不同器官保存液对大鼠肝脏透明质酸吸收率的影响

目的　探讨不同器官保存液对大鼠肝脏透明质酸吸收率的影响 ,以评价它们对肝窦内皮细胞的保护作用。方法　大鼠肝脏原位灌洗后 ,分别在UW液、Celsior液或Histidine Tryptopan Ketoglutarate液 (HTK液 )中低温保存 16和 2 4h ,然后用含透明质酸的Kreb Henseleit液在 37℃下连续循环灌注 90min ,分别于灌注 0、15、30、6 0和 90min时检测肝脏对外源性透明质酸的吸收率。结果　低温保存 16h ,再灌注 0、15、30、6 0和 90min时 ,3种保存液保存的肝脏对外源性透明质酸的吸收率均为负值 ,表明肝窦内皮细胞受到一定程度的损伤 ,但UW液和Celsior液对肝窦内皮细胞的保护作用较HTK液为优 (P <0 .0 1) ;保存 2 4h者 ,UW液对肝窦内皮细胞的保护作用优于Celsior液和HTK液。结论　UW液对肝窦内皮细胞具有较强的保护作用     

器官保存液对大鼠肝脏细胞凋亡的影响的研究

细血再灌注损伤的主要机制之一。氧自由基除直接损害细胞外 ,还可以间接激活细胞内核酸内切酶 ,导致缺血再灌注时的细胞凋亡 ,有研究表明再灌注时 ,氧自由基对线粒体的损害可以产生凋亡诱导因子造成细胞凋亡。Ｂｕｒｎｓ等〔1〕证实肾小管的凋亡在低温缺血尤其是长时间缺血损伤中起着重要作用。尽管一些临床移植表明细胞凋亡只发生在再灌注 1ｈ内〔2〕,但一些实验研究表明凋亡可在再灌注后相当一段时间内存在〔3〕。最近的两项研究提供了更加直接的佐证 ,Ｇａｏ等〔4〕发现低温保存的大鼠肝脏由于乏氧引发蛋白酶的释放 ,这些蛋白酶作用于肝…     

自制多器官保存液对大鼠肝脏保存的效果

目的 探讨自制多器官保存液(self-designed multi-organ preservation solution,SMO)对大鼠肝脏低温保存的效果.方法 使用SMO液、UW液和肾脏保存液保存大鼠肝脏6、12和24 h后进行肝移植,观察移植后12 h肝功能改变和移植后14 d大鼠存活情况.结果 SMO液保存24 h之内,肝脏的形态学观测无明显改变.SMO液组与UW液组TB、ALT和血清透明质酸同步升高;肾脏保存液组显著升高,与SMO液组比较差异有统计学意义(F=49.027,70.280,34.349,71.532,446.544,303.408,P＜0.05).SMO液组肝移植后14 d大鼠存活情况良好.结论 大鼠原位肝移植模型证实,SMO液与UW液在保护肝脏功能方面作用相当,优于肾脏保存液.     

SWH液对大鼠肝脏保存中肝细胞凋亡的影响

目的　通过与UW液进行比较 ,观察SWH保存液对大鼠肝细胞凋亡及其对肝移植受者存活率的影响。方法　应用大鼠原位肝移植模型 ,通过HE染色、电镜和TUNEL法检测肝细胞凋亡以及观察移植术后 7d动物存活率。结果　随着保存时间的延长 ,两组的凋亡指数 (AI)均无明显升高 ,保存 18h后 ,两组的AI亦无明显改变 ,仅在行肝移植恢复血流循环后AI才明显上升 ,移植前后存在显著性差异 ,P <0 .0 1,SWH液组略低于UW液组 ;SWH液组移植术后 7d动物存活率有高于UW液组的趋势。结论　有效地防止肝细胞凋亡可以提高肝脏的保存效果 ,在防止肝细胞凋亡方面 ,SWH液优于UW液。     

