组织工程活性皮肤用于皮肤慢性溃疡创面临床研究

目的探讨组织工程活性皮肤修复皮肤慢性溃疡创面临床应用的有效性及安全性。方法选取不同临床单位符合临床试验要求的皮肤溃疡患者，随机分为试验组和对照组，试验组应用组织工程活性皮肤覆盖创面，对照组应用常规凡士林纱布覆盖，所有患者采用常规包扎并固定。临床研究观察时间为6个月，观察指标为治疗期患者的创面变化、创面愈合时间和愈合后的创面愈合质量；同时对全身及重要脏器进行检测。采用SPSS统计软件对试验组和对照组平均愈合时间进行t检验，分析两组间差异有无统计学意义。结果应用组织工程活性皮肤可在创面存活，促进创缘皮肤组织的新生并替代组织工程活性皮肤。与对照组相比应用后创面明显缩小，试验组的平均愈合时间24，37d，明显少于对照组（64．05d），有统计学意义。结论应用组织工程活性皮肤修复慢性皮肤溃疡创面可促进创面早期修复、缩短病程并降低由此产生的并发症；为组织工程活性皮肤的临床应用提供了切实可行的方法。     

利用组织工程双层皮肤修复糖尿病溃疡的研究

目的 探讨组织工程双层皮肤修复糖尿病溃疡的效果.方法 利用同种异体的皮肤表皮细胞和皮肤成纤维细胞分别作为表皮和真皮的种子细胞制备组织工程双层皮肤,选取已制备的溃疡面积相当的糖尿病溃疡动物模型20例,随机分为实验组和对照组各10例,临床选取26例溃疡面积差异无统计学意义的糖尿病患者,随机分为试验组和对照组各13例,分别将制备的皮肤用于动物模型和用于临床糖尿病足溃疡患者,同时控制血糖,对溃疡进行清创处理,以制备的组织工程双层皮肤覆盖创面,行常规护理;对动物模型的创面愈合情况和临床创面愈合效果分别进行统计和分析.结果 动物实验中,实验组愈合速度明显快于对照组,平均愈合时间较对照组提前6d,实验组与对照组愈合时间差异有统计学意义（F=0.178,P＞0.05,方差齐,t=-10.919,P＜0.05）;移植4周时,实验组愈合率为60％,对照组10例均未完全愈合,愈合率为0,两组愈合率比较差异有统计学意义（t=0.011,P＜0.05）.临床试验中,移植6周时,试验组愈合率为84.6％;对照组愈合率为23.1％,两组比较差异有统计学意义（χ^2=0.001,P＜0.05）.试验组的平均愈合时间为43.25 d,对照组的平均愈合时间为76.69 d,与对照组相比,试验组创面的平均愈合时间缩短了约33 d,对照组的愈合速率较试验组明显缓慢,试验组与对照组的创面愈合时间差异有统计学意义（方差齐性检验结果,χ^2=16.971,P ＜0.05,方差不齐,χ^2=7.649,P＜0.05）.结论 应用组织工程双层皮肤修复糖尿病足溃疡是一种切实可行的临床治疗方法.     

