核磁共振氟谱对五氟利多的定量分析

目的建立核磁共振氟谱测定五氟利多定量分析的方法.方法 Varian-300核磁共振谱仪,四核宽带探头,氟谱检测观察频率:282.234 MHz;谱宽:150~-150ppm;脉冲宽度:谱仪的90度脉冲值15μs;增益值:30;采样时间:1s;采样次数:一般32次,浓度低时数百次直到信号峰清晰;样品溶剂为氯仿,毛细管内标含稀释的三氟乙酸。结果氟谱信号峰的积分显示五氟利多在水与盐酸中完全不溶,在氯仿中的溶解度最好。在氯仿中,Varian-300氟谱的灵敏度可以检测出16ppm的五氟利多溶液,但需要合适的检测参数与扫描3 000次。检测不同浓度的氟谱,以毛细管内标标定,获得CF3氟信号峰的相对积分值,作图获得标准曲线,线性关系良好,r=99.95%。标准曲线法测定药片中五氟利多的含量为20.05mg,与说明书的实值20mg基本一致,实验RSD值为0.48%,平均回收率为99.70%。结论测定方法简便快速,结果准确,可以用于未知样品或药片中五氟利多的定量分析.     

关格片中盐酸小檗碱的含量测定

目的 提高关格片的质量标准.方法 应用高效液相色谱法对黄连中有效成分盐酸小檗碱进行了含量测定.结果 盐酸小檗碱在0.199 8～1.998 mg范围内呈良好线性关系,回归方程为Y=1 843 459.405 X=45 289.676 2,r=0.999 6.结论 含量测定方法简便、灵敏、准确、专属性强.可作为关格片中盐酸小檗碱含量测定的方法.     

HPLC法测定拈痛丸中盐酸小檗碱的含量

目的 测定拈痛丸中盐酸小檗碱的含量.方法 采用离子对色谱法,Diamonsil C18柱,乙腈-水(体积比52∶48)(每1 000 mL加磷酸二氢钾3.4 g,十二烷基硫酸钠1.7 g)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长265 nm,柱温为室温.结果 盐酸小檗碱平均回收率为99.8%,RSD为2.89%(n=6).结论 该法可用于拈痛丸中盐酸小檗碱的含量测定.     

RP-HPLC定量三乙胺法测定中药黄连中盐酸小檗碱的含量

目的:建立一种反向高效液相色谱(RP-HPLC)法测定黄连中盐酸小檗碱的含量.方法:采用HPLC法,色谱柱为Luna C18柱(150 mm×4.60 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸(25 ∶75),每1 000 ml 0.1%的磷酸溶液中加入50 μl的三乙胺(扫尾剂)进行洗脱;检测波长为340 nm.结果:采用HPLC法检测黄连中盐酸小檗碱的含量,其在0.246～2.460 μg范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系.平均加样回收率为100.1%,相对标准偏差(RSD)为1.60%.结论:HPLC简便可行、重复性好,可作为检测盐酸小檗碱含量的质量控制;一定量的三乙胺分析纯可作为很好的扫尾剂,用于盐酸小檗碱的含量测定.     

HPCE测定戊己丸中盐酸小檗碱与芍药苷的含量

目的 建立同时测定戊己丸中盐酸小檗碱、芍药苷的高效毛细管电泳法,考察影响分离的各因素,确定最佳测定条件.方法 测定缓冲液为50 mmol/L的硼砂溶液:甲醇=1:1.5;未涂层石英毛细管(50 μm×64.5 cm,有效长度57.1 cm)为分离通道;操作电压30 kV;柱温25℃;检测波长230 mn;压力进样1.5 kPa×8 s.结果 盐酸小檗碱和芍药苷分别在0.037～0.460 mg/mL、0.037～0.463 mg/mL范围呈良好的线性关系,其平均回收率分别为99.22%和99.60%.结论 建立了快速、准确测定戊己丸中盐酸小檗碱、芍药苷含量的新方法 .     