保存温度对大鼠肝脏功能的影响

目的 研究温度对大鼠肝脏功能的影响,以确定大刀肝脏的是适保存温度。方法 采用单纯低温保存方法及建立大鼠原位肝移植模型研究保存温度对大鼠肝脏功能的影响。实验对0℃、4℃、8℃、12℃进行研究,保存时发为6,18及30h,保存18h后行肝移植术,检测指标包括肝脏酶学、能量指标及组织形态学改变。结果 ①保存18,30h的灌出液及移植后2h血清中AST、LDH水平为4℃＜0℃＜8℃＞12℃（P＜0.01或P＜0.05）。②保存18、30h及移植后20min的肝脏能量指标ATP、EC为4℃＞0℃＞8＞12℃（P＜0.01或P＜0.05）。③肝脏形态学示4℃组损害较其它组轻。结论 4℃对于大鼠肝脏是是适保存温度,它能够明显减轻大鼠肝脏的冷损伤程度。     

多器官保存液组成探讨

本文综述了器官保存的原理及要求，指出一种成功的器官保存液的组成应满足五个要求：１、减少由于低温保存导致的细胞水肿；２、防止细胞的酸化作用；３、防止灌洗保存过程中的细胞间隙膨胀；４、防止氧自由基损伤；５、提供再生高能磷酸化合物的底物。并对ＵＷ、ＨＴＫ液的各个组成部分进行了分析和探讨。     

大鼠肝脏冷灌注保存中肝细胞凋亡及其调控基因的研究

目的 通过检测凋亡细胞计数及凋亡相关基因bax和Fas的表达，探讨细胞凋亡及其相关基因在冷灌注保存大鼠肝脏组织中的作用。方法 本研究采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的末端标记法（TUNEL法）及RT-PCR，按照供肝保存时间30、60、90、120、180、300min分为6组进行凋亡细胞计数及其相关基因的检测。结果 不同保存时间大鼠肝脏组织中均有凋亡细胞发生，随着时间延长，凋亡细胞计数呈进行性增加趋势；未检测到bcl-2的表达，但可明显检测到bax和Fas基因的表达。结论 在冷灌注保存肝组织中，细胞凋亡是早期细胞死亡的主要原因之一。细胞凋亡的发生可能与bax和Fas的高表达以及bcl-2的低表达有关。     

保存不同时间的大鼠部分肝脏移植后的肝细胞再生

目的 探讨保存不同时间的大鼠部分肝脏移植后的肝细胞再生及其可能机制.方法 采用近交系雄性Lewis大鼠为供、受者,按照实验设计分别将供肝于4℃UW液中保存1 h(冷缺血1 h组)、8 h(冷缺血8 h组)和16 h(冷缺血16 h组).然后进行原位肝移植.移植肝恢复血流前,用3-0丝线结扎供肝左侧中央叶、左外叶及尾状叶,保留右侧的肝叶.即可制成大鼠50%体积肝脏(以下简称"半肝")原位移植模型.术后观察各组移植肝的存活情况和肝细胞再生情况;采用逆转录聚合酶链反应测定肝组织中自细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF_n)的表达情况;采用Western印迹法检测肝组织中信号传导与转录因子-3(STAT-3)表达情况;采用免疫组织化学染色检测移植肝组织中细胞周期素DI(Cyelin D1)的表达和肝细胞摄取溴脱氧尿核苷(BrdU)情况.结果 各组手术成功率均为100%.与冷缺血1 h组相比,冷缺血8 h组和冷缺血16 h组移植肝组织中TNF-a(F=67.45,P<0.05)和IL-6(F=287.73,P<0.05)的表达明显增加.STAT-3的表达也明显增强.肝移植后24 h.冷缺血8 h组在胞浆和细胞核内均有Cyclin D1的表达.而冷缺血16 h组移植肝组织中未见明显的Cyclin D1表达.移植后24 h.冷缺血16 h组的BrdU染色阳性的肝细胞数无明显增多,而在冷缺血8 h组可见BrdU染色阳性的肝细胞明显增多(t=19.40,P<0.05).结论冷保存一定时限的大鼠部分肝脏在移植后可获得肝细胞再生,此过程可能通过TNF-α/IL,16/sTAT-3/Cyclin D1/DNA合成的途径进行调节;当冷保存时间达16 h后,肝细胞不能对肝脏再生早期信号起反应.     