皮肤减张闭合技术修复急慢性创口临床研究进展

皮肤软组织缺损是外科常见的疾病，诸如创伤、皮肤病变切除等引起的皮肤软组织缺损，感染造成的创口，软组织切开减张形成的创口等，临床处理起来十分棘手，往往需要二次手术。传统创面修复方法包括植皮、皮瓣转移、反复换药等均存在一定的缺陷。皮肤牵张技术和皮肤扩张技术是2种不做组织移植而修复皮肤缺损的外科方法，同时诞生于1976年。另外，皮肤缝合牵拉技术、减张胶带(小伤口)，及近年来开展的皮肤减张闭合技术，均可以利用皮肤的机械伸展性和应力松弛性来修复缺损。但皮肤扩张技术疗程长，需2次以上手术，不适用于修复新鲜创面；皮肤牵张技术适用范围有限，术后牵张及拆除牵张装置时患者痛感强烈，对于难以闭合创面仍需要二期植皮。2012年，以色列Topaz教授发明研制的TopClosure皮肤牵张闭合器作为一种新型牵张(减张)闭合创面的产品，避免了创缘的压力副作用，且可闭合大面积创面(直径大于10 cm的创面)，在临床上有较好的疗效。目前国内研制出了新型皮肤减张闭合器，实现了闭合创面的创新，运用皮肤自身张力，对皮肤表面进行无创闭合，具有无创伤瘢痕、炎症反应轻、愈合美观、操作方便等优点。适用范围包括：妇科剖腹产手术、甲状腺等外科手术、急诊外伤手术、腔镜手术、感染伤口治疗、术后延迟愈合伤口治疗等。再联合负压创面治疗技术，组合负压材料的优势，可达到1＋1>2的创面愈合效果。皮肤减张闭合技术操作方便，避免缝针穿刺切割损伤，缩短手术时间；减轻患者术后疼痛程度，有利于患者早下床活动，减少患者因卧床时间长导致的并发症，节省医疗费用；方便医患沟通，适合小儿皮肤裂伤修复，避免局部麻醉；避免术后缝合瘢痕，通过减张技术实现伤口瘢痕最小化；一次性闭合创面或在清创的同时就可以采用渐进式的牵拉缩小至闭合创面，且术后无需拆线；降低手术风险，使复杂的手术简单化，实现创口闭合的微创化与精准化。     

ES细胞源性表皮干细胞在皮肤缺损创面的分化

目的探讨ES细胞源性表皮干细胞移植入小鼠全层皮肤缺损后对创面的修复作用,为组织工程皮肤的研究提供新的思路。方法将羊膜诱导后的带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞以生物膜为载体,覆盖小鼠全层皮肤缺损创面。术后1～8周连续取材,HE染色观察,苏丹Ⅲ染色,β1整合素、CK15、CK19、CEA免疫组化荧光双标观察。结果术后2周,创面完全长合,较厚的新生皮完全覆盖创面,基底层细胞增生,形成细胞柱伸向真皮层,真皮层中可见管腔样结构,4周后新生表皮开始变薄,新生表皮下可见毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构,皮脂腺样结构苏丹Ⅲ染色阳性。免疫双标结果显示,1～4周新生表皮基底层细胞呈β1整合素、CK19阳性,真皮层中带有核标记的管状或泡状结构呈CK15、CEA阳性。结论ES细胞源性表皮干细胞在小鼠全层皮肤缺损创面可分化为表皮样、汗腺样、毛囊样和皮脂腺样等结构的潜能。     

扩张器周围构建自体复合皮修复原位皮肤缺损

背景：目前组织工程皮肤构建时间长,价格贵,修复效果不佳,而且抗原的消除以及疾病传播问题也没有彻底解决。在理想的组织工程皮肤诞生之前,如何利用现有的成熟技术来解决自体皮源奇缺患者的创面修复难题？ 目的：观察扩张器周围构建的自体复合皮用于修复皮肤缺损创面的效果。 方法：取大耳白兔10只,于其背部中线两侧对称部位皮下各埋植一球形硅胶扩张器,待扩张器周围形成纤维包囊后,分别向其中注入原代培养的自体皮肤上皮细胞悬液(实验组)或生理盐水(对照组),4周后取出扩张器,可见实验组形成上皮化的纤维包囊,即自体复合皮。沿扩张囊周边切除扩张器顶部皮肤及部分纤维包膜,而扩张器底面和顶部周边的纤维包囊予以保留,形成自体复合皮覆盖的创面,而对照组创面为非上皮化的纤维包囊覆盖,每日观察创面的愈合状况直至痊愈。 结果与结论：实验组创面红润洁净,分泌物少,平均愈合时间为(14.0±0.4) d,镜下可见上皮层厚而规整;对照组创面分泌物较多,平均愈合时间为(27.0±0.7) d,镜下见上皮层薄且细胞排列不规整。说明应用扩张器周围构建的自体复合皮能明显促进创面愈合。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

