小蘗碱诱导人宫颈癌Hela细胞株凋亡的作用

目的:探讨中药黄连素对子宫颈癌Hela细胞株的增殖抑制和诱导凋亡的作用。方法:以不同浓度的黄连素(10、20、40、80μmol/L),分12、24、48、72h四个时间点处理Hela细胞,光镜观察细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;用透射电子显微镜及琼脂糖凝胶电泳检测凋亡发生情况。结果:黄连素可抑制Hela细胞增殖,作用呈明显的时效和量效关系,差异有统计学意义(P<0.01);黄连素可诱导Hela细胞凋亡,透射电子显微镜下可见凋亡细胞;琼脂糖凝胶电泳出现细胞凋亡典型的DNA"梯状"条带。结论:黄连素体外对Hela细胞具有增殖抑制作用和促进凋亡作用。     

Caspase-3在硫化砷诱导宫颈癌Hela细胞凋亡中的作用

目的探讨硫化砷(As4S4)诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的分子机制。方法以不同剂量(7.5、15、30、60mg/L)的As4S4,12、24、36、48、60 h处理Hela细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;采用流式细胞术测定细胞凋亡情况;Western blot法检测不同剂量As4S4处理Hela细胞后凋亡相关蛋白bcl-2、caspase-3表达的变化;并以流式细胞术检测半胱氨酸酶3(caspase-3)酶活性的变化。结果不同剂量As4S4处理的Hela细胞,细胞增殖受到抑制,作用呈明显的时效和量效关系。24 h时IC50为30 mg/L,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);流式细胞术显示不同浓度As4S4作用Hela细胞24 h后,出现明显的凋亡峰,其凋亡率分别为(8.13±1.13)%、(29.58±2.51)%、(46.24±3.92)%、(62.36±4.42)%,对照组没有出现凋亡峰,差异有统计学意义(P<0.01);经As4S4处理后凋亡相关蛋白bcl-2表达下降,caspase-3表达增加;随着As4S4剂量的增加,表达活性caspase-3的细胞百分率逐渐增加,分别为(2.67±0.22)%、(9.53±0.15)%、(21.28±0.43)%、(39.63±0.80)%、(63.40±0.69)%(P<0.01)。结论As4S4体外对Hela细胞具有增殖抑制和促进凋亡作用,其作用机制可能通过下调bcl-2蛋白表达,活化caspase-3的活性来起作用。     

地塞米松诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡的实验研究

目的:探讨地塞米松对宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤生长及凋亡的作用。方法:BALB/C裸鼠皮下接种宫颈癌Hela细胞,腹腔内注射不同剂量地塞米松15~250mg/kg,测量肿瘤体积观察肿瘤生长情况,用透射电镜及原位细胞凋亡检测(TUNEL)的方法对肿瘤细胞的凋亡进行检测。结果:不同剂量地塞米松体内注射均可抑制宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的生长,并能诱导肿瘤细胞凋亡,与对照组相比肿瘤生长速度减慢,体积明显缩小(P<0·001),凋亡小体明显增多;不同剂量地塞米松对肿瘤生长的影响有差异,当剂量<62·5mg/kg时,疗效随剂量增加而增加,凋亡小体逐渐增多,肿瘤生长更加缓慢,各组间有明显差异(P<0·001);剂量为62·5~125mg/kg时,肿瘤生长及凋亡发生与剂量无明显的关系;当剂量>125mg/kg时,疗效随剂量增加而降低,凋亡小体逐渐减少,肿瘤生长速度加快,各组间有明显差异(P<0·001)。结论:地塞米松体内能诱导裸鼠宫颈癌移植瘤凋亡发生,显著抑制肿瘤生长,并存在一定程度的剂量依赖效应。     

盐酸小檗碱及其联合应用顺铂诱导宫颈癌细胞株凋亡研究

目的:研究不同浓度盐酸小檗碱(Ber)单用及联合应用顺铂(DDP)对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响,并探讨其抗癌机制。方法:将不同浓度的盐酸Ber、DDP分别或联合作用于宫颈癌Hela细胞,采用MTT比色法检测细胞体外增殖的抑制作用;原位末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡率;免疫组化SABC法检测Hela细胞中NF-κBp65的表达。结果:MTT比色法表明盐酸Ber能抑制宫颈癌Hela细胞的体外增殖,并具有剂量、时间的依赖性(P<0.05);TUNEL法可检测到凋亡细胞,其凋亡率显示盐酸Ber诱导宫颈癌Hela细胞凋亡表现出剂量和时间的依赖性(P<0.05);免疫组化SABC法结果显示,盐酸Ber能引起细胞内NF-κBp65表达下调,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);盐酸Ber与DDP联合用药表现出明显的协同作用,且高剂量的盐酸Ber可增加DDP的疗效。结论:盐酸Ber对宫颈癌Hela细胞体外增殖具有明显的抑制作用,且能增强DDP对宫颈癌Hela细胞的抑制作用,并增加其诱导宫颈癌Hela细胞的凋亡,其作用机制可能与降低NF-κBp65的表达有关。     

