异种体外受精实验模型的建立及其方法学探讨

建立人和小鼠精子与去透明带金黄地鼠卵的异种体外受精实验模型(SPA)。8例小鼠精子对地鼠卵子的平均受精率为69.9±26.4%;16例次人精子对地鼠卵的平均受精率为55±20%,批内变异系数为14.5%,符合 WHO 标准,技术稳定可靠;PMSG 作用61h 可提高地鼠排卵量。     

人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验与人精卵体外受精的比较

目的　研究在人工助孕技术中能否以人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验 ( SPA)结果作为确定采用人精卵体外受精 ( IVF)或经卵细胞胞浆内单精子注射 ( ICSI)的指标。方法　对 2 2例准备行 IVF的夫妇男方精子 SPA受精率与其 IVF受精率结果进行比较。结果　 SPA和 IVF受精率分别为 38.6 %± 2 3.5 %与 5 3.5 %±2 8.4% ,SPA受精率较 IVF受精率低 ,但随着 SPA受精率的增加 ,IVF受精率也呈明显增加的趋势。在 SPA受精率大于 10 %的病例中 ,约 76 %的病例 IVF受精率大于 5 0 %。经统计学分析两者有显著相关性 ( rs=0 .70 46 ,| U | =3.2 2 84>u0 .0 1 /2 )。结论　 SPA受精率可作为助孕技术中确定 IVF或 ICSI助孕方案的参考指标     

人精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验与人精卵体外受精的比较

OBJECTIVE: The research question was whether the result of human sperm zona-free hamsterovum penetration assay (SPA) could serve as an indicator for in vitro fertilization (IVF) or intracytoplasmic sperm injection (ICSI). METHODS: The semen samples of 22 male partners in couples with infertile marriage were assessed for their fertilizing capacity by SPA. The fertilization rate of SPA was compared with that of IVF. RESULTS: The fertilization rates of SPA and IVF were 38.6% +/- 23.5% and 53.5% +/- 28.4% respectively, and a significant correlation between SPA and IVF was observed (rs = 0.7045). CONCLUSION: The result of SPA may be used as a reference indicator for assisting fertilization, IVF or ICSI.     

男性年龄对精子质量和体外授精-胚胎移植治疗结局的影响

目的 探讨男性年龄对精子质量以及体外授精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结局的影响.方法 回顾性分析该中心2010年5月至2015年12月接受IVF-ET治疗的633对夫妇的资料,按男方年龄分组:A组年龄小于30岁(187例)、B组30～34岁(248例)、C组35～39岁(156例)、D组大于或等于40岁(42例),观察男方年龄对平均精子密度、存活率、前向运动精子率、正常形态率、受精率、胚胎利用率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率和活产率的影响.结果 A、B、C3组间的平均精子密度无显著差异,但B组和C组均明显高于D组(P＜0.01);A、B两组平均精子活率之间无差异,但均显著高于C、D两组(P＜0.01);A组精子前向运动率高于C组(P＜0.05),A组和B组显著高于D组(P＜0.01),B组平均正常形态率与D组比较差异有统计学意义(P＜0.05).受精率、胚胎利用率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率和活产率4组间相比差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 男性年龄对精子质量有负面影响,但与受精率、胚胎利用率、优质胚胎率、临床妊娠率、流产率和活产率无明显相关性.     

人精子染色体改良技术及其应用

课题研究提供了改良的人精子染色体直接制备，Ｇ显带核分析技术。在对８０例对象的人精子染色体直接制备，Ｇ显带核型分析中，成功率为６２．５％，较Ｔｅｍｐｌａｄｏ方法的成功率（５８．１％）进一步提高。通过对正常人，不育，流产对象的男性精子染色体研究，发现精子染色体数目和结构畸变率分别为：正常人２．３％和０％，不育１４．０％和４．８％，流产组４．５％和２．４％，不育和流产组的畸变率较正常人增加。在对５例染色     

