D-半乳糖致衰老动物模型的建立及评价

建立衰老动物模型是研究人类衰老过程的有效方法.结合动物的生理特性及自然属性,建立不同的动物模型,已成为衰老及抗衰老研究的焦点.D-半乳糖衰老动物模型与其他几种衰老动物模型（如自然衰老模型、臭氧损伤衰老模型、去胸腺衰老模型、SAMP系小鼠衰老模型等）相比,简便易行,价格低廉,结果稳定,因而得到广泛应用.结合该模型近年来的运用和发展,本文对该模型构建原理、剂量、具体方法和评估手段作一综述,并对行为学水平、生化水平、形态学水平、分子生物水平检测指标进行总结.总之,采用D-半乳糖120～125mg/（ kg·d）连续皮下注射6～8周是较为可靠、稳定的建立衰老动物模型的方法.     

林蛙油对D-半乳糖致衰老模型小鼠的保护作用

目的 研究林蛙油对D-gal诱导的衰老小鼠大脑学习记忆及抗衰老的作用.方法 小鼠颈背部皮下注射D-gal(120 mg/kg)建立衰老模型,同时以林蛙油(0.05,0.2,0.8g/kg)作为抗衰老实验药物灌服.60 d后.与衰老小鼠比较在行为、记忆上的差异和脑组织内的丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、Na+-K+-ATPase活性的差异.结果 在水迷宫和跳台实验中林蛙油的学习记忆能力明显长于模型组(P<0.05);D-gal致小鼠的空间认知功能损伤严重,林蛙油组SOD、GSH-Px以及Na+-K+-TPase酶活性高于模型组,而MDA含量低于模型组(P<0.05).结论 林蛙油能显著提高衰老模型小鼠学习记忆能力及脑组织中SOD含量、GSH-Px及其Na+-K+-TPase酶活性,并从分子水平揭示了林蛙油抗衰老的作用机制.     

氧化应激对D-半乳糖致衰老小鼠的影响

目的 探讨氧化应激与衰老的相互关系.方法 应用腹腔注射D-半乳糖方法建立衰老模型,观察实验小鼠的外观特征,测定其运动能力、免疫器官指数(胸腺指数、脾脏指数)、脾淋巴细胞增殖活性、血清和脑组织中的SOD及MDA含量,并进行统计学分析.结果 与对照组相比,D-半乳糖腹腔注射后小鼠运动能力、脾指数、胸腺指数及脾细胞增殖活性下降(均P＜0.01),SOD的活性降低(P＜0.01),MDA的含量升高(P＜0.01).结论 氧化应激参与了衰老的发生发展过程,降低了机体的免疫功能和抗氧化能力.     

D-半乳糖合并半高脂饲料致认知功能障碍大鼠模型的建立及评价

目的 建立复合因素所致认知功能障碍大鼠模型,并从行为学、病理形态学、细胞凋亡、氧化损伤和炎症因子等角度进行评价.方法 选用雌性正常SD大鼠,采用皮下注射D-半乳糖及饲喂半高脂饲料,制备6 w及8 w不同时程的认知功能障碍动物模型.采用Morris水迷宫实验及物体识别实验检测各组大鼠学习记忆能力;采用HE染色及电镜观察海马组织病理形态;测定脑中丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的含量;比较不同时程认知功能障碍模型大鼠之间及与正常大鼠的差异.结果 6 w末时,认知功能障碍模型大鼠在物体识别实验中,分辨指数较空白组明显下降(P＜0.05),但水迷宫实验成绩与空白组比较无明显差异;而8 w末时,模型动物在分辨指数下降(P＜0.01)的同时,水迷宫成绩亦明显下降,逃避潜伏期明显延长(P＜0.01),穿台次数明显减少(P＜0.05);8 w末与6 w末相比,水迷宫实验逃避潜伏期明显延长(P＜0.01);造模后,能引起海马神经细胞的退行性改变及早期凋亡现象,且存在着进行性加重的病理变化;6、8 w模型组大鼠脑组织的TNF-α、IL-6水平显著升高(P＜0.05,P＜0.01),同时8 w大鼠IL-6水平高于6 w模型组(P＜0.05);6、8 w模型组ox-LDL、MDA水平均显著升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 以该方法复制的认知功能障碍大鼠模型,在一定程度上模拟了认知功能障碍发生、发展的多环节病理变化,可为认知功能障碍的治疗,特别是其早期干预打下基础.     