本犀草素对宫颈癌HeIa细胞的增殖抑制及诱导凋亡作用的实验研究

目的探讨木犀草素对宫颈癌Hela细胞的增殖及诱导凋亡的影响。方法将宫颈癌细胞株传代培养至对数生长期,分组加入不同浓度的本犀草素,并设置空白对照组。用MTT比色法观察木犀草素对体外培养的宫颈癌细胞生长的抑制作用,在光学显微镜下观察不同浓度的本犀草素对宫颈癌细胞的凋亡作用并计算凋亡率。结果MTT比色法测定显示,本犀草素作用于宫颈癌Hela细胞后可以抑制其增殖及诱导凋亡,且呈剂量依赖性。结论木犀草素能抑制体外培养的宫颈癌Hela细胞的增殖并诱导其凋亡。     

甘草提取物（Gly34）对Hela细胞体外促凋亡作用研究

目的观察甘草提取物（Gly34）对Hela细胞的体外促凋亡作用,为Gly34在抗肿瘤方面的机制研究及应用提供理论依据。方法应用MTT法测定Gly34对Hela细胞增殖的抑制作用;采用AO-EB染色、透射电镜、DNA Ladder实验、流式细胞仪检测其促凋亡作用及对细胞周期的影响。结果 Gly34对Hela细胞体外增殖有明显抑制作用;AO染色表明药物组细胞有明显凋亡迹象,并伴少量细胞坏死现象,而在阴性对照组中细胞形态完好;透射电镜表明Hela细胞在Gly34处理后出现典型凋亡细胞形态改变;DNA Ladder实验发现Hela细胞在Gly34处理后发生DNA片段化断裂,表现为＂梯形＂DNA条带;流式细胞仪（FCM）分析Hela细胞在Gly34处理前后细胞周期均呈现明显的差异,并且药物组细胞表现为G0/G1期阻滞,其中溶媒对照组G0/G1期峰面积为（44.62±0.6）%,1.56μg·mL-1、3.125μg·mL-1、6.25μg·mL^-1药物组G0/G1期峰面积为（53.18±0.7）%、（55.40±0.8）%、（58.67±0.6）%,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）;FCM分析Hela细胞在Gly34处理前后细胞凋亡率发生改变,其中溶媒对照组为（0.51±0.6）%,1.56μg·mL^-1、3.125μg·mL^-1、6.25μg·mL^-1药物组分别为（1.25±0.7）%、（21.38±0.8）%、（62.08±0.7）%,各组间差异有统计学意义（P〈0.05）。结论甘草提取物（Gly34）能明显抑制Hela细胞增殖并诱导其发生凋亡,具有抗肿瘤作用。     

CD47在维生素E琥珀酸酯诱导人宫颈癌细胞凋亡过程中的作用

目的 探讨CD47在维生素E琥珀酸酯诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡过程中的作用.方法 实验采用的细胞系是人宫颈癌Hela细胞,分为空白对照、VES处理(10μg/ml VES作用24h)、CD47抑制剂处理细胞和VES处理、CD47过表达转染细胞和VES处理、空载体转染细胞和VES处理共5组.流式细胞术检测各处理组细胞的...     

奈达铂对宫颈癌Hela及Siha细胞的作用

目的:比较奈达铂(NDP)体外对人宫颈腺癌细胞Hela细胞及鳞癌细胞Siha的抑制作用并探讨其作用机制。方法:以2.5～40μg/ml NDP分别作用于Hela及Siha细胞24 h,48 h,72 h,MTT法检测抑制率,计算半数抑制浓度(IC50);利用流式细胞术(FCM)观察细胞凋亡率及周期变化;半定量PCR法分析基因半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3,Caspase 9)及基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达变化。结果:NDP对宫颈癌Hela细胞及Siha细胞均有抑制作用,呈时间-剂量依赖性,NDP对Hela细胞的抑制率大于Siha细胞;FCM显示,随时间、浓度增加,Hela及Siha细胞凋亡率增加,相同浓度和作用时间下,Hela细胞的凋亡率大于Siha细胞(P<0.05),S期细胞的比例增加,G0/G1期比例减少,G2/M期比例变化不明显;与对照组相比,Caspase 3,Caspase 9表达增加,MMP-2表达减少。结论:NDP可抑制宫颈腺癌细胞Hela及鳞癌细胞Si-ha的增殖,NDP体外对Hela细胞的抑制作用更强。NDP的作用机制与诱导细胞凋亡、细胞周期阻滞、上调Caspase3和Caspase9的表达有关;下调MMP-2的表达可能有利于降低宫颈癌细胞的侵袭力。     

