用MTAB直接重氮盐法测定血清总胆红素

目前测定总胆红素主要有重氮试剂法和氧化法 (化学氧化法和酶氧化法 )两大类。在重氮试剂法中 ,以往都有临时制备重氮苯磺酸试剂的麻烦 ,且又不能保存。在反应的催化剂方面 ,二甲亚砜及某些非离子型表面活性剂的用量都较大 ,故粘性很高[1,2 ] 。据此我们直接使用稳定的重氮盐和加入少量的阳离子活性剂 ,建立了单试剂直接终点法测定血清总胆红素的方法 ,适用于自动分析或手工操作。一、材料和方法1.仪器　TOSHIBATBA 4 0FR全自动生化分析仪2 .试剂　 (1)反应试剂 :3,5 二氯苯基四氟硼酸重氮盐 (Sigma产品 ) 1.2 5nmol/L ,十四烷基三甲…     

对钒酸氧化法测定血清中胆红素的评价

目的 :评价钒酸氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法 :钒酸氧化法的精密度、准确度实验及其重氮法相关和干扰因素实验。结果 :批内 CV总、直接胆红素分别为 0 .8%与 1 .3%。日间 CV为1 .8%与 1 .7% ,平均回收总胆红素为 1 0 1 .1 % ,直接胆红素 1 0 0 .1 %。与重氮试剂法相关 ( J- G法 )总胆为 Y(本法 ) =1 .0 1 5X(重氮法 ) - 0 .1 1 9,r=0 .998,直接胆红素为 Y(本法 ) =1 .1 0 1 x(重氮法 ) 0 .81 ,r=0 .952。相关良好 ,血红蛋白浓度和脂血分别高达 3g/L和 9.0 mmol/L不干扰。结论 :该法简单、快速、稳定 ,而且对溶血、乳糜等干扰因素的影响比重氮法小     

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价

目的对钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素进行方法学评价.方法采用钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素,与重氮法测定血清总、直接胆红素进行了比较.结果钒酸盐氧化法(Y)与重氮法(X)相关性良好,相关方程:YTBIL=1.184XTBIL-1.29(r=0.9954),YDBIL=0.982XDBIL+1.43(r=0.9947);总胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.67%、3.02%,平均回收率达98.3%,在0～628μmol/L范围内线性良好.直接胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.72%、3.28%,平均回收率达97.6%,在0～229μmol/L范围内线性良好.标本中甘油三酯含量≤5mmol/L、维生素C含量≤0.5g/L时,对钒酸盐氧化法测定总、直接胆红素均无干扰,但对重氮法有明显干扰;血红蛋白对钒酸盐氧化法和重氮法测定总、直接胆红素均产生正干扰.结论钒酸盐氧化法是一种准确、灵敏、特异性较重氮法高的方法,适用于常规自动化测定血清总、直接胆红素,但在抗血红蛋白干扰方面有待改进.     

单一试剂测定胆红素实验探讨

本文介绍用单一试剂测定血清总胆红素和直接胆红素.重氮试剂pH 在0.7条件下可稳定一个月.反应时间仅需6分钟.总胆红素和直接胆红素CV 分别为1.69～2.06%、2.05～3.95%,总胆红素回收率为100.3%.与J-G 法比较,总胆红素、直接胆红素相关系数分别为0.998和0.986.本法操作简便、试剂稳定、手工分析和生化分析仪均可应用.     

对钒酸氧化法测定血清中胆红素的评价

目的:评价钒酸氧化法测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法:钒酸氧化法的精密度、准确度实验及其与重氨法相关和干扰因素实验。结果:批内CV总、直接胆红素分别为0.8％与1.3％。日间CV为1.8％与1.7％,平均回收总胆红素为101.1％,直接胆红素100.1％,与重氮试剂法相关(J-G法)总胆为y(本法)=1.015x(重氮法)-0.119,r=0.998,直接胆红素为y(本法)1.101x(重氮法)+0.81,r=0.952。相关良好,血红蛋白浓度和脂血分别高达3g/L和9.0mmol/L不干扰。结论:该法简单、快速、稳定,而且对溶血、乳糜等干扰因素的影响比重氮法小。     

