流式细胞术检测冠心病患者外周血白细胞唾液酸黏附素的表达及临床意义

目的观察唾液酸黏附素（Siglec-1）在冠心病（CHD）患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其在冠状动脉粥样硬化发病过程中的作用。方法流式细胞术检测57例CHD患者及38名正常对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞Siglec-1的百分率;生化常规测定所有人选者血脂水平。结果流式细胞仪检测发现,Siglec-1在正常对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞Siglec-1阳性率为（12．74-2．4）％,显著高于正常对照组[（1．0±0．3）％,P〈0．01],而CHD血脂正常组和血脂异常组的Siglec-1阳性率差异无统计学意义。结论作为单核巨噬细胞激活的标志,Siglec-1在外周血淋巴细胞和中性粒细胞上不表达,在正常人单核细胞上表达很低。CHD患者单核细胞Siglec-1表达明显升高,提示CHD患者外周血单核细胞已经激活,发生巨噬细胞化,Siglec-1在单核细胞黏附血管内皮及CHD的发病过程中可能起重要作用。     

流式细胞术测定冠心病血小板活化状态的研究

目的：检测冠心病患者全血血小板活化程度与冠状动脉病变程度,研究血小板活化在冠心病（CHD）中的作用。方法：采用流式细胞术（FCM）测定28例稳定型心绞痛（SAP组）、26例不稳定型心绞痛（UAP组）和16例急性心肌梗死（AM I组）患者的外周血中血小板糖蛋白（CD 62P）、溶酶体膜糖蛋白（CD 63）的阳性表达,并与20例非冠心病患者对照。结果：经冠状动脉造影的90例病例中70例为阳性,CD 62P表达率不稳定型心绞痛组与非冠心病对照组及稳定型心绞痛组比较、冠脉二支以上病变与无病变及一支病变比较差异有显著性;CD 63阳性表达率不稳定型心绞痛组与其余三组比较差异有显著性,二支病变与无病变及一支病变比较差异有显著性。结论：不稳定型心绞痛体内血小板活化程度明显增高,血小板活化状态与冠脉病变的严重程度相关。     

冠心病患者血小板活化状态的检测

近年来随着识别活化血小板膜抗原单克隆抗体的发展，流式细胞术（FCM）以其快速、敏感、准确、特异的优点被广泛用于临床活化血小板的检测。血小板在血栓性疾病形成过程中起着重要作用，而只有血小板活化后才参与血栓形成等多种生理病理过程。本文通过测定40例冠心病患者及20例健康人血小板活化标记物CD62P、PAC-1的变化。以讨论冠心病患者血小板活化程度及其临床意义。     

流式细胞术在精子质量检测中的应用

目的研究流式细胞检测方法在精子质量评价中的应用。方法将104例男性不育患者的精子标记相应的荧光染料,用流式细胞仪检测精子的质膜完整性、染色质状态、顶体状态和线粒体膜电位等,并与精液常规检测方法进行比较和相关性分析。结果男性不育患者精子质膜完整率为(54.20±21.23)%,染色质结构分析t(37.78±22.78)%,SDt(44.24±14.58)%,COMPt(26.24±21.42)%,线粒体膜电位正常率(50.22±18.36)%,活精子的顶体率(25.27±12.08)%,相关性分析结果表明精子的线粒体膜电位与其活动率(a+b)%存在正相关性(P=0.0002)。结论流式细胞术与常规检测方法相比,不仅具有快速、精确的优点,还可以了解精子的内部结构和功能,是评价精子质量的有效方法。     

流式细胞术在冠心病患者诊疗中的作用研究进展

正冠心病是危害人类健康与生命的心血管疾病,其基本病理变化是冠状动脉血管发生动脉粥样硬化病变而引起血管腔狭窄或阻塞,造成心肌缺血、缺氧或坏死。世界卫生组织将冠心病分为5大类:无症状心肌缺血(隐匿性冠心病)、心绞痛、心肌梗死、缺血性心力衰竭(缺血性心脏病)和猝死5种。临床上又     

