。1　材料和方法1.1　材料　抗 - HIV使用美国 BIO- RAD公司 CODA 型全自动酶免分析系统检测 ,国产第 2代试剂盒 A(批号 2 0 0 2 0 92 2 )、第 3代试剂盒 B和 C(批号 2 0 0 2 12 0 1和 2 0 0 30 4 16 ) ;类风湿因子(RF)采用胶乳凝集法 ,试剂由军事医学科…     

无偿献血300ml与200ml献血反应的比较分析

ELISA检测室内质控与临床化学测定的质控方法相比有其特殊性 ,由于 ELISA试剂盒的有效期短 ,批号更换频繁 ,短时间内难以积累最佳条件下 2 0次质控物的检测结果。而采用“即刻法”质控统计方法 ,只需连续测 3次 ,即可对第 3次检验结果进行质控。笔者在免疫实验室 ELISA检测室内质控中采用了即刻法取得了良好的效果 ,现以检测HBs Ag室内质控为例 ,简述如下。材料与方法1　材料　 1 ng HBs Ag质控血清 (由卫生部临床检验中心提供 ) ;酶标仪 (美国伯乐 5 5 0 ) ;洗板机 (美国伯乐 1 5 75 ) ;40～ 2 0 0 μl加样枪 (芬兰产 ) ;检测HBs…     

血站室内质控即刻法在ELISA检测中的应用

目前，血站对献血者进行乙型肝炎表面抗原（HBsAg），丙型肝炎病毒抗体（抗－HCV）及艾滋病病毒抗体（抗－HIV）的筛选，主要采用酶联免疫吸附试验（ELISA）。要保证检测结果的可靠性，保障供血质量，就必须对ELISA检测开展室内质控。我站应用即刻法对ELISA检测进行室内质控，并绘制了即刻法室内质控表。通过二年来的实践证明效果良好，现以抗－HIV为例，将实验方法报告如下：１材料与方法１．１仪器：WellscanMK２型酶标仪及洗板机。１．２试剂：抗HIVELISA试剂盒，由上海科华生物工程有限公司提供，批号２００１０３０。…     

光照对ELISA试验结果的影响

EL ISA法作为血站最常用的试验 ,具有灵敏、特异、重复性好的特点 ,但影响因素也很多 ,尤其是试验过程中底物的避光问题常被一些操作者忽视 ,有些商品试剂盒在说明书中指明加入底物溶液后应避光 ,但有些试剂说明书则未特别强调 ,且光照对 EL ISA的影响也少见报道。本文着重探讨了光照对 EL ISA试验结果的影响材料与方法1　试剂盒　上海科华抗 - HCV (批号 2 0 0 1110 5 )、HBs Ag(批号 2 0 0 112 0 7) ,厦门新创 HBs Ag(批号 2 0 0 110 2 5 0 1) ,美国雅培抗 - HCV (批号 M80 6 310 ) ,荷兰欧嘉隆抗 - HIV (批号A4 2 KA)。均…     

即刻法室内质控的应用

“即刻法”室内质控因简单、实用而被免疫实验室广泛采用。但本站在应用”即刻法”室内质控的过程中 ,发现一些很少出现但对实际工作有一定影响的问题 ,现报告如下。材料与方法1　材料1.1　所用试剂均为通过“批批检定”的国产ELISA (HBsAg、抗 HCV、抗 HIV)试剂。1.2　自制弱阳性临界值质控血清 ,S/CO值控制在 1.5～ 3.0 (S为质控品双孔测定值的均值 ,CO为阈值 )。1.3　CS 5 0 0 0酶标仪 (北京航天 )。2　方法　依照即刻性室内质控方法 ,当检测完 3次数值后 ,将测定值从小到大排列 :X1、X2 、X3 ………Xn(X1为最小值 ,Xn 为…     

浅析即刻法进行ELISA检测室内质控

ELISA检测室内质控与临床化学测定的质控方法相比有其特殊性,由于ELISA试剂盒的有效期短,批号更换频繁,短时间内难以积累最佳条件下20次质控物的检测结果.而采用"即刻法"质控统计方法,只需连续测3次,即可对第3次检验结果进行质控.笔者在免疫实验室ELISA检测室内质控中采用了即刻法取得了良好的效果,现以检测HBsAg室内质控为例,简述如下.     

