两种不同初筛酶联免疫吸附试验试剂联合检测以替代艾滋病病毒抗体蛋白印迹试验确认检测的对比分析

目的　为评价两种不同初筛酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂联合检测艾滋病病毒 (HIV)抗体的可靠性 ,以替代艾滋病病毒 (HIV)蛋白印迹 (Westernblotting ,WB)确认法。 方法　79份初检为HIV抗体阳性的吸毒人员血清 ,重新统一用两种抗体初筛ELISA试剂 (Vironostika○RHIVUni FormⅡ plus 0和UBIHIV 1 / 2EIA)进行复测 ,之后随机选择前 51份样品进一步做WB确认 ,并做对比分析。 结果　51份血清中 ,有 49份样品 2次初筛复测时至少有 1次复测的结果显示为S/CO≥ 6 ,它们的WB确认结果均为HIV抗体阳性 ;其余的 2份样品 2次初筛复测时 ,其S/CO均 <6 ,但其中 1份 (样品“0 5”)的WB结果为HIV抗体阴性 ,1份 (样品“584”)为HIV抗体阳性。确认为HIV抗体阴性的样品“0 5” ,在整个初筛的 3次检测中曾 2次出现过S/CO >1 ;确认为HIV抗体阳性的样品“584” ,虽然 3次初筛检测中S/CO值均 >1 ,但因本试验中 2次复测得到的S/CO都 <6 ,因而其确认结果亦显示出较少抗原带 ,即只有p2 4和Gp1 60。 结论　两种不同原理的ELISA试剂 (最好为进口试剂 )联合检测HIV抗体可替代WB确认法 ,以监测具有一定HIV流行率的风险人群 (如哨点监测人群 )的HIV/艾滋病疫情。报告为HIV抗体阳性的临界判断指标采用 2次初筛S/CO≥ 6应是可靠的 ;初筛中     

HIV抗体ELISA阳性标本蛋白印迹确证试验的研究

用获ＦＤＡ准许的美国ＣａｍｂｒｉｄｇｅＢｉｏｔｅｃｈ公司ＨＩＶ－１蛋白印迹剂盒（ＷＢ）对ＨＩＶ－１／２抗体诊断试剂盒（ＥＬＩＳＡ）初筛阳性的６２份血清标本做确证试验。一次性确证ＨＩＶ抗体阳性者８名；阴性者１２名；不确定者４２名，对８名ＨＩＶ抗体不确定者做追访采样监测，其中１人１２天后ＷＢ血清ＨＩＶ抗体由不确定性转为阳性，另７人在６～１５个月经２～３次采样检测，ＷＢ区带反应无变化或略有变化，本研究证     

酶联免疫吸附试验检测猪血清的乙型脑炎抗体的评价

本文报告用酶联免疫吸附试验捕获法和间接法分别检测猪血清乙型脑炎IgM和IgG抗体。酶标法测得的IgM和IgG滴度与血凝抑制试验滴度显著相关。但前者可测出70％的IgG型抗体和63.3％的IgM型抗体,而后者仅56.7％阳性。在乙脑流行季节,两种类型的乙脑抗体出现几乎同样快。IgG可持续终身。IgM仅在短期内检测到,当表示猪乙脑新感染。     

HIV抗体筛查试剂联合检测替代免疫印迹法的对比分析

目的探讨用两种不同厂家或原理的HIV抗体初筛试剂联合检测,以替代免疫印迹法(WB),用于检测某些高危人群或特殊人群。方法用包括快速检测和酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂在内的9种HIV抗体筛查试剂,对200份样本进行联合检测,对任意一种试剂检测阳性的样本进行WB检测。结果ELISA初筛有阳性反应(S/CO值>1)的样本,WB确认阳性率为81.93%。初筛阳性且有1种ELISA试剂S/CO值>6的样本,WB确认阳性率为100%。两种快速试剂检测均为阳性反应的,WB确认阳性率为100%。结论可以用两次ELISA、两种快速试剂或一种快速试剂加一种ELISA试剂联合检测替代WB。     

