膝骨关节炎动物模型的选择

膝骨关节炎(Knee osteoarthritis,KOA)作为最为普遍的慢性关节疾病,其病因及发病机制目前仍不是十分清楚。因此通过建立KOA动物模型来探讨其病理机制并寻找合理有效的诊疗手段成为研究KOA的重要方法。目前常用的几种动物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠等。但是,目前还没有一个唯一的动物模型标准,每个动物模型均具有其独特的优点和不足之处。因此,文章旨在对这几种动物模型的优势及不足之处进行归纳总结,以便学者基于不同的研究目的,选择合适的动物模型。     

骨性关节炎动物模型研究概况

骨性关节炎(OA)是一种中老年人常见多发的以软骨退行性变和继发骨质增生为主的慢性退行性骨关节病.临床以慢性关节疼痛、僵硬、肿大伴有关节功能障碍为主要表现,发病机制十分复杂.随着社会人口的老龄化,该病发病率呈显著上升趋势[1].年龄和性别是一个很重要的发病因素.有报道骨性关节炎在55～64岁的人群中发病率达40％[2].戴七一等[3]根据流行病学调查方法,设计调查表,通过问诊、查体了解患者的主要症状及发病时间、诱发因素及加重原因的途径.调查资料统计反映,患膝骨性关节炎的女性患者明显多于男性,女男之比约为3.5:1.说明膝骨性关节炎因性激素内环境的不同,而发病率因性别有所差异.血脂异常与骨关节炎的关系密切.建立OA动物模型是寻找有效治疗措施的重要途径.动物自发模型适合骨关节炎的病理机制及防治骨关节炎的研究;而非手术方法诱发动物模型主要用于软骨病变用药物研究;通过手术方法人工诱发的动物模型可能会引起关节其他损伤[4].因此,实验时应根据具体研究作出选择.现就骨关节炎动物模型研究的相关文献综述如下.     

兔膝骨性关节炎模型建立的现状

膝骨性关节炎是一种慢性退行性骨关节疾病,其病因和发病机制尚不十分明确。因此,需用动物模型来研究和防治该疾病。基于该疾病的发病特点和兔膝关节的生理特性,目前兔膝关节炎模型是膝骨性关节炎最经典的常用模型,其主要建模方式有自发性和诱发性模型两种,以诱发性为主,包括骨内高压、关节内手术、腔内药物注射、关节制动诱发性模型。这4种诱发性模型与人的骨关节炎在发病机制和组织病理学等方面相似,可用于药物的筛选、评价及病理基础研究。     

关节内注射壳多糖预防创伤性类节软骨退变的实验研究

关节内注射壳多糖预防创伤性类节软骨退变的实验研究［吴海山等．解放军医学杂志，１９９５；２０（４）：２５４］以Ｈｕｌｔｈ法建立膝关节骨关节炎模型，术后每隔３周关节内注射２％壳多糖凝胶１ｍｌ，分别于术后４、８、１２周处死动物，作大体标本手术显微镜观察并取...     

关节镜下半月板部分切除制备骨关节炎动物模型

目的 探讨经关节镜建立猪双膝骨关节炎动物模型及用磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)监测骨关节炎骨软骨损害的有效性和可行性.方法 4只小型猪经关节镜切除双膝外侧部分半月板,术后12周,行大体、组织学和MRI观察与切除半月板相对股骨髁的骨软骨变化.结果 大体观察结果显示,局限性软骨表面纤维化,股骨髁间切迹骨赘形成;组织学检测结果显示,软骨细胞数量和蛋白多糖含量减少、成簇排列细胞数量增加;MRI检查结果显示,软骨厚度变薄和骨软骨信号强度改变.结论 经关节镜半月板部分切除能有效建立猪双膝关节骨关节炎动物模型,MRI能灵敏地监测到骨关节炎动物模型的骨软骨变化.     

膝关节骨性关节炎动物建模研究进展

膝关节骨性关节炎(KOA)为一种退行性病变,其发病机制尚不清楚及发病进程的不可逆性,导致临床上对该疾病的治疗极为困难,致残率较高,考虑到临床现状以及医学伦理道德的限制,常使得研究人员难以获得早期人类KOA样本,因此需要通过建立与人类KOA病理发展过程相似的早期KOA动物模型来进行相关研究。常用的KOA建模方法有:关节腔内注射药物法,如瘦素、碘乙酸钠、木瓜蛋白,2～4周后观察到关节炎表现,操作方法简便,建模时间最短;关节制动法(石膏固定法、新型支局固定法、Ilizarov外固定)、卵巢切除法法、外科手术法(破坏关节稳定术、破坏关节血液循环术)可在4～8周内成功建立骨性关节炎模型,关节划痕法及关节撞击法在10～12周后观察到骨关节炎性变。自发型动物模型及转基因动物模型的建立虽已有成功案例的报道,但是培养周期较长,成本较大。     

