鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药及其携带基因的探讨

目的探讨鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药情况和耐药表型及其携带基因的关系。方法收集48株鲍曼不动杆菌,用K-B法和琼脂稀释法检测其对阿米卡星的敏感性,PCR法扩增aac(6′)Ⅰ基因以及3种16SrRNA甲基化酶基因(armA、rmtB及rmtC基因)。结果 72.9%(35/48)菌株对阿米卡星表现为双圈耐药,其中100.0%菌株检出armA基因,未检出rmtB、rmtC基因,77.1%(27/35)菌株检出aac(6′)Ⅰ基因;10.4%(5/48)菌株对阿米卡星普通耐药,均未检出16SrRNA甲基化酶基因,其中80.0%(4/5)菌株检出aac(6′)Ⅰ基因;16.7%(8/48)菌株对阿米卡星敏感,未检出相关耐药基因。结论鲍曼不动杆菌对阿米卡星的耐药情况非常严重;双圈耐药现象与armA基因诱导型表达有关。     

多重耐药性鲍曼不动杆菌耐药基因及菌株聚类分析

目的了解临床分离到的鲍曼不动杆菌耐药相关基因存在状况和菌株间的亲缘性。方法药敏试验用PhoenixTM100系统检测。用PCR扩增β-内酰胺酶基因、氨基糖甙类药物修饰酶基因、DNA拓扑异构酶基因等,并用DNA测序仪证实。结果247株鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美洛培南耐药率最低,仅为3.2%、4.1%。20株多重耐药性鲍曼不动杆菌中,17株具TEM型β-内酰胺酶基因,氨基糖甙类药物修饰酶基因aac（3）-Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（3）-Ⅲ、aac（3）-Ⅳ、aac（6′）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ基因检出率分别为80%、15%、30%、70%、15%、55%、80%。20株对环丙沙星耐药的鲍曼不动杆菌gyrA密码子均由TCA→TTA,氨基酸由Ser83→Leu,而85%菌株（17/20）的ParC氨基酸序列发生Ser80→Leu替代。聚类分析显示存在2株克隆株,其耐药表型基本一致。结论本院鲍曼不动杆菌携带多种β-内酰胺酶、氨基糖甙类修饰酶等耐药基因,喹诺酮耐药决定区基因突变是细菌耐受喹诺酮类药物重要原因。聚类分析表明,本院的鲍曼不动杆菌存在克隆传播。     

多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类修饰酶基因及qacEΔ1基因的研究

目的 调查我院院内分离的多重耐药鲍曼不动杆菌中,氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因及季胺类化合物耐药基因的存在情况,为临床合理使用抗菌药物和控制院内感染的发生提供科学依据.方法 用WalkAway 96 PLUS NC31复合板鉴定菌种,用微量稀释法和纸片扩散法测定菌株的药敏情况.PCR法检测aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ、aph(3′)-Ⅵ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ和qacEΔ1基因在46株院内分离的多重耐药鲍曼不动杆菌中的存在情况.结果 46株多重耐药鲍曼不动杆菌中,41株(89.1%)携带ant(3″)-Ⅰ、33株(71.7%)携带aac(3)-Ⅰ、2株(4.3%)携带aac(3)-Ⅱ、1株(2.2%)携带aac(6′)-Ⅱ、1株(2.2%)携带aph(3′)-Ⅵ,AMEs基因携带率为89.1%(41/46).未检出aac(3)-Ⅲ、aac(3)-Ⅳ、aac(6′)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ基因.43株(93.5%)携带qacEΔ1耐药基因.结论 我院院内分离的多重耐药鲍曼不动杆菌AMEs基因和qacEΔ1基因携带率很高,临床上应加强AMEs基因的检测,注意消毒剂的选择.     

