二剂量浊度法测定红霉素软膏效价的方法验证

目的探讨测定红霉素软膏效价的方法。方法采用二剂量浊度法,以金黄色葡萄球菌为实验菌,测定不同浓度下其吸收光度、回收率及可信限率以验证此法的可行性。结果抗生素浓度在0.40～0.97μg/ml的范围内成良好的线性关系;二剂量法测定红霉素软膏效价的平均回收率为99.7%（RSD=1.7%,n=9）;比浊法与管碟法所测得的效价结果基本一致,但此浊法的可信限率明显低于管碟法。结论本方法灵敏、快速,可作为测定红霉素软膏效价的方法。     

微生物比浊法与管碟法测定硫酸庆大霉素效价的评价

在国际上,抗生素效价测定以管碟法和比浊法并行,但《中国药典》只收载管碟法。实际上,比浊法在国内有相当的应用前景,它不仅耗时短,灵敏度高,操作简单,且人为影响因素少,对中间产品的检验更具有重要意义。在９０年代初期,国内有人用比浊法测定了四环素等［１］部分抗生素药品,取得了良好效果。本文对比浊法和管碟法测定硫酸庆大霉素效价进行了评价,取得了较好效果,现报告如下。１材料与仪器１－１菌株：金黄色葡萄球菌（ＣＭＣＣ（Ｂ）２６００３）、庆大霉素标准品（批号３２６９１１２,效价６３１ＩＵ）,均由中国药品生物制…     

浊度法测定氯霉素注射液的效价

目的建立浊度法测定氯霉素注射液的效价。方法以金黄色葡萄球菌为实验菌,加菌量0.6%,37℃培养3～4h测定。结果抗生素线性浓度范围为5.0～15.3U/mL,r=0.9980,平均回收率为99.2%(n=9),RSD为1.8%。结论本方法具有简便,快速,精确的特点,测定氯霉素注射液效价优于管碟法。     

微生物比浊法测定硫酸链霉素的效价

目的建立测定硫酸链霉素效价的方法。方法采用比浊法,并与管碟法比较。结果比浊法线性范围为0.5-8.0U.ml-1,线性方程：A=0.3908-0.3970 logC（r=0.998 9）,平均回收率为97.11%（n=4）;RSD=1.43%（n=15）。结论比浊法与管碟法的测定结果无显著性差异,可以作为硫酸链霉素效价测定方法之一,且更快捷、方便。     

比浊法测定阿奇霉素效价的研究

目的:建立测定阿奇霉素效价的方法。方法:采用比浊法测定阿奇霉素的效价,并与管碟法比较。结果:阿奇霉素检测浓度的线性范围为0.4～2.0I U.mL-1(r=0.999 1) ;回收率为99.70%～100.02%(RSD为0.22%～0.46%) ;比浊法与管碟法的测定结果无显著性差异。结论:本方法操作更快捷、方便。     

微生物比浊法与管碟法测定磷霉素钠效价的评价

目的验证比浊法测定磷霉素钠效价方法的可行性。方法应用比浊法测定磷霉素钠含量,并对微生物比浊法、管碟法测定磷霉素钠效价的结果进行评价。结果比浊法、管碟法效价测定结果一致。结论比浊法测定磷霉素钠效价快速、可行,对中间产品的检验更具有重要意义。     

微生物比浊法测定麦迪霉素胶囊的效价

目的:建立麦迪霉素胶囊效价的微生物比浊法.方法:分别采用微生物比浊法和管碟法对麦迪霉素胶囊的含量进行测定和比较研究.结果:麦迪霉素胶囊效价测定的线性范围为1.0～3.3 U/ml;r=0.999 5,平均回收率为98.76%,RSD=1.52%(n=9). 结论:微生物比浊法具有简便、精确、快速的特点,可以应用于该产品的质量控制.     