胚胎干细胞源性表皮干细胞对小鼠全层皮肤缺损的修复

目的 研究129小鼠胚胎干细胞(ES cell)源性表皮干细胞在同种小鼠全层皮肤缺损的生长和分化,探讨Es细胞源性表皮干细胞对全层皮肤缺损的修复作用.方法 以生物膜为载体,将羊膜诱导后带有核荧光标记的ES细胞源性表皮干细胞直接覆盖小鼠全层皮肤缺损创面.术后1～8周连续取材,HE染色,β1整合素、CK15、CK19、CK10、CEA免疫组织化学和荧光双标显色.结果 术后2周,创面完全长合,较厚的新生皮覆盖创面,基底层细胞增生,形成许多大小不一的细胞柱伸向真皮层,真皮层中可见管腔样结构,免疫荧光双标显示,1～3周新生表皮中可见核标记的细胞呈β1整合素、CK15阳性,真皮层中带有核标记的管状或泡状结构呈β1整合素、CK15阳性;4周后新生表皮开始变薄,基底层细胞呈CK19、CK10阳性,汗腺样结构呈CEA阳性,6～8周新生表皮下可见毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构.结论 ES细胞源性表皮于细胞植入小鼠全层皮肤缺损创面,可修复缺损的表皮,并在其下真皮层内具有分化为汗腺样、毛囊样和皮脂腺样结构的潜能.     

股前外侧穿支皮瓣修复胫前皮肤软组织缺损

目的 报道应用游离股前外侧穿支皮瓣移植修复胫前皮肤软组织缺损的临床效果.方法 对12例胫前皮肤软组织缺损伴骨外露患者,应用游离股前外侧穿支皮瓣移植修复,皮瓣切取面积14cm×6cm ~23cm×12cm,供区直接缝合或全厚皮片植皮修复.结果 术后12例皮瓣全部存活,创面一期愈合,术后随访3~24月(平均8个月),皮瓣质地优良,无溃疡发生,8例获保护性感觉.结论 股前外侧穿支皮瓣是修复胫前皮肤软组织缺损的有效方法.     

组织工程皮肤移植过程中白细胞介素10和肿瘤坏死因子α的表达

背景:白细胞介素10和肿瘤坏死因子α在异体异种皮肤移植局部免疫与排斥反应中发挥了重要作用。但在组织工程人工皮肤移植过程中局部皮肤组织内白细胞介素10和肿瘤坏死因子α的表达情况目前尚不清楚。目的:采用表皮干细胞联合脱细胞真皮构建人工皮肤并移植修复兔全层皮肤缺损创面,观察创面修复效果和局部皮肤组织白介素10与肿瘤坏死因子α的表达变化。方法:将体外培养的人表皮干细胞或角质细胞接种到脱细胞真皮支架中,构建组织工程人工皮肤;取新西兰白兔常规制作背部全层皮肤缺损创面随机分为4组,表皮干细胞组、角质细胞组用含表皮干细胞或角质细胞的组织工程皮肤移植于皮肤缺损创面;脱细胞真皮组移植单纯脱细胞真皮;对照组创面空置。观察创面修复情况,局部炎症反应,创面愈合时间。各组分别于术后7d在部分创面取材观察组织形态和白细胞介素10与肿瘤坏死因子α表达。结果与结论:含表皮干细胞的人工皮肤移植后创面愈合良好,局部炎症反应轻微,无出血、积脓、坏死,创面愈合时间较角质细胞组明显缩短。白细胞介素10在各组均有表达,其中表皮干细胞组表达最强,角质细胞组次之,脱细胞真皮组和对照组最弱。肿瘤坏死因子α在各组也均有表达,其中角质细胞组表达最强,表皮干细胞组次之,脱细胞真皮组和对照组较弱。说明以表皮干细胞作为种子细胞联合脱细胞真皮构建人工皮肤可用有效促进皮肤缺损创面的修复治疗,创面修复过程中局部皮肤组织内白细胞介素10和肿瘤坏死因子的表达变化可能是其取得较好效果的主要机制之一。     