降植烷诱导鼠关节炎模型研究进展

类风湿关节炎是一种以慢性、进行性、对称性、侵蚀性外周关节损害为特征的常见自身免疫性疾病。建立模拟人类患者的动物模型是研究此类疾病的有效方法。不同动物模型具有不同的特点,降植烷诱导鼠关节炎模型是常用模型,在临床表现、病理学改变、免疫学特点和遗传背景等各个方面均与人类患者类似。     

施沛特膝关节内注射的效果观察及护理

骨关节炎是中老年人常见的关节疾病，而膝关节是最易累及的关节之一。由于膝关节是身体主要的负重关节，膝关节骨关节炎可导致患者严重的功能障碍。透明质酸钠为关节滑液的主要成分，在关节腔内起润滑、扩散屏障和缓冲应力的作用，目前已广泛用来治疗膝关节骨关节炎。我院自2003年1月～2004年1月，采用透明质酸钠注射液(施沛特)关节内注射治疗膝关节骨关节炎140例，经半年随访，效果良好。现报告如下。     

颞下颌关节紊乱病动物模型构建进展

颞下颌关节紊乱病(temporomandibular joint disorders,TMD)在人群中发病率一直居高不下，严重影响了人们的生活质量。由于其发病机制复杂、具体病因不明，加之颞下颌关节解剖结构复杂，且不易获取活体标本，给TMD相关科学研究造成了极大困难。因此颞下颌关节紊乱病动物模型研究符合时代热点。目前常用于颞下颌关节紊乱病动物造模的方法有化学注射法、机械刺激法、手术诱导法、基因工程修饰。本文就颞下颌关节紊乱病实验动物模型的建立方法及其在实验动物的组织学表现、细胞水平表现、分子学水平表现等各个方面的研究进展作一综述。     

龙须藤总黄酮对大鼠骨关节炎治疗作用及机制

目的 考察龙须藤总黄酮对骨关节炎动物模型的治疗作用和机制.方法 釆用4%木瓜蛋白酶关节腔内注射法建立骨关节炎大鼠模型.以大鼠关节直径变化,足趾容积变化、关节病理切片及骨关节Makin′s评分为指标,观察龙须藤总黄酮对膝关节炎大鼠的影响.利用ELISA法检测大鼠血清中IL-1β、TNF-α含量,初步探讨龙须藤总黄酮治疗骨关节炎的作用机制.结果 与模型组相比,龙须藤总黄酮各组均能不同程度地使骨关节大鼠关节直径、足趾容积、Makin′s评分降低,并能显著降低大鼠血清中IL-1β和TNF-α的含量.结论 龙须藤总黄酮对膝关节炎大鼠具有治疗作用,其抗炎机制可能与其抑制IL-1β和TNF-α分泌有关.     

关节腔内注射生长抑素治疗兔膝关节骨性关节炎的实验研究

[目的]评价生长抑素关节腔内注射治疗兔膝关节骨性关节炎的可行性。[方法]雄性新西兰白兔30只制成骨关节炎模型,随机分成实验组和对照组。造模后每天训练所有模型动物活动1h,距离约400mm,2周后向实验侧关节腔内注射0.5mL生长抑素溶液（含生长抑素250μg）（实验组）;向对照侧膝关节内注入盐水0．5mL（对照组）。1次／周,连续4周。造模后笼中饲养,自由活动。造模后12周抽取实验动物关节液,用放射免疫方法测定其超氧化物歧化酶（SOD）的含量;而后处死动物,取关节软骨及滑膜组织观察。[结果]与对照组相比,实验组可见软骨破坏减轻,滑膜炎症明显抑制,Markins评分明显降低（5．50±1．41VS7．80±1。25,P〈0．05）;关节液SOD活性明显增加（110．60±8．99VS69．20±7．48,P〈0．05）。[结论]关节腔内注射生长抑素可使关节软骨损伤减轻,滑膜炎症得到控制,减轻关节液中SOD含量增加。     

