黄芩苷对耐药性金黄色葡萄球菌的抑菌作用研究

目的:研究黄芩苷对耐药性性金黄色葡萄球菌的抑菌作用。方法:通过体外对耐药性性金黄色葡萄球菌的抑菌试验及体内对耐药性性金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用,观察黄芩苷的抑菌作用。结果:体外试验表明黄芩苷、复方磺胺甲噁唑(SMZ-TMP)对耐药性金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别是2 mg/m、l0.45 mg/m。l体内试验表明黄芩苷(100 mg/kg)可以降低耐药性金黄色葡萄球菌感染小鼠的死亡率。结论:黄芩苷对耐药性金黄色葡萄球菌有抑菌作用。     

重组溶葡萄球菌素对烧伤创面分离的金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性评估

目的 评估重组溶葡萄球菌素对烧伤创面分离的金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性.方法 收集烧伤创面分离的金黄色葡萄球菌共171株.采用琼脂稀释法测定临床烧伤常用药物万古霉素、红霉素、克林霉素、头孢西丁及磺胺甲噁唑对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC);根据头孢西丁的MIC值区分耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA);根据万古霉素、红霉素、克林霉素、磺胺甲噁唑的药物敏感试验结果对金黄色葡萄球菌进行耐药性分析.采用微量肉汤稀释法检测重组溶葡萄球菌素对金黄色葡萄球菌的MIC,计算50％最低抑菌浓度(MIC50)和90％最低抑菌浓度(MIC90).结果 根据药物敏感试验结果,收集的171株金黄色葡萄球菌对磺胺甲噁唑、红霉素、克林霉素和万古霉素的耐药率分别为99.4％、88.3％、87.1％和0,其中MRSA有146株(占85.4％).重组溶葡萄球菌素对金黄色葡萄球菌的MIC范围为0.015～0.5 U/mL,MIC50为＜0.015 U/mL,MIC90为0.03 U/mL.结论 重组溶葡萄球菌素对金黄色葡萄球菌具有较好的体外抗菌活性.在金黄色葡萄球菌耐药性日益增强的情况下,对于临床烧伤创面感染的预防和治疗,重组溶葡萄球菌素是一种极具开发潜力的新药.     

黄芩素对金黄色葡萄球菌生物膜抑制作用的体外研究

目的研究黄芩素(Baicalein)对金黄色葡萄球菌(S.a)早期、成熟生物膜(biofilm,BF)的抑制作用。方法以编号为17546金黄色葡萄球菌为实验菌株,构建体外BF模型。分为空白对照组、实验组(黄芩素组),二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC);荧光显微镜观察载体表面BF形态;连续稀释法行活菌计数。结果建模3 d,荧光显微镜发现黄芩素终浓度分别为128μg/mL、64μg/mL、32μg/mL的实验组形成BF明显少于空白对照组,载体表面活菌计数(x±s,log10CFU/mL)分别为4.00±0.27、4.24±0.31、5.26±0.45,均少于空白对照组活菌计数5.69±0.18(P<0.05);建模7 d荧光显微镜观察,黄芩素终浓度分别为128μg/mL、64μg/mL、32μg/mL的实验组仅见少许散在生物膜,BF结构较空白对照组明显稀薄,其BF内细菌活菌计数(x±s,log10CFU/mL)分别为4.04±0.12、4.69±0.41、5.63±0.10亦均少于空白对照组活菌计数6.08±0.10(P<0.05)。结论黄芩素在体外可以抑制金黄色葡萄球菌生物膜的形成。     

枫香树叶对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌抑菌作用的观察

目的:探讨枫香树叶对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的体外抑菌作用.方法:采用琼脂扩散法和试管连续稀释法测定枫香树叶对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的体外抑菌作用及最低抑菌浓度.结果:枫香树叶对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌皆有抑菌作用,抑菌圈直径在14～25mm之间.不同方法提取的药液的抑菌作用有明显差别,其中枫香树叶水煎液抑菌作用最好, 对金黄色葡萄球菌(标准菌株和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌)、绿脓杆菌(标准菌株及其临床多重耐药菌株)的最低抑菌浓度分别为0.5g/ml、1g/ml、0.25g/ml、0.125g/ml.结论:枫香树叶对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌具有较好的抑菌作用,可为临床治疗由金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌引起的感染提供参考依据.     

