枸杞多糖促进大鼠海绵体神经损伤修复的实验研究

<正>前列腺癌根治术及某些盆腔手术操作中损伤海绵体神经(cavernous nerves,CN)是术后产生勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的主要原因~([1])。CN损伤后,早期的氧化应激反应在CN损伤导致ED的发病机理中起重要作用~([2])。枸杞多糖(Lyceum Barbarum Polysaccharides,LBP)是枸杞子的主要活性成分,具有明显的抗氧化及神经保护等作     

枸杞多糖对糖尿病大鼠阴茎海绵体氧化应激损伤的保护作用

目的探讨枸杞多糖(LBP)对糖尿病大鼠阴茎海绵体氧化应激损伤的保护作用。方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型,随机设立糖尿病组(DM组)、枸杞多糖灌胃组(LBP组),并设立正常对照组(NC组)。8周后通过APO试验检测勃起功能,硫代巴比妥酸法检测阴茎海绵体组织内丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测阴茎海绵体组织内超氧化物歧化酶(SOD)含量,光镜下观察阴茎海绵体组织Masson染色病理切片中胶原纤维、平滑肌纤维的差异。结果与NC组比较,DM组大鼠勃起次数明显减少(P0.05),阴茎海绵体组织内MDA含量显著增高(P0.05),SOD含量明显减少(P0.01);大鼠阴茎海绵体组织平滑肌部分断裂,数目减少,胶原纤维菲薄,结构破坏,排列紊乱。经灌胃8周后,LBP组与DM组比较:勃起次数增多(P0.05),大鼠阴茎海绵体组织中MDA含量降低(P0.05),SOD含量明显增加(P0.01),光镜下观察阴茎海绵体组织结构改善。结论实验证实,LBP可以减轻糖尿病大鼠阴茎海绵体氧化应激损伤,修复部分组织结构,改善大鼠勃起功能。     

碱性成纤维细胞生长因子促神经再生的实验研究

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对神经再生的影响。方法：用硅胶管桥接大鼠坐骨神经６ｍｍ长的缺损，管内注入生理盐水稀释的ｂＦＧＦ，对照组注入等量的生理盐水，分别于术后１、３、５周作神经电生理检查及组织形态学检查。结果：ｂＦＧＦ组运动神经传导速度、复合肌肉动作电位振幅、神经纤维密度、轴突直径、髓鞘厚度均优于对照组。结论：ｂＦＧＦ能促进神经再生。     

枸杞多糖延缓小鼠皮肤衰老的实验研究

目的：研究枸杞多糖（Lyciumbar barum polysaccharides,LBP）对D-半乳糖拟衰老小鼠皮肤组织的延缓皮肤衰老作用。方法：80只2月龄昆明种小鼠随机分为四组：正常组（N）、衰老模型组（C）、低剂量LBP抗衰老组（L）和高剂量LBP抗衰老组（H）。衰老模型组与抗衰老用药组每日颈背皮下注射D-半乳糖溶液制造衰老模型。抗衰老用药组在注射D-半乳糖期间以LBP灌胃。42天后取小鼠背部皮肤检测。结果：衰老模型组、低、高剂量LBP抗衰老组小鼠皮肤含水量、表皮厚度、真皮厚度以及成纤维细胞数与正常对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）,组间两两比较差异有统计学意义。结论：D-半乳糖诱导的亚急性衰老模型是可靠的衰老实验动物模型,枸杞多糖能延缓皮肤衰老。     

化学去细胞异体神经促神经再生的体外实验研究

[目的]对大鼠化学去细胞异体神经蛋白成分进行电泳分析,观察去细胞异体神经中的蛋白组分;制备去细胞神经薄膜,接种背根神经节,观察其结构对神经生长的影响。[方法]按Sondell法制备大鼠的去细胞异体神经,将制备好的神经进行电泳分析,观察28～30 kDa区域的髓鞘蛋白的去除程度;将制备的神经进行冰冻切片,接种鸡胚背根神经,进行神经纤维荧光染色,观察神经纤维在神经切片上的生长方向。[结果]去细胞异体神经电泳结果显示:28～30 kDa区域髓鞘蛋白完全消失,化学萃取的去细胞神经可以完全去除髓鞘蛋白;背根神经节发出大量的神经纤维沿着去细胞神经基底膜管方向生长。[结论]去细胞异体神经中无残留引起免疫反应的髓鞘蛋白,保留的基底膜管结构对促神经纤维再生具有引导性作用。     

