重症急性胰腺炎大鼠丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的动态变化

目的：阐明重症急性胰腺炎时大鼠胰腺及肺脏组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路的变化规律。方法：以胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠建立大鼠重症急性胰腺炎(SAP)模型，将SD大鼠56只随机分为对照组(即造模前)、造模后0．5、1、3、6、12和24h共7组，采用Western blot法检测胰腺及肺脏组织p38MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)活性变化。结果：对照组能检测到p38MAPK的基础活性，而检测不到JNK活性。造模后，胰腺组织的p38MAPK活性明显增高，至3h达到高峰，而肺脏组织的p38MAPK活性在6h达到高峰，两者在24h点处的p38MAPK活性仍高于基础值，而JNK的活性仅在12h点处有增高，24h点已检测不到JNK活性。结论：MAPK信号转导通路，特别是p38MAPK是重症急性胰腺炎发病过程中的重要信号转导通路。     

p38丝裂原活化蛋白激酶对急性坏死性胰腺炎大鼠低钙血症的影响

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠低钙血症和甲状旁腺激素受体1(PTHR1)表达的影响.方法 将雄性SD大鼠72只按完全随机法分为ANP组、SB203580干预(SB)组和假手术(SO)组,每组分3、6、12 h 3个时间点,每个时间点8只.以5%牛磺脱氧胆酸钠逆行胰胆管注射建立ANP模型,SB组在造模前30 min腹腔注射p38MAPK特异抑制剂SB203580 10 mg/kg体重.观察各组血清钙浓度,蛋白质印迹法(Western blotting)分析骨组织磷酸化p38MAPK(P-p38 MAPK)和TNF-α变化,实时RT-PCR检测骨组织PTHR1 mRNA表达.结果 制模后6 h,SO组、ANP组和SB组血清钙浓度分别为(2.50±0.08)mmoL/L、(2.11±0.06)mmol/L和(2.35±0.10)mmol/L;骨组织P-p38 MAPK表达量分别为0.14±0.04、0.80±0.06和0.33±0.05;骨组织TNF-α表达量分别为0、0.91±0.04和0.44±0.03;骨组织PTHR1 mRNA表达量分别为1.00±0.12、0.23±0.04和0.44±0.06.SB组骨组织P-p38 MAPK及TNF-α表达较ANP组显著降低(P＜0.01);骨组织PTHR1 mRNA表达量及血清钙浓度较ANP组显著增加(P＜0.01).结论 p38MAPK信号转导通路可介导ANP低钙血症的发生,抑制该通路可改善ANP低钙血症.     

软脂酸通过丝裂原活化蛋白激酶通路促进血管内皮细胞凋亡

目的探讨软脂酸(PA)诱导的血管内皮细胞凋亡中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的作用。方法将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分对照组、PA组、MAPK通路干预组[分别先用p38抑制剂SB203580、氨基末端激酶(JNK)抑制剂PD98059、细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂SP600125干预]再分为PA+SB组、PA+PD组、PA+SP组。流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot法检测caspase-3、磷酸化p38、JNK和ERK1/2表达水平;分光光度法检测caspase-3的活性。结果与对照组比较,PA组、PA+SB组、PA+PD组、PA+SP组HUVEC凋亡及caspase-3表达和活性明显增加,PA组磷酸化p38MAPK表达明显增加(P<0.05)。与PA组比较,PA+SB组HUVEC细胞凋亡率、caspase-3表达和活性明显降低(P<0.05);而PA+PD组和PA+SP组HUVEC凋亡率、caspase-3表达和活性无明显变化(P>0.05)。结论 PA通过p38MAPK通路促进内皮细胞凋亡。     

帕金森病与丝裂原活化蛋白激酶信号通路的相关性及中医药干预作用

帕金森病（PD）是一种进行性多系统神经退行性疾病,其中黑质多巴胺能神经元丧失是其重要的病理改变。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路能调节细胞的生长、分化、凋亡、炎症等多种生理病理过程,近年来其已成为PD机制研究的热点。本文主要综述了PD与MAPK亚家族[p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶（JNK）和细胞外信号调节激酶（ERK）]的相关性及中医药干预作用,以期为PD的诊疗提供新的思路。     

丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路抑制剂对重症急性胰腺炎治疗作用的实验研究

通过既往研究,我们发现丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导通路在重症急性胰腺炎（SAP）发病的早期过程中显著活化,由此我们观察了 MAPK信号转导通路活化抑制剂CNI-1493对SAP大鼠的干预作用,探讨了CNI-1493实验性治疗SAP的疗效,为其临床应用提供实验依据.     