受血者输血前传染性血清标志物检测分析

本院于 1999年 6月起对受血者输血前血清 HBs Ag、抗 -HCV、抗 - HIV及梅毒抗体等 4项标志物进行检测 ,现将结果报告如下。材料与方法1　血清标本　所有血清均来自于 1999年 6月～ 2 0 0 1年 12月在本院住院需输血的患者 ,共 2 384 5例 ,标本均在输血前采集。2　检测方法　 HBs Ag与抗 - HCV检测采用 EL ISA法 ,试剂由北京耀华生物技术公司提供 ;抗 - HIV检测采用 EL ISA双抗原夹心法 ,试剂由北京万泰生物技术公司提供 ;梅毒抗体检测采用 EL ISA双抗原夹心法 ,试剂由北京金伟凯生物技术公司提供。梅毒抗体阳性标本用 TPPA作…     

应用即刻性进行抗-HCV检测的室内质控

目前国内检测抗 -HCV的 ELISA法大多参照生化的质控方法 ,即选择弱阳性标本为质控物 ,以 x质控图法控制日常工作的精密度 ,判断实验的有效性。但由于 ELISA检测试剂有效期短 (一般为 6个月 ) ,用同一批号试剂盒连续常规检测 2 0次难度大 ,有一定的局限性。笔者结合 x质控图和“即刻性”质控的优点 ,建立了抗 -HCV的即刻性 x质控图方法 ,现介绍如下。材料与方法1　试剂与质控物　试剂为厦门新创公司生产 ,批号 2 0 0 2 0 45 80 5。 2 Ncu/ml低值质控物购自上海市血液中心 ,批号2 0 0 1 0 81 5。阴性质控物则取 A值在 0 .0 2～ …     

血液抗-HCV初复检采用不同试剂的必要性

生部规定每袋血液必须经初、复检确认五项指标 ( ALT、HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV、梅毒 )均为阴性后方可用于临床 ,而目前国产的试剂盒 ,不同厂家在抗原 (抗体 )包被和灵敏度方面都有所差异 ,特别是抗 - HCV试剂盒。故笔者对联合使用不同厂家试剂对抗 - HCV检测的必要性进行了探讨 ,现报告如下。材料与方法1　标本来源　均为本站采集的城郊两区的血样1 642份。2　方法2 .1　血清抗 - HCV初检采用上海实业科华技术有限公司提供的酶联免疫 ( EL ISA)试剂盒 ,批批检定合格 ,批号 980 5 30 0 1 ,复检采用厦门新创科技有限公司提供 …     

ELISA试验室内质控“双质控点法”的应用分析

目的探讨“双质控点法”在ELISA试验室内质控的有效性及应用价值。方法当更换质控血清批号时，将新批号质控血清在旧批号质控血清结束前与旧批号质控血清一起测定3～4次，新批号质控结果按“即刻法”分析。结果采用“双质控点法”对前3次实验结果进行质控均在控。结论“双质控点法”对ELISA试验室内质控是有效、及时、可靠的，可作为常规ELISA试验室内质控方法的补充。     

2000～2002年周口市无偿献血者输血传染病标志物检测结果分析

从计划献血到自愿无偿献血是保证血液质量和输血安全的关键 ,为了解本地无偿献血的基本情况 ,笔者对 2 0 0 0～ 2 0 0 2年无偿献血者血液标本的检测结果进行分析 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　 2 0 0 0～ 2 0 0 2年度 ,周口市参加无偿献血者 35 195人次 ,年龄 18～ 5 5岁。1.2　仪器　 L absystems MK2洗板机 ,Wellscan MK3酶标仪(芬兰产 )。1.3　方法　 HBs Ag抗 - HCV、抗 - HIV检测均采用 EL ISA法 ,梅毒采用 TRUST和 EL ISA法 ,AL T采用赖氏法 (试剂分别由洛阳华美 ,河南理利 ,上海生物制品研究所提供 )批批检合…     

“即刻法”室内质控存在的问题探讨

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒有效期较短,同一批号试剂若按常规方法开展室内质控难度较大,故秦晓光[1 ] 提出采用“即刻法”做ELISA法的室内质量控制。“即刻法”实际上是数据统计处理方法中应用Grubbs[2 ] 剔除异常值的方法在免疫质控中的应用,就是用检验一个室内质控结果是否为异常值的方法来判断其是否失控。该法只需要连续测定3次,即可对3次结果中异常值进行检验,比较简单,因此在临床中得到一定应用。但我们在实际应用中,发现“即刻法”还存在下列问题。一、从理论上讲“即刻法”不适用于ELISA法的室内质量控制所谓“即刻…     