快速酶联免疫吸附试验检测TORCH-IgM抗体的研究

目的建立快速检测TORCH-IgM抗体的方法。方法利用聚乙二醇（PEG）能加速抗原、抗体反应的特点,在常规间接ELISA法检测TORCH—IgM抗体基础上,在样本稀释液、酶标记物稀释液中各加入3％PEG,以缩短反应时间。结果温育时间缩短到15min（37℃）的快速ELISA法对检测人TORCH—IgM抗体强阳性、弱阳性、阴性标本具有稳定性好,精密性、特异性强的特点;稀释液中不加PEG的常规15min法,采用37℃、15min试验条件,可能会造成弱阳性标本漏检情况。结论快速ELISA法的建立为TORCH病原体感染的快速检测和流行病学调查提供了新的手段。     

HIV抗体ELISA阳性标本蛋白印迹确证试验的研究

用获ＦＤＡ准许的美国ＣａｍｂｒｉｄｇｅＢｉｏｔｅｃｈ公司ＨＩＶ－１蛋白印迹试剂盒（ＷＢ）对ＨＩＶ－１／２抗体诊断试剂盒（ＥＬＩＳＡ）初筛阳性的６２份血清标本做确证试验。一次性确证ＨＩＶ抗体阳性者８名；阴性者１２名；不确定者４２名。对８名ＨＩＶ抗体不确定者做追访采样监测，其中１人１２天后ＷＢ血清ＨＩＶ抗体由不确定性转为阳性，另７人在６～１５个月经２～３次采样检测，ＷＢ区带反应无变化或略有变化。本研究证实ＷＢ不确定者，若有ＨＩＶｅｎｖ（ｇｐ１６０、ｇｐ１２０、ｇｐ４１）区带反应，ＨＩＶ血清抗体可能转阳；若仅ＨＩＶｐｏｌ（ｐ３１、ｐ５１、ｐ６６）和／或ｇａｇ（Ｐ１７、Ｐ２４、Ｐ５５）区带反应，很大可能是非特异性反应。虽ＥＬＩＳＡ阳性，而ＷＢ不确定者血清主要呈ｐ２４抗体反应（４２．９％，１８／４２）与ｐ２４、ｐ１７抗体反应（２８．６％，１２／４２）。     

《日本血吸虫抗体检测标准酶联免疫吸附试验法》解读

遵循《卫生标准管理办法》相关规定,按照《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》（GB/T 1.1—2020）体例,编制《日本血吸虫抗体检测标准酶联免疫吸附试验法》。标准全文由六章组成,包括范围、规范性引用文件、术语和定义、仪器设备、试剂或材料、检测步骤。另附有2个资料性附录（主要试剂材料制备方法,检测步骤示意图和注意事项）。该标准已由国家卫生健康委员会发布通告（国卫通[2021] 11号）,定于2022年5月1日起实施。该标准的实施将进一步推进我国血吸虫病检测技术规范化进程,为全国实现消除血吸虫病目标提供重要的技术支撑。     

应用酶联免疫吸附试验检测猪囊虫病特异抗体的研究

用猪囊虫粗抗原、B 抗原、等电聚焦技术分离的抗原组份和特异单克隆抗体亲和层析抗原,以ELSA间接法检测猪囊虫病血清抗体,结果特异性均不理想。应用单克隆抗体分析查明,在某些囊虫抗原分子上既有特异性抗原位点,又有非特异性位点。用特异单克隆抗体以ELISA抑制法检测猪囊虫病血清抗体,结果完全消除了假阳性反应,病猪血清检出率为86.41％(89/103)。     