原位定型微囊化载体制剂在糖尿病大鼠皮肤溃疡中的作用

背景：原位定型微囊化载体制剂成分之一胰岛素可以促进溃疡愈合。 目的：观察原位定型微囊化载体制剂在糖尿病大鼠皮肤溃疡中的疗效。 方法：腹腔内注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,应用外科方法建立全层皮肤缺损模型。根据皮肤溃疡处干预方式将实验动物分为4组。①空白对照组用生理盐水处理创面。②一般制剂组应用甲硝唑+山莨菪硷1+普通短效胰岛素处理创面。③单纯微囊组创面外敷不含有效药物成分的微囊化载体膜。④微囊化有效制剂组溃疡处外涂微囊化载体制剂膜,内含药物成分与一般制剂组相同。定时测量溃疡面积,记录溃疡愈合时间,取创面全层组织进行组织学观察,测定表皮生长因子受体、纤维连接蛋白阳性细胞数量。 结果与结论：微囊化有效制剂组大鼠溃疡愈合时间短于其他3组(P < 0.05或P < 0.01),微囊化有效制剂组表皮生长因子受体和纤维连接蛋白阳性细胞数目高于其他各组(P < 0.05或P < 0.01)。结果表明,原位定型微囊化载体制剂能够缩短愈合时间和促进糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合。     

海扶刀致皮肤软组织深度损伤创面的修复

目的 探讨海扶刀在治疗肿瘤过程中引起皮肤软组织深度损伤创面的修复方法.方法 选择2004年1月至2013年9月北京丰台右安门医院烧伤整形科收治的8例因海扶刀治疗肿瘤引起皮肤软组织深度烧伤患者,对其创面进行有效清创,彻底去除坏死组织及死骨,均以肌皮瓣转移修复,封闭创面.供瓣区3例植皮修复,其余均直接拉拢缝合.结果 术后8例患者肌皮瓣均完全成活,4例患者有窦道或局部创面形成,其中2例经换药后愈合,2例经二次手术清创后创面愈合;供瓣区愈合良好,植皮均一期成活;8例患者术后均随访6个月～2年,其中3例患者皮瓣明显臃肿,其余患者皮瓣色泽良好、质地柔软.结论 海扶刀在治疗肿瘤过程中引起的皮肤软组织损伤往往伴有深部组织缺损、骨质坏死、外露等,使用肌皮瓣转移修复创面,临床疗效良好.     

重建系统性红斑狼疮治疗与创面修复的平衡

复习目前国内外关于系统性红斑狼疮合并皮肤溃疡的病例报道及基础研究,探讨系统性红斑狼疮合并皮肤溃疡的临床特点及治疗方法.皮肤溃疡的严重程度不仅与局部创面相关,同时也与全身病情严重程度密不可分,对于此类皮肤溃疡需要多学科协作,定期评估创面局部情况与全身病情进展程度,及时调整治疗方案,寻找控制病情与创面修复的平衡点.     

Clinical trial of allogeneic cultured dermal substitutes for intractable skin ulcers of the lower leg

The efficacy of allogeneic cultured dermal substitute (CDS) on wound healing was evaluated in six patients with intractable skin ulcers on the lower extremities. Allogeneic CDS was repeatedly applied to wounds at intervals of 4-7 days to prepare a wound bed acceptable for skin grafting or to induce resurfacing through the granulation tissue formation associated with epithelialization. In one patient with a leg ulcer, the wound size decreased to 32% of the original size within 10 weeks and skin grafting was conducted. In the other five patients with leg, ankle, or foot ulcers, the wound size decreased to 9%-25% of the original size within 6 weeks.     