化学氧化法测血清中直接胆红素

传统的测定血清胆红素的方法是重氮试剂法。该法的主要缺点是试剂不稳定和反应不稳定。长期以来，人们一直在寻找改进方法。上世纪九十年代初，日本出现化学氧化法。1998年该法试剂盒进入中国。它的主要优点是试剂稳定，反应稳定和较少受共存物的干扰，很快受到欢迎，市场扩展很快。不久国产化学氧化法试剂也纷纷面市。在近4—5年的实际应用中，化学氧化法的总胆红素测定试剂准确性较好，而测直接胆红素(以下间称直胆)试剂问题较多。存在着严重的互不一致的现象。我院从2000年起用化学氧化法试剂代替OLYMPUS原装重氮试剂，近二年来的实践感觉良好，特作报导。     

M蛋白在重氮法与钒酸氧化法检测胆红素中的影响初探

目的通过对M蛋白阳性病例用重氮法、钒酸氧化法、干化学法测定胆红素浓度,探讨M蛋白在重氮法与钒酸氧化法胆红素测定中的影响。方法收集安庆市立医院2015年8月~2017年6月247例M蛋白阳性患者血清,分为多发性骨髓瘤(MM)组与非MM组,收集M蛋白阴性患者血清为对照组。三组均采用干化学法、重氮法、钒酸氧化法测定胆红素。以干化学检测结果为标准,对各组重氮法和钒酸氧化法胆红素的检测结果进行比较。结果 MM组和非MM组的组内重氮法和钒酸氧化法总胆红素检测结果的差异有统计学意义(P0.05),而对照组的组内重氮法和钒酸氧化法总胆红素检测结果的差异无统计学意义(P0.05)。MM组与对照组的重氮法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);非MM组与对照组重氮法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);MM组与非MM组重氮法与干化学法胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05)。MM组与对照组钒酸氧化法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);非MM组与对照组钒酸氧化法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较有统计学意义(P0.05);MM组与非MM组钒酸氧化法与干化学法总胆红素检测结果的差值比较无统计学意义(P0.05)。结论 M蛋白影响重氮法和钒酸氧化法总胆红素测定,MM患者与非MM患者的M蛋白对重氮法胆红素测定的影响程度不同。     

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价

目的 对钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素进行方法学评价。方法 采用钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素，与重氮法测定血清总、直接胆红素进行了比较。结果 钒酸盐氧化法（Y）与重氮法（X）相关性良好，相关方程：YTBIL=1.184XTBIL-1.29(r=0.9954),YDBIL=0.982XDBIL 1.43(r=0.9947)；总胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.67%、3．02%,平均回收率达98．3％，在0－628μmol/L范围内线性良好。直接胆红素批内、批间平均变异系数分别为1．72％、3．28％，平均回收率达97．6％，在0．229μmol/L范围内线性良好。标本中甘油三酯含量≤5mmol/L、维生素C含量≤0.5g/L时，对钒酸盐氧化法测定总、直接胆红素均无干扰，但对重氮法有明显干扰；血红蛋白对钒酸盐氧化法和重氮法测定总、直接胆红素均产生正干扰。结论 钒酸盐氧化法是一种准确、灵敏、特异性较重氮法高的方法，适用于常规自动化测定血清总、直接胆红素，但在抗血红蛋白干扰方面有待改进。     

钒酸盐氧化法测定血清胆红素评价

血清胆红素的测定法有重氮法、胆红素氧化酶法、二甲基亚砜法等,改良J-G汉是重氮法的一种,现在比较常用的方法是重氮法双试剂双波长自动分析.日本和光纯药工业株式会社以及上海科华一东菱诊断用品公司已经推出了钒酸盐氧化法测定血清胆红素,能够自动化分析,本文对该方法进行了评价并与重氮法作比较分析,报告如下:     

自配胆红素试剂(重氮法)在AU-600的应用

目前,用于测定胆红素的方法主要有重氮法,改良J-G法、胆红素氧化酶法等[1,2].但无论何种方法,其试剂在配制后的稳定性皆不够理想[3].故我们参考有关资料,自配胆红素测定试剂(重氮法),并采取每天临用时配制总(直接)胆红素试剂2的方法,通过三年来对其在AU-600全自动生化分析仪上的运用观察,证明其试剂空白稳定性良好,并且近三年里全国、全省室间质控TB、DB项目的VIS值均在100以内,PT(可接受范围)在100%～80%之间.……     