流式细胞术在精液检测中的应用

流式细胞术(FCM)是20世纪70年代发展起来的一种单细胞快速分析技术,已广泛应用于细胞生物学和医学的各个领域.精子质量检测是诊断男性不育的重要手段,由于检测精子数低及主观因素影响,常规的精液检查只能反映精子的形态特征和有限的功能,不能为生育力提供准确评估的依据.将FCM用于精液检查,可把定性的描述过渡到定量的研究,并可进行数据统计,大大提高了实验结果的科学性,而且可对精液进行高通量、多参数分析.因而FCM为客观地评价男性生育能力提供了有利的条件,有着广泛的应用前景.本文对流式细胞术在精液检测中的应用进行综述.     

流式细胞术检测活化血小板

建立了流式细胞术检测活化血小板的方法并作了方法学方面的探讨，同时比较了几种抗活化血小板特异性单克隆抗体的特点。实验结果表明：该法结果准确，特异性和灵敏度高，能检出２％以上的活化血小板，并可反映单个或亚群血小板质膜上活化抗原的变化，为研究血小板活化提供了一种新方法。     

用流式细胞术检测冠心病患者血清P选择素的方法与应用评价

目的 评价流式细胞术（FCM）检测冠心病患者血清P选择素（P-selectin）的方法学和临床应用效果。 方法 参考美国CLSI系列文件,用FCM检测75例冠心病患者血清P-selectin,对方法的精密度、准确度、分析灵敏度、分析测量范围等进行评价,并与ELISA法比较。以80例健康人为对照,观察本法的临床应用价值。 结果 P-selectin含量在39.1和10 000.0 ng/L时,批内变异系数（CV）分别为4.2%和9.0%,批间CV分别为4.6%和11.0%,准确度相对偏倚分别为2.7% 和5.3%;检测灵敏度为7.9 ng/L,分析测量范围为7.9 ng/L~103 928.0 ng/L,结果与ELISA法进行比较无显著差异（P＞0.05）。ROC曲线下面积为0.924,P＜0.05。根据ROC曲线,以9 855.2 ng/L为cut off值,诊断冠心病的敏感性为85.3%,特异性为83.8%,阳性似然比为5.3,阴性似然比为0.18,阳性预测值为85.9%,阴性预测值为97.1%,Youden指数为0.691。检测结果有助于冠心病患者分层。 结论 FCM检测血清P-selectin的分析性能良好,其水平对冠心病的诊断和分层有一定的应用价值。     

冠心病患者血小板活化状态的检测

近年来随着识别活化血小板膜抗原单克隆抗体的发展,流式细胞术(FCM)以其快速、敏感、准确、特异的优点被广泛用于临床活化血小板的检测。血小板在血栓性疾病形成过程中起着重要作用,而只有血小板活化后才参与血栓形成等多种生理病理过程。本文通过测定40例冠心病患者及20例健康人血小板活化标记物CD62P、PAC-1的变化,以讨论冠心病患者血小板活化程度及其临床意义。1临床资料本组40例心内科住院患者,男23例,女17例,年龄37~78岁,其中心绞痛15例,心肌梗死(MI)25例。正常对照组20例,男12例,女8例,年龄38~67岁,均为健康体检者,无心脑血管疾…     

流式细胞术检测活化血小板的临床应用

目的 观察高粘滞综合征（HVS）与活化血小板的关系。方法 用流式细胞术以单克隆抗体作分子探针，对120例HVS患者治疗前联合测定CD62P、CD63、CD41，并与正常组（50例）测定比较。结果 （1）CD62P、CD63、CD31阳性百分率均高于正常测定值，CD41阳性表达无明显改变。（2）联合检测可提高HVS的阳性率至90％－100％，其敏感性达95％。结论 活化血小板参与了高粘滞综合征的发生和发展，应用流式细胞术分析血小板膜糖蛋白，其特异性强，阳性检出率高，重复性好，快速简便，在分子水平上为HVS早期诊断提供了一种新的可靠依据。     