Notch表达在Vk3诱导的人宫颈癌Hela细胞损伤中的作用及其机制的研究

目的:通过Vk3诱导人宫颈癌Hela细胞损伤,观察Hela细胞Notch-1、Notch-2及其配体Jagged-1、Jagged-2,细胞周期素D1(Cyclin D1)mRNA表达的变化及N-乙酰半胱氨酸(NAC)对其的影响,探讨Notch在人宫颈癌发生发展过程中的作用。方法:实验分组为对照组、Vk3处理(Vk3)组、Vk3与NAC联合作用(Vk3+NAC)组及NAC单独应用(NAC)组,用RT-PCR方法检测Hela细胞中Notch-1、Notch-2、Jagged-1、Jagged-2及Cyclin D1 mRNA表达的变化。结果:与对照组相比,Vk3组Notch-1、Notch-2、Jagged-1、Jagged-2及Cyclin D1 mRNA表达明显下降,而Vk3+NAC组明显高于Vk3组(P<0.05)。结论:Vk3诱导人宫颈癌Hela细胞损伤,降低了Notch-1、Notch-2、Jagged-1、Jagged-2及Cyclin D1 mRNA的表达,NAC增加了Hela细胞Notch-1、Notch-2、Jagged-1、Jagged-2及Cyclin D1 mRNA的表达而减轻了Hela细胞损伤,表明Notch信号通路参与了人宫颈癌的发生。     

脉冲电场对宫颈癌Hela细胞黏附和侵袭能力影响的实验研究

目的:探讨脉冲电场对肿瘤细胞黏附侵袭能力的影响及其可能的作用机制.方法:分别将场强为0 V/cm、500 V/cm、1 000 V/cm和1 500 V/cm的脉冲电场作用于宫颈癌Hela细胞,采用基质胶黏附实验观察脉冲电场对Hela细胞黏附能力的影响;采用Transwell小室实验观察脉冲电场对Hela细胞侵袭能力的影响;采用免疫荧光法检测脉冲电场作用后Hela细胞中MMP-2、TIMP-2的表达情况.结果:经脉冲电场作用后,Hela细胞黏附能力下降,侵袭能力受到抑制,MMP-2的表达水平下调,TIMP-2的表达水平上调.结论:脉冲电场能抑制Hela细胞的黏附和侵袭能力,这种抑制作用可能与其下调MMP-2的表达水平和上调TIMP-2的表达水平有关.     

2,3,7,8-四氯二苯并-p-二恶英诱导肺癌SPC-A1细胞凋亡的研究

目的研究2，3，7，8-四氯二苯并-p-二恶英（TCDD）在体外诱导肺癌细胞系SPC-A1细胞凋亡的作用。方法用MTT法测定TCDD对SPC-Al细胞的毒性，采用流式细胞仪对细胞凋亡进行分析，通过HE染色观察细胞形态变化。结果SPC—A1细胞生长曲线表明，随着TCDD浓度增高，SPDAl细胞生长率明显下降；细胞凋亡可在TCDD浓度为10nmol／L，0．1μmol／L，1μmol／L处理24h后出现；TCDD诱导SPC-A1细胞的凋亡具有时间和浓度依赖性；凋亡细胞主要表现为细胞体积缩小，核染色质固缩，亚二倍体峰出现。结论TCDD在体外能有效诱导SPC—A1细胞发生凋亡。     

姜黄素对人宫颈癌细胞株Hela细胞增殖的作用的研究以及p53表达的影响

目的：主要探讨姜黄素对人类宫颈癌Hela细胞中增殖作用的影响,以及细胞p53蛋白表达的影响。方法：本文通过不同浓度姜黄素干预人宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测药物对Hela细胞的增殖抑制率;RT—PCR和Westernblot检测细胞凋亡相关蛋白p53表达。结果：MTT发现姜黄素对人宫颈癌Hela细胞有一定的抑制作用,并呈时间一剂量依赖性;RT—PCR结果显示p53mRNA的表达增加;westernboltting显示p53蛋白的表达增加。结论：姜黄素可一直Hela细胞增殖,其机制可能是通过增加p53基因的表达而实现。     