单一试剂测定总胆红素和直接胆红素

随着医学科学的发展和临床实验室自动化程度的提高,目前使用重氮反应及推荐的Jendrassik-Grof方法等测定总胆红素和直接胆红素已越来越不能满足常规测定的需要.大多数方法都存在着以下缺点,如重氮试剂不稳定;所加的试剂多、费时以及两种胆红素的测定方法不同,甚至比色的波长也不同等.为了克服这些不足,作者介绍了一种简单、可靠、易掌握,既可手工操作,又能作自动化测定的较理想方法.其特点为:用相同的方法测定总胆红素和直接胆红素;使用混含的单一试剂,一步即可完成;反应时间短,只需5分钟;试剂稳定,     

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析性能评价

目的对钒酸盐氧化法测定血清总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBil)进行方法学评价.方法系统研究钒酸盐氧化法测定血清胆红素的精密度、灵敏度、稳定性及干扰因素,并比较其与重氮法结果的相关性.结果钒酸盐氧化法测定TBil批内变异系数(CV) 1.67%,批间CV 2.92%,平均回收率99.8%.DBil批内CV 1.25%,批间CV 3.52%,平均回收率99.6%.维生素C(VitC)≤0.5 g/L时对钒酸盐法和重氮法均无干扰.三酰甘油(TG)<6 mmol/L时对钒酸盐法无干扰,对重氮法有明显干扰.血红蛋白(Hb)在4 g/L以下对钒酸盐法无干扰,对重氮法有较大干扰.结论钒酸盐氧化法灵敏度高、重复性好,抗干扰能力强,适用于实验室常规应用.     

广东茂名地区健康人群血清胆红素三种方法参考范围的调查及比较

目的 确定重氮法、钒酸盐氧化法及胆红素氧化酶法检潮广东茂名地区健康人群血清胆红素的参考范围.方法 同时用前述三种方法 对1 232名健康体检人员做血清总胆红素(TBIL)和直接胆红素(DBIL)的检测,采用x±1.96s计算参考范围并做比较.结果 三种方法 中,重氮法与钒酸盐氧化法所得的TBlL和DBIL参考范围接近,重氮法:TBlL 5.4～26.2μgmol/L,DBIL 0.73～6.89 μmol/L;钒酸盐氧化法:TBIL 5.2～25.8/Jmol/L,DBIL 0.47～6.99 μmol/L.重氮法略高于钒酸盐氧化法,但两者间总体差异无统计学意义(P＞0.05).胆红素氧化酶法最低,TBIL 3.2～22.4μmol/L,DBIL 0.3～4.8 μmol/L,与其余两法比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 胆红素检测方法 不同参考范围有差异,应根据检测方法 建立相应的参考范围.     

新生儿黄疸的实验室诊断方法探讨

新生儿黄疸是临床常见病、多发病,其诊断的依据是临床实验室提供的总胆红素和直接胆红素测定结果。临床上实验方法很多,主要有重氮法、改良J-G氏法、钒酸氧化法、氧化酶法等。其中改良J-G氏法是重氮法的改良法,是卫生部推荐方法,但不能自动化,影响其应用。现在临床上大多应用重氮法,重氮法方法上较成熟,测定结果也比较稳定,能满足大多数临床的要求。     

重氮试剂对尿素自动化测定的影响及处理措施

目的 分析自动生化仪中重氮试剂对尿素测定是否存在交叉污染及其产生原因并提出解决方法.方法 用迈瑞BS-300全自动生化分析仪将新鲜混合血清单独进行尿素测定,然后将同份标本分别置于总胆红素(TB)或直接胆红素(DB)测试项目后再进行尿素测定,记录其结果并进行统计学分析;将重氮试剂一系列稀释作为标本来测定尿素,分析其对尿素自动化测定有无影响及影响程度.结果 重氮法原理中直接胆红素试剂对尿素测定结果没有影响,总胆红素试剂对尿素会产生明显的正干扰.结论 检验人员使用全自动生化仪时,不仅要熟悉仪器工作流程、试剂组成、测定原理等,更要注意试剂间的交叉污染,并根据仪器工作特点制定相应的措施来消除交叉污染,从根本上保证实验数据的可靠性,为临床提供客观真实的诊疗依据.     