甜菜碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抑菌效果的实验研究

目的研究甜菜碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性。方法采用试管二倍稀释法进行体外抑菌试验,测定甜菜碱对MRSA和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。结果甜菜碱对MRSA的最小抑菌浓度平均为14.2 g/L,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为12.5 g/L。结论甜菜碱对MRSA有抑菌作用,且与金黄色葡萄球菌的抑菌效果无差异。     

亚抑菌浓度的抗生素对金黄色葡萄球菌杀白细胞素表达及释放的影响

目的：观察亚抑菌浓度抗生素对金黄色葡萄球菌(金葡菌)杀白细胞素(PVL)表达的影响。方法利用 PCR筛选出8株 PVL 阳性金葡菌。常量稀释法测定克林霉素、替加环素、利奈唑胺和万古霉素最低抑菌浓度值(MIC);荧光定量 PCR 测定前3种抗生素对 PVL 阳性金葡菌在1/8、1/4、1/2 MIC 作用下 PVL mRNA 相对变化。 ELISA 法测定4种抗生素1/4、1/2 MIC 时 PVL 蛋白含量。结果克林霉素、利奈唑胺和替加环素在1/8、1/4、1/2 MIC 时均可降低 PVL表达。 PVL mRNA 在3种抗生素作用下分别降低17%~82%、8%~85%和11%~78%;PVL 蛋白水平在1/4、1/2 MIC 克林霉素和利奈唑胺作用下,分别下降了65%和83%、40%和61%,替加环素仅1/2 MIC 时降低较明显,达64%。万古霉素不影响 PVL 表达。结论不同抗生素亚抑菌浓度时对 PVL 表达影响不同。克林霉素和利奈唑胺可明显降低PVL 表达,且呈剂量依赖性,替加环素只在较高浓度时抑制PVL 表达,万古霉素对 PVL 表达无影响。     

连翘不同提取液对金黄色葡萄球菌体外抑制作用研究

目的:了解连翘不同提取液在体外对金黄色葡萄球菌的抑制效果。方法:将连翘洗净、烘干、粉碎成粗粉,分别用水、30%乙醇、50%乙醇、70%乙醇、95%乙醇连续回流提取,提取液浓缩成相当于原药材1 mg/mL的药液,将药液处理后,制成含药滤纸片,采用纸片法,以抑菌环大小为参考指标,观察抑菌效果,确定最佳提取溶剂及提取工艺。结果:连翘用10倍量95%乙醇回流提取3次,每次1 h,所得药液的抑菌效果最佳。结论:优选得到的提取工艺确实可行,便于连翘生产质量的控制。     

苦参、绿茶及紫苏叶提取物联用对金黄色葡萄球菌的体外活性研究

[目的]考察苦参、紫苏叶和绿茶联合应用对金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性,为预防和治疗金黄色葡萄球菌感染的中药制剂的研发提供实验基础。[方法]采用琼脂稀释法测定了苦参、绿茶及紫苏叶提取物对金黄色葡萄糖球菌的抑菌活性,并用棋盘微量肉汤稀释法测取苦参提取物分别与绿茶及紫苏叶提取物联合用药时的最低抑菌浓度(MIC),并计算出分级抑菌指数(FIC)。[结果]苦参提取物、绿茶提取物和紫苏叶提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为0.025 0、0.250 0、0.312 5 g/L。苦参提取物与紫苏叶提取物的联合抑菌实验结果:分级抑菌指数FIC=1.5,表现为无关作用。苦参生物碱提取物与茶叶提取物对金黄色葡萄球菌的联合抑菌实验结果:分级抑菌指数FIC=0.75,表现为相加作用。[结论]苦参、紫苏叶和绿茶的提取物均对金黄色葡萄球菌具有良好的抑制活性,茶叶提取物与苦参提取物联合应用具有相加作用。     

黄芩苷及联合左氧氟沙星对金黄色葡萄球菌早期生物膜的体外影响

目的 探讨黄芩苷及联合左氧氟沙星(LFX)对金黄色葡萄球菌(S.a)生物被膜(BF)的影响.方法 以临床分离S.a菌株17546为实验菌株,构建生物膜体外模型;分为空白组、黄芩苷组、LFX组、黄芩苷+LFX组;二倍稀释法测定药物的最低抑菌及杀菌浓度;连续稀释法行活菌计数;激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)及扫描电镜(SEM)观察BF形态.结果 S.a17546培养3d后可形成早期的BF.药物作用12h后BF内活菌计数示:LFX、黄芩苷单独作用与空白组相比,差异无显著性(P＞0.05);但与空白组、LFX单独作用组相比,黄芩苷+LFX组活菌计数均明显减少(P＜0.05).CLSM示黄芩苷+LFX组与空白组、LFX单独作用组相比,死菌明显增多.SEM示黄芩苷+LFX组与空白组、LFX单独作用组相比菌数及胞外基质均显著减少.结论 黄芩苷在体外对S.a BF具有破坏作用,与LFX联合应用,可显著增强LFX对BF的杀菌作用.     