HIV1+2抗体筛查阳性与免疫印迹试验结果分析

目的 对比HIV1+2抗体筛查试验阳性与免疫印迹蛋白试验（WB）结果,探讨筛查与确认实验结果之间的关系,为HIV抗体诊断提供科学依据。方法 按照《全国艾滋病检测技术规范》2020修订版对河南省漯河市艾滋病筛查实验室送检疑似样本复核,采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和快速胶体金试验（RT）两种方法检测,经复检后任何1种筛查试验结果呈现HIV阳性反应需进行WB试验,2种试剂复核结果与WB结果比较研究。结果 复检1 564份疑似样本经WB确认,1 420份呈现HIV型抗体阳性（90.79%）,74份阴性（4.73%）、70份不确定（4.48%）。2种筛查试验与WB结果的阳性符合率为90.93%和91.94%。结论 复核实验中酶联免疫试验吸光度值/临界值（S/CO）值越高,RT检测带越深,WB试验结果的阳性率也越高,HIV抗体阳性确认结果以WB为准。ELISA、RT存在一定的假阳性,而WB试验结果为HIV抗体阴性或不确定。     

酶联免疫吸附试验不稳定因素的分析

酶联免疫吸附试验 (Enzyme linked immunosorbent assay,简称 EL ISA)是本世纪 70年代发展起来的一种检测技术 ,具有敏感、特异、操作简便、重复性好等优点 ,已在疾病诊断、科研等医学领域中得到广泛应用。由于该技术涉及因素较多 ,在使用中常常遇到试验不够稳定的问题 ,笔者对不稳定因素进行了分析并将解决这些问题的一些经验和体会叙述如下。1　产品质量的影响1.1　酶标板 :目前广泛应用的固相载体有两种 ,即聚苯乙烯和聚氯乙烯微量反应板 ,简称酶标板。聚苯乙烯板质地坚硬 ,易于操作 ,但吸附能力较聚氯乙烯板差 ;聚氯乙烯吸附能力强 ,…     

西尼罗病毒抗体酶联免疫吸附试验检测方法的评价

目的系统地评价血清西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为在人群和宿主动物中进行WNV感染血清流行病学调查提供技术支持。方法利用构建的包膜蛋白重组质粒(pQE-30)表达纯化西尼罗病毒包膜蛋白,以此为抗原进行ELISA检测。在对抗原包被量、酶标抗体浓度、血清稀释度进行优化的基础上,对本方法的灵敏度和特异度进行评价。结果确定最适抗原包被量为0.034μg,酶标抗体工作浓度和血清稀释度分别为1∶4 800和1∶80;批内变异和批间变异分别为6.7%和22.6%;对小鼠WNV抗体阳性血清53份、JEV抗体阳性血清48份和阴性对照血清94份进行检测,灵敏度为86.8%,特异度分别为93.8%和92.6%。结论本研究建立的ELISA方法灵敏、检测抗体特异,结果可重复,是一种有价值的血清学调查方法。     

HIV抗体检测免疫印迹法的替代策略及其应用进展

目前,中国艾滋病（AIDS）的流行仍然处于全国低流行和局部地区及特定人群高流行并存的态势.2003年底估计现存感染者人数为84万,全人群感染率为0.07%.截至2004年9月底,全国累计报告的艾滋病病毒（HIV）感染者为89 067例.其中对有偿献血员的大量筛查工作发现,很多既往感染者,现行的HIV抗体筛查和确认实验[酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫印迹试验（WB）]策略使检测的可及性受到一定的影响,成为艾滋病自愿咨询检测的不利因素,使艾滋病的预防和控制工作受到影响.     

聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验技术在诊断肺结核病的临床应用

1989年聚合酶链反应(PCR)用于结核分支杆菌以来，该技术已广泛应用于结核病的诊断，如何提高PCR的敏感性和特异性成为检验人员和临床医师共同关注的问题。我们通过采用聚合酶链反应-酶联免疫吸附试验(PCR—ELISA)技术检测肺结核病患者的痰标本，并将其涂片和培养、BBL-MGIT快速培养、PCR-凝胶电泳法进行对照比较，取得了较为满意的结果。     