流式细胞仪检测肾小球疾病患者尿巨噬细胞的应用研究

目的　研究尿巨噬细胞计数与肾小球肾炎细胞增生程度的关系。方法　用流式细胞仪 (FCM )测定 36例肾小球肾炎患者尿巨噬细胞计数和尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值 ,并与肾活检结果进行对照。结果　 2 2例增生性肾炎患者尿巨噬细胞计数为 5 6 1 7± 185 7个 /ml,尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值为 4 8± 1 7;14例非增生性肾炎患者尿巨噬细胞计数为 2 8 5± 15 3个 /ml,尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值为 0 6± 0 2。增生性肾炎患者的两项指标均明显高于非增生性肾炎组 (P <0 0 1) ,且在IgA肾病中随系膜细胞增生程度的加重 ,尿巨噬细胞计数则明显升高 (P <0 0 5 )。结论　尿巨噬细胞计数和尿巨噬细胞 /T淋巴细胞比值可作为判断肾小球细胞增生程度的指标之一。     

冠心病患者血小板膜糖蛋白CD_(62)P表达和血粘度的临床研究

目的　探讨血小板膜糖蛋白CD62 P表达及血粘度与冠心病的关系。方法　利用流式细胞仪和单克隆抗体技术测定 82例冠心病患者 (稳定型心绞痛 2 6例A组 ;不稳定型心绞痛 2 8例B组 ;急性心肌梗死2 8例C组和 2 8例健康人D组 )的CD62 P活性及血液流变学指标。结果　A组、B组、C组和D组的CD62 P阳性表达率分别为 3 6 2± 1 2 4 %、5 2 6± 1 4 9%、6 0 8± 1 75 %和 2 4 6± 0 81%。A组、B组和C组与健康人D组比较 ,差异均有显著意义 (P值均 <0 0 5 )。以上各组的血浆粘度分别为 1 31± 0 30、1 6 4± 0 2 2、2 19±0 35及 1 30± 0 18。B组、C组与对照组相比差异均有显著意义 (P值均 <0 0 5 ) ,CD62 P与血浆粘度和纤维蛋白原浓度呈正相关 (r =0 872 ,P <0 0 5 ;r =0 793,P <0 0 5 )。结论　CD62 P及血浆粘度均可能成为判断冠心病患者病情进展程度的良好指标     

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1在冠状动脉粥样硬化性心脏病患者外周血单个核细胞的表达及临床意义

目的 观察唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1(sialic acid-binding immunoglobulin-likelectin 1,Siglec-1,也称CD169)在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上的表达水平,并探讨其与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系.方法 流式细胞术检测57例CHD患者及38名健康对照者外周血CD14CD169双阳性细胞的表达率;生化常规测定所有入选者血脂水平;实时荧光相对定量逆转录(FQ-RT)-PCR方法检测入选对象外周血单个核细胞(PBMCs)中CD169 mRNA的含量.结果 流式细胞仪检测发现,CD169在健康对照组及CHD组淋巴细胞和中性粒细胞上均无表达;CHD组单核细胞CD14CD169双阳性率为(12.7±2.4)%,显著高于健康对照组[(1.0±0.3)%,t=23.2,P<0.01];CHD组CD169 mRNA的拷贝数显著高于健康对照组拷贝数(t=6.59,P<0.01),为健康对照组的3..倍;而CHD血脂正常组和血脂异常组的CD169阳性率[分别为(12.2±2.3)%和(13.4±2.5)%,t=1.87,P>0.05]和mRNA平均拷贝数(分别为健康对照组的3.64和2.79倍,t=0.98,P>0.05)差异均无统计学意义.结论 CD169组成性表达于特定组织巨噬细胞上,健康人外周血单核细胞上并不表达,单核巨噬细胞受到炎症刺激时,CD169表达迅速上调.CD169蛋白及mRNA含量在CHD患者外周血单核细胞上表达显著升高,CHD患者外周血单核细胞已发生巨噬细胞化,单核巨噬细胞介导的免疫炎症反应在CHD发生发展过程中起重要作用.     