α辐射体诱发神经元样细胞凋亡模型研究

目的　为了研究α辐射体诱发神经元损伤的细胞模型。方法　实验PC12细胞加入 5 0 μl 用DMEM/F12全培养液稀释的 0 5 0 4Bq/ μl　2 3 5　UDMEM /F12工作液 ,放射自显影示踪术观察细胞放射性核素行径定位。结果　研究表明 ,随着内照射时间延长细胞存活率迅速下降 ,ID50 (mediuminhibitorydose)为4 6 5 5mGy;凋亡细胞数和坏死细胞数明显增加 ,并有显著的剂量效应关系 (r =0 974 ,P <0 0 1) ;放射性核素可迅速进入细胞核内。结论　α辐射体浓缩铀诱发PC12细胞的损伤具有神经细胞的易脆性     

双靶点沉默hTERT和Bi-1基因诱导人鼻咽癌细胞凋亡的初步研究

目的利用RNA干扰阻抑hTERT和Bi-1基因的表达并诱导人鼻咽癌细胞的凋亡。方法收集CNE-2Z细胞,设未处理组、Lip组、pcDNA3.1(+)/Lip对照组、TR/Lip组、TRs/Lip组、Bi-1/Lip组、Bi-1s/Lip组、TR-Bi-1/Lip组和TRsBi-1s/Lip组,采用MTT法观察质粒载体及转染试剂对CNE-2Z细胞生长增殖的影响;采用流式细胞术检测CNE-2Z细胞凋亡,Hoechst 33258染色,采用荧光显微镜观察鼻咽癌细胞形态学的变化。结果 TR、Bi-1和TR-Bi-1组的CNE-2Z细胞增殖能力显著降低,且TR-Bi-1组的生长增殖能力最低(P<0.05);凋亡细胞有所增加。转染TR、Bi-1和TR-Bi-1重组质粒48 h后,荧光显微镜下可见部分鼻咽癌细胞出现典型的凋亡形态学变化;而pcDNA3.1(+)、TRs、TRs-Bi-1s、Lip和未处理组则无明显变化。结论双基因表达载体可以同时特异、有效地沉默hTERT和Bi-1两种基因,与沉默单基因的效果相比较,双基因沉默组鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖率受到明显抑制。     

四氯二苯并二(口恶)英诱导3种癌细胞的细胞凋亡

目的 研究四氯二苯并二（口恶）英（TCDD）诱导HepG2肝癌细胞、肺癌A549、SPC-A1细胞的细胞凋亡.方法 分别用0.01、0.10、1.00μmol/LTCDD对3种细胞染毒24 h,再细胞爬片和HE染色,光学显微镜下观察细胞形态.结果 细胞凋亡可在0.01、0.10、1.00μmol/L TCDD处理后24 h出现.表现为细胞固有形态丧失,核染色质固缩、碎裂,出现凋亡小体,并随染毒浓度加大而更明显.SPC-A1细胞的凋亡率分别为9.56%,16.8%,21.7%;A549的凋亡率分别为7.7%,13.6%,19.4%;HepG2的凋亡率分别为8.5%,14.5%,30%,均高于对照组,3组癌细胞凋亡率与对照组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 TCDD可能诱导此3种细胞发生凋亡.     

电离辐射诱发人肝细胞凋亡的研究

目的 对⁶⁰Coγ射线诱发人正常肝细胞7702凋亡情况进行研究,为探讨辐射诱导细胞凋亡的机制及辐射诱发基因组不稳定性所产生的延迟效应提供重要的实验依据。方法 采用⁶⁰Coγ射线照射人正常肝细胞7702,利用Annexin-V-PI复染法、流式细胞术对辐射诱导细胞凋亡进行检测。结果 首次照射中,照射剂量与细胞凋亡率具有明显的剂量-效应关系;二次照射后的细胞凋亡率与首次照射剂量存在明显的剂量-效应关系;传代细胞的细胞凋亡率与首次照射剂量存在明显的剂量-效应关系。结论 电离辐射诱发细胞凋亡存在明显的剂量-效应关系,辐射使细胞敏感性增加,所产生的损伤使整个基因组处于一种不稳定状态,可以传递到细胞的子代中,持续影响子代细胞的遗传效应。     