103例HIV检测第四代酶联免疫试验阳性而蛋白印迹试验阴性样本的分析

目的探讨蛋白印迹试验(WB)对第四代酶联免疫(ELISA)筛查试验艾滋病病毒(HIV)阳性样本确证检测的漏检问题及可能的解决办法。方法收集103例第四代ELISA筛查试验阳性、WB确证试验阴性的样本,进行HIV-1核酸套式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测,并对HIV-1核酸阳性样本进行抗体追踪复检。结果 103例样本中,检出97例阴性,占94.17%;6例HIV-1阳性,占5.83%。97例阴性样本主要来源于没有或甚少高危行为的各类普通人群,且ELISA S/CO值多处于低值水平;6例阳性者均曾于近期有过相关接触史,其中ELISA S/CO值<6的2例,>6的4例,CD4+细胞数均低于正常值。结论实验室应采取措施对第四代ELISA阳性-WB阴性的艾滋病检测样本进行进一步诊断,以确定其真实的HIV-1感染状况,防止漏检。     

酶联免疫吸附试验检测梅毒患者血清中抗苍白螺旋体IgM抗体

目的评价抗苍白螺旋体IgM抗体检测对梅毒的临床意义.方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)对72例梅毒患者检测了特异性IgM抗体,并与快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)的检测结果进行比较分析.结果血清抗苍白螺旋体IgM抗体在一期梅毒的阳性率为73.3%(11/15),在二期梅毒的阳性率为88.9%(16/18),二者差异无显著的统计学意义(χ2＝1.6363,P＞0.10).在潜伏梅毒,IgM抗体阳性率为26.1%(6/23),非常显著地低于早期显性梅毒(χ2＝17.6189,P＜0.005).在一期、二期和潜伏梅毒,RPR和TPPA的阳性率均为100%.入组前2～24个月已经正规抗梅治疗的梅毒16例,其中IgM抗体阳性2例.结论 ELISA法检测特异性IgM抗体诊断一期梅毒并不优于RPR和TPPA.IgM抗体在潜伏梅毒敏感性低,其诊断应依靠RPR和TPPA.目前不推荐单独检测抗梅毒IgM抗体来监测病情和判断疗效.抗苍白螺旋体IgM抗体的临床意义有待更深入的研究.     

酶联免疫吸附试验和聚合酶链反应检测生殖器标本中的单纯疱疹病毒

目的 评价酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断生殖器疱疹的临床应用价值。方法 对120例具有生殖器皮肤、粘膜损害的病人，采用ELISA和分型聚合酶链反应(PCR)检测其生殖器标本中的单纯疱疹病毒(HSV)，两种试验结果不符合者采用第二种PCR检测。结果 120例受检者中，ELISA检出49例HSV阳性，分型PCR检出50例阳性。单纯HSV-1感染者占生殖器疱疹的10.0％，单纯HSV-2感染者占80.0％，HSV-1和HSV-2混合感染者占10.0％。在120例标本中，107例两种试验结果是符合的，13例结果不符合。与“扩大金标准”比较，ELISA的敏感性、特异性、阳性预期值分别为92.0％、95.7％、93.8％，分型PCR的敏感性、特异性、阳性预期值分别为94.0％、95.7％、94.0％。结论 ELISA法检测HSV感染，其敏感性和特异性高，方便、快速，尤其适合大批量样本的检测，值得在临床应用。     

应用凝胶扩散—酶联免疫吸附试验检测华支睾吸虫病抗体

本文报告应用DIG-ELISA检测64份华支睾吸虫病患者血清抗体,结果阳性反应59份,阳性率92.2％。以S-ELISA作为比较,两法检测结果无显著性差异。实验表明,DIG-ELISA不仅具有S-ELISA敏感、特异的优点,而且方法简便,更适合于现场和基层单位应用。     

HIV抗体线性免疫印迹方法简介

酶联免疫吸附试验（ELISA）广泛应用于血液的HIV抗体筛查，然而筛查试验中经常会出现假阳性。因此，必须用可靠的方法对筛查阳性的样品进行确认。Innogenetics公司研发的INNO-LIAHIV Ⅰ／Ⅱ Score试剂利用条带免疫测定的方法，包被从HIV-1和HIV-2中提取的重组蛋白和合成肽链（包括HIV-10亚型），以确认人血清或血浆样本中是否存在HIV-1（包括O亚型）和HIV-2抗体。