四种结核杆菌DNA提取方法PCR检测结果对比分析

四种结核杆菌ＤＮＡ提取方法ＰＣＲ检测结果对比分析闫国蕊，腊胜明ＰＣＲ检测技术，是８０年代中期创建的一种体外基因扩增技术，自１９８９年应用于结核病诊断以来，已取得了巨大成绩。但在检测结核杆菌标本前处理方法很多，本文选用具有代表性的几种前处理方法作对比研...     

聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价

本文应用ＰＣＲ联合ＤＮＡ探针快速检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ。对临床３０７例标本同时进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｅｈｅｒｎ杂交。其中临床确诊为结核病的１０９例，二者的阳性率分别为４９．６％、６０．６％。未确诊结核病的１９８例，二者均为阳性２例、单纯ＰＣＨ阳性３例。结果表明ＤＮＡ探针检测的灵敏性和特异性高于ＰＣＲ。二者联合使用，有助于对疑难电泳图谱的分析和判断，降低假阴性和假阳性率。     

聚合酶链反应检测结核杆菌DNA对结核病诊断的可靠性探讨

聚合酶链反应检测结核杆菌ＤＮＡ对结核病诊断的可靠性探讨杨绍基，凌小强，高志良，姚集鲁，彭文伟为了探讨用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测结核杆菌ＤＮＡ作为结核病诊断的可靠性，我们对一年来有关结核病的实验室检查结果和临床医疗情况进行了分析研究，现报告如下。材料...     

套式聚合酶链反应检测结核杆菌DNA

套式聚合酶链反应检测结核杆菌ＤＮＡ王晓东孟昭智陶静郑传文刘德鸿聚合酶链反应（ＰＣＲ）以其特异、敏感、快速的特点从众多结核杆菌检查方法中脱颖而出。套式ＰＣＲ经套式引物进行前后两次扩增，进一步提高了结核杆菌检测的特异性与敏感性。材料和方法：ＤＮＡ模板提取...     

聚合酶链反应对脑脊液标本中结核杆菌DNA重复序列的检测

采用聚台酶链反应（ＰＣＲ）对３４例结核性脑膜炎（结脑）患者脑脊液（ＣＳＦ）进行检测，其中５份结核杆菌培养阳性的标本，ＰＣＲ检测均阳性；２９例ＣＳＦ结核杆菌培养阴性的标本，１９例ＰＣＲ检测阳性，总的阳性率为７０．５％。而作为对照的２０例非结脑患者的ＣＳＦ标本则无阳性。利用育法微量结核杆菌与对照菌测试，可以反证本方法的准确性，其符合率为１００％，提示本方法可以用于临床标本中结核杆菌ＤＮＡ的快速检测，不失为一快速，灵敏而又特异的诊断手段。关键词     

聚合酶链反应法诊断结核病临床价值探讨

目的 探讨ＰＣＲ法对结核病的诊断价值。方法 用ＰＣＲ法检测痰、纤支镜抽吸物、胸水和血液标本中结核杆菌ＤＮＡ。结果 ＰＣＲ法敏感性为２１．９％，特异性为９２．６％，总的阳性预测值、阴性预测值和诊断效率分别为６４．６％，６５．９％和６５．８％，不同标本敏感性有较大的差异。结论 ＰＣＲ法诊断结核病的敏感性、特异性尚远不能完全满足临床的需要，需进一步完善和改进 。     

DNA固定技术对结核分枝杆菌PCR产物杂交结果影响的研究

目的 比较各种ＤＮＡ固定方法对结核杆蓖ＰＣＲ产物杂交结果的影响。方法 选取结核杆菌ＰＣＲ扩增产物并点样于尼龙膜上，用紫外线，加热和碱液三种方法固定ＤＮＡ，然后以结核杆菌ＰＣＲ产物作探针用增强化学发光标记剂进行标记，并对三种不同方法固定的ＰＣＲ产物杂交分析，结果结核杆菌ＤＮＡ固定方法对结核杆菌ＰＣＲ扩增产物的检测结果具有较大的影响，碱液固定具有较好的敏感性和重复性。     