剖宫产与体外授精技术在小鼠生物净化中的应用

目的 采用剖宫取胎和体外受精对微生物级别达不到SPF级的小鼠进行生物净化.方法 对于具有正常繁殖能力的小鼠品系,通过对阴道栓的检查和触诊确定剖宫产取胎时间,采用子宫摘除手术对小鼠进行剖宫产,取出仔鼠用SPF级受体母鼠代乳,观察代乳情况及代乳仔鼠成活率;对于繁殖力较差或者丧失繁殖能力的品系,采取辅助生殖的方式,采集小鼠精子和卵子,在HTF液中受精,培养3.5 d后的胚胎移植到SPF级受体母鼠子宫内,待产仔.结果 两种方式净化的小鼠断奶后进行微生物检测,均达到SPF级.结论 对微生物级别达不到SPF级但不含垂直传播病原体的小鼠,采用两种方式可有效提高小鼠的微生物等级.     

改良R18S3冷冻液对cre转基因小鼠精子冷冻效果探讨

目的 比较改良精子冷冻液与传统冷冻液对cre转基因小鼠的精子冻存和体外受精率的影响,建立采用精子冷冻技术稳定保存两种cre转基因小鼠的方法.方法 以R18S3作为精子冷冻液和以R18S3作为基础液添加477 μmol/L的硫代甘油（MTG）配成R18S3＋MTG冷冻液,冻存Neurog3-cre和Itgax-cre雄鼠精子,采用相同方法复苏精子.同时,以两种cre小鼠的背景鼠C57BL/6J作为对照组,另选用ICR和FVB小鼠用两种冷冻液冻存并复苏精子,进行体外受精,统计受精率来评价精子冷冻效果.结果 以R18S3冷冻并复苏的两种ere小鼠及野生型C57BL/6J的精子体外受精率分别为10.5％,11.6％和12.0％,无显著差异.以R18S3＋MTG冷冻并复苏的精子体外受精率分别为66.4％,62.5％和67.6％,相对传统冷冻液有显著提高.ICR和FVB小鼠用改良精子冷冻液前后的体外受精率分别是34.1％,46.7％和65.7％和70.2％,后者都有所提高.结论 改良后的R18S3＋MTG冷冻液能明显提高以C57BL/6J为背景的cre转基因小鼠冷冻后精子的体外受精率,对ICR和FVB品系的小鼠的体外受精率也有提高.     

免疫珠试验检测抗精子抗体技术在体外受精-胚胎移植中的应用

对17对不明原因不育夫妇作了免疫珠试验以测定抗精子抗体,发现1例女性血清IgA抗精子抗体阳性;IgA免疫珠在活动精子头部的结合率达46％。该例先前作了IVF—ET治疗失败;回收的三个卵母细胞在自身血清制备的培养基中无一受精。故认为免疫珠试验测精子抗体技术可作为IVF—ET治疗前的一项常规检查,以排除不孕的免疫因素。     

不孕夫妇精子－宫颈粘液体外穿透试验与其他不孕因素的关系研究

应用玻片法精子－宫颈粘液穿透试验检测３５０例不孕夫妇。结果显示，不孕夫妇穿透试验评分差和阴性者占６０％。３６例为各项检测正常，仅穿透试验评分差，占１０％。穿透试验评分优良的比率与精子活率、向前直线运动精子的比率以及女性血清抗精子抗体阳性的比率有关。     

肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物发光法（ATP-TCA）检测技术在化疗中的应用（简报）

肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物发光法(ATP-TCA)，是近年发展起来的针对恶性实体肿瘤有较高可评估率的新方法。ATP-TCA法的检测原理：由于ATP是活细胞最基本的能量来源，其水平与活细胞数呈正相关线性关系。用荧光素-荧光素酶试验定量测定细胞内源性ATP的含量，荧光酶在有氧条件下，可以和底物结合后催化ATP转变成ADP，并且释放出荧光(波长562mm)。通过测定内源性ATP的含量所产生的荧光强度，直接反映出细胞的数量。     