比浊法测定硫酸抗敌素效价

目的:建立比浊法测定硫酸抗敌素效价的方法。方法:确定比浊法测定硫酸抗敌素的线性范围,在线性范围内选择高、低剂量对硫酸抗敌素进行效价测定,并与管碟法效价测定结果进行比较。结果与结论:比浊法与管碟法测定结果无明显差异,比浊法测定硫酸抗敌素效价具有精确、便捷等特点,可用于产品质量控制。     

麦白霉素组分对其效价测定的影响

目的 对微生物管碟法与比浊法测定麦白霉素效价与组分的关系加以探讨研究,说明比浊法测定效价较管碟法测定效价的高灵敏度与高选择性.方法 比浊法以金黄色葡萄球菌为实验菌,加菌量约0.3%(V/V),(37±0.5)℃培养3.5-4.5h后测定吸光值.管碟法按照中国药典2005年版二部.HPLC法:色谱柱为phenomenex Gemini C18(4.6mm×250m);流动相为0.2mol/L甲酸铵溶液(pH7.6)-乙腈(60:40);流速为1.0mL/min;检测波长为232nm;柱温为30℃:进样量为10μL.结果 比浊法更好地反映了麦白霉素组分的变化,管碟法对组分的变化基本无反应.结论 比浊法较管碟法对组分变化的反应灵敏度高、选择性好,更好地反应了样品的实际质量.     

微生物比浊法测定妥布霉素、硫酸妥布霉素注射液及妥布霉素滴眼液的效价

目的：建立妥布霉素、硫酸妥布霉素注射液及妥布霉素滴眼液效价的微生物比浊法。方法：分别采用微生物比浊法和管碟法对妥布霉素、硫酸妥布霉素注射液及妥布霉素滴眼液的含量进行测定和比较研究。结果：妥布霉素效价测定的线性范围为0.4~1.0 U/ml;R2=0.991 3,硫酸妥布霉素注射液平均回收率为100.2%,RSD为2.6%（n=9）;妥布霉素滴眼液平均回收率为99.6%,RSD为1.5%（n=9）。结论：微生物比浊法具有简便、精确、快速的特点,可应用于产品的控制。     

浊度法测定土霉素原料药及其片剂的效价

目的:建立测定土霉素原料药及其片剂效价的浊度法。方法:采用浊度法,试验菌为金黄色葡萄球菌,加菌量为1.0%～1.5%(V/V),培养温度为37℃,培养时间为4h左右;同时与管碟法比较效价测定结果。结果:土霉素检测浓度的线性范围为0.05～0.4IU·mL-1,原料药平均回收率为99.59%(RSD=2.0%),片剂平均回收率为99.51%(RSD=1.91%);与管碟法比较含量无显著性差异。结论:本方法灵敏、快速、影响因素较少,可用于测定土霉素原料药及其片剂的效价。     

Determination of lysozyme activity by a fluorescence technique in comparison with the classical turbidity assay

The aim of this comparable study was to evaluate two different methods for the assay of lysozyme activity. Lysozyme activity was assayed by turbidimetric and fluorescence-based methods with hen egg white lysozyme as standard. The standard activity of each assay was calibrated in units of activity per mg under the experimental conditions (37 degrees C) so that direct comparison between these two assays could be made. The turbidimetric assay was performed using a 0.36 mg/ml Micrococcus lysodeikticus suspension and a microtiter plate reader capable of analyzing enzyme kinetics at 450 nm, and the linearity, in the range of 2.3-23.8 units/ml, presented a correlation coefficient (R2) as high as 0.9967. The fluorescence-based assay was performed with EnzChek kit using a suspension of Micrococcus lysodeikticus labeled with fluorescein and a fluorescence microplate reader. The linearity in the range of 0.47-5.28 units/ml, presented a correlation coefficient (R2) as high as 0.9881. Thus, the turbidimetric assay provides a simple rapid accurate and specific method for the determination of lysozyme activity but with relatively low sensitivity in comparison with the fluorescence-based method which was demonstrated to be a high sensitivity assay, and hence a reliable applicable technique to determine lysozyme activity at low levels e.g. in cell culture systems.     