175聚合酶链反应在结核杆菌检测中的应用

本综述了近５年来聚合链反应（ＰＣＲ）技术在结核杆菌检测中的应用情况，主要介绍了ＰＣＲ检测结核杆菌的方法，ＰＣＲ扩增靶基因的选择，敏感性和特异性及临床应用情况，并对临床应用中一些问题，如临床标本处理的简化，假阳性结果和假阴性结果的原因及对策进行了讨论。     

聚合酶链式反应与DNA探针检测临床标本中结核分支杆菌的评价

本文应用ＰＣＲ联合ＤＮＡ探针快速检测临床标本中结核杆菌ＤＮＡ。对临床３０７例标本同时进行ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交。     

五种方法检测临床标本中结核分支杆菌的比较分析

迄今为止，对结核病的病原体快速诊断的方法仍很有限，国内外学者一直在寻找快速、敏感、特异、简便的实验室诊断方法。我们应用抗酸染色、细菌培养、荧光染色、ＰＣＲ、ＰＣＲ反向探针膜杂交法检测临床标本中的结核分杆菌比较分析，报告如下。     

聚合酶链反应和DNA探针联合检测临床标本中结核杆菌的研究

目的为提高聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测未培养临床标本中结核杆菌的敏感性和特异性，方法，首先通过琼脂糖凝胶电泳检测ＰＣＲ扩增产物，然后用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ法转移到至膜上，与地高辛标记的人型结核杆菌ＤＮＡ探针杂交。结果ＰＣＲ电泳检测的灵敏度为１ｐｇ而ＤＮＡ探针检测将灵敏度提高到１００ｆｇ。２４种受试菌株中，只有结核分支杆菌复合体和蟾分杆菌有２４５ｂｐ扩增带，其中牛型结核分支杆菌与１８８ｂｐ探针不杂交，对２     

应用PCR检测脑脊液中结核杆菌的研究

采用Ｍａｎｊｕｎａｔｈ等设计的一对引物，对人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ以ＰＣＲ检测其敏感性为１ｐｇ，１７种分支杆菌ＤＮＡ仅人型，牛型及ＰＣＧ出现２４０ｂｐ扩增带，其它均未出现扩增带。５０例结脑ｃｓｆ作ＰＣＲ检测结核菌与培养，涂片对比，阳性率分别为５４％，６％和。８例非结核性脑膜炎均为阴性。结果表明，该引物具有较高的敏感性和特异性。应用ＰＣＲ方法可以为结核性脑膜炎提供快速，敏感，特异的病原学诊断。     

应用PCR检测痰液中结核分支杆菌DNA的研究

应用ＰＣＲ检测痰液中结核分支杆菌ＤＮＡ的研究安徽省结核病防治研究所２３００２２王庆，唐荷英，孙道霞，李军，刘晓云结核病细菌学常规检查方法，存在着检出率低、耗时长等缺点，给结核病早期和鉴别诊断带来了一定困难。我们用ｍｕｌｌｉｓ建立的聚合酶链反应（ＰＣＲ...     

PCR诊断结核性胸腔积液33例临床分析

ＰＣＲ诊断结核性胸腔积液３３例临床分析山东医科大学附属医院（２５００１２）董亮，王伟，许仁和，王玲结核性胸腔积液的病原学诊断是临床的一大难点。多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术的问世，大大增强了结核杆菌检测的敏感性及特异性。我们对３３例胸腔积液患者应用ＰＣＲ...     

