反相HPLC测定金荞麦药材和饮片中表儿茶素的含量

 目的 通过研究,以期建立金荞麦药材和饮片中指标成分的含量测定方法。方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.004%磷酸溶液（10∶90）为流动相;检测波长为280 nm;对11批金荞麦药材和12批饮片中的表儿茶素进行了含量测定。结果 11批药材除1批逸出值外,其余10批的平均含量（以干品计）为0.050 4%;12批饮片的平均含量（以干品计）为0.030 6%。结论 所建方法稳定可靠,简单易行。建议以总平均含量的60%,即0.030%作为金荞麦药材中表儿茶素的最低限量纳入质量标准（草案）正文含量测定项下;以总平均含量的70%,即0.020%作为金荞麦饮片中表儿茶素的最低限量纳入质量标准（草案）含量测定项下。     

金荞麦饮片液相色谱含量测定及指纹图谱研究

目的：研究金荞麦饮片高效液相色谱指纹图谱及含量测定方法。方法：采用高效液相色谱-电化学检测法,Diamonsil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱；流动相为甲醇-0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 2.5)；流速1.0 mL·min^-1；柱温35 ℃；参比电极为ISAAC(in-situ Ag/AgCl)；工作电极为玻碳电极；辅助电极为铂电极。结果：建立了金荞麦饮片高效液相色谱图谱,发现了6个色谱峰为共有峰,其中4个分别为没食子酸,原儿茶酸,原儿茶醛和表儿茶素的色谱峰。原儿茶酸的质量分数为0.004%～0.05%,原儿茶醛的质量分数为0.003%～0.015%。结论：该方法可用于金荞麦饮片质量控制。     

表儿茶素为指标的金荞麦分散片含量测定的研究

目的：研究金荞麦分散片的处方,并确定以表儿茶素为指标的分散片含量测定前处理工艺。方法：用预试验和正交试验筛选出优化处方;以表儿茶素为指标,依据正交试验设计法,重点考察乙醇浓度、料液比、提取时间3个因素对醇提效果的影响,应用高效液相色谱技术分析提取效果。结果：金荞麦分散片的崩解时间小于3min,且能均匀分散,并符合《中华人民共和国药典》（2010年版）的标准。醇提法最佳工艺是乙醇浓度60％、料液比1：15、提取时间1h;以最终工艺测得每片表儿茶素的含量为151．35g,相当于浸膏粉0．154g。结论：金荞麦分散片的处方工艺简便可行;优化的醇提法不受辅料干扰,合理可靠,适用于分散片含量测定项下的样品前处理。     

金荞麦中表儿茶素提取工艺的研究

以表儿茶素为考察指标,以正交实验设计法为依据,重点考察提取溶剂乙醇的浓度、提取次数和提取时间3个因素,每个因素3个水平,按L9（34）正交表设计实验,采用高效液相法测定其含量。实验证明,最佳提取工艺条件为45％的乙醇回流提取3次,每次1h。本优选工艺稳定可行,提取率高,重现性好。     

高效液相色谱-荧光检测法测定丹酚酸B的含量研究

建立了丹酚酸B的高效液相色谱-荧光检测含量测定方法.色谱条件为:BACKMAN ODS柱(4.6mmi.d.×250mm,5μm),以甲醇-0.5%冰醋酸水溶液为流动相,流速为1.0mL/min;荧光检测波长λEX=338nm,λEM=443nm;进样量5μL.丹酚酸B进样量为0.12～1.2μg时,其质量与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998);加样回收率为98.6%～108%;最低检测限为0.013μg/mL.该法具有更高的灵敏度,为丹酚酸B的药代动力学研究提供基础.     

高效液相色谱-荧光检测法测定大鼠脑脊液中的石杉碱甲

 目的建立大鼠脑脊液中石杉碱甲的高效液相色谱-荧光测定方法。方法采用ODS-C₁₈柱(4.6mm×250mm,10μm),以甲醇-水-三乙醇胺(60:40:0.1)为流动相,流速1mL·min^-1,荧光检测器于激发波长310nm,发射波长370nm处检测,同时紫外检测器于波长310nm处检测作为对照。结果石杉碱甲质量浓度在0.5～200μg·L^-1内线性关系良好(r=0.9999),最低定量限为0.5μg·L^-1,比紫外法降低了10倍。结论该方法准确,可靠,比高效液相-紫外法灵敏度更高。     