神经外科病房鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的为了解本院神经外科病房鲍曼不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药性及耐药基因流行特点,现对鲍曼不动杆菌表型和β-内酰胺酶基因类型进行检测分析。方法从本院患者的各类临床标本中分离的120株鲍曼不动杆菌进行药敏试验,结果按NCCLS2006年的标准作出判定。结果用K-B法测定的120株鲍曼不动杆菌对5种抗生素的耐药性。其中头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为7.1%,头孢曲松的耐药率为64.5%,头孢吡肟和头孢他啶的耐药率都为64.2%,头孢呋肟的耐药率为80.0%,头孢唑啉的耐药率为97.5%结论鲍曼不动杆菌是医院获得性感染的重要细菌之一,因其分离率高、耐药广泛、病死率高,对危重患者威胁很大。     

鲍曼不动杆菌的分布及耐药性分析

目的；分析我院鲍曼不动杆菌的临床分布和耐药性。方法：对2004～2005年住院患者的鲍曼不动杆菌的首个分离株的临床分布进行分析并对14种抗生素的耐药性进行监测。结果：共有483株菌入选。以急诊病房、内外科重症监护病房多见。亚胺培南对鲍曼不动杆菌的不敏感率只有3．3％，其余13种抗生素的不敏感率都在50％以上。结论：我院鲍曼不动杆菌以急诊病房、内外科重症监护病房多见，亚胺培南对鲍曼不动杆菌有着良好的体外活性。     

36株多重耐药鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类药物耐药基因的流行病学研究

目的了解多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类耐药基因的存在情况。方法收集2012年8—11月江苏大学附属医院和镇江市第一人民医院住院患者的临床标本中分离到的多重耐药鲍曼不动杆菌菌株36株。应用KB纸片扩散法检测多重耐药鲍曼不动杆菌对抗菌药物的敏感性、应用PCR检测细菌对氨基糖苷类药物的耐药基因。结果36株多重耐药鲍曼不动杆菌对头孢哌酮一舒巴坦有较高的敏感率（33．3％）,对其他抗菌药物的敏感率均较低（20．0％）。36株多重耐药鲍曼不动杆菌中氨基糖苷类耐药基因aac（3）-I、aac（6’）Ib、aph（3’）-I和16SrRNA甲基化酶基因armA的阳性率分别为72．2％（26株）、72．2％（26株）、80．6％（29株）和80．6％（29株）。结论本组多重耐药鲍曼不动杆菌多耐药情况比较严重,其对氨基糖苷类药物耐药与氨基糖苷类耐药基因的存在密切相关。     

鲍曼不动杆菌耐药机制的研究进展

鲍曼不动杆菌引起的医院和社区感染日益增多且耐药性严重,给临床治疗带来严重挑战。它有多重耐药机制,现已出现泛耐药菌株。其在世界各地的蔓延已对全球构成威胁。本文对近年来国内、外有关不动杆菌的耐药机制相关资料进行归纳,以期根据耐药机制,采取相应的措施,控制医院感染,抑制不动杆菌感染的蔓延。     

多重耐药鲍曼不动杆菌耐药机制研究进展

鲍曼不动杆菌是氧化酶阴性、非发酵的革兰阴性不动杆菌,是一种重要的条件致病菌,广泛存在于自然界及人体皮肤、胃肠道、上呼吸道等,由于其在自然界的广泛存在性及对环境有较强抵抗力,因而也是院内感染常见病原菌,曾多次引起地区暴发流行。欧洲、北美、巴西、中国、日本、韩国以及南太平洋等地区均有多重耐药鲍曼不动杆菌感染的报道,且其感染常可     

多重耐药鲍曼不动杆菌的研究进展

鲍曼不动杆菌是引起医院内感染的重要病原菌。随着抗生素的广泛应用,鲍曼不动杆菌的耐药尤其是多重耐药问题日趋严重。现就目前临床感染患者多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药现状、耐药机制、基因分型方法及治疗等方面作一综述。     

多重耐药鲍曼不动杆菌氨基糖苷类耐药基因的研究

目的调查山东省潍坊市人民医院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌氨基糖苷类耐药基因的流行情况,为院内感染控制提供依据。方法采用VITEK2全自动微生物仪对2013年11月26日至12月12日山东省潍坊市人民医院临床分离的9株多重耐药鲍曼不动杆菌进行细菌鉴定和药敏试验,部分抗菌药物的敏感度检测采用纸片扩散法。聚合酶链反应检测氨基糖苷类耐药基因,对部分阳性基因进行测序。结果 9株多重耐药鲍曼不动杆菌中,2株aac(3)-Ⅰ基因阳性,3株ant(3″)-Ⅰ基因阳性,3株aac(6′)-Ⅰ基因阳性,9株armA基因阳性。所有菌株对氨基糖苷类抗菌药物阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素耐药。5株标本来源于重症监护病房,3株标本来源于神经外科病房。所有标本来源于痰液。结论该院这段时间分离的多重耐药鲍曼不动杆菌对阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素同时耐药与携带armA氨基糖苷类耐药基因有关。院感部门应重点监测重症监护病房和神经外科病房多重耐药鲍曼不动杆菌引起的院内感染。     