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析性能评价

目的　对钒酸盐氧化法测定血清总胆红素 (TBil)、直接胆红素 (DBil)进行方法学评价。方法　系统研究钒酸盐氧化法测定血清胆红素的精密度、灵敏度、稳定性及干扰因素 ,并比较其与重氮法结果的相关性。结果　钒酸盐氧化法测定TBil批内变异系数 (CV) 1.6 7% ,批间CV 2 .92 % ,平均回收率 99.8%。DBil批内CV 1.2 5 % ,批间CV 3.5 2 % ,平均回收率 99.6 %。维生素C(VitC)≤ 0 .5 g/L时对钒酸盐法和重氮法均无干扰。三酰甘油 (TG) <6mmol/L时对钒酸盐法无干扰 ,对重氮法有明显干扰。血红蛋白 (Hb)在 4g/L以下对钒酸盐法无干扰 ,对重氮法有较大干扰。结论　钒酸盐氧化法灵敏度高、重复性好 ,抗干扰能力强 ,适用于实验室常规应用。     

自配胆红素试剂(重氮法)在AU-600的应用

目前,用于测定胆红素的方法主要有重氮法,改良Ｊ－Ｇ法、胆红素氧化酶法等１、２。但无论何种方法,其试剂在配制后的稳定性皆不够理想３。故我们参考有关资料,自配胆红素测定试剂（重氮法）,并采取每天临用时配制总（直接）胆红素试剂２的方法,通过三年来对其在ＡＵ－６００全自动生化分析仪上的运用观察,证明其试剂空白稳定性良好,并且近三年里全国、全省室间质控ＴＢ、ＤＢ项目的ＶＩＳ值均在１００以内,ＰＴ（可接受范围）在１００％～８０％之间。年期我对自配胆红素试剂作一系列评价试验,证明其在ＡＵ－６００全自动…     

改良重氮法和钒酸盐氧化法测定胆红素结果比较

目的探讨罗氏改良重氮法和钒酸盐氧化法测定胆红素结果的差异。方法选用有代表性的两种方法试剂,先做基本性能检测,后检测45份浓度分布均匀的血清样品,进行结果的比较。结果两种试剂的精密度较好,各项检测项目的方差齐,配对t检验总胆红素（TBIL）结果P〉0．05,直接胆红素（DBIL）结果P〈0．05;其方法学比较评估的相对系统误差（％SE）,TBIL X1=8．29％,X2=1．17％;DBIL X1=8．82％,X2=5．70％。结论两种测定方法测定的结果之间的一致性较差,重氮法胆红素测定结果稍高于钒酸盐氧化法测定结果,但两者的系统误差均属临床可接受水平。     

一种稳定的氧化剂法测定血清胆红素

1883年Ehrlich发明偶氮反应,1913年V anD en Bergh把重氮试剂用于测定血清胆红素,生成偶氮胆红素,建立了重氮试剂法[1]。近一个世纪以来,国内外学者先后摸索并成功地推出了许多胆红素的测定方法,主要有重氮法(M-E法、改良J-G法)和单一试剂法[2]。重氮法受溶血、脂浊的干扰,使检     

自制双试剂测定血清胆红素的探讨

目的；建立准确的自动生化分析测定血清胆红素的方法。方法：采用双试剂测定，以尿素咖啡因及Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００组成的加速剂作为第一试剂，重氮试剂为第二试剂测定总胆红素，以对氨基苯碘酸溶液为第一试剂，亚硝酸钠浓度为１．４５ｍｍｏｌ／Ｌ的重氮试剂为第二试剂测定直接胆红素。结果：总胆红素回收率为９９．８５％，批内艰０．８２％，批间ＣＶ为１．５４％，与咖啡因法比较ｒ＝０．９９９９。ｔ＝１．３２３，Ｐ〉０．２