儿茶药材中儿茶素和表儿茶素的高效液相色谱法分析研究

目的利用高效液相色谱法测定儿茶药材中儿茶素和表儿茶素的含量。方法色谱柱填料为十八烷基键合硅胶,流动相A:甲醇;流动相B:0.04 mol/L柠檬酸-N,N-甲基甲酰胺(45∶8,V/V)。A-B(15∶85,V/V),流速1m l/m in,柱温:35℃,检测波长280 nm。结果儿茶素在0.484~4.84μg、表儿茶素在0.184~1.84μg范围内呈良好的线性关系。两种成分的均回收率分别为98.11%和106.14%。结论该方法简便、准确、分离效果好,无干扰,可用于儿茶药材质量评价。     

原代培养大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的高效液相色谱-电化学检测

 目的:检测培养的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺。方法:用原代培养的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞,建立了培养细胞分泌的儿荼酚胺(去甲肾上腺素,肾上腺素和多巴胺)的高效液相色谱-电化学检测法。结果:在静息状态下,细胞在20min内分泌的儿茶酚胺为每10⁶个细胞(73.29±15.32)ng,用乙酰胆碱等药物刺激后分泌明显增加?结论:用该方法可以灵敏地检出培养的肾上腺髓质嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺,细胞基础分泌稳定,对药物刺激反应良好>目的:检测培养的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺?方法:用原代培养的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞,建立了培养细胞分泌的儿荼酚胺(去甲肾上腺素,肾上腺素和多巴胺)的高效液相色谱-电化学检测法。结果:在静息状态下,细胞在20min内分泌的儿茶酚胺为每106个细胞(73.29±15.32)ng,用乙酰胆碱等药物刺激后分泌明显增加?结论:用该方法可以灵敏地检出培养的肾上腺髓质嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺,细胞基础分泌稳定,对药物刺激反应良好。     

原代培养大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞分泌儿茶酚胺的高效液相色谱-电化学检测

目的：检测培养的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺。方法：用原代培养的大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞,建立了培养细胞分泌的儿荼酚胺（去甲肾上腺素,肾上腺素和多巴胺）的高效液相色谱电化学检测法。结果：在静息状态下,细胞在２０ｍｉｎ内分泌的儿茶酚胺为每１０６个细胞（７３．２９±１５．３２）ｎｇ,用乙酰胆碱等药物刺激后分泌明显增加。结论：用该方法可以灵敏地检出培养的肾上腺髓质嗜铬细胞分泌的儿茶酚胺,细胞基础分泌稳定,对药物刺激反应良好     

正交试验优化金荞麦抗癌成分提取工艺的研究

目的 优选金荞麦抗癌有效成分最佳提取工艺.方法 采用正交实验,考察了溶剂种类、溶液pH值、提取温度、提取时间对金荞麦中抗癌成分提取量的影响.采用紫外分光光度法测定提取物中总原花青素含量,HPLC法测定提取物中原花青素B2的含量.结果 对总原花青素及原花青素B2提取溶剂种类、溶液pH值、提取温度是主要影响因素,均具有统计...     

金荞麦提取液的大孔树脂分离纯化工艺研究

目的：研究大孔树脂分离纯化金荞麦提取液的工艺,为工业化生产提供实验依据。方法：以金E比吸附量为指标，动态吸附法考察3种树脂的吸附效果并系统研究大孔树脂分离纯化金荞麦提取液的吸附性能和洗脱参数。结果：D-101型树脂对金E有较好的吸附分离性能,适合于金荞麦提取液的提纯。结论：采用大孔树脂分离纯化金荞麦提取液是可行的。     

金荞麦抗癌成分大孔树脂纯化工艺的研究

目的:研究大孔树脂分离纯化金荞麦抗癌成分的工艺。方法:以原花青素B2吸附率和解析率为指标,对七种树脂进行静态筛选,采用正交试验法,考察最佳上样条件,系统研究洗脱参数。结果:X-5型树脂对原花青素B2有较好的吸附分离性能,最佳吸附条件:3.5BV浓度为0.12g·mL-1的生药,pH为3.0,流速为2BV·h-1;最佳解吸条件:解吸液为3BV60%乙醇水溶液,流速为2 BV·h-1。结论:该工艺用于金荞麦抗癌成分的纯化是可行的。     