整合子在鲍曼不动杆菌耐药中的作用研究

目的调查本院鲍曼不动杆菌耐药谱并了解其整合子流行情况;检测鉴定整合子类型并分析其与耐药的相关性。方法收集本院2007年临床分离鲍曼不动杆菌85株,KB法测定其药敏结果。PCR法扩增整合子的整合酶基因,并进一步鉴定整合子种类。分析鲍曼不动杆菌整合子携带与其耐药之间的关系。PCR法扩增整合子开放阅读框,观测其多态性并挑选个别产物测序。结果 85株鲍曼不动杆菌除对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率低于10%,其他15种常用抗菌药物的耐药率均超过30%。67.1%(57/85)的鲍曼不动杆菌中检出整合子;进一步鉴定结果显示均为Ⅰ类整合子,未检出Ⅱ类和Ⅲ类整合子。携带整合子鲍曼不动杆菌株对14种抗菌药物耐药率高于不携带整合子鲍曼不动杆菌株耐药率。开放阅读框可变区扩增产物为0.3～2.5 KB不等条带,测序结果证实含有多药耐药基因编码。结论本院鲍曼不动杆菌耐药率高,以多药耐药菌株为主,携带Ⅰ类整合子率较高;携带整合子鲍曼不动杆菌对14种抗菌药的耐药率明显增高,整合子与鲍曼不动杆菌的多重耐药性具有密切相关性。     

261株鲍曼不动杆菌临床分布及耐药性分析

目的对本院2012年8月至2014年7月检出的261株鲍曼不动杆菌进行耐药性分析,为临床治疗鲍曼不动杆菌感染提供依据。方法按常规方法进行细菌培养,检测本院2012年8月至2014年7月间送检的各种临床标本(包括痰液、脓液、分泌物、尿液、血液和引流液等),应用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统对临床分离的病原菌进行鉴定和药敏试验,利用WHONT 5.6软件分析鲍曼不动杆菌的耐药性及其分布。结果共检出261株鲍曼不动杆菌,其中多重耐药菌141株(54.0%),83株多重耐药鲍曼不动杆菌分离自ICU和呼吸科。结论鲍曼不动杆菌多重耐药情况很严重,尤其是分离自ICU和呼吸科的标本,实验室应加强鲍曼不动杆菌耐药检测,临床医师应根据细菌的药物敏感性试验结果合理选用抗生素,同时应加强医院感染监测,做好隔离,防止医源性传播。     

多重耐药鲍曼不动杆菌对替加环素耐药状况分析

目的 了解多重耐药鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素及新药替加环素的耐药状况.方法 收集2008-2009年浙江省4所教学医院的602株临床分离鲍曼不动杆菌,采用琼脂稀释法检测其对13种临床常用抗生素的敏感性,以及对多黏菌素B和替加环素的敏感性.同时,采用PFGE技术对24株多重耐药鲍曼不动杆菌进行同源性分析,以确定菌株间的亲缘关系.结果 浙江省4家教学医院2008-2009年分离的鲍曼不动杆菌主要来自于呼吸道标本,2009年达到277株(86.0%),血液标本数量从2008年的15株(5.4%)下降到2009年的5株(1.5%),而其他标本无明显变化.鲍曼不动杆菌对临床常用的13种抗生素均有不同程度的耐药,耐药率35.0%～85.0%.与2008年相比,除左氧氟沙星和妥布霉素耐药率分别下降0.9%和9.0%以外,2009年其余抗生素耐药率均有不同程度地上升,头孢曲松和头孢吡肟耐药率增加了近10.0%,对碳青霉烯类抗生素亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到74.2%(239/602)和70.8%(228/602).鲍曼不动杆菌对替加环素显示了很高的耐药率,耐药率达到78.9%(475/602),而多黏菌素B耐药率仅为3.7%(22/602).PFGE分型显示2008-2009年24株鲍曼不动杆菌有6个克隆型,其中A型最常见,占50%.结论 鲍曼不动杆菌对替加环素的耐药加大了院内感染控制的难度,临床应加强控制,防止多重耐药菌的传播.