关节腔内注射贝伐单抗治疗兔膝骨性关节炎

目的：评估关节腔内注射贝伐单抗治疗兔膝骨性关节炎的效果。方法： 24只新西兰兔制造原发性骨关节炎模型后随机分入贝伐单抗组、透明质酸钠(sodium hyaluronate, SH)组和对照组,每组8只。贝伐单抗组和对照组关节腔各自注射4.0 mg贝伐单抗和生理盐水,每3周1次,连续实验6周,各组分别注射2次;SH组进行SH关节腔内注射,每周1次,连续实验6周,共6次。6周后观察各组软骨和滑膜组织病理切片,滑膜电子显微镜及血管免疫组织化学SP法染色,软骨大体观察评分,MMP-1的免疫组织化学表达,以及Mankin’s评分。结果：病理切片显示贝伐单抗组较SH组和对照组血管生成明显减少,抑制滑膜增生,改善了软骨结构及基质成分;滑膜血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)阳性细胞百分数、平均光密度值、软骨MMP-1细胞百分数、Mankin’s评分及软骨大体评分均显示贝伐单抗组小于SH组和对照组（P<0.05）,SH组小于对照组（P<0.05）。结论：贝伐单抗能减少血管生成,抑制滑膜增殖,减少MMP-1的生成,对软骨有保护作用,并且优于SH,对兔膝原发性骨性关节炎有治疗作用,这为临床膝原发性骨性关节炎关节腔内药物治疗提供了一种可能的方案。     

Risk assessment of the mycotoxin ochratoxin A

Ochratoxin A (OA) is a mycotoxin which has been found to occur in foods of plant origin, in edible animal tissues, as well as in human blood sera and tissues. The ability of OA to move up the food chain is aided by its long half-life in certain edible animal species. In this report, an evaluation of the health risks to Canadians due to the presence of OA in food products is presented. The first part of the report deals with the physicochemical aspects, mycology, laboratory production, analytical methods, and natural occurrence in plant products, animal products, and human tissues. The stability of OA in foods and feeds, the effects of food processing, and the removal from foods and feeds by physiochemical means are also discussed. From these data, the worst case estimate for the daily exposure of Canadians to OA, from the consumption of pork-based food products and cereal foods, is approximately 5 ng OA/kg body wt (mean of eaters) for young children, the highest consumption group on a body weight basis. The second part of the report deals with the metabolic disposition as well as the available toxicity database for OA in laboratory animals, farm animals, and humans. The major target for OA toxicity in all mammalian species tested is the kidney, and endemic nephropathies affecting livestock as well as humans have been attributed to OA. OA is also teratogenic, and in the fetus the major target is the developing central nervous system. Recent studies have provided "clear evidence" of the carcinogenicity of OA in two rodent species. OA was found to be nonmutagenic in various microbial and mammalian gene mutation assays, but weak genotoxic activity to mammalian cells was noted. In addition, OA was found to suppress immune function. Based on the NTP carcinogenicity study with OA in rats, the estimated tolerable daily intake in humans ranges from 0.2 to 4.2 ng OA/kg body wt, depending on the method of extrapolation used. In view of the toxic properties of OA, it is recommended that exposure to OA be kept to a minimum. In Canada, further monitoring programs are required to better define the overall residue profile of OA in cereal grains, animal feeds, animal food products, and human blood. Such data are required to better assess dietary exposure and to ascertain the need for regulatory controls or other control mechanisms.     

激活自噬对关节腔内注射糖皮质激素大鼠骨关节炎进展的影响

目的：观察激活自噬对关节腔内注射糖皮质激素大鼠骨关节炎进展的影响。方法：将50只雄性SD大鼠随机均分为假手术组（Sham组）、造模组（OA组）、糖皮质激素组（OA+GS组）、雷帕霉素组（OA+RAPA组）、糖皮质激素+雷帕霉素组（OA+GS+RAPA组）。建立大鼠骨关节炎模型并分别进行干预。10周后取大鼠膝关节组织进行S-O染色,评估OARSI评分、滑膜评分,免疫组化检测关节软骨P62 表达情况。结果：OA组大鼠关节软骨部分区域出现缺损,OARSI评分、滑膜评分均较Sham组显著升高（P ＜0.05）;OA+GS组大鼠软骨缺损依旧比较严重,OARSI评分与OA组比较差异无统计学意义（P ＞0.05）,滑膜评分与OA组比较有所降低（P ＜0.05）;OA+RAPA组大鼠软骨表面侵蚀明显好转,OARSI评分、滑膜评分与OA组比较均降低（P ＜0.01）;OA+GS+RAPA组大鼠关节软骨侵蚀现象进一步好转,OARSI评分、滑膜评分与OA+RAPA组比明显较低（P ＜0.05）。免疫组化结果显示,OA组关节软骨表面P62表达明显增加,在使用雷帕霉素后,关节软骨表面P62表达降低（P ＜0.05）。结论：在大鼠骨关节炎模型上,激活自噬可以在一定程度上进一步延缓关节腔内注射糖皮质激素大鼠骨关节炎的进展。     

玻璃酸钠与得宝松关节腔内注射治疗膝关节骨性关节炎

目的:为了寻找更有效使用玻璃酸钠(SH)与得保松(diprospan)关节腔内注射补充治疗膝关节骨性关节炎(OA)的方法。方法:选OA患者100例,前3周每周关节腔内注射diprospan,每次1mL(以关节疼痛完全消失、挺髌试验阴性为停药标准);后5周每周注射SH每次2mL。结果:缓解12例,显效36例,有效48例,无效4例,总有效率为96%。结论:前期使用diprospan消除关节炎症,后期SH进一步保护关节面是治疗早、中期膝OA患者的一种值得推荐的新方法。     