丹参酚酸B盐对转化生长因子β1活化的大鼠肝星状细胞内p38丝裂原活化蛋白激酶通路及其转录因子的影响

目的 探讨丹参酚酸B盐(SA-B)对转化生长因子β1(TGFβ1)活化的大鼠肝星状细胞(HSC)内p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的影响. 方法 分离并培养正常大鼠HSC,将TGFβ1和SA-B直接添加于原代HSC的无血清培养液中,用p38信号通路特异性阻断剂SB203580和细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路特异性阻断剂PD98059分别阻断HSC内p38MAPK和ERK信号通路.细胞内总的P38蛋白、MKK3/6蛋白及MEF2A、MEF2C的测定分为空白对照组、SA-B组、SA-B+ TGF β1组和TGFβ1组;磷酸化P38蛋白、MKK3/6蛋白和α-SMA蛋白的测定分为空白对照组、SA-B组、SA-B+ TGF β1组、TGFβ1组、PD98059、PD98059+ SA-B组、PD98059+ TGFβ1组和SA-B+ PD98059+ TGFβ1组;SA-B对TGFβ1刺激的HSC内MEF2和Ⅰ型胶原报道基因的影响分为突变型(mt)对照组、野生型(wt)对照组、TGFβ1组、SA-B+ TGF β1组、SA-B组、SB203580+ TGF β1组、SB203580组.Western blot法检测HSC内磷酸化和总P38蛋白、MAPK激酶3/6 (MKK3/6)蛋白、肌细胞增强因子2(MEF2)A、MEF2C、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;荧光素酶报道基因测定法检测MEF2报道基因和Ⅰ型胶原启动子的活性.多组间数据的多重比较用q检验.结果 SA-B组磷酸化P38蛋白相对表达量为0.33±0.05,明显低于空白对照组(q=7.08,P＜0.01); SA-B +TGF β1组的磷酸化P38蛋白相对表达量为0.46±0.04,明显低于TGFβ1组(q=10.45,P＜0.01);SA-B组磷酸化MKK3/6蛋白相对表达量为0.11±0.07,明显低于空白对照组(q=3.944,P＜0.05);SA-B+ TGF β1组磷酸化MKK3/6蛋白相对表达量为0.28±0.07,明显低于TGFβ1组(q=7.91,P＜0.01);SA-B+ TGFβ1组和SB203580+ TGF β1组MEF2报道基因的相对荧光素酶活性分别为2.93±0.09和2.50±0.05,均明显低于TGFβ1组(q值分别为35.35和37.2,P值均＜0.01);SA-B组MEF2C及MEF2A的相对表达量分别为15.82±0.97和13.00±0.40,均明显低于空白对照组(q值分别为5.18和13.32,P值均＜0.01);SA-B+ TGF β1组MEF2C及MEF2A的相对表达量分别为13.40±0.72和20.47±0.83,均明显低于TGF β1组(q值分别为43.93和12.52,P值均＜0.01); SA-B+ TGFβ1组α-SMA相对表达量为8.76±0.44,明显低于TGFβ1组(q=20.35,P＜0.01); SA-B+ SB203580+TGF β1组α-SMA相对表达量仅为3.57±0.49,明显低于TGFβ1组(q=39.78,P＜0.01);SA-B+ TGF β1组和SB203580+ TGF β1组Ⅰ型胶原报道基因的相对荧光素酶活性分别为1.61±0.05和1.42±0.07,较TGFβ1组明显降低(q值分别为26.4和27.62,P值均＜0.01).结论 SA-B可能通过抑制原代HSC内TGFβ 1的p38MAPK信号传导通路,抑制HSC的活化.     