D-半乳糖诱导衰老动物模型研究进展

在上世纪60年代发现半乳糖会对鸡脑中能量和磷脂代谢产生有害影响[1].1985年,中国学者徐黻本首次提出给予啮齿动物D-半乳糖(D-gal)可以诱导类似于加速衰老进程的生理变化[2].近年来,随着该模型被大量深入研究,其致衰老的作用机制也渐为明了,这为这一动物模型的广泛应用奠定了坚实的理论基础.研究发现,经过长期D-gal诱导而导致的模型动物寿命缩短主要是由于氧化应激所致,引起线粒体、神经损伤,进一步表现为认知能力下降.另外,该模型具有衰老相关的高级糖基化终产物(AGE),并且出现免疫力下降等一系列类似自然衰老的变化.本文简要地综述了D-gal半乳糖诱导衰老动物模型的研究进展及其可能的应用领域.     

维生素E对D-半乳糖亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基及相关生化指标的影响

目的 研究维生素E(VE)对D-半乳糖(D-gal)亚急性中毒拟衰老模型鼠自由基产生及相关生化指标的影响.方法 昆明小鼠颈背部皮下注射D-ga140mg·kg<'-1>·d<'-1>制备D-gal亚急性中毒导致的衰老鼠模型.将模型鼠分为4组,除对照组外,其他3组模型鼠分别灌胃以60、30、15 mg·kg<'-1>·d<'-1>VE,10w后杀鼠.摘眼球取血,室温离心,分离血清,采用硫代巴比妥酸(TBA)法检测血清中丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测血清中总超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用ISP半自动生化分析仪检测血清中血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)的含量.结果 模型鼠血清中MDA含量显著高于正常对照组(P<0.05),VE喂饲的3个实验组小鼠血清MDA含量显著低于对照组(P<0.05).模型鼠血清总SOD含量显著低于正常对照组(P<0.05),VE喂饲的3个实验组小鼠血清总SOD含量显著高于对照组(P<0.05).模型鼠血清中的Glu、TC、TG含量显著高于正常对照组(P<0.05).VE喂饲的3个实验组小鼠血清中Glu、TC、TG与对照组无显著差异.结论 VE可以对衰老鼠的氧自由基损伤发挥保护作用,为临床将VE作为一种抗衰老药物应用提供了进一步的试验依据.     

通补1号对D-半乳糖衰老模型大肠菌群的影响

目的研究通补Ⅰ号对D-半乳糖衰老小鼠模型的大肠杆菌群的影响。方法采用20±28ICR品系小鼠用D-半乳糖造模,同时用通补Ⅰ号治疗,采用滴注法检测衰老模型小鼠大肠杆菌、双歧杆菌及拟杆菌数量。结果D-半乳糖衰老模型大肠杆菌群中大肠杆菌增多,拟杆菌、双歧杆菌变化不大,通补Ⅰ号具有防治此模型肠杆菌增多的作用。结论通补Ⅰ号可通过抑制肠杆菌的产生,达到延缓衰老之功效。     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺β-半乳糖苷酶表达的影响

目的 通过观察何首乌饮干预的衰老大鼠下颌下腺β-半乳糖苷酶(β-gal)表达的改变,探讨何首乌饮的抗衰老作用.方法 用D-半乳糖制造衰老大鼠模型,何首乌饮的干预作用分治疗和预防两部分,检测β-半乳糖苷酶活性,观察下颌下腺衰老细胞数目改变.结果 预防性实验部分:模型组衰老细胞数目多于正常组和各预防性用药组;治疗性实验部分:用药各组与自然恢复组相比,衰老细胞数目明显减少,其中治疗中剂量组最低.结论 何首乌饮具有抗模型大鼠下颌下腺细胞衰老的作用.     