"即刻法"室内质控存在的问题探讨

由于酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒有效期较短，同一批号试剂若按常规方法开展室内质控难度较大，故秦晓光提出采用“即刻法”做ELISA法的室内质量控制。“即刻法”实际上是数据统计处理方法中应用Grubbs剔除异常值的方法在免疫质控中的应用，就是用检验一个室内质控结果是否为异常值的方法来判断其是否失控。该法只需要连续测定3次，即可对3次结果中异常值进行检验，比较简单，因此在临床中得到一定应用。但我们在实际应用中，发现“即刻法”还存在下列问题。     

丙型肝炎病毒抗体酶联免疫吸附试验试剂盒稳定性评价探讨

目的评价用于血源筛查的丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒使用期间稳定性,为改变血液检测策略时选择抗-HCV试剂盒提供参考。方法通过试剂盒批内检测结果和室内质控检测结果的变异系数(CV)来评价3批次抗-HCV的ELISA试剂盒室批内、日间和批间的差异性,采用箱线图分析室内质控结果批内和日间结果的极值,评价该试剂盒在使用期间的日间稳定性、批内稳定性和批间稳定性等方面性能。结果 3个批号试剂批内CV值分别为8.6%、7.4%和8.1%,无极值出现;3批次试剂日间CV值分别为10.3%、11.1%和9.9%,有2个批次试剂出现极值;批间CV=10.5%。结论使用箱线图分析试剂盒室内质控日间、批内和批间的结果,能够评价抗-HCV酶联免疫诊断试剂盒在使用期间日间稳定性、批内稳定性和批间稳定性三方面性能。     

抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择和批间连续质控延续方法的建立

目的建立抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度的选择方法和批间连续质控的延续方法。方法选择系列质控血清中S/CO值减去精密度测定中得到的3倍批间CV与该S/CO值的乘积仍大于1.0者用来监测试验重复性,选择S/CO处于1.5左右的质控血清以判断试剂盒测定下限的有效性。使用新旧两个批号试剂盒同时检测系列质控血清得到线性回归的直线方程,计算得到换算因子,用以将新批号试剂测定值换算至原批号试剂测定值,继续使用原质控图。结果通过实验能够选择合适浓度的质控物用以判断检测重复性和试剂盒测定下限的有效性。能够得到不同批号间质控测定的换算因子用以有效延续质控图。结论通过上述方法能够有效选择抗肺炎支原体IgG定性测定的室内质控物浓度,并建立批间连续质控的延续方法。     

周口市2001～2003年献血者HBsAg测定不一致原因分析

为了解临床日常工作中EL ISA法检测HBs Ag误诊情况,笔者对2 0 0 1～2 0 0 3年河南周口地区无偿献血者2 384 5份血清标本,在相同的实验条件下分别用两种不同厂家试剂平行检测,结果分析如下。1　对象和方法1.1　对象　周口市中心血站无偿献血者血清2 384 5份。1.2　试剂与仪器　HBs Ag EL ISA试剂盒由河南理利生物技术公司、洛阳华美科技公司和北京万泰生物技术公司提供;试剂盒均经过国家批批检,并在有效期内使用,严格按说明书操作。L absystems Dragon Well Wash4 MK2洗板机,L absystemsWellscan MK3酶标仪(芬兰产)。1.3　方法　…     

ELISA法测定HBsAg临床研究

为了解临床日常工作中 EL ISA法检测 HBs Ag误诊误报情况 ,笔者对 1998- 0 1～ 1999- 12河南周口部分地区无偿献血者、临床住院患者、中学生等 480 85份血清标本 ,在相同的实验条件下分别用两种不同厂家试剂平行检测 ,现将结果报道如下。1　对象和方法1.1　对象　血站无偿献血者血清 2 2 0 0 0例份 ,周口地区人民医院患者血清 3838例份 ,周口地区高考体检学生血清 2 2 2 47例份。1.2　试剂与仪器　 HBs Ag EL ISA试剂盒由河南理利生物技术公司、厦门新创科技公司和上海实业科华生物技术公司提供 ;试剂盒均经过国家批批检 ,并在有效期…     

Excel软件在“即刻法”与Levery-Jenning图质控法有效结合判定抗-HIV室内质控的探讨

目前AIDS初筛实验室的HIV抗体检测主要是酶联免疫法（ELISA）,但对于大部分的初筛实验室来说,由于样本量少同批号试剂盒绘制L-J质控图有一定难度,＂即刻法＂可较早地进入质控状态。因此,2004年卫生部将其纳入《全国艾滋病检测技术规范》,作为抗-HIV检测的常规质控方法,其实用性得到广大实验室工作者的认可。现在大多数实验室是采取＂即刻.