TWEAK及其受体Fn14在大鼠骨关节炎(OA)关节软骨和滑膜中的表达

目的 检测肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)及其受体成纤维细胞生长因子诱导因子14 (fibroblast growth factor inducible 14,Fn14) mRNA及蛋白在大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)关节软骨和滑膜中的表达情况,初步了解TWEAK及其受体Fn14在OA发病中的作用.方法 42只大鼠中随机选取18只行膝关节前交叉韧带切断(anterior cruciate ligament transection,ACLT)制作OA模型作为实验组,另外18只接受手术但不切断前交叉韧带作为假手术组,剩余6只作为正常对照组.饲养至1、2、4周时,实验组及假手术组随机各取6只处死,6只正常对照组在第4周处死,采集所有动物关节软骨及滑膜组织,用实时定量PCR及Western blot分别检测TWEAK和Fn14在mRNA及蛋白水平的表达情况.结果 术后第2和第4周实验组动物关节滑膜中TWEAK及Fn14的mRNA及蛋白表达水平显著上调,与假手术组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);术后第2周实验组动物关节软骨中TWEAK及Fn14的mRNA及蛋白表水平与假手术组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TWEAK及其受体Fn14的mRNA及蛋白表达水平在大鼠OA关节软骨及滑膜组织中的表达显著增高,它们可能是参与OA的重要细胞诱导因子.     

骨性关节炎中白介素-7及基质金属蛋白酶-13的表达

目的探讨细胞因子白介素－7（IL-7）及基质金属蛋白酶-13（MMP-13）在骨性关节炎发生发展中的作用及意义。方法应用免疫组织化学技术及酶联免疫吸附方法对骨性关节炎29例、半月板及交叉韧带损伤患者17例（对照组）检测IL-7及MMP-13在滑膜组织中的表达情况及关节滑液中的蛋白含量,分析检测结果。结果IL-7及MMP-13在骨性关节炎滑膜组织中表达强度及滑液中蛋白含量高于对照组（P〈0．01）,IL-7及MMP—13在滑液中的蛋白含量显著相关（r=0．511,P〈0．01）,且两者与年龄也有相关性（r=0．454;r=0．583,P〈0．01）。结论IL-7及MMP-13与骨性关节炎的发生发展有关,IL-7可能通过刺激滑膜细胞分泌MMP-13发挥关节破坏作用。     

切开复位内固定术治疗跟骨关节内骨折疗效观察

目的观察切开复位内固定术治疗跟骨关节内骨折的疗效。方法回顾性分析骨科应用跟骨＂Y＂型解剖接骨板治疗跟骨骨折21例患者的临床资料,术后观察切口愈合情况及Maryland足部评分。结果术后复查X线片提示跟骨高度、Blher’s角及Gissane角均较术前明显改善。术后21例患者Maryland足部评分结果为：优11例,良8例,中2例,优良率90.48%。结论对于跟骨关节内骨折,我们认为需要积极行切开复位内固定术治疗,术中注意软组织保护,尽可能骨折复位,充分引流和术后加强切口管理是取得较满意疗效的关键。     

吲哚美辛对大鼠骨关节炎模型关节软骨中IL-6表达的影响

目的研究环氧合酶-2(COX-2)抑制剂对大鼠骨关节炎模型关节软骨中白介素-6(IL-6)表达的影响。方法健康雄性Wistar大鼠30只,随机分为对照组、骨性关节炎组(OA组)和COX-2抑制剂(吲哚美辛)处理组,每组10只。利用膝关节注射4%的木瓜蛋白酶溶液的方法制作骨关节炎模型。采用关节炎评分法评定各组大鼠平均关节炎指数,Western blot方法检测关节软骨中IL-6蛋白的表达变化,RT-PCR方法检测关节软骨中IL-6 mRNA的表达变化。结果 OA模型组随着造模时间的延长,关节出现了重度红肿现象,对照组关节无任何异常变化;与OA模型组比较,吲哚美辛组的关节炎症反应呈现消退现象。术后8周检测关节软骨中IL-6蛋白及mRNA表达的变化,结果发现IL-6蛋白及mRNA在对照组大鼠关节软骨中仅有微量表达,而在OA组大鼠关节软骨表达则显著升高(P0.01);与OA组相比,吲哚美辛组大鼠关节软骨中IL-6蛋白表达显著降低(P0.01)。结论吲哚美辛可通过下调IL-6蛋白的表达参与骨关节炎的发病机制。