慢性溃疡创面床准备的疗效

目的 观察创面床准备埘慢性溃疡创而的疗效.方法 2000年9月至2005年4月本院本科室的107例慢性溃疡创面入选患者,随机分为试验组(n=58)和对照组(n=49).前者采用创面床准备方法 进行创面处理,对照组采用传统创而处理方法 ,比较两组患者的住院大数、组织病理变化、创面情况变化及手术失败率.结果 试验组的住院天数(35.1±26.8)d较对照组(49.7±32.9)d短(P<0.05).HE染色发现试验组创而组织变化朝有利于愈合的方向发展.试验组和对照组的换药后白愈率分别为26%(15/58)和10%(5/49)(P<0.05);植皮术手术失败率分别为9%(3/33)和23%(6/26)(P>0.05);皮瓣转移术失败率分别为0%(0/10)和44%(8/18)(P<0.05).结论 创而床准备方法 是慢性溃疡一种有效和科学的创面处理手段,可促进较小创面愈合.经创面床准备后选择手术覆盖创而可减少手术失败率,加快创面愈合.     

Sandwich-type fiber scaffolds with square arrayed microwells and nanostructured cues as microskin grafts for skin regeneration

The paper reports the fabrication of sandwich-type scaffolds consisting of radially-aligned nanofibers at the bottom, nanofiber membranes with square arrayed microwells and nanostructured cues at the top, and microskin tissues in between as microskin grafts for use in skin regeneration. This class of nanofiber scaffolds was able to confine the microskin tissues in the square arrayed wells and simultaneously present nanotopographic cues to the cultured NIH 3T3 fibroblasts and primary rat skin cells, guiding and facilitating their migration in vitro. More importantly, we demonstrated that the sandwich-type transplants exhibited an even distribution of microskin grafts, greatly improved the ‘take’ rate of microskin tissues, and promoted re-epithelialization on wound in vivo. In addition, the void area in the scaffolds was well suitable for exudate drainage in wound. The sandwich-type scaffolds show great potential as microskin grafts for repairing extensive burn injuries and may provide a good solution for the treatment of acute skin defects and chronic wounds including diabetic ulcer, pressure ulcer, and venous stasis ulcer.     

硫化氢对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响

目的:探讨硫化氢对糖尿病大鼠皮肤溃疡创面愈合的影响。方法:将30只健康雄性SD大鼠,随机分为正常对照组(NDC组)、糖尿病对照组(UDC组)和硫化氢处理组(TDA组),每组10只。腹腔注射链脲佐菌素(65 mg/kg)柠檬酸缓冲液(p H 4.5)建立糖尿病大鼠模型。1周后,将正常大鼠及糖尿病大鼠背部剪开直径为20mm的圆形切口,正常组和糖尿病组大鼠的溃疡创面以空白基质处理,硫氢化处理组则用2%的硫氢化钠涂抹溃疡创面。分别在给药后第5、10、15、20天测定伤口愈合率。21 d后处死大鼠,分别收集血浆以及肉芽组织,检测血浆的凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、凝血酶时间(thrombin time,TT)及纤维蛋白原(fibrinogen,FIB),白细胞和淋巴细胞计数,ELISA检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量,Western blot检测肉芽组织中血红素加氧酶1(HO-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平;肉芽组织进行HE染色,光镜观察组织形态的变化。结果:与糖尿病组比较,硫氢化钠处理明显加快大鼠伤口愈合(P0.01),提高了血清SOD活性(P0.01),同时降低了MDA水平(P0.01);血液学检测显示,硫氢化钠明显降低白细胞及淋巴细胞数量,延长PT及TT,降低FIB水平。病理切片观察显示,糖尿病对照组大鼠肉芽组织有炎症细胞浸润,胶原纤维排列疏松且不规则,而硫化氢组大鼠肉芽组织中胶原排列整齐,血管生成增多(P0.05)。此外,TDA组HO-1表达明显高于UDC组,而TNF-α的水平则显著低于UDC组。结论:硫化氢可促进糖尿病大鼠伤口愈合,其机制可能与其提高抗炎及抗氧化作用、改善微循环进而修复组织损伤有关。     