薄层-紫外分光光度法测定清热解痒胶囊中盐酸小檗碱的含量

[目的 ]测定清热解痒胶囊中盐酸小檗碱的含量。 [方法 ]采用薄层 -紫外分光光度法 ,用正丁醇 -冰醋酸 -水 (7∶ 1∶ 2 )为展开剂 ,在硅胶 G薄层板上分离盐酸小檗碱 ,然后定位 ,刮下 ,洗脱 ,采用紫外分光光度法进行含量测定。 [结果 ]盐酸小檗碱的平均回收率为 98.6% ,RSD为 1 .57%。[结论 ]该法分离效果好 ,简便 ,结果准确 ,可用于该制剂的质量控制。     

分光光度法测定蒙药耧斗菜中盐酸小檗碱的含量

目的：建立蒙药耧斗菜中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法：以甲醇为提取溶剂,采用超声法直接提取样品中的盐酸小檗碱,以蛮罕山产蒙药耧斗菜作为供试品对本实验方法进行考察,以甲醇为空白,在348nm波长处用紫外分光光度法测定盐酸小檗碱的含量。结果：盐酸小檗碱浓度在0.0020-0.0140 mg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,平均加样回收率为96.77%（n=6）,小井沟、蛮罕山、三岔沟三不同产地蒙药耧斗菜中盐酸小檗碱的含量分别为6.259 mg/g、5.630 mg/g及5.960 mg/g。结论：本法操作简便、重复性好,可用于中蒙药材中盐酸小檗碱的含量测定。     

HPLC双波长切换法测定二妙丸中盐酸小檗碱、苍术素含量

目的:建立HPLC双波长切换法对二妙丸中盐酸小檗碱、苍术素的含量测定,该方法有利于二妙丸的含量测定及质量控制。方法:采用反相高效液相色谱法;以0.02mol/L磷酸二氢钾(用磷酸调PH3.0)-乙腈(色谱纯)流动相梯度洗脱;流速:1.0m L/min;柱温:30℃;检测波长:270nm(0~10min,盐酸小檗碱)、340nm(10~20min,苍术素);结果:HPLC双波长切换法可同时测定二妙丸中盐酸小檗碱、苍术素的含量,盐酸小檗碱和苍术素分别在14.63~292.5μg/m L、0.54~10.75μg/m L和峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率(N=6)分别为99.8196%、99.2808%。RSD分别为0.6163%、2.1763%。结论:该方法准确、可靠、专属性强,为二妙丸的质量控制提供参考。     

紫外分光光度法测定优赛清栓剂中两组分的含量

目的 :不经分离同时测定 4 氨基水杨酸钠和盐酸小檗碱的含量。方法 :采用紫外分光光度法在波长345nm处测定盐酸小檗碱的含量 ;在 2 98nm和 36 4nm处利用双波长法测定 4 氨基水杨酸钠的含量。结果 :4 氨基水杨酸钠的线性范围为 10 .2 μg/mL～31.5 μg/mL,平均回收率为 (97 98± 0 5 6 ) % ,相对标准偏差为 0 .5 7%(n =9)。盐酸小檗碱的线性范围为 5 1μg/mL～15 3μg/mL,平均回收率为 (10 1 8± 0 80 ) % ,相对标准偏差为0 79% (n =9)。结论 :采用紫外分光光度法测定栓剂中两组分的含量 ,方法简单、快速、准确度高。     

HPLC法测定栀子金花分散片中盐酸小檗碱的含量

目的：建立栀子金花分散片中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定,色谱条件：Diamonsil-C18色谱柱（4.6mm＆#215;150mm,5μm）,流动相为乙腈-0.6%磷酸二氢钠溶液（30：70）,流速为1.0ml/min,检测波长为350nm。结果：盐酸小檗碱在2.5-50μg范围内线性关系良好,r=0.9995;盐酸小檗碱加样回收率（n=6）为100.85%,RSD为3.7%;栀子金花分散片中盐酸小檗碱平均含量为0.633%。结论：本研究建立的HPLC测定栀子金花分散片中盐酸小檗碱含量的方法简便、重复性好,可用于栀子金花分散片中盐酸小檗碱的含量测定。     