改良式电动洗胃法的洗胃效果评价

目的:观察改良式电动洗胃法的洗胃效果。方法:将68例口服毒物需洗胃的患者随机分为传统的电动洗胃法组(传统组)和改良式电动洗胃法组(改良组),后者延长胃管插入长度,并在洗胃循环中增加引流,及时排出胃内残留液。结果:改良组总洗胃时间为(25.50±5.35)min,较传统的电动洗胃法组[(42.64±7.65)min]明显缩短(P=0.01)。洗胃过程中胃内液体自患者口鼻腔涌出改良组为0,而传统组为6例(P=0.025);洗胃术后2 h患者出现呕吐、腹痛不良反应改良组为3例,而传统组为8例(P=0.031)。结论:改良式电动洗胃法不仅使洗胃时间缩短,而且洗胃过程中的不良反应减少,可在临床推广应用。     

辅助孵化技术（激光法）在体外受精-胚胎移植中的应用价值

目前,随着胚胎体外培养技术的日益成熟,体外受精一胚胎移植（Invitrofertilizationandembryotransfer,IVF—ET）在控制性超排卵、体外受精和胚胎移植等技术方面有了很大的提高,虽然IVF—ET的临床妊娠率目前达到40—60％,但是胚胎种植率较低一直影响着IVF—ET的成功率。近年来的研究发现胚胎不能从透明带中孵出可能是种植失败的原因之一。目前,较多的研究认为辅助孵化技术（AssistedHatching,AH）能够克服透明带硬化,提高胚胎孵化率和妊娠率,由于激光辅助孵化法具有精确控制、操作简便、快速、安全等特点,     

活血化瘀法预处理对输卵管性不孕体外受精-胚胎移植（IVF-ET）妊娠结局的影响

目的〓观察中药活血化瘀法预治疗对体外受精-胚胎移植超促排卵周期妊娠结局的影响。方法〓将413例因输卵管因素行IVF-ET的患者随机分为中药+控制性超促排卵组198例（试验组）和单纯控制性超促排卵组215例（对照组）。观察两组生化妊娠率,临床妊娠率,活产率,流产率,异位妊娠率等,做相关性分析。结果〓试验组和对照组生化妊娠率分别为61.11%和58.14%（P>0.05）;临床妊娠分别为56.57%和55.81%（P>0.05）;活产率分别为51.52%和45.58%（P>0.05）;宫外孕妊娠率分别为0.89%和1.67%（P>0.05）;流产率分别为8.04%和16.67%（P<0.05）。结论〓对输卵管性不孕行IVF-ET患者用中药活血化瘀法预处理可降低输卵管性不孕患者IVF-ET中的流产率,但对生化妊娠率、临床妊娠率、活产率、异位妊娠率无明显影响。     

基于偏最小二乘法（PLS）构建大型突发公共卫生事件创伤预后预测

目的采用汶川大地震后一组伤员救治医疗数据,以偏最小二乘（partial least square,PLS）算法为核心,探讨影响因素并构建一种新的大规模突发公共卫生事件创伤救治预后预测模型。方法以四川省医学科学院.四川省人民医院2008年5月收治的地震伤员数据库作为建模资料来源作为训练集,建模过程包括成分提取和建立回归方程,模型优度判别采用交叉检验。运算平台采用EXCEL和Matlab软件。结果通过相关性分析得到9个因素的相关性,VIP值得到5个影响结局的重要因素,并建立了大规模突发公共卫生事件创伤救治预后预测模型。结论本研究构建的以PLS算法为基础的模型,能可靠的帮助筛选大规模公共卫生事件中创伤患者预后预测的关键性影响因素以及综合评价指标。     

9－（N~（4′）取代乙醛缩氨基硫脲）腺嘌呤衍生物的体外抗病毒作用

为筛选有效的抗疱疹病毒药物，将新合成的９种９－（Ｎ４′取代乙醛缩氨基硫脲）腺嘌呤（ＴＳＣ－Ａ）在体外做了抗单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）试验。结果表明，当取代基为苄基和羟乙基时，抗病毒作用明显，最小抑毒剂量分别为４０μｇ／ｍｌ和２０μｇ／ｍｌ。提示苄基和羟乙基为活性基团，可能是化学结构的关键部位。当与无环鸟苷联合应用时，呈现出协同效应，６μｇ／ｍｌ和２μｇ／ｍｌ即有抗病毒作用。对ＴＳＣ－Ａ抗ＨＳＶ作用机理以及与无环鸟苷结合应用时产生的协同效应机理进行了探讨。     