负压创伤治疗技术及生物半透膜覆盖治疗糖尿病皮肤慢性溃疡

背景：糖尿病患者全身营养状况不良和免疫功能低下导致其皮肤慢性溃疡愈合困难,常规创面治疗方法效果不佳。 目的：探讨负压创伤治疗技术在糖尿病皮肤慢性溃疡治疗中的安全性和有效性。 方法：纳入2007年7月至2010年12月在广西壮族自治区人民医院内分泌科治疗的糖尿病皮肤慢性溃疡患者144例,其中糖尿病足溃疡132例,压疮12例。分别采用负压创伤治疗技术或传统清创、换药方法治疗;同时均辅以控制血糖及血压、抗凝、抗感染及对症支持治疗。 结果与结论：采用负压创伤治疗技术治疗的109例患者溃疡愈合60例,显效30例,有效14例,无效5例,总有效率95.4%。采用传统清创、换药方法治疗的35例患者溃疡愈合17例,显效10例,有效3 例,无效5例,总有效率85.7%。两组总有效率比较差异有显著性意义(P < 0.05)。且负压创伤治疗可明显提高糖尿病足溃疡患者溃疡周边组织氧分压,负压泵连续运行最长120 d,无并发症出现。说明负压创伤治疗技术在糖尿病皮肤慢性溃疡治疗中具有良好的安全性和有效性。     

The n-Hexane,ethylacetate, and butanol fractions from Hydnocarpi Semen enhanced wound healing in a mice ulcer model

Our previous report showed that Hydnocarpi Semen (HS) extract has wound repair activity at ulcer lesion in diabetic mice. In this study, fractions of n-Hexane, ethylacetate (EtOAc), and butanol (BuOH) from HS crude extract were evaluated for their wound healing activity by using in vivo diabetic ulcer models and in vitro acute inflammation model. Although n-Hexane and EtOAc fractions promote wound healing in mice with ulcer, the BuOH fraction exhibited the most potent wound healing activity and the wound area score significantly decreased after treatment of BuOH fraction even at dose of 2 mg/kg. BuOH fraction stimulated macrophages to increase the production of nitric oxide (NO) and TNF-α. The BuOH fraction also enhanced the production of TGF-β and VEGF, which were involved in fibroblast activation and angiogenesis. The mRNA expression and activation of MMP-9 were increased by three fractions and the activity was higher in BuOH fraction-treated group compared to the other groups. The mechanism that the HS helps to promote healing of diabetic ulcer is possibly associated with the production of TNF-α, a proinflammatory cytokine, as well as the secretion of VEGF, TGF-β, and MMP-9, which were involved in proliferation of capillaries and fibroblasts. These results suggest that HS can be a new candidate material for the treatment of wound in skin ulcer.     

压疮的评估、预防和治疗研究进展

压力性溃疡（PU）简称压疮,是皮肤或皮下组织由于压力、剪切力或摩擦力而导致的皮肤、肌肉和皮下组织的局限性损伤,常发生在骨隆突处。压疮是长期卧床及危重患者最常见的并发症之一,严重降低患者生活质量,增加治疗费用;严重者可继发感染、脓毒症、败血症等导致全身衰竭而死亡。本文从流行病学、危险预测因素及评估量表、预防、伤口局部和全身性治疗、护理及未来研究方向等方面对压疮的研究进展进行综述。