冠心病患者止凝血与纤溶状态检测的临床价值

目的探讨冠心病(coronaryheartdisease,CHD)患者止凝血、纤溶状态检测的临床价值。方法102例冠心病患者,其中31例稳定型心绞痛(stableangina,SA),33例不稳定型心绞痛(unstableangina,UA),38例急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction,AMI),采用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测血浆中血管性血友病因子(vonWillebrandfactor,vWF)、血浆血小板α颗粒膜蛋白140(α-granulemembraneprotein140,GMP-140)、组织型纤溶酶原激活物(tissue-typeplasminogenactivator,t-PA)、血浆纤溶酶原激活物抑制物(plasminogenactivatorinhibitor,PAI)及D-二聚体(D-Dimer),采用Clauss法检测纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)含量并比较各指标在CHD患者组与健康对照组的差别。结果CHD患者血浆中t-PA低于健康对照组,其他指标的含量高于健康对照组。UA组与SA组比较,vWF、t-PA、PAI、D-Dimer、FIB有显著性差异(P<0.05),而GMP-140无显著性差异(P>0.05)。AMI组与UA组比较,GMP-140和D-Dimer无显著性差异(P>0.05),其他指标有显著性差异(P<0.05)。结论CHD患者存在内皮细胞损伤、血小板活性增高而纤溶活性降低的状态,易发生血栓,并且各项指标异常程度与CHD严重程度相一致(AMI>UA>SA),有助于进行危险分层诊断。     

重症冠心病非体外循环冠状动脉搭桥术

目的 总结21例重症冠心病非体外循环冠状动脉搭桥手术的临床体会。方法 先行乳内动脉与前降支的吻合，或在主动脉内球囊反搏支持下完成手术。结果 平均手术时间216（196-286）分钟，3例搭桥3根，15例搭桥4根，3例搭桥5根（4根/人），平均术后呼吸机辅助时间6（3-8）小时，术后应用多巴胺和多巴酚丁胺进行循环功能支持者14例，应用主动脉内球囊反搏2例，均于术后48小时内撤除，术后早期发生房颤，房扑伴阵发性室上速者12例，频发室性早搏者3例，心包填塞二次开胸止血者2例，结论 重症冠心病非体外循环冠状动脉搭桥手术，应充分进行术前准备，制订合理的麻醉和手术方案。加强术中密切配合，重视全面的术后处理。     

氯吡格雷抑制冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血小板受体活化的特征

目的 探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者服用氯吡格雷后血小板受体抑制与总活性短期改变的特征.方法 选择冠状动脉粥样硬化性心脏病患者32例,在服用100 mg/d阿司匹林的同时,分别在服用氯吡格雷前、300 mg负荷剂量后10 h和36 h(维持剂量75 mg)分3次采血检测.用AA和ADP作为诱导剂测定血小板聚集率,使用血栓弹力图仪配套试剂盒中的高岭土(Kaolin)试剂、AA、ADP和ActivatorF((R)) 检测并计算血小板INH;在FACSCalibur流式细胞仪上检测血小板活化标志物CD62p和VASP磷酸化水平(以PRI表示),分别了解血小板分泌活性和P2Y12受体被抑制的情况.比较各指标在服药前后的动态变化趋势,并评价其在反映血小板受体活化功能水平的价值.结果 ADP诱导的血小板INH在服药前为(11.5±9.3)%,服药后10 h升至(42.5±29.1)%,与服药前比较差异有统计学意义(t=3.155,P<0.05),服药后36 h降至(20.4±13.1)%,与服药前比较差异无统计学意义(t=2.078,P>0.05);由AA诱导的血小板INH服药前为(56.6±36.6)%,服药后10 h升至(83.0±27.3)%,与服药前比较差异无统计学意义(t=2.086,P>0.05),服药后36 h升至(85.4±20.8)%,与服药前比较差异无统计学意义(t=1.888,P>0.05);表明300 mg负荷剂量氯吡格雷对ADP诱导作用的抑制在36 h内未能稳定.由ADP诱导的血小板聚集率在服药前为(53.7±14.1)%,服药后10 h降至(49.2+22.8)%,与服药前比较差异无统计学意义(t=0.656,P>0.05),服药后36 h降至(40.7±12.8)%,与服药前比较差异有统计学意义(t=2.418,P<0.05);由AA诱导的血小板聚集率在服药前为(34.3±18.1)%,服药后10 h降至(17.4±13.1)%,与服药前比较差异有统计学意义(t=3.134,P<0.05),服药后36 h降至(14.6±5.1)%,与服药前比较差异有统计学意义(t=2.532,P<0.05).PRI在服药前为(78.6±22.3)%,服药后10 h降至(70.7±9.4)%,与服药前比较差异无统计学意义(t=1.194,P>0.05),服药后36 h降至(59.6±28.0)%,与服药前比较差异有统计学意义(t=1.930,P<0.05),说明氯吡格雷在36 h内尚未对ADP受体形成有力的抑制效果.CD62p在服药前为(7.5±1.4)%,服药后10 h降至(4.2±1.1)%,与服药前比较差异有统计学意义(t=18.027,P<0.05),服药后36 h降至(4.3±0.2)%,与服药前比较差异无统计学意义(t=2.908,P>0.05).CD62p反映的分泌活性所受抑制比较明显.相比而言,环氧化酶-1途径所受的抑制更为显著,而P2Y12受体所受抑制却因方法差异而不尽相同.结论 从诱导的血小板活化在氯吡格雷和阿司匹林联合抑制下显著减低,ADP受体直到服用负荷剂量氯吡格雷后36 h才出现显著抑制.全血中血小板功能反映了血小板与其他成分交互作用下的总活性,10 h内效果不明显.     