Abstract：

Objective To investigate the resistance of Acinetobacter baumannii to clinical common antibiotics and new drug tigecycline. Methods Six hundred and two Acinetobacter baumannii isolates were collected from 2008 to 2009 in four teaching hospitals in Zhejiang province. Agar dilution method was used to detect the resistance of 13 clinical commom antibiotics, polymyxin B and tigecycline. Homology analysis of 24 multi-drug resistant Acinetobacter baumannii strains was used to investigate the relationship of each strain with the method of pulsed field gel electrophoresis. Results From 2008 to 2009, the Acinetobacter baumannii isolates of four teaching hospitals in Zhejiang province were mainly isolated from respiratory specimens with the number of 277 (86.0%) strains in 2009, the number of blood samples decreased from 15 (5.4%) strains in 2008 to 5 ( 1.5% ) strains in 2009, and there were no obvious change in other specimens. Acinetobacter baumannii strains were resistant to 13 clinical common antibiotics at different degree, fluctuated from 35.0% to 85.0%. Compared with the resistance in 2008, levofloxacin and tobramyxin decreased 0. 9% and 9.0% in 2009, respectively. However, the resistance of other antibiotics increased at different degree, the resistance of ceftriaxone and cefepime increased about 10.0%, and the resistance of imipenem and meropenem increased to 74.2% (239/602) and 70.8% (228/602) in 2009,respectively. Acinetobacter baumannii showed high resistance to tigecycline with the percent of 78.9% (475/602), while it was only 3.7% (22/602) for polymyxin B. There were six cloning types among the 24 Acinetobacter baumannii isolates, and the most common type was type A with the percent of 50%.Conclusions The resistance of tigecycline makes the situation of nosocomial infectious more serious. It is necessary to control the transmission of multi-drug resistant Acinetobacter baumannii immediately.     

某院抗生素使用情况与耐药性的关系

目的了解1998-2006年该院抗生素使用和铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的耐药情况，以及它们之间的相关关系。方法采用世界卫生组织（WHO）推荐的限定日剂量（DDD）法计算各种抗生素的用药频度（DDDs）；用ViteK2系统对临床分离菌株进行鉴定，采用K-B纸片扩散法进行药敏试验，用2004版美国实验室标准化委员会（CLSI）标准对结果进行判定，用WHONET5．3软件对数据进行处理。抗生素使用与细菌耐药之间的天系用SPSS统计软件进行偏相关分析。结果铜绿假单胞菌对头孢他啶（CAZ）、亚胺培喃（IMP）而耐药率在20％左右，对其他抗生素的耐药率都超过了40％。鲍曼不动杆菌对IMP仍敏感，耐药率不到5％，对其他抗生素耐药率都超过了40％。抗生素的总DDDs2003年达到高峰；加酶抑制剂类在2003年后DDDs上升幅度很大。相关性分析，以下关系为正相关关系，并具有统计学意义：铜绿假单胞菌对IMP的耐药率与IMP的DDDs之间，以及对头孢哌酮／舒巴坦（SCF）的耐药率与SCF的DDDs之间。鲍曼不动杆菌对哌拉西林／他唑巴坦（TZP）的耐药率与TZP的DDDs、同时与加酶抑制剂类的DDDs之间；对CAZ的耐药率与CAZ的DDDs之间；对头孢吡肟FEP的耐药率与FEP的DDDs之间；以及对SCF的耐药率与加酶抑制剂类的DDDs之间。结论广谱抗生素特别是加酶抑制剂类抗生素的使用对铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌耐药水平影响较大，临床上使用应慎重。     

临床分离鲍曼不动杆菌耐药基因研究

目的研究临床分离鲍曼不动杆菌耐药性与耐药基因之间的关系。方法用K-B法检测17株鲍曼不动杆菌的耐药情况；用PCR方法检测各种耐药基因并加以分析。结果在17株研究的鲍曼不动杆菌中，有12株为多重耐药菌，且均携带blaTEM、ampC、aacA4和gyrA突变基因；在5株普通耐药株中，有4株携带blaTEM基因，2株携带gyrA基因但未表达耐药。结论鲍曼不动杆菌多重耐药性与同时携带blaTEM、ampC、aacA4基因和gyrA基因突变有非常密切的关系。     