双酚A对人胚肝细胞凋亡的影响

[目的]研究双酚A(BPA)对人胚肝L-02细胞的凋亡的影响。[方法]以MTT来分析不同浓度BPA对人胚肝L-02细胞的细胞存活率的影响;用流式细胞术分析不同浓度BPA对细胞凋亡的影响;通过RT-PCR分析BPA引起的生长抑制、DNA损伤基因GADD45、GADD153、GADD34表达水平的变化。[结果]BPA处理后,L-02细胞的生存率随着BPA浓度的增加而下降,在≥50μmol/L,细胞的存活率显著降低(P<0.01)。随着BPA浓度升高,细胞凋亡率增加,≥50μmol/L可显著升高L-02细胞的凋亡率(P<0.01)。生长抑制DNA损伤基因GADD45、GADD153.GADD34表达水平随着BPA浓度增加表达量也增加,100μmol/LBPA组显著高于正常对照组,但在100μmol/L,BPA+VitC组三种GADD基因表达量均稍降低。[结论]BPA对L-02细胞具有细胞毒性作用,可导致细胞凋亡率升高,与细胞生长调控和DNA损伤相关的GADD45、GADD153、GADD34基因表达升高,VitC可减缓BPA对DNA的损伤作用。     

铜绿假单胞菌制剂经由甘露糖依赖方式影响人宫颈癌Hela细胞株的生长研究

目的 研究铜绿假单胞菌制剂(pseudomonas aeruginosa with mannose sensitive hemagglutination pili,PAMSHA)由甘露糖依赖方式影响Bad、Bax及Bcl-2的表达进而影响癌细胞的增殖和细胞周期进程,为治疗宫颈癌的新的生物制剂提供依据. 方法 采用单独处理PA-MSHA或甘露糖与PA-MSHA联合处理宫颈癌Hela细胞,随后采用MTT法检测细胞增殖,流式检测细胞周期,荧光定量PCR和western blot检测凋亡抑制蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bad、Bax的表达变化. 结果 PA-MSHA单独处理宫颈癌Hela后细胞增殖减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,同时荧光定量PCR和western blot检测显示促凋亡蛋白Bad、Bax的表达增加而凋亡抑制蛋白Bcl-2表达减少.而甘露糖与PAMSHA共培育组与空白组对比在细胞增殖、细胞周期及凋亡蛋白表达上差异无统计学意义. 结论 PA-MSHA可以影响Bad、Bax及Bcl-2的表达进而影响癌细胞的增殖和细胞周期进程,且这种作用为甘露糖敏感型,该结果为其成为治疗宫颈癌的新的生物制剂提供了可靠依据.     

枸杞多糖对人食管癌细胞Eca-109的抑制作用及凋亡的研究

目的研究枸杞多糖(LBP)诱导人食管癌细胞Eca-109的凋亡作用及其作用机制。方法体外培养的人食管癌细胞Eca-109,细胞经不同剂量LBP处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对Eca-109细胞周期和凋亡的影响,用RT-PCR技术检测Eca-109细胞Survivin mRNA的表达。结果 LBP可明显抑制人食管癌细胞Eca-109的生长,并能诱导Eca-109细胞凋亡,凋亡率(%)分别为6.20±0.62、12.80±0.47和18.10±0.70,与对照组(0.78±0.91)%比较,差异有统计学意义(P0.01);各剂量药物处理组的肿瘤细胞SurVivin mRNA表达水平均明显降低(P0.01)。结论 LBP可抑制Eca-109细胞增殖,诱导细胞凋亡,该作用可能与下调细胞Survivin表达有关。     

迷迭香酸拮抗H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及作用机制

目的研究迷迭香酸(Rosmarinic acid,RA)对H2O2诱导的人脐静脉内皮细胞株ECV304凋亡的抑制作用及其机制。方法以H2O2诱导ECV304细胞凋亡为模型,用MTT比色法检测RA对细胞活性的影响;流式细胞仪检测法和Tunel法检测RA对细胞凋亡率的影响;用Western-blotting检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达情况和第24hcaspase-3活性。结果用0.5mmol/LH2O2孵育细胞24h细胞凋亡明显。不同浓度的RA(1、3、10μmol/L)预处理细胞后,呈浓度依赖性的增加内皮细胞活性,降低细胞凋亡率,并且Bcl-2蛋白表达呈浓度依赖性的上调,而Bax蛋白的表达和caspase-3蛋白活性呈浓度依赖性下降。结论迷迭香酸可以拮抗H2O2诱导的内皮细胞凋亡,其抑制内皮细胞凋亡与激活Bcl-2活性有关。