老年冠心病患者的冠状动脉特点

目的　探讨老年冠心病患者的临床及冠状动脉病变特点。方法　采用病例对照研究方法 ,观察 346例经冠状动脉造影确诊的冠心病患者 ,并根据年龄是否≥ 6 5岁而分为老年组 (n =134)和中青年组(n =2 12 ) ,评价两组的危险因素及冠脉病变情况。结果　老年患者的左主干及多支血管病变多见 ,左回旋支及其近段病变也多见 ,而在单支血管病变中青年患者多于老年患者。危险因素方面两组差别不大。结论　老年冠心病患者的冠脉病变以左主干和多支发生血管病变多见     

Toll样受体4在冠心病患者外周血细胞的表达检测及临床意义

目的探讨Toll样受体4(Tolllikereceptor4,TLR4)在外周血白细胞上的表达及其表达差异在动脉粥样硬化中的意义。方法采用流式细胞术检测50例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者及40名健康对照者外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞上TLR4的表达;全自动生化分析仪测定所有入选者血脂水平。结果TLR4在外周血淋巴细胞和中性粒细胞的阳性率平均值低于5%;单核细胞的TLR4阳性率在冠心病组为(55.11±16.30)%,显著高于健康对照组的阳性率(42.91±15.70)%(P<0.01);而冠心病血脂正常组和血脂异常组的TLR4阳性率无统计学意义[(54.16±14.60)%;(56.41±18.30)%,P>0.05]。结论TLR4主要表达于外周血单核细胞,在动脉粥样硬化患者中其阳性率升高;而且TLR4的阳性率高低与患者血脂正常与否无关;TLR4及其介导的天然免疫应答与动脉粥样硬化的发生发展存在一定的相关性。     

流式细胞术快速鉴定ABO血型亚型

目的 建立流式细胞术快速鉴定ABO血型亚型的实验方法。方法 用荧光素(FITC)标记多人份人源抗-A、抗-B,与受检RBC上的相应抗原结合,利用流式细胞仪快速、特异地分辨每个细胞(生物颗粒)获得细胞的散点图,以RBC设定“门”,用Cell quest verl 2.2软件分析,对照管作“mark”,得测定管阳性细胞的百分率。结果 A型RBC其抗A-FITC百分率为97.40％±0.62％,抗B-FITC百分率为0.40％±0.15％;B型RBC其抗A-FITC百分率为0.42％±0.14％,抗B-FITC百分率为98.36％±0.55％。阴性细胞的x±s=0.43％±0.13％,阳性界值>0.85％(>x±3s)。11例ABO亚型FCM测定结果与血清学方法确认的结果完全一致。结论 流式细胞术鉴定ABO亚型的方法,较之常规的血清学方法,具有简便、快速、结果客观、重复性好之优点。