器官保存及保存液的研究

正器官移植是治疗各种器官终末期疾病的唯一有效治疗方案。随着器官移植医学的快速发展,尤其是手术技术的进步及新型免疫抑制剂、器官保存方式的应用,器官移植病人的生存率得到显著提高。器官移植也在世界范围内广泛开展。移植等待病人数量不断增加,远远超过器官捐献的数量,器官供应严重不足,而高质量的供体是器官移植成功的先决条件和基本保障[1]。     

不同器官保存液对成人胰岛分离、纯化及功能的影响

目的探讨不同器官保存液保存胰腺对胰岛分离、纯化及功能的影响。方法以成人胰腺为研究对象,分别以高渗枸橼酸钾溶液(HCA液)与威斯康新大学器官保存液(UW液)灌洗、保存胰腺,进行胰岛分离及纯化,比较两组分离、纯化后收获的胰岛数及胰岛当量数(IEQ),并在体外评价其功能。结果两组在胰腺重量、热缺血时间、冷缺血时间没有明显差异的情况下,胰腺分离、纯化后所获得的胰岛数及胰岛当量数的差异无显著性(P>0.05),纯化后的胰岛细胞在体外低糖与高糖刺激下,其胰岛素的分泌量及C肽的释放量的差异也无显著性(P>0.05);两个组胰岛细胞的活率均在85%以上。结论在胰岛移植中,可以使用HCA液作为胰腺保存液。     

The impact of donor organ quality on postoperative liver function after orthotopic rat liver transplantation

The impact of donor factors for posttransplant liver function was evaluated in the model of orthotopic rearterialized liver transplantation in the rat. The effect of donor fasting, parenteral hyperalimentation, hypotension, warm ischemia and endotoxins on histology, clinical chemistry and MEGX test was analyzed in syngeneic and allogeneic recipients of livers stored for 4 hrs on ice. In syngeneic animals, 20 min of warm ischemia led to significantly elevated serum transaminase levels and degree 2 histological damage on POD 2. Endotoxins produced a grade 1 histological damage. All groups had a lower MEGX formation rate compared to controls. In allogeneic animals, warm ischemia was the single most detrimental parameter. The strength of the rejection response on POD 8 did not depend on the type of donor pretreatment. The major finding of this non-survival study is the deleterious effect of warm ischemia and endotoxin on the functional and structural integrity of liver grafts after 4 hrs of cold ischemia. Received: 9 June 1997     

外源性三磷酸腺苷在大鼠肝脏低温保存中的作用

目的研究外源性三磷酸腺苷(ATP)在大鼠肝脏低温保存中的作用及其机制.方法采用持续低温机器灌流保存模型,利用高效液相色谱、光镜及放射自显影等技术测定低温保存大鼠肝脏的能量代谢、功能、形态学变化及外源性ATP是否能进入肝细胞内.结果灌流液中不含ATP及MgCl2组(A组)和灌流液中含5 mmol/LATP、不含MgCl2组(B组),随保存时间的延长,大鼠肝细胞内ATP及Atkinson's能量转换(EC)迅速下降,两组差异不显著(P>0.05),而灌流液中含5 mmol/LATP及5 mmol/LMgCl2组(C组),ATP及EC则下降缓慢(P<0.01);A、B组乳酸脱氢酶(LDH)及天冬氨酸转氨酶(AST)迅速增高(P>0.05),C组上升较A、B组缓慢(P<0.05);保存24     

The effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in the liver

Background

Liver ischemia-reperfusion (I-R) injury is a well-known cause of morbidity and mortality following liver surgery and transplantation. Further investigation is warranted to identify measures that reduce the untoward sequelae of liver ischemia.

Methods

Male Sprague-Dawley rats (wild-type) and Zucker rats (with hepatic steatosis) were subjected to 75 minutes of 70% hepatic ischemia and 3 hours of reperfusion. The ischemic periods were based on protocols of either continuous clamping (CC) or ischemic preconditioning (IP). Prior to ischemia induction, rats were pretreated with intravenous methylprednisolone (MP; 2 mg/kg) or normal saline. Warm I-R injury was evaluated using serum levels of aspartate aminotransferase (AST), serum interleukin-6 (IL-6), and hematoxylin and eosin staining.