藏药六味丁香丸对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及机制探讨

目的 研究藏药六味丁香丸对金黄色葡萄球菌的抑菌作用并阐明相关抑菌机制,为其临床应用提供理论依据。方法 采用平板打孔法检测六味丁香丸对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,通过倍比稀释法测定最小抑菌浓度范围。绘制药物作用36h的细菌生长曲线。利用扫描电镜观察细胞形态变化和细胞壁通透性实验阐述其抑菌机理。结果 六味丁香丸800mg/mL对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径达到(21.8±2.36)mm,最小抑菌浓度介于12.5～25mg/mL;药物可以显著抑制细菌生长增殖,能够使细胞形态发生改变和细胞通透性增加。结论 六味丁香丸对耐药性金黄色葡萄球菌具有显著抑菌作用,具有潜在的临床应用价值。      

黄芩主要成分体外抗甲型流感病毒作用的研究

目的比较黄芩的主要成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素体外抗甲型流感病毒FM1感染的作用,明确黄芩抗流感病毒的主要有效成分。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对狗肾细胞株(MDCK)的最大无毒浓度(TC0)及半数中毒浓度(TC50),通过细胞病变效应(CPE)法观察药物对病毒致细胞病变作用的影响。MTT法检测药物不同浓度的抗病毒有效率,Probit回归法计算黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对病毒感染的半数抑制浓度(IC50)及治疗指数(TI),荧光法检测黄芩苷对病毒神经氨酸酶活力的影响。结果黄芩苷对流感病毒所致的细胞病变作用有明显的抑制作用,当黄芩苷浓度在0.0156～0.1250g/L时,细胞存活率明显高于病毒感染组,其中以0.1250g/L组的细胞存活率最高,抗病毒有效率达94.6%,其IC50为0.0162g/L,TI为21.34;黄芩素对流感病毒所致的细胞病变有一定的抑制作用,当黄芩素浓度在0.0860g/L时,抗病毒有效率达48.72%,其IC50为0.0778g/L,TI为8.89;汉黄芩素对流感病毒所致的细胞病变无抑制作用,其IC50为0.0236g/L,TI为0.051。当黄芩苷浓度?0.0313g/L时,能明显降低病毒神经氨酸酶的活力。结论黄芩主要成分中抗流感病毒的作用为黄芩苷黄芩素汉黄芩素,说明黄芩抗流感病毒的主要有效成分是黄芩苷。     

苦瓜总皂甙对金黄色葡萄球菌抑制作用的研究

目的 研究苦瓜总皂甙的抑菌作用及抑菌条件,为生产实践提供理论依据.方法 通过滤纸片法和试管法考察苦瓜总皂甙对金黄色葡萄球菌的抑菌效果及确定最低抑菌浓度.以pH值、温度和时间为考察因素,研究苦瓜总皂甙抑菌稳定性.通过对比试验观察金黄色葡萄菌生长曲线的变化.结果 苦瓜总皂甙对金黄色葡萄球菌的抑制作用明显,最低抑菌浓度为30 mg/mL,抑菌最适pH值范围5～8苦瓜总皂甙的热稳定性好,在121 ℃处理10 min仍具有较好的抑菌活性,对数生长期的金黄色葡萄球菌对苦瓜总皂甙较敏感,而对接近稳定期的菌体抑制作用较弱.结论 苦瓜皂甙抑菌效果明显,稳定性高,安全,有很高实用价值.     