化学发光微粒子免疫法检测人附睾蛋白方法学性能评价

目的 对Abbott Architect i2000SR检测系统应用化学发光微粒子免疫技术定量测定人附睾蛋白（HE4）的分析性能进行评价。方法 参考美国临床实验室标准化协会（NCCLS）文件,制定定量检测方法的方法学评价方案,通过Abbott Architect i2000SR检测系统测定HE4的批内精密度、批间精密度、线性范围、携带污染率和参考区间。结果 低、高值混合血清批内精密度CV分别为1.80%、 2.34%;批间精密度CV分别为2.03%、 2.70%;线性范围为19.8~1573.5 pmol/L;携带污染率为-0.02%;参考区间为0.0~140.0pmol/L。结论 Abbott Architect i2000SR检测系统测定HE4的精密度好、线性范围宽、携带污染率低,参考区间与厂家提供的一致,检测性能可满足临床要求。     

人骨髓成骨细胞培养法的改良及其体外成骨能力

目的：探讨简便、易行的人达成骨细胞体外培养方法,研究骨髓基质在体外培养条件下的成骨能力。方法：抽取人骨髓组织,梯度离心后置于含１００ｍＬ／Ｌ小牛血清的ＤＭＥＭ培养液中,培养２４小时换液,稳定伟代后改用含地塞米松和β－甘油磷酸钠的条件增大２液,用倒置显微镜观察、组织化学染色、四环素荧光标记等方法进行观察。结果：传代细胞４天～５天即可传代,在条件培养液中２ＷＫ形成多层结构,并聚集成黑色结节。培养细胞Ａ     

白血病化疗药物MTT法体外敏感试验的临床意义（附14例分析）

应用ＭＴＴ法对１４例白血病患者进行了ＤＮＲ、Ｈａｒ、Ａｒａ－ｃ、ＶＣＲ、ＡＤＭ和ＶＰ＿（１６）等６种常用化疗药物的体外敏感试验及临床观察。按体外药敏结果选择药物组成方案进行化疗，杀伤指数＞５５％者占６６．７％，未按药敏结果组成方案进行化疗，杀伤指数＞５５％者仅占２５％，二者差异有显著性，表明体外药敏与临床用药间有一定关系。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子（rh-aFGF）在激光治疗创面修复的效果评价

目的：对应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)对接受激光治疗的患者实施创面修复治疗的临床效果进行研究。方法抽取该院于2013年11月-2014年11月收治的激光治疗患者82例,以就诊时间先后顺序分成对照组与治疗组,对照组采取百多邦与红霉素联合方式,观察组采取rh-aFGF方式,而后对这两组患者的治疗效果进行对比分析。结果治疗组患者创面愈合时间（5.10±1.67）d、创面皮肤外观复常时间（35.48±4.26）d、创面修复治疗计划实施总时间（10.32±3.65）d明显短于对照组(8.69±2.44）、（46.93±5.67）、（13.28±3.41）d;激光治疗创面修复治疗效果(总有效率92.7%)明显优于对照组（总有效率70.7%）;创面修复治疗期间出现水肿、渗出、红斑及疼痛灼烧的人数明显少于对照组。结论应用重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-aFGF)对接受激光治疗的患者实施创面修复治疗的临床效果非常明显。     

托槽改良粘结法预防牙釉质脱矿效果的评价

目的比较改良法与传统法粘结托槽在预防牙釉质脱矿方面的差异。方法选择群耕口腔固定矫治患者40例（共716颗牙）,男16例,女24例,年龄12～30岁平均年龄14.3岁。将所有要粘托槽的牙齿按中线分为试验组和对照组,实验组用改良法粘结托槽,对照组用传统法粘结托槽,待矫治结束后拆除固定矫治装置观察釉质脱矿的发生情况。结果试验组的釉质脱矿发病率低于对照组,差异具有显著性意义（P〈0.05）。结论表明在固定矫治中,托槽改良粘结法是一种简便且有效降低牙釉质脱矿的方法。