HPLC法检测大鼠血浆中吡非尼酮的浓度及其药动学研究

目的:建立大鼠血浆吡非尼酮检测的高效液相色谱方法,研究吡非尼酮的药代动力学。方法:血浆经乙酸乙酯,采用ZORBAX SB-C18色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1%TFA(三氟乙酸),流速为1.0 mL·min-1;检测波长为318(0～8 min)、246nm(8～10 min)。6只雄性大鼠单剂量灌胃给予15 mg.kg-1吡非尼酮,分别在给药后多点尾静脉采血;用该方法检测血浆中吡非尼酮的浓度。用DAS(数据采集系统)计算药代动力学参数。结果:吡非尼酮浓度在0.025～4.00 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 9);定量下限为0.025 mg·L-1;低、中、高3个浓度的相对回收率分别为(100.40±4.66)%、(102.17±4.02)%和(101.12±2.89)%;日内RSD分别为4.6%,3.9%,2.9%,日间RSD分别为5.5%,4.8%,3.7%。大鼠吡非尼酮灌胃后,血浆吡非尼酮在0.39 h达到1.69 mg·L-1的峰值浓度,血浆半衰期为2.21 h。吡非尼酮在大鼠体内符合一级吸收的二室模型。结论:本方法准确可靠、简便快速,适用于大鼠血浆吡非尼酮浓度的测定及其药代动力学研究。     

HPLC-UV法测定大鼠体内S-腺苷蛋氨酸浓度及其药动学研究

目的：建立HPLC-UV法测定大鼠血浆中S-腺苷蛋氨酸（S-Adenosylmethionine,SAMe）浓度,并用此法研究静脉给药后的大鼠体内药代动力学特征。方法：色谱柱：大连依利特KromasilC18柱（4.6mm×200mm,5μm）,流动相：甲醇∶0.3%三氟乙酸溶液（含1%磷酸二氢钠盐）=2∶98,等浓度洗脱,紫外检测波长：260nm,流速：0.6mL/min,柱温：30℃。大鼠（n=6）经静脉给予140mg/kg SAMe并测定血浆药物浓度,采用DAS 2.0软件进行药动分析。结果：SAMe能完全分离,线性范围：10～2000μg/mL,回归方程为Y=30241 X＋256204,r=0.9991,日内精密度分别为2.6%,3.6%,3.9%;日间精密度分别为6.3%,4.9%,7.9%;回收率分别为107%,101%,98.3%。静脉给予140mg/kg SAMe药动学参数,血浆药物浓度-时间曲线下面积AUC（0-t）为（569.52±174.87）mg·L-1·h,半衰期（t1/2）为（2.03±0.96）h,清除率（CL）为（0.21±0.13）L·h-1·kg-1,表观分布容积（Vd）为（0.53±0.31）L/kg。结论：本实验方法专属性好,灵敏度高,可靠性强,可用于SAMe药动学分析。     

HPLC法检测大鼠血浆中芦丁浓度及其药物动力学

目的:建立高效液相色谱法检测大鼠血浆芦丁的方法,研究芦丁在大鼠体内的药动学.方法:以ZORBAX SB-C18为色谱柱,以乙腈-水-0.1%TFA为流动相,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为360 nm.血浆经高氯酸沉淀,高速离心后上清液直接进样检测.6只雄性SD大鼠单剂量静脉给予芦丁5 mg·kg-1后,分别在给药后多点尾静脉采血.用此方法测定血浆中芦丁的浓度;用DAS计算主要药代动力学参数.结果:大鼠血浆芦丁浓度在0.25～40.00 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 8);低、中、高三个浓度日内精密度RSD分别为3.36%、2.61%和1.30%,日间精密度RSD分别为4.02%、3.46%和2.09%.相对回收率分别为(102.17±3.28)%、(101.00±2.96)%和(100.46±1.32)%.单剂量给予芦丁后,芦丁在大鼠体内的药物动力学符合二室模型.结论:本方法简便快速、准确可靠,适用于大鼠血浆芦丁浓度的测定及其药物动力学研究.     