金荞麦多酚分散片处方优选及溶出度研究

目的:优选金荞麦多酚分散片的处方并对其溶出度进行考察。方法:以崩解时间为指标,采用单因素试验法优选填充剂和崩解剂种类,采用正交设计优选各辅料的用量。以表儿茶素和原花青素为指标对金荞麦多酚分散片的溶出度进行考察。结果:处方组成为主药34.2%,交联聚乙烯吡咯烷酮15.0%,微晶纤维素50.0%,硬脂酸镁0.8%,该处方压片后崩解时间小于3 min,表儿茶素和原花青素在3 min内溶出率均达85%以上,原花青素在5 min内、表儿茶素在10 min内溶出率达100%。结论:此处方工艺配比所制备的金荞麦多酚分散片溶散迅速,溶出特性较好。     

HPLC同时测定阮氏上清丸中儿茶素和表儿茶素的含量

目的：建立同时测定阮氏上清丸中儿茶素和表儿茶素含量的方法。方法：采用高效液相色谱法,C18色谱柱,流动相为乙腈-水（10：90）,检测波长280nm。结果：儿茶素在0．317μg-6．34μg间呈良好线性关系,r=0．99997,平均回收率为99．22％,RSD=2．46％;表儿茶素在0．2618μg-3．74μg间呈良好线性关系,r=0．99998,平均回收率为101．51％,RSD=2．08％。结论：方法简便、准确,可作为阮氏上清丸的含量测定方法。     

金荞麦中原花青素B2和表儿茶素在人工胃肠液中的含量变化

目的：研究金荞麦中原花青素B₂和表儿茶素在人工胃肠液中的含量变化,为金荞麦的体内物质基础研究提供依据。方法：采用HPLC测定金荞麦提取液中原花青素B₂和表儿茶素在人工胃液和人工肠液中的含量变化。结果：原花青素B₂和表儿茶素在酸性的人工胃液中含量随时间延长明显增加,胃蛋白酶对原花青素B₂和表儿茶素的含量影响不大。原花青素B₂和表儿茶素在人工肠液NE（无胰蛋白酶）中含量增加,胰酶能够降低原花青素B₂和表儿茶素的含量,对原花青素B₂含量影响尤为明显。结论：酸性的人工胃液是引起金荞麦提取液中原花青素B₂和表儿茶素含量上升的主要原因,胰酶与原花青素B₂和表儿茶素发生结合是降低原花青素B₂和表儿茶素的含量的主要原因。     

微波消解-ICP-MS法测定川芎和天麻药材中5种重金属元素

目的:使用电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS),建立川芎和天麻中Cu、As、Pb、Cd、Hg共5种重金属元素的测定方法。方法:样品经过微波消解处理后,采用外标法,用ICP-MS进行测定。结果:各元素线性关系良好(R2>0.999),最低检出限为0.003-0.134μg·L-1,回收率为80.04%-118.34%。结论:该方法准确、简便、快速、灵敏,适用于川芎和天麻药材中重金属的含量测定。     

天南星、半夏、白附子中8种核苷成分的含量测定

目的:建立HPLC测定天南星、半夏、白附子中8种核苷成分含量的方法.方法:采用Phenomenex Luna PFP(2)柱(4.6 mm ×250 mm,5 μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL· min-1,柱温35℃,检测波长260 nm.结果:尿嘧啶、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷进样量分别在0.00434～0.434 μg(r=0.9999),0.00234 ～0.234 μg(r=0.9999),0.00407 ～0.407μg(r=0.9997),0.01090 ～1.090μg(r=0.9999),0.00201 ～0.201 μg(r=0.9999),0.00732 ～0.732 μg(r=0.9999),0.00122 ～0.122 μg(r=0.9997),0.00207 ～0.207 μg(r=0.9999)有良好的线性关系;平均回收率分别为104.2％ (RSD 2.1％),98.7％ (RSD 2.4％),103.7％ (RSD 3.0％),99.4％ (RSD 1.4％),101.8％ (RSD 2.0％),102.9％ (RSD 1.9％),98.3％ (RSD 2.8％),102.3％ (RSD 2.7％).结论:方法简便、准确、快速,结果可靠,为测定天南星、半夏、白附子中8种核苷成分提供依据.