腹腔和皮下注射D-半乳糖衰老大鼠模型分析

目的 探讨腹腔和皮下注射D-半乳糖建立衰老大鼠模型间的差异.方法 分别腹腔和皮下连续注射D-半乳糖40d后,称量大鼠体重,取血测血糖、C反应蛋白(CRP)、丙二醛(MDA)含量;总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.取胸腺、脾脏、皮肤和脑组织,称量胸腺和脾脏重量,测脑组织单胺氧化酶(MAO-B)活性和皮肤羟脯氨酸含量,同时制作切片.结果 经过比较发现,皮下注射组CRP含量较腹腔注射组高(P＜0.05);T-SOD活性和GSH-Px活性较腹腔注射组高(P ＜0.01);MDA含量较腹腔注射组低(P＜0.01);皮肤羟脯氨酸含量较腹腔注射组低(P＜0.05),但脑组织MAO-B活性、胸腺指数、脾脏指数和血糖并无明显差异.结论两种方法均能建立稳定可靠的衰老大鼠模型.两种模型均能在多层面上反映出机体的衰老情况,腹腔注射法在构建大鼠衰老模型上效果更明显.     

D-半乳糖致衰老模型小鼠皮肤衰老的观察

目的　观察D 半乳糖连续皮下注射对小鼠皮肤衰老指标的影响。　方法　 3月龄KM雌性小鼠 6 0只 ,随机分为空白对照组 (注射生理盐水 )、D 半乳糖低剂量组 (80mg/kg)和D 半乳糖高剂量组 (10 0 0mg/kg) ,连续每日背部皮下注射 4 2天后 ,观察小鼠皮肤中与衰老相关的生化指标及组织病理学变化 ,并用计算机图像分析系统定量分析。　结果　高剂量组小鼠真皮厚度〔(6 2 4 5±4 8 5 ) μm〕较对照组〔(839 3± 5 8 4 ) μm〕显著变薄 (P <0 0 5 ) ,胶原纤维减少 ,排列疏松 ,弹力纤维总面积亦显著减少 (P <0 0 5 ) ;高剂量组皮肤中超氧化物歧化酶 (SOD)活性〔(131 2± 11 5 )U/ml〕、羟脯氨酸含量〔(0 5 7± 0 13) μg/mg〕显著低于对照组的〔(178 1± 2 0 7)U/ml、(0 74± 0 17) μg /mg ,P <0 0 5〕 ,丙二醛 (MDA)含量增加〔(9 4± 1 5 )nmol/ g和 (6 8± 1 5 )nmol/ g ,P <0 0 5〕 ;而低剂量组上述改变则不显著。　结论　每日 10 0 0mg/kgD 半乳糖连续皮下注射 4 2天 ,可导致小鼠皮肤的明显衰老 ,为抗皮肤衰老研究提供一个简便、稳定的实验模型。     

D-半乳糖加速衰老合并Meynert核损毁大鼠学习记忆能力变化的初步观察

1997年3～7月,在大鼠D-半乳糖加速衰老模型基础上,注射鹅膏蕈氨酸(ibotenic acid,IBO)损毁脑Meynert核制造了新的痴呆大鼠模型,并对其学习记忆能力的改变进行了初步观察和评价。     

双歧杆菌对D-半乳糖致衰老小鼠的抗衰老作用

目的观察双歧杆菌对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠血液中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）含量的影响。方法小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖建立亚急性老年模型，用双歧杆菌液拌少量小鼠饲料喂饲小鼠，实验前后取血检测血中s0D、GSH-Px及MDA值进行比较。结果双歧杆菌明显提高小鼠全血SOD含量（P〈0．01）和GSH-Px含量（P〈0．05），明显降低小鼠全血GSH-Px含量。结论双歧杆菌具有明显的抗衰老作用。     