大鼠血浆中双嘧达莫的反相高效液相色谱法检测

目的 建立大鼠血浆中双嘧达莫的检测方法.方法 采用RP-HPL C法测定大鼠血浆中的药物浓度,色谱柱为Lichrospher C18(4.6×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-冰乙酸(75∶25∶0.5 v/v).结果 在0.1～8 mg/L-1范围内双嘧达莫峰面积与浓度线性关系良好(r=0.9995),最低检测限为0.01 mg/L-1,绝对回收率为85.8%～94.3%,准确度为94.9%～104.7%,日内RSD为2.2%～6.6%,日间RSD为5.9%～11.4%.结论 本测定方法灵敏、准确、简便,适合于双嘧达莫的药代动力学研究.     

离子对反相高效液相色谱法测定血浆中美托洛尔的浓度

目的:建立离子对反相高效液相色谱法测定人血浆中美托洛尔的浓度.方法:色谱柱: Kromasil C18;流动相: 甲醇-乙腈-15 mmol·L-1庚烷磺酸钠溶液(34.5∶18.5∶47.0),冰醋酸调pH 3.5;紫外检测波长为223 nm.结果:线性范围5.0～400.8 μg·L-1;最低检测浓度为1.5 μg·L-1;相对回收率和绝对回收率分别为(101.4±5.2)%和(96.1±5.5)%; 日内RSD和日间RSD均小于5.0%.结论:方法灵敏准确,简便可行,适用于美托洛尔的治疗药物浓度监测.     

衍生化LC—MS／MS法测定人血浆中氨基葡萄糖的浓度及药代动力学研究

目的：建立柱前衍生化高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定人血浆中氨基葡萄糖的浓度,并研究该药在健康受试者体内的药代动力学特征。方法：采用乙腈沉淀蛋白和邻苯二甲醛/3-巯基丙酸（OPA/3-MPA）衍生化法对血浆样品进行前处理,LC-MS/MS法测定受试者血浆中氨基葡萄糖的浓度,并用BAPP2.0软件计算药动学参数。色谱分离采用Phenomenex ODS柱（150mm×4.6mm,5mm）,流动相为甲醇-0.2%醋酸铵溶液（含0.1%甲酸）,梯度洗脱;待测样品通过电喷雾正离子化以选择性反应离子监测方式进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z384→118（氨基葡萄糖衍生物）和m/z326→147（内标酒石酸托特罗定）。结果：血浆中氨基葡萄糖在0.012～8.272mg.L-1范围内线性关系良好（r〉0.9980）,绝对回收率为87.9%～106.5%,批内、批间精密度RSD分别为4.4%～5.4%和9.8%～19.8%,定量限为0.012mg.L-1。其主要药动学参数Cmax为（1.03±0.47）mg.L-1,AUC为（4.32±1.41）h.mg.L-1,AUC0-∞为（4．34±1．41）h·mg·L^-1,Tmax为（2．80±1．37）h,t1／2为（1．20±0．32）h,MRT为（3．74±0．63）h。结论：衍生化LC-MS／MS法可增强氨基葡萄糖在反相色谱系统中的保留,改善与内源性干扰物的分离,有效降低电喷雾质谱检测的基质效应,提高检测灵敏度和准确度,适用于氨基葡萄糖的临床药动学研究。     

HPLC检测人血浆中厄贝沙坦的浓度

目的建立人血浆厄贝沙坦检测的高效液相色谱法。方法血浆经乙醚萃取,以ZORBAX Extend-C18为色谱柱;流动相为乙腈-水-0.1%TFA-0.5 mmol.L^-1 SDS体系,流速为0.8 mL.min^-1;检测波长为242 nm（0-6.5 min）和266 nm（6.5-7.8min）。结果厄贝沙坦浓度在0.05-6.00 mg.L^-1内线性关系良好（r=0.999 9）;定量限为0.05 mg.L^-1;高中低3个浓度的相对回收率分别为（103.93±1.09）%、（99.85±0.65）%和（100.95±1.21）%;日内RSD分别为3.04%,1.15%,1.19%,日间RSD分别为4.50%,3.32%,1.18%。结论本方法准确可靠、简便快速,适用于人血浆厄贝沙坦浓度的测定及其药动学研究。     