Results

Histology, serum IL-6, and AST release revealed that MP treatment provided significant protection as compared with ischemic controls (both CC and IP groups) only in the normal, not steatotic, livers. The inflammatory response was considerably reduced in MP groups with normal livers but not in steatotic livers. In general, the IP groups showed decreased I-R injury compared to the CC group. However, MP was able to further reduce I-R injury only in normal, not steatotic, livers.

Conclusions

MP attenuated the postischemic and inflammatory response in the normal, and not steatotic, livers. MP pretreatment might be effective in reducing warm I-R injury to livers without steatosis. The mechanism of I-R-related hepatocellular damage in steatotic liver is different than in normal liver.     

二种不同成份灌洗液肺保存效果的对比

目的 比较2种不同成份肺灌洗液的肺保存效果.方法 将犬分成2组,一组供肺采用改良的Euro-Collins液(含高钾,钾浓度108mmol/L)灌洗,另一组用低钾葡萄糖液(LPG液,钾浓度4 mmol/L)灌洗.4℃保存6小时后行异体左肺移植,保留受体的右肺.术后10分钟～72小时定时阻断右肺动脉血流,采股动脉血作血液气体分析,并作病理检查.结果 改良的Euro-Collins液和LPG液灌洗的肺移植后即刻受体动脉血氧分压(PaO2)分别为(17.3±6.2)kPa和(19.7±7.0)kPa.CO2分压(PaCO2)分别为(5.28±1.17)kPa和(4.8±0.7)kPa,两组比较,P>0.05,移植后72小时的PaO2分别为(14.6±6.1)kPa和(18.4±7.6)kPa,PaCO2分别为(4.2±0.9)kPa和(4.6±0.7)kPa,两组比较,P>0.05.移植肺组织光镜和电镜观察发现,灌洗后即刻及保存6小时的组织学改变主要表现为肺泡上皮及毛细血管上皮细胞肿胀、肥大、变性,移植后72小时可见肺泡内有渗出、淋巴细胞浸润及血管壁增厚,2个组的病理改变相似.结论 含高钾的改良Euro-Collins液及含低钾的LPG液肺保存效果相似,灌洗液中的K+浓度并非影响移植肺功能的关键因素.     

二氮嗪改善供心超时冷保存效果的实验研究

目的　研究二氮嗪在离体大鼠心脏冷保存中的作用,探讨线粒体ATP敏感性钾通道(Mito chondrialATP sensitivepotassiumchannel,MitoKATPC)开放剂在改善供心功能中的可能机制,及超时(超过公认5h)冷保存供心的有效性。方法　SD大鼠随机分7组。对照组、二氮嗪(DE)组,以上两组又各分为冷保存3、5、10h组和DE +5 羟基葵酸盐(5 HD)组。采用Langendorff离体鼠心灌注法,复灌6 0min ,观察心脏血流动力学、冠脉流出液心肌酶漏出量及心肌水含量变化,并做心肌超微结构检查。结果　(1)冷保存3、5、10h后,DE组LVDP、±dp/dtmax、CF恢复率在多个复灌时间点上均优于对照组,且心肌酶漏出量明显减少。(2 )5、10h保存组中,DE处理后LVEDP的变化明显小于对照组。(3)与对照组相比,保存10h后DE组的心肌水含量明显降低,且心肌超微结构优于对照组。(4)与保存5h对照组相比,保存10h后DE组在复灌期可显著抑制LVEDP的增高;仅LVDP和-dp/dtmax恢复率较保存5h对照组低。(5 )DE的上述作用可被Mi-toKATPC的特异性阻断剂5 HD抵消。结论　Celsior保存液中加入DE能明显改善离体大鼠心脏冷保存效果,且供心的冷缺血安全时间可安全延长至10h,其保护机制涉及MitoKATPC的开放