鲍曼不动杆菌耐药性和氨基糖苷类修饰酶基因的研究

目的了解鲍曼不动杆菌(ABA)耐药性和氨基糖苷类修饰酶基因(AME)存在状况。方法用K-B法测定ABA对14种抗菌药物的敏感性,用PCR法检测6种AME和Ⅰ类整合酶基因(intⅠ1)。结果85株ABA的耐药率除头孢哌酮/舒巴坦(8.2%)和阿米卡星(18.8%)外,其余12种抗菌素均在50%以上(48.2%～81.2%),其中妥布霉素、奈替卡星和庆大霉素的耐药率分别达55.3%、48.2%和70.6%。耐药基因检测ant(3″)-Ⅰ阳性61株(71.8%)、aac(6')-Ⅰb阳性53株(62.3%)、aac(3)-Ⅰ阳性39株(45.9%),intⅠ1阳性66株(77.6%),其余基因均阴性。锚定PCR扩增结果表明ant(3″)-Ⅰ、aac(3)-Ⅰ型AME在Ⅰ类整合子上。结论绍兴地区临床分离的ABA多重耐药情况十分严重,对氨基糖苷类抗生素耐药主要由ant(3″)-Ⅰ、aac(6')-Ⅰb、aac(3)-Ⅰ基因介导,Ⅰ类整合子在耐药性传播中起着非常重要的作用。     

鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药机制研究

目的了解鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药性及耐药机制。方法琼脂稀释法对62株鲍曼不动杆菌进行药敏检测,对其中20株亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌进行耐药机制研究。酶三维试验检测ESBLs和AmpC酶,PCR扩增和测序分析检测碳青霉烯酶VIM、IMP、OXA-23和OXA-24,SDS-PAGE方法研究外膜蛋白表达情况,利血平协同抑制试验检测膜外排机制。结果62株鲍曼不动杆菌中,亚胺培南耐药25株,占41%;20株亚胺培南耐药菌中,ESBLs和AmpC酶阳性株分别为10株(50%)和20株(100%),PCR扩增VIM、IMP和OXA-24均阴性;OXA-23基因扩增显示19株(95%)阳性,PCR产物并经序列分析证实为OXA-23;与敏感株相比,部分菌株存在22、29、33kD的外膜蛋白缺失;利血平不能降低亚胺培南对鲍曼不动杆菌的MIC值。结论产OXA-23型β-内酰胺酶是本院鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药的重要原因,产AmpC酶合并外膜蛋白缺失与鲍曼不动杆菌对亚胺培南耐药有密切关系。     

鲍曼不动杆菌生物膜耐药机制及防治进展

目前,鲍曼不动杆菌的多重耐药性在世界范围内暴发流行并有愈演愈烈的趋势,尤其在重症监护病房及烧伤病房,泛耐药鲍曼不动杆菌被称为21世纪革兰阴性菌的"MRSA"、"超级细菌",近几年研究表明这与致病菌形成生物膜有关。本文对近几年鲍曼不动杆菌感染现状、生物膜形成、耐药机制及其防治等方面的研究现状进行综述。     

南京地区鲍曼不动杆菌中整合子流行现状及携带的耐药基因分析

目的研究南京地区鲍曼不动杆菌中整合子的流行现状、与耐药的相关性及携带的耐药基因。方法收集106株南京地区鲍曼不动杆菌,纸片扩散法测定其药敏情况;PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)筛查整合子并分类;PCR法扩增整合子可变区;联合RFLP和DNA测序技术分析整合子携带的耐药基因。结果52.8%(56/106)鲍曼不动杆菌检出整合子,PCR—RFLP结果显示均为Ⅰ类整合子;94.6%(53/56)整合子阳性菌株可变区扩增阳性,扩增片段大小为0.15～2.8kb;共检出7种不同的可变区,含有编码对氨基糖苷类抗生素(aadA1、aadA2、aadA5、aadB、aacA4)、磺胺类抗菌药(dfrⅫ、dfr17)、β内酰胺类抗生素(bla_(axa-10))和氯霉素(catB-like、catB8)耐药的基因及2个功能不清的开放阅读框(orfF、orfI);发现1例新型基因盒组合形式orfI—aadA1,GenBank基因号为DQ092497。结论Ⅰ类整合子广泛存在于南京地区鲍曼不动杆菌中;整合子与鲍曼不动杆菌的耐药和多重耐药有关;鲍曼不动杆菌整合子主要携带氨基糖苷类耐药基因。