HPLC法测定替考拉宁血药浓度

目的利用单因素实验法建立和优化临床替考拉宁（TEC）HPLC分析方法,为临床合理用药和药动学研究提供检测方法。方法用甲醇沉淀处理血液标本,Waters ODS2（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱为分析柱,利用单因素实验法优化色谱条件。实验设计通过改变柱温、p H、流动相的组成比例,验证每种条件对各成分分离度（R）、理论板数（N）和拖尾因子（T）的影响,并用所建立的方法研究TEC在大鼠肝脏和血清中的分布动力学。结果优化后流动相为0.05 mol·L-1KH2PO4缓冲溶液-乙腈（22∶78）,用磷酸调p H至2.65,波长为200 nm,流速为1.2 m L·min-1,柱温30℃,进样量为100μL。TEC的最低检测质量浓度为0.1 mg·L-1,在0.2²04.8 mg·L-1内线性较好（r=0.995 8）,相对回收率为（98.66±8.38）%^100.75±8.32%,平均日内、日间精密度（RSD）分别为9.83%和9.87%,分离度（R）为1.5。以15 mg·kg-1单剂量静脉给药的大鼠,3 h后测得血清和肝脏中TEC质量浓度分别为（152.5±7.01）mg·L-1和（14.99±3.54）mg·L-1,21 h后得血清和肝脏质量浓度分别为（3.19±1.53）mg·L-1和（13.39±2.39）mg·L-1。结论该方法灵敏、快速、简便和特异性强且稳定可靠,适用于临床TEC血药浓度的监测及药动学的研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中霉酚酸的浓度

目的建立用高效液相色谱测定人血浆中霉酚酸浓度的方法。方法采用SUPELCOSIL C18色谱柱（4.6mm×250 mm,5μm） 流动相：乙腈-0.01 mol.L-1磷酸二氢钾（pH=3.0）溶液（40∶60,v/v） 流速：1.0mL.min-1 检测波长：254 nm。结果霉酚酸在0.4~51.2 mg.L-1线性关系良好（r=0.999 3）,最低检测浓度为0.4 mg.L-1,霉酚酸低、中、高浓度检测的日内、日间RSD分别为2.22%、5.15%、4.13%和1.75%、6.75%、3.35%。结论该法具有操作简便可靠、准确、稳定性高等特点,适合应用于霉酚酸的治疗药物监测和药动学研究。     

HPLC法测定大鼠血浆中色胺酮的浓度及药代动力学参数

目的建立测定血浆中色胺酮含量的HPLC法,并用于色胺酮在大鼠体内的药代动力学研究。方法采用ODSC18色谱柱(4.6 mm×250 mm),流动相为乙腈∶水(47∶53),流速为1.0 ml.min-1,检测波长为251 nm,柱温30℃,进样量20μl,内标物为桂皮醛。按56 mg.kg-1剂量给大鼠灌胃后,用HPLC法测定给药后不同时刻大鼠血浆中色胺酮的浓度。采用DAS 2.1.1软件分析,计算药动学参数。结果色胺酮在0.0183～1.1712 mg.L-1范围内线性关系良好(r2=0.999),最低定量限为0.02 mg.L-1。回收率大于95.0%,其日内、日间RSD均小于8%。大鼠灌胃色胺酮56mg.kg-1后,♀和♂T12分别为4.314和5.597 h,Tmax分别为5.2和4.6 h,Cmax分别为1.887和2.620 mg.L-1,AUC0→t分别为12.1和14.70 mg.h.L-1。结论本方法操作简便,准确,灵敏度高、重复性好,可用于色胺酮血药浓度检测及药代动力学研究。     

反相高效液相色谱法检测人血浆特比萘芬浓度

目的:建立人血浆特比萘芬检测的高效液相色谱方法.方法:以ZORBAX Eclipse XDB-C18为色谱柱;流动相为乙腈-0.2%三氟乙酸-水体系,流速为 0.8 ml·min-1;检测波长258 nm(0～5.2 min) 和283 nm(5.2～7.0 min).以伏立康唑为内标,血浆在酸性条件下经乙酸乙酯萃取后检测.结果:特比萘芬浓度在0.05～4.00 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 7);高中低三个浓度(0.10、1.00、3.00 mg·L-1)的日内精密度RSD分别为3.12%、2.85%和2.63%,日间精密度RSD分别为4.18%、3.29%和2.81%;相对回收率分别为(101.47±4.53)%、(99.50±3.63)%和(100.71±3.33)%,RSD分别为2.60%、2.41%和1.62%.健康志愿者单剂量口服250 mg 盐酸特比萘芬后,Cmax为(1.27±0.15)mg·L-1,Tmax为(1.56±0.32)h,t1/2α为(0.96±0.24)h,t1/2β为(16.73±1.87)h,AUC(0-48)为(13.44±1.95)mg·h·L-1,AUC(0-∞)为(15.32±2.16)mg·h·L-1.结论:该方法简便、快速、准确可靠,适用于人血浆特比萘芬浓度的测定及其药代动力学研究.     