基于刃天青微平板法检测金黄色葡萄球菌对天然产物的敏感性

[目的] 以刃天青为检测试剂,评价大黄酸、棉子酚、盐酸小檗碱、兰雪醌、槲皮素5种天然产物对金黄色葡萄球菌的抑制作用。[方法] 比较刃天青浓度、菌悬液浓度、培养基种类和反应时间对吸光值的影响,优化刃天青的工作条件。刃天青法进行药敏性实验得到五种天然产物的最低抑菌浓度（MIC）,求得毒力回归方程、相关系数（R²）和半抑菌浓度（IC₅₀）。通过Z值判断刃天青显色法适用于高通量筛选药物的可行性。[结果] 当刃天青孔内终浓度为20μg/mL,培养基为LB,菌悬液浓度为5×10⁵CFU/mL,反应时间9h时适用于金黄色葡萄球菌的药敏性实验。刃天青显色法与微量肉汤法检测得到的五种天然产物的抑菌结果具有一致性。[结论] 五种天然产物均具有一定的抑菌活性。刃天青显色法具有准确性好、灵敏度高及高通量的特点,适用于天然产物抗菌活性的筛选。     

苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抗菌作用的实验研究

目的:研究苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性。方法:采用液体稀释法测定苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)的最小抑菌浓度(MIC)。结果:苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为31.6g/L,对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为22.5g/L。结论:苦参碱对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌均具有一定的抑菌作用,且敏感性无差异。     

芒果苷对金黄色葡萄球菌诱导肺炎的作用研究

目的 探究芒果苷对金黄色葡萄球菌诱导的肺炎的影响及对NF-KB信号通路的作用.方法 将50只Balb/c雄性小鼠采用随机数字法分为5组,每组10只:分别为对照组、金黄色葡萄球菌组、芒果苷(15、30、60 mg/kg)组.金黄色葡萄球菌诱导造模1 h后,芒果苷组给予腹腔注射芒果苷.12 h后,收集各组肺泡灌洗液、小鼠肺...     

Sub—MIC抗生素对金黄色葡萄球菌的作用 1、金黄色葡萄球菌经头孢噻唑最小抑菌浓度作用后对血液杀菌作用的变化

本文报导了30株金黄色葡萄球菌(金葡菌)经次最小抑菌浓度(Su b—MIC)抗生素作用前后,分别进行了血液杀菌作用的抗性试验。结果,经 Sub—MIC 抗生素作用的金葡菌易被血液免疫系统处理,存活菌的百分率经统计学处理,差异非常显著P<0.001,从而加深了对抗生素抗菌作用的理解,丰富了对抗生素作用机制的认识,对指导临床良好的选择和应用抗生素,都有一定的意义。     

五环三萜类柴胡皂苷单体抗耐红霉素金黄色葡萄球菌活性研究

目的探讨柴胡抗菌有效成分五环三萜类活性单体Bp3的抗耐红霉素金黄色葡萄球菌（ERSA）作用及其与红霉素的协同作用。方法参照美国临床实验室标准化委员会标准,测定Bp3对20株ERSA的最低抑菌浓度值（MIC）及其与红霉素的协同作用。结果 Bp3对ERSA的抑菌作用优于红霉素,且联合用药时显著减少了每一药物的MIC。20株耐红霉素黄色葡萄球菌均表现为协同或相加作用方式。结论结构明确的五环三萜类单体Bp3对ERSA有一定的抑制作用,且与红霉素有协同或相加作用。     

肺炎链球菌溶血素的体外表达及活性鉴定

目的 体外扩增肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)的溶血素(pneumolysin,ply)基因,在大肠杆菌中高效表达,并验证其生物活性.方法 分离培养D39型肺炎链球菌并提取其基因组DNA,采用PCR技术体外扩增ply基因,体外重组将ply序列克隆到原核表达载体pET28(a)内,测序鉴定后将重组子转化到E.coli Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导大量表达融合6个组氨酸标签的Ply重组蛋白,经Ni-NTA树脂纯化后,获得的重组蛋白经SDS-PAGE鉴定后检测其溶血活性和细胞毒性.结果 克隆的ply序列与GenBank中的数据相符,并实现了Ply蛋白的可溶表达.所获重组蛋白纯度达到95%.溶血实验显示 Ply对人红细胞具有极高的溶血活性,与对照组相比较差异有统计学意义(P＜0.05),并呈剂量依赖.细胞毒实验显示Ply对脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)细胞具有明显抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),并呈剂量与时间依赖性,IC50(24h)为1.525 μg/ml.结论 经测序鉴定ply基因正确扩增,并成功表达、纯化出具有高溶血活性和细胞毒性的Ply蛋白.     

芒果核提取物体外抑菌作用的研究

0 引言 随着抗生物药物的广泛应用,微生物耐药性已成为全球关注的严峻问题. 由于多重耐药菌、多重感染以及许多新的病原微生物引起的感染对人类健康造成极大威胁,且日趋严重,我们从临床工作中观察到部分纯天然抗生物药物有很好的抗菌疗效,现将其中之芒果核提取物作体外抗菌作用研究,为临床应用提供一定药理学基础.