pH-酶触型盐酸小檗碱结肠定位片大鼠体内的释药研究

目的：对pH-酶触型盐酸小檗碱结肠定位片在大鼠体内的释药特点进行研究。方法：将pH-酶触型盐酸小檗碱结肠定位片（Ф3mm）大鼠灌胃给药,在各时间点将大鼠处死,取出胃肠道,采用HPLC检测,内标法分别测得大鼠各段胃肠道内容物中盐酸小檗碱的含量,研究药物在胃肠道各部位内容物中含量的经时变化,评价其释药特性。结果：盐酸小檗碱在胃肠道内容物中的线性范围为0.1-20.0μg.mL-1,线性关系良好（r〉0.999）,定量限为0.1μg.mL-1;药物于6-14h在盲肠和结肠内具有较高的药物浓度。结论：pH-酶触型盐酸小檗碱结肠定位片具有较好的结肠定位释药特性。     

Effect of Astragalus Injection on Serious Abdominal Traumatic Patients’ Cellular Immunity

After serioustrauma,thei mmunefunction ofpatients was inhibited, particularly the cellulari mmunity function,not only increased the infec-tionincidence rate,but also,after the infectionoccurrence,was apt toleadto sepsis and multi-ple organ dysfunction syndromes ( MODS) ,which was the main cause of deathfor traumaticpatientsin thelate stage(1).The present study,onthe basis of superiority of Astragalus injection(AI) in actingto strengthen and regulatethei m-munityfunction,triesto explorethe ef…     

HPLC法测定汝安膜中盐酸小檗碱含量

目的:建立汝安膜中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法:使用C18柱,0.03 mol/L磷酸二氢钠溶液-乙腈(68∶32)为流动相,检测波长为348 nm。结果:盐酸小檗碱在0.4~2.0 mg/L范围内线性关系良好,平均回收率为98.04%(n=6),RSD为0.89%。结论:该方法准确、可靠、重现性好,可作为该膜剂的质量控制方法。     

薄层扫描法测定汝安膜中盐酸小檗碱的含量

目的建立汝安膜中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法采用薄层扫描法对汝安膜中的盐酸小檗碱进行定量。结果盐酸小檗碱点样量在0.05～0.5μg呈良好的线性关系,平均回收率为99.22%,RSD=1.2%(n=6)。结论该方法准确、可靠、重现性好,可作为该膜剂的质量控制方法。     

异基因干细胞移植后T细胞重建及与慢性移植物抗宿主病关系的研究

目的:探讨恶性血液病异基因干细胞移植后T细胞免疫重建的特点及与慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的关系.方法:采用流式细胞仪动态检测42例恶性血液病患者异基因干细胞移植前、后不同时期T淋巴细胞亚群的变化,并对其中18例白血病患者检测其移植前、后不同时期的CD3 CD5 、CD3 CD45RA 、CD4 CD45RA 细胞的变化情况.结果:42例患者均重建造血.移植后CD4 T细胞恢复较慢,而CD8 T细胞则恢复较快,导致CD4 /CD8 细胞比值在移植后1年内持续倒置.回输CD 34细胞数量分别与移植后30 d时的CD3 、CD4 、CD8 T细胞数呈正相关.cGVHD组患者的CD3 CD45RA 、CD4 CD45RA 细胞均明显低于无GVHD组患者(均P<0.05).结论:异基因干细胞移植后CD4 T细胞恢复慢,而CD8 T细胞恢复较快.回输CD 34细胞数与移植后早期患者T细胞重建的快慢密切相关.cGVHD可引起初始T细胞亚群(CD45RA 细胞)减少.     

强直性脊柱炎和类风湿关节炎患者外周血T细胞亚群检测的意义

目的:探讨强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)和类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者外周血T细胞亚群的变化特点及临床意义。方法:收集AS和RA及健康志愿者外周抗凝静脉血,以ECD标记的抗CD3单克隆抗体和PE-Cy5标记的CD4、CD8单克隆抗体作双色流式细胞术,分析AS和RA患者CD3+CD4+、CD3+CD8+T细胞百分率。结果:AS患者CD4+T百分率和CD4+T/CD8+T比值均明显低于正常对照(P<0.05),CD8+T细胞百分率明显高于正常对照(P<0.05);RA患者CD4+T和CD8+T细胞百分率明显低于正常对照(P<0.05)、CD4+T/CD8+T比值明显高于正常对照(P<0.05)。AS患者的CD8+T百分率明显高于RA患者(P<0.05),CD4+T/CD8+T细胞比值明显低于RA患者(P<0.05)。结论:AS患者外周血表现免疫功能低下,以及RA患者外周血呈现免疫功能亢进,可能都与其免疫发病机制有关;CD4+T/CD8+T比值的变化特点有助于AS和RA的临床鉴别诊断。     