姜黄素在大鼠体内药代动力学和生物利用度研究

目的研究姜黄素不同给药途径在大鼠体内的药代动力学和绝对生物利用度。方法建立大鼠血浆中姜黄素的HPLC检测方法。考察大鼠分别经灌胃ig(200 mg·kg-1)、ip腹腔注射(20 mg·kg-1)、舌下静脉iv(10 mg·kg-1)给予姜黄素后血药浓度变化。用DAS2.0软件计算药动学参数,根据腹腔注射、灌胃和静脉给药药-时曲线下面积AUC(0-∞)和给药剂量,计算腹腔注射和口服姜黄素的绝对生物利用度。结果姜黄素浓度在0.05～6.00 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998);定量下限为0.05 mg·L-1;低(0.10 mg·L-1)、中(1.00 mg·L-1)、高(4.00 mg·L-1)3个浓度的回收率分别为(99.29±5.40)%、(104.21±4.72)%和(99.83±1.97)%;日内RSD分别为4.49%、3.90%和1.72%,日间RSD分别为4.61%、4.27%和2.00%。大鼠经灌胃、腹腔注射和静脉注射姜黄素后,姜黄素在大鼠体内的代谢过程均符合二室模型,消除半衰期分别为(159.28±18.12)、(90.79±11.55)和(11.96±2.64)min;AUC(0-∞)分别为(86.36±12.90)、(73.39±8.72)、(104.62±11.89)mg.min.L-1。按剂量折算,姜黄素经腹腔注射给药的绝对生物利用度为35.07%,灌胃给药的绝对生物利用度为4.13%。结论姜黄素经不同途径给药在大鼠体内的药代动力学过程相似,腹腔注射给药的绝对生物利用度较高,口服生物利用度低。     

单次注射比阿培南在健康人体的药代动力学

目的研究注射用比阿培南(碳青霉烯类抗生素)在健康人群单次给药药代动力学。方法用分层随机、三交叉、拉丁方设计、空腹给药的试验方法,12名健康受试者单次静脉滴注比阿培南150,300,600 mg,HPLC法测定给药后血、尿药物浓度,DAS软件计算药代动力学参数。结果受试者静滴比阿培南150,300,600 mg后药代动力学参数如下,Cmax分别是(8.49±1.03),(16.31±1.83),(34.51±3.74)mg.L-1;Tmax均为(1.00±0.00)h;t1/2β分别为(1.08±0.80),(0.89±0.14),(0.93±0.08)h;AUC0-t分别(13.49±2.29),(28.91±4.92),(60.85±8.72)mg.L-1.h;CL分别是(11.09±1.58),(10.54±1.85),(9.98±1.39)L.h-1.kg-1。12 h尿排出率分别为61.9%,62.1%,62.8%。结论注射用比阿培南药代动力学符合二室开放模型,药代动力学参数与剂量呈线性相关,受试者耐受性良好。     

反相高效液相色谱法检测兔血浆胞磷胆碱浓度

目的:建立兔血浆胞磷胆碱浓度检测的高效液相色谱方法。方法:血浆经高氯酸沉淀,以Venusil MP-C₁₈为色谱柱;流动相为0.1%三氟乙酸,流速为0.8 ml·min^-1;检测波长282 nm。结果:胞磷胆碱浓度在0.25～40.00 mg·L^-1范围内线性关系良好（r=0.999 8）;低中高三个浓度(0.50,10.00,30.00 mg·L^-1)的相对回收率分别为（100.87±3.38）%、（99.53±2.30）%和（100.47±1.47）%;日内RSD分别为3.37%、2.73%和1.76%,日间RSD分别为3.86%、3.34%和1.81%。结论:本方法简便、快速、准确可靠,适用于兔血浆胞磷胆碱浓度的测定及其药物动力学研究。     