脑力智宝对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠的抗衰老作用及其机制

目的　探讨脑力智宝的抗衰老作用机制。方法　以D 半乳糖致亚急性衰老小鼠为模型 ,采用跳台法和Y型迷宫法检测各组小鼠学习记忆行为 ;并测定脑中丙二醛 (MAD)、一氧化氮 (NO)含量及超氧化物歧化酶 (SOD)、一氧化氮合酶 (NOS)活性。结果　与模型组比较 ,脑力智宝可明显提高衰老小鼠的学习记忆能力 ,降低MDA含量 ,提高SOD的活性 ,减少NO的生成 ,降低NOS活性。结论　脑力智宝具有明显的抗衰老作用 ,其作用机理可能与其抗自由基的作用有关     

何首乌饮对D-半乳糖所致衰老大鼠下颌下腺超微结构的影响

目的 观察实验性衰老大鼠下颌下腺超微结构的改变,探讨何首乌饮的干预作用.方法 用D.半乳糖制造衰老大鼠模型,用何首乌饮干预(预防和治疗),观察下颌下腺主要细胞器超微结构改变.结果 模型组大鼠下颌下腺细胞器的超微结构呈现明显的退行性变;何首乌饮预防组下颌下腺细胞器的超微结构退行性变的情况明显好于治疗组,治疗组改变程度较自然恢复组明显减轻.结论 D-半乳糖模型大鼠下颌下腺超微结构发生明显衰老改变,何首乌饮可改善衰老大鼠下颌下腺超微结构的衰老变化,预防用药效果更好.     

巴戟天对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化系统作用的实验研究

中药巴戟天 (morindaofficinalishow ,MOH )具有补肾阳、强筋骨、祛风湿之功效〔1〕。研究发现巴戟天具有抗疲劳、抗自由基、影响内分泌、抗抑郁及提高免疫功能等作用〔2〕。但关于巴戟天抗衰老的作用未见报道。1　材料与方法1 1　 药品制备　巴戟天生药购于佳木斯市药材公司。经洗净、切碎后水煎数次 ,合并滤液浓缩成 1g/ml生药煎剂。1 2 　 实验试剂　D 半乳糖 ,上海试剂二厂产品 ;丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)测定试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品。1 3 　 实验动物及分组　 8～ 10周龄昆…     

肉苁蓉总苷对D-半乳糖所致衰老模型小鼠免疫功能的影响

目的　研究肉苁蓉总苷对 D-半乳糖致衰老小鼠抗衰老作用的免疫学机制。方法　通过 3H- Td R掺入法测定淋巴细胞转化能力、中性红试验测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、免疫荧光法进行淋巴细胞亚群的检测、放免法测定外周血 IL- 2含量、微量 NAG酶释放法测定 NK细胞活性。结果　 D-半乳糖致衰小鼠免疫功能明显下降 ,表现为淋巴细胞转化能力、外周血 IL - 2含量、CD4 T细胞和 CD8 T细胞含量、腹腔巨噬细胞吞噬功能和 NK细胞活性均明显降低 (P<0 .0 5) ;肉苁蓉总苷能提高模型小鼠淋巴细胞转化能力、外周血 IL - 2含量、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NK细胞活性、CD4 T和 CD8 T细胞含量 (P<0 .0 5)。结论　肉苁蓉总苷明显增强 D-半乳糖致衰老小鼠的免疫机能 ,使其恢复或接近了青年小鼠状态 ,具有延缓衰老的作用     