FK506对大鼠阴茎海绵体神经再生影响的研究

目的:探讨FK506对大鼠阴茎海绵体神经损伤后再生的影响,并讨论其作用的可能机制。　方法:54只 SD雄性大鼠随机分成3组,即假手术对照组(简称对照组,n=24)、单侧阴茎海绵体神经切断组(简称单切组,n= 24)、单侧阴茎海绵体神经切断+FK506组(简称FK506组,n=6)。术后1、3个月电刺激阴茎海绵体神经并连续监 测阴茎海绵体内压变化及阴茎勃起情况,同时取阴茎海绵体组织采用NADPH d法观察一氧化氮合酶(nNOS)阳性 神经纤维的再生情况。　结果:术后1个月单切组nNOS阳性神经纤维数量明显减少,与对照组相比差异有极显 著性(P<0.01),术后3个月在电刺激未切断侧阴茎海绵体神经时,FK506组比单切组产生更大的最大海绵体内压 (P<0.01),且单切组阴茎海绵体组织中nNOS阳性神经纤维比术后1个月无明显增加(P>0.05),而FK506组 nNOS阳性神经纤维显著增加(P<0.01)。　结论:FK506皮下注射能促进大鼠损伤的阴茎海绵体神经再生,促进 勃起功能恢复。     

神经生长因子促神经再生的研究进展

神经生长因子(Nerve Growth Factor,NGF) 是最早被发现、兼有神经元营养和促突起生长双重生物学功能的一种细胞调节因子。它对中枢和周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用,可促进受损神经再生、免受继发性损害、减少细胞死亡、支持神经元存活。本文就NGF的作用机理,对神经系统的生物效应,对神经再生的影响及外源性神经生长因子的应用途径等相关研究进展作一综述。     

雪旺细胞促神经再生的研究进展

本文就周围神经损伤后雪旺细胞的促进轴突髓鞘化作用，促进神经肌肉接口处的引导作用和神经细胞的细胞间作用等方面进展作一综述。     

海绵体神经损伤后阴茎组织氧化应激的变化

目的探讨大鼠双侧海绵体神经(CN)钳夹损伤后阴茎组织氧化应激的变化规律。方法 56只SD雄性大鼠随机均分成假手术组、双侧CN钳夹损伤组。分别于术后第1、2、4、12周每组7只大鼠分别取阴茎组织采用蛋白印迹法来检测谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)及3-硝基酪氨酸(NT-3)的蛋白表达水平。术后12周进行电刺激CN来观察海绵体内压的变化以反映其勃起功能,随后取CN干进行甲苯胺蓝染色观察有髓鞘轴突的数目变化以了解神经再生情况。结果与假手术组相比,钳夹损伤组GPX表达在术后第1周和2周明显增加(P0.05),在术后第4及12周基本下降至正常水平;NT-3表达在术后第1、2、4周明显增加(P0.05),在术后第12周基本下降至正常水平。术后3个月,钳夹损伤组最大海绵体内压为(52.4±11.2)cmH2O,明显低于假手术组(102.5±9.0)cmH_2O(P0.05)。甲苯胺蓝染色显示损伤组的有髓鞘轴突为(59.9±15.9)个,明显低于假手术组(180.6±27.7,P0.05)。结论海绵体神经钳夹损伤后早期阴茎组织氧化应激反应明显,提示在海绵体神经损伤后勃起功能障碍的发病过程中,氧化应激起重要作用。     

阴茎海绵体压力测定的方法学实验研究

为建立阴茎海绵体压力测定方法，并探讨其测定条件及影响因素，对９例主诉阳萎的志愿者进行ＣＭ及药物性化学假体压力测定，分别采用不同诱导灌注流率，不同剂量血管扩张剂及不同海绵体压力设定进行ＣＭ及ＰＣＭ。比较ＣＭ及ＰＣＭ在上述不同测定条件下所得参数：ＩＦ，维持灌流率及压力跌差。结果表明；ＣＭ时快速与慢速灌注测得的ＭＦ差异显著，而ＰＣＭ时无显著差异。     