静脉全麻药HX0507体内活性代谢物丙泊酚的药动学研究

目的研究单次iv给予HX0507后,在健康受试者体内活性代谢物丙泊酚的药动学特征。方法 30名健康受试者分组(10、20、30 mg·kg-1),分别接受单次iv HX0507,以GC-MS法测定丙泊酚的血药浓度,用DAS 2.0药动学软件以非房室模型计算其药动学参数。结果受试者单次iv低、中、高浓度HX0507后的主要药动学参数为:t1/2分别为150.72±42.63、133.35±33.76、145.77±51.76 min、Cmax分别为1.96±0.47、4.27±1.54、9.71±4.78 mg·L-1,AUC0-t分别为174.80±33.49、397.34±62.19、642.28±90.69 mg·min·L-1。结论 HX0507的活性代谢物丙泊酚在10～30 mg·kg-1给药剂量范围内,Cmax和AUC与给药剂量呈线性相关,在体内呈现线性药动学特性。     

左西孟旦注射液在中国健康人体的药代动力学

目的研究左西孟旦注射液在中国健康人体的药代动力学。方法 30名健康男性受试者,采用随机、开放、单剂量试验设计,分别单次静脉注射左西孟旦注射液1.0,2.0,3.0 mg。用HPLC法测定血药浓度;用WinNonlin软件计算药代动力学参数。结果 3个剂量左西孟旦的主要药代动力学参数:Cmax分别为(109.24±14.52),(201.38±38.94)和(317.65±45.75)ng.mL-1;Tmax分别为(11.5±2.4),(11.5±3.4)和(11.9±2.6)min;t1/2分别为(0.68±0.10),(0.60±0.08)和(0.80±0.08)h;AUC0-t分别为(81.38±12.64),(143.13±29.63)和(289.86±48.57)μg.h.L-1。结论 1～3 mg给药剂量范围内,左西孟旦均具有线性动力学特征。     

注射用雷替曲塞在晚期实体瘤患者体内的药动学

目的建立测定人血浆中雷替曲塞浓度的高效液相色谱(HPLC)法,研究国产注射用雷替曲塞在中国晚期实体瘤患者体内的药动学特征。方法采用固相萃取法提取血浆样品中的雷替曲塞,进行HPLC分析。6名中国晚期实体瘤患者使用雷替曲塞单药3 mg.m-2静脉滴注,采用HPLC法测定血浆中雷替曲塞浓度的变化,采用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果雷替曲塞在2.5～2 000μg.L-1浓度范围时线性关系良好,回归方程为Y=284.79 X+853.64,r=0.996(n=3)。雷替曲塞浓度为5、100和1 000μg.L-1的提取回收率分别为(102.7±2.6)%、(89.7±4.6)%和(99.1±7.5)%,RSD分别为1.72%、3.75%和5.28%。雷替曲塞给药剂量3 mg.m-2时,ρmax为(839.4±246.2)μg.L-1,AUC0-t为(719.8±146.7)μg.L-1.h。结论本方法操作简便、结果准确可靠、灵敏度高,重复性好,适合药动学研究。     

液质联用法测定人血浆中米格列奈的浓度

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中米格列奈的浓度,并研究其在健康男性受试者体内的药动学。方法血浆经液-液萃取。色谱柱:Agilent TC-C18柱,流动相:乙腈-水-甲酸(体积比为70.0∶30.0∶0.3),质谱检测采用多反应监测模式(multiple reaction monitoring,MRM),电喷雾离子源,分析时间:2.0 min。结果米格列奈线性为5.0～4 000.0μg.L-1,定量下限为5.0μg.L-1。日内、日间精密度(relative standard deviation,RSD)均不大于10.5%,准确度(relative error,RE)为-0.8%～-2.0%。健康男性受试者口服含米格列奈10 mg的受试制剂(规格:10 mg/片)和参比制剂(规格:5 mg/片)后主要药动学参数为:tmax分别为(0.375±0.079)和(0.396±0.166)h,ρmax分别为(887±292)和(902±298)μg.L-1,t1/2分别为(1.37±0.45)和(1.49±0.57)h,AUC0-t分别为(1047±379)和(1 067±430)μg.h.L-1,AUC0-∞分别为(1 070±394)和(1 092±433)μg.h.L-1。结论该法适用于米格列奈的药动学及生物等效性研究。