脂肪源间充质干细胞治疗aGVHD后T细胞亚群的变化yh

目的:探讨脂肪源间充质干细胞(adultadiposetissue?derivedmesenchymalstemcells,AMSC)治疗急性移植物抗宿主病(acutegraft-versus-hostdisease,aGVHD)的机制。方法:3例行异基因造血干细胞移植术后发生aGVHD患者,以每公斤体重2×106个细胞剂量静脉输注AMSC;首先应用尼龙毛柱分离外周血T淋巴细胞,再经CD4或CD8免疫磁珠分选出CD8+或CD4+T淋巴细胞,应用流式细胞术检测发生aGVHD患者使用AMSC前后外周血CD8+及CD4+T细胞亚群的变化。结果:与输注AMSC前相比,输注AMSC后,CD8+T细胞中的CD8+CD28CD25--亚群显著上调,CD4+T细胞中的CD4+CD25+亚群并无明显变化,同时,患者的aGVHD得以有效控制。结论:AMSC治疗aGVHD的作用机制可能与其上调CD8+CD28-T细胞亚群有关,而与CD4+CD25+亚群可能并无直接关联。     

单纯性肾病综合征血T细胞亚群变化及对体液免疫功能的影响

对39例初发和复发单纯性肾病综合征病儿外周血T细胞亚群,IgG,IgA,IgM进行检测.结果表明,无论初发或复发病例外周血中CD_3~+和CD_4~+细胞水平无明显变化,CD_8~+和CD_(10)~+细胞均明显高于对照组,CD_4~+/CD_8~+细胞比值均明显低于对照组,而初发组和复发组间无明显差异;85.3%的病儿伴血清IgG降低,29.4%的病儿伴血清IgM增高,CD_4~+/CD_8~+细胞比值与血清IgG水平呈显著正相关,而与IgM水平呈明显负相关.提示单纯性肾病综合征病儿存在T细胞功能紊乱,且与病儿体液免疫功能紊乱的关系密切.     

溃疡性结肠炎活动期和缓解期患者外周血CD_4~+CD_(25)~+T细胞的变化

目的 探讨溃疡性结肠炎(UC)患者活动期和缓解期外周血CD4+CD25+T细胞的变化.方法 选择14例健康者(正常对照组)和27例UC患者(活动期12例,缓解期15例).应用流式细胞仪检测3组受检者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25+T细胞的比例.应用罗氏Light Cycler荧光定量PCR仪检测PBMC中Foxp3 mRNA的含量.结果 UC活动期患者CD4+CD25+T细胞、CD+4T细胞的比例,CD4+CD25+T/CD+4T细胞比值及Foxp3 mRNA含量与正常时照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);UC缓解期患者CD4+CD25+T细胞、CD+4T细胞的比例及Foxp3 mRNA含量与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),但CD4+CD25+T/CD+4T细胞与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 UC活动期患者外周血CD4+CD25+T细胞比例和Foxp3 mRNA含量显著高于健康者,可见外周血CD4+CD25+T细胞比例改变在UC的发病机制中起重要作用.     

高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度

目的:用高效液相色谱法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度。方法:采用转篮法测定复方黄连素片中盐酸小檗碱的溶出度,以高效液相色谱法定量。色谱柱为RP-C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相为0.033 mol/L,磷酸二氢钾-乙腈(60∶40);流速为1.0 mL/min;检测波长265 nm;进样量为10μL。结果:盐酸小檗碱在0.992~9.920μg/mL范围内有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为100.2%,RSD=0.38%(n=9),3批样品45 min溶出度均在75%以上。结论:高效液相法测定溶出度简便、准确、灵敏度高,可用于复方黄连素片中盐酸小檗碱溶出度的测定。