糖尿病大鼠海绵体神经诱发电位的实验研究

目的 :观察糖尿病 (DM)性大鼠海绵体的神经病变。　方法 :3 5只SD大鼠随机分为造模组 ( 2 5只 )和空白对照组 ( 10只 )。造模组应用腹腔内单次注射链脲佐菌素 ( 63mg/kg)制造DM模型。单波刺激海绵体神经 ,测定反射潜伏期及肌电位。　结果 :海绵体神经 海绵体平滑肌传导潜伏期中 ,DM组所需时间明显长于其他各组 (P <0 .0 1)。同时 ,与其他各组相比 ,其海绵体平滑肌电位明显升高 (P <0 .0 1)。　结论 :提示DM大鼠海绵体神经病变可能是导致勃起功能障碍的重要原因之一     

阴茎海绵体压力测定的方法学实验研究

为建立阴茎海绵体压力测定（ＣＭ）方法，并探讨其测定条件及影响因素，对９例主诉阳萎的志愿者进行ＣＭ及药物性化学假体压力测定（ＰＣＭ），分别采用不同诱导灌注流率（ＩＦ）、不同剂量血管扩张剂（罂粟碱）及不同海绵体压力（ＩＣＰ）设定进行ＣＭ及ＰＣＭ。比较ＣＭ及ＰＣＭ在上述不同测定条件下所得参数：ＩＦ、维持灌流率（ＭＦ）及压力跌差（ＰＬＣ）。结果表明：ＣＭ时快速与慢速灌注测得的ＭＦ差异显著，而ＰＣＭ时无显著差异；罂粟碱为３０及６０ｍｇ时测得的ＭＦ差异显著，ＩＣＰ设定低于系统舒张压（７．８４ｋＰａ）时ＰＣＭ测得的ＭＦ显著低于１１．７６ｋＰａ与１４．７ｋＰａ时；ＰＬＣ测定值较为稳定。结论：有ＩＦ、海绵体平滑肌扩张程度、ＩＣＰ设定值等多种因素影响ＣＭ，诊断静脉性阳萎时应采用ＰＣＭ，血管扩张剂用量应充分，ＩＣＰ设定应高于系统舒张压，使得ＰＣＭ测定条件尽量恒定，减少影响测定的因素。     

终末器官对神经再生影响的实验研究

探讨神经远端终末器官对神经再生的影响。方法：采用硅胶管桥接大鼠双侧坐骨神经，一侧硅胶管套接的远端神经连有终末器官，另一侧远端神经不连有终末器官。术后２、４、６周取标本，通过肉眼观察、光镜、电镜和轴突图象分析仪观察神经再生情况。结果：从各时间段的标本检测，在再生神经干直径，有髓纤维的密度、数目，远端神经的面积及形态学比较，两者均无显著差异。结论：远端神经连有终末器官与否虽不是影响神经能否再生的关键因素，但是终末器官对再生神经的成熟有明显的促进作用     

神经移植段对神经再生影响的实验研究

为了探讨神经移植段的方向对神经再生的影响，采用硅胶管桥接Ｗｉｓｔａｒ大鼠双侧坐骨神经，一侧硅胶管远端套接顺行神经移植段，另一侧套接逆行神经移植段，术后２，４及６周取材。     

外源性表皮生长因子促端侧吻合神经再生的研究

目的　评价外源性表皮生长因子对端侧吻合后神经远段再生的影响。　方法　选用雄性Wistar大白鼠 32只 ,随机分成 2组 ,每组 16只。EGF组 :切断右侧腓总神经 ,在邻近的胫神经干外膜上开一直径为 1mm小窗 ,将腓神经远端吻合到胫神经干侧方开窗处。右小腿外侧肌内每天注入生理盐水稀释的EGF注射液 ( 2 μg·μl-1) 0 1ml ,共用 2周 ;对照组 :吻合方法同EGF组 ,术后注射等量的生理盐水。各组分别于术后 4周、8周进行大体、组织学、形态定量学和电生理检测。　结果　端侧吻合加EGF组在各时间点 ,吻合口远段再生神经的数目、有髓神经纤维截面积、运动神经传导速度均明显优于对照组 (P <0 0 5 )。超微结构观察 :EGF组再生神经的有髓纤维数、髓鞘厚度和髓鞘的成熟度明显优于对照组。　结论　外源性表皮生长因子可以促进端侧吻合后神经远段再生和功能的恢复。     