PCR—SSCP技术快速检测结核分枝杆菌rpoB基因突变的研究

目的 应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术直接快速检测痰标本中结核分枝杆菌ｒｐｏＢ基因突变,评价此方法用于结核分枝杆菌利福平（ＲＦＰ）耐药性的意义。方法 以结核分枝杆菌Ｈ３７Ｒｖ为对照、５０例耐ＲＦＰ（单耐和多耐）结核分枝杆菌临床分离株、１２例ＲＦＰ敏感菌株、３５例耐ＲＦＰ肺结核患者痰标本,采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测痰标本和菌株中结核杆菌ｒｐｏＢ基因突变。结果 ５０例耐ＲＦＰ菌株中有４５例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ条带与     

结核杆菌及其L型的液体培养

目前 ,世界上的结核病流行仍在回升扩大 ,成为紧迫的公共卫生问题。引起结核病回升的原因 ,多数学者认为与多重耐药性结核杆菌 (ＭＤＲ -ＴＢ)的形成有关 ,特别是结核杆菌可形成细胞壁缺陷的Ｌ型在体内长期潜伏存在〔1〕。由于对此种形态缺乏足够认识 ,体外培养难以成功。我们应用研制的结核杆菌及其Ｌ型液体培养基 ,并结合ＰＣＲ、罗 -琴氏培养基等方法对 4 0例临床标本进行比较检测。1　材料与方法1 1　标本　江西医学院二附院呼吸内科 ,临床表现、影像诊断为结核的病人深部晨痰 2～ 3口。1.2　液体培养基　本室研制。取痰消化液沉渣 37…     

聚合酶链反应试剂对检测痰结核分支杆菌的影响

目的观察聚合酶链反应（ＰＣＲ）的试剂对检测痰结核分支杆菌的敏感性和特异性的影响。方法对结核病组２０５例和非结核病组１０５例的痰标本同时进行三个厂家生产的ＰＣＲ试剂检测、普通细菌培养和抗酸染色法涂片检测。再对ＰＣＲ假阳性的痰普通细菌培养结果进行分析，试找出ＰＣＲ假阳性的其它因素。结果三种不同引物序列和扩增产物片段长度的ＰＣＲ试剂对结核性痰标本的阳性率分别为８２．４％、７１．７％和６１．０％，组间差异有非常显著意义（Ｐ＜０．００５）。结论ＰＣＲ试剂的引物序列和扩增产物长度对检测痰结核分支杆菌的阳性率和假阳性率有很大的影响     

聚合酶链反应用于涂阴结核病早期诊断的评价

聚合酶链反应用于涂阴结核病早期诊断的评价张言斌谭耀驹谭守勇李一耕应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测各种临床标本中的结核分支杆菌具有快速、敏感、特异之优点。通过对２０８例新入院涂片检查阴性而ＰＣＲ技术检测结核分支杆菌特异性ＤＮＡ片段（ＰＣＲ－ＴＢ－ＤＮＡ）...     

恙螨和鼠宿主体内恙虫病立克次体检测的基因技术方法的系统比…

为建立一种恙螨和鼠宿主体内恙虫病立克次体检测量敏感特异的基因技术方法，本文对包括ＤＮＡ抽提，ＰＣＲ，核酸杂交，ＰＣＲ结合核本杂交作了系统比较研究，结果证明，ＰＣＲ结合核酸杂交比单用ＰＣＲ敏感１０倍，比单独核酸杂交敏感１０００倍，而ＤＮＡ快速抽提可代替酚一氯仿法应用于鼠血和病人标本的检测，去抑制ＤＮＡ快速抽提法能使阳性恙螨ＰＣＲ检出率提高。     

聚合酶链反应检测临床标本中结核分支杆菌DNA诊断结核病的评价

常规的结核病诊断方法,抗酸染色镜检（镜检）阴性率低,结核菌培养需时长,常给诊断和治疗造来困难。聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术自１９８５年发明以来,为结核病建立了一种快速、敏感、特异与简便的细菌检查方法,取得了令人鼓舞的效果。近年来,我们应用ＰＣＲ技术检测２７７０份临床标本结核分支杆菌ＤＮＡ（ＴＢ－ＤＮＡ）,对ＰＣＲ技术在结核病诊断中的作用进行评价。１材料和方法病例选择：（１）结核组：１２０３例,其中肺结核８８４例（包括慢性纤维空洞型肺结核２０例,浸润型肺结核６４５例,结核性胸膜炎１７２例,血行播散型…