两种方法测定硫酸庆大霉素颗粒剂生物效价的比较

目的用两种方法测定硫酸庆大霉素颗粒剂的生物效价,并对结果进行分析。方法采用管碟法,用两种培养基测定效价;采用浊度法,以一剂量法测定线性、二剂量法测定效价。结果管碟法测得的效价分别为127.2%和104.0%;浊度法测得的抗生素线性范围为0.16～0.39μg/mL,二剂量法测得的效价为97.2%。结论采用浊度法测定效价,影响因素较少,结果较准确。     

高效液相色谱法同时测定复方氯霉素滴耳液中2组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方氯霉素滴耳液中氯霉素和呋喃西林含量的方法。方法:色谱柱为TianheKromasil C18,流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1·0ml/min,内标为地塞米松,检测波长为278nm,柱温为25℃,进样量为20μl。结果:氯霉素、呋喃西林检测浓度分别在31·75~127、26·25~105μg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好,平均加样回收率分别为100·4%(RSD=0·89%)、100·7%(RSD=1·20%)。结论:本方法操作简便,结果准确、可靠,可用于本品质量控制。     

浊度法测定琥乙红霉素片的效价

目的建立浊度法测定琥乙红霉素片效价的方法。方法用标准曲线法,以金黄色葡萄球菌为实验菌,加菌量0．3％（V／V）,37℃培养3～4h测定。结果抗生素浓度在0．40～0．97μg／ml的范围内成良好的线性关系,标准曲线法测定琥乙红霉素片效价的平均回收率为99．9％,RSD=1．4％（／Z=9）。结论浊度法灵敏、快速,可作为测定琥乙红霉素片效价的方法。     

HPLC法测定复方氯霉素洗剂和氯柳酊中氯霉素的含量

目的:建立测定复方氯霉素洗剂和氯柳酊中氯霉素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex C18,流动相为0.01 mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液-甲醇(70∶30,V/V),检测波长为277 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃,进样量为10μl。结果:氯霉素检测质量浓度在51.27²05.08μg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.1%;平均回收率为100.36%,RSD=0.78%(n=9)。结论:该方法操作简便、结果准确、专属性强、重复性好,可用于复方氯霉素洗剂和氯柳酊中氯霉素的含量测定。     

龙心素胶囊质量标准提高研究

目的研究提高龙心素胶囊的质量标准。方法用蚓激酶活性测定替代原标准第1项化学显色鉴别。引入蚓激酶标准品,采用生物统计的量反应平行线法统计计算效价,并对效价测定的琼脂糖纤维蛋白平板法进行了方法学研究。结果新的鉴别方法能反应蚓激酶的活性特征。效价测定的线性范围为8 250～33 000 U/mL(r=0.998 6),精密度RSD为4.71%;重复性RSD为6.54%;平均回收率(n=9)94.63%,RSD为7.69%;不同的溶剂对效价测定影响较小,阴性对照无干扰;供试品溶液在4℃下72 h内稳定。结论提高后的质量标准专属性强,准确性高,可控制测定方法的误差,能更有效地控制龙心素胶囊的质量。     

血凝酶效价测定新方法的方法学研究

目的：本研究提供了一种新的血凝酶效价测定的方法。方法:采用凝血质控血浆为底物,以凝血分析仪进行测定,利用血凝酶可以直接水解血浆中纤维蛋白原为纤维蛋白使血浆凝固,并且在一定血凝酶浓度范围内,血浆的凝固时间与血凝酶效价成反比的原理,测得血凝酶效价。结果:本方法对血凝酶的精密度的相对标准偏差为2.3%,准确度的相对标准偏差在4.1%～4.8%之间,定量线性范围为0.4U.mL-1～2.5 U.mL-1,并具有良好的专属性和耐用性,通过市售3个规格9批次注射用矛头蝮蛇血凝酶效价测定,能够较好的控制产品的效价。结论:本研究避免了检验人对凝固终点判定标准的不同和人-枸缘酸血浆存在的差异,所导致产品之间效价存在的差异,实现血凝酶高效、准确的测定。     

庆大霉素组分差异对效价测定可靠性测验的影响

目的 对庆大霉素组分差异与效价测定可靠性测验的关系进行探究,以期得到导致可靠性测验不符合规定的组分差异限值。方法 按照《中国药典》2015版二部庆大霉素品种下庆大霉素C组分检查项的液相色谱-蒸发光散射检查法进行组分含量测定,按照《中国药典》2015版四部微生物检定法进行管碟法与浊度法的测定。结果 庆大霉素供试品与标准品C2+C2a相对百分含量差异超过4%时,即会导致三剂量法可靠性测验不符合规定。结论 应关注多组分抗生素组分差异对效价测定准确性的影响,并在相应质量标准中对允许的组分含量范围进行进一步细化。