鸡冠花对D-半乳糖致小鼠衰老作用的研究

目的　研究鸡冠花的抗衰老作用。方法　随机将小鼠分为 A(正常对照组 )、B(衰老对照组 )、C(鸡冠花高剂量组 ) D(鸡冠花低剂量组 )四组。每组 1 4只 ,雌雄各半 ,除 A组外 ,其余三组每天注射 0 .1 g/ kg D-半乳糖 ,建立衰老动物模型 ,C、D两组同时施加不同剂量鸡冠花 ,连续 8w,测定各组血清超氧化物歧化酶 ( SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 ( GSH- Px)活性 ,总抗氧化能力 ( T- AOC) ,丙二醛 ( MDA)和肝脏脂褐质 ( L F )含量。结果　衰老对照组 SOD、GSH- Px活性和 T- AOC较正常对照组明显降低 ( P<0 .0 5) ,MDA和 L F含量增加 ( P<0 .0 5) ,呈现衰老状态。鸡冠花两组 SOD、GSH- Px活性和 T- AOC较衰老对照组明显升高 ( P<0 .0 5) ,MDA和 L F含量减少 ( P<0 .0 5)。结论　鸡冠花具有拮抗 D-半乳糖致衰老作用     

富硒板党对D-半乳糖所致衰老小鼠模型的影响

目的研究富硒板党(BCPA)注射液对D-半乳糖所致衰老小鼠模型的影响。方法昆明种小鼠(雌雄各半)40只,随机分为对照组、模型组、7.2 g/kg BCPA组、3.6 g/kg BCPA组及1.8 g/kg BCPA组,每组8只。腹腔注射D-半乳糖造模,Morris水迷宫测量小鼠学习和记忆能力。检测各组小鼠皮肤羟脯氨酸、心脑组织丙二醛(MDA)、脂褐质(LP)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,采用双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素(IL)-2及IL-6含量。结果 Morris水迷宫实验中,BCPA各组潜伏期与模型组相比较明显减少(P0.05),模型组小鼠穿越平台的次数比其他各组小鼠少(P0.05)。心、脑组织匀浆氧化性指标(SOD、MAD、LP及GSH-Px)检测,对照组及BCPA各组MDA与LP含量低于模型组(P0.05)。对照组及BCPA各组SOD与GSH-Px的活性明显高于模型组(P0.05)。注射过D-半乳糖小鼠皮肤羟脯氨酸含量都明显低于对照组(P0.05),BCPA组小鼠皮肤中羟脯氨酸的含量明显高于模型组(P0.05)。BCPA组小鼠血清中IL-2、IL-6含量显著高于对照组和模型组(P0.05),模型组小鼠血清中的IL-2、IL-6比对照组要低(P0.05)。结论 BCPA的有效成分具有多种生物学活性,可以通过不同途径发挥抗衰老作用,在改善学习记忆功能,清除体内自由基抗氧化,增强机体免疫能力等方面都有较好的作用。     

枸杞多糖对D-半乳糖诱导衰老小鼠皮肤的影响

目的探讨枸杞多糖的抗皮肤衰老作用。方法健康昆明种雌性小鼠50只,随机分为正常对照组、衰老模型组、枸杞多糖低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外,其余各组均每日颈背部皮下注射D-半乳糖连续42 d,建立衰老模型。给药组同时给予不同剂量的枸杞多糖。42 d后测定小鼠皮肤组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量,以及皮肤羟脯氨酸(HYP)含量。结果枸杞多糖可增强衰老模型小鼠皮肤组织SOD、GSH-Px活力,降低MDA含量,提高HYP含量。结论枸杞多糖具有延缓D-半乳糖致小鼠皮肤衰老的作用。     

大豆异黄酮对D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化系统作用的实验研究

目的　研究大豆异黄酮 (ISO)对 D-半乳糖致衰老模型小鼠抗氧化系统的影响。方法　用 D-半乳糖诱导小鼠制成衰老模型 ,同时给予不同剂量的 ISO灌胃 4 w,测定脑匀浆超氧化物歧化酶 (SOD)、血清谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)活力以及血清丙二醛 (MDA)含量。结果　与正常对照组相比 ,模型组小鼠脑组织 SOD活力和血清 GSH- Px活力明显降低 ,血清 MDA含量明显升高 ;不同剂量 ISO可不同程度的提高 SOD和 GSH-Px活力 ,降低血清 MDA含量。结论　 ISO对于衰老模型小鼠抗氧化系统功能具有一定的促进作用。