枸杞多糖诱导人肝癌细胞Bel-7402凋亡及其周期的实验研究

目的:探讨枸杞多糖对人肝癌细胞Bel-7402凋亡及其周期的影响。方法:利用MTT染色在普通光镜下观察细胞凋亡形态学变化并观测枸杞多糖对肿瘤细胞的抑制率;通过流式细胞仪分析人肝癌细胞Bel-7402凋亡率、细胞周期变化。结果:经枸杞多糖作用后的人肝癌细胞Bel-7402出现核固缩、凋亡小体、新月状浓染区等细胞凋亡形态学改变,各剂量LBP组的肿瘤细胞均表现生长抑制,且具有剂量依赖性,1000μg/ml LBP处理组的抑制率达96.02%。药物处理组的肿瘤细胞更多地被阻止于G2/M期,各剂量组均出现明显的凋亡变化,最大凋亡率可达21.3%。结论:枸杞多糖可明显抑制人肝癌细胞Bel-7402的生长增殖,诱导细胞凋亡,并能改变该肿瘤细胞周期分布,阻止细胞周期于G2/M期。     

复合神经生长因子的纳米纤维导管促神经再生的初步研究

目的 探讨应用同轴静电纺丝技术制备复合神经生长因子的神经导管的可行性,检测神经生长因子的活性及对神经再生的作用.方法 应用同轴静电纺丝技术制备以可降解生物材料乳酸己内酯共聚物[P(LLA-CL)]为壳层材料、神经牛长冈子(NGF)和牛血清蛋白(BSA)为芯层材料的纳米纤维,纺织成神经导管复合体.模拟体内环境进行体外降解缓释8周,在不同时间点,应用PCI2细胞培养法检测缓释液中NGF的生物活性.构建大鼠坐骨神经10 mm缺损模型.分别采用自体神经移植(A组)、P(LLA-CL)/BSA/NGF导管(B组)、P(LLA-CL)/BSA导管加一次性注射NGF(C组)、P(LLA-CL)/BSA导管(D组)桥接神经断端,术后12周进行再生神经形态学等观察.结果 P(LLA-CL)/BSA/NGF导管在体外8周尚末完全降解.能够持续释放NGF,并保持牛物活性.解剖观察可见再牛神经均通过神经导管,B组再生神经的卣径最均匀一致,达到正常神经的直径.透射电镜图片显示,A组和B组神经纤维数日多、大小均匀、成熟良好,C组和D组纤维结缔组织多、神经纤维细小、髓鞘薄.结论 P(LLA-CL)/BSA/NGF导管具有良好的组织相容性和生物活性,能够诱导并促进神经再生,提高神经再牛的质量,其移植效果接近于自体神经移植.     

碱性成纤维细胞生长因子促神经再生的研究进展

１９７５年Ｇｏｓｐｏｄａｒｏｗｉｃｚ首先报道运用理化方法从牛的大脑和垂体中分离纯化出碱性成纤维细胞生长因子（ＢａｓｉｃＦｉ－ｂｒｏｂｌａｓｔＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）。８０年代,ｂＦＧＦ的氨基酸序列得到澄清。９０年代,国内外相继运用基因工程...     

海绵体神经损伤性ED大鼠模型的实验研究

海绵体神经极细 ,肉眼无法看见 ,本研究试图在显微镜下寻找大鼠海绵体神经并建立海绵体神经损伤性ＥＤ大鼠模型。材料与方法　对 2 0只雄性大白鼠进行解剖 ,8只在放大 10倍的外科显微镜下于背侧前列腺后外侧叶表面找到海绵体神经。电刺激至阴茎膨胀、勃起 ,证实其解剖学走行。将 42只雄性成年ＳＤ大白鼠随机分为假手术对照组、双侧海绵体神经损伤组及单侧海绵体神经损伤组 ,每组 14只。每只大鼠于术后 3周在颈项部皮下注射阿朴吗啡 15 0 μｇ/ｋｇ[1] ,观察 30ｍｉｎ ,重点观察其阴茎勃起情况。结果　大鼠主要盆神经节位于背侧前列腺后外侧…     

糖尿病大鼠阴茎海绵体细胞凋亡的实验研究

目的 观察糖尿病(DM)大鼠阴茎海绵体细胞凋亡,探讨DM性阴茎勃起功能障碍(ED)的发病机理。方法 本文通过四氧嘧啶(Alloxan,AXN)诱导的DM大鼠模型,饲养8周后处死动物并取阴茎海绵体。用琼脂糖凝胶电泳法进行DNA片段分析;用TUNEL法检测细胞凋亡。结果 DM组DNA片段分析出现凋亡特征性梯带。DM组较对照组勃起组织凋亡细胞数明显增多(P<0.01)。结论 DM大鼠阴茎海绵体凋亡细胞增加,细胞凋亡可能是DM性ED的发病机理。