活化蛋白C治疗重症急性胰腺炎机制的实验研究

目的观察重症急性胰腺炎（SAP）大鼠给子活化蛋白C（APC）后胰腺组织中血栓调节素（TM）和内皮细胞蛋白C受体（EPCR）的表达，并同时评估胰腺损伤的严重程度。方法SD大鼠随机分为SAP组（胆胰管逆行注射5％牛黄胆酸钠诱导sAP）、高剂量治疗组（诱导SAP时静脉注射50〉g／kgAPC）和低剂量治疗组（10〉g／kgAPC）以及正常对照组。于动物造模后16h取材，行胰腺组织损伤评分，胰腺湿／干重系数、血淀粉酶测定评估胰腺损伤严重度，并测定胰腺组织基质金属蛋白酶9（MMP-9），TM和EPCR蛋白及mRNA表达水平。结果胰腺损伤严重度指标在APC两种剂量治疗组均较SAP组明显减轻（P〈0．01或P〈0．05）。高剂量治疗组的MMP-9表达较SAP组明显下调（P〈0，01），EPCR和TM表达较SAP组和正常对照组上调（P〈0，01）。同时发现两种剂量APC治疗组的TM蛋白及mRNA表达呈量效关系（P〈0．01）。结论APC可能通过降低MMP-9表达，减少EPCR脱落及弱化炎症介质对TM和EPCR表达的抑制作用，而提高组织TM和EPCR的表达，能有效强化蛋白C途径在SAP中的作用，降低胰腺组织的损伤程度，因此有可能成为临床治疗疾病的新手段。     

重症急性胰腺炎肝血流动力学改变及活化蛋白C干预的影响

目的 通过CT灌注成像技术探讨SAP时肝脏的血流动力学表现,以及活化蛋白C(activated protein C,APC)对其的治疗作用.方法 SD雄性大鼠分为对照组、ANP组、APC 10μg/kg体重、50 μg/kg体重治疗组.于制模后1 h、6 h、16 h、24 h行肝脏动态CT灌注成像检查,测定局部肝血流量(BF)、血容量(BV)、平均通过时间(MTT)、表面通透系数(PS)和肝动脉指数(HAF),24 h处死动物行肝脏和胰腺病理学检查.结果 与对照组比较,ANP组BF、BV值降低,MTT值延长,PS增加,HAF值下降,以24 h点最为显著(P＜0.01).APC治疗组与ANP组比较,上述指标改善,以APC 50 μg/kg体重治疗组更明显(P＜0.01或0.05),同时肝脏组织损伤分级及胰腺组织病理分值明显降低(P＜0.01).结论 ANP大鼠肝脏存在明显的血液低灌注状态,而APC的应用可改善异常的血流动力学.     

丹参酮ⅡA磺酸钠对急性坏死性胰腺炎大鼠肺损伤的抗炎作用及其机制研究

背景:急性肺损伤是重症急性胰腺炎(SAP)早期最主要的死亡原因,减轻肺损伤可能降低SAP的死亡率。目的:研究丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对SAP相关肺损伤的抗炎作用及其可能机制。方法:36只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、急性坏死性胰腺炎(ANP)组和STS组,后两组予5%牛磺胆酸钠胰管注射建立ANP模型,STS组于造模前30 min予腹腔注射STS预处理。造模后12 h和24 h分批处死动物,行胰腺、肺组织病理学检查和肺损伤评分,ELISA法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)含量,蛋白质印迹法检测肺组织JNK、p-JNK蛋白表达。结果:ANP组肺组织实变明显,大量中性粒细胞浸润,肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β含量和JNK、p-JNK表达均显著高于同时间点假手术组(P0.05)。STS组肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-1β含量和p-JNK表达较同时间点ANP组显著降低(P0.05),JNK表达则无明显变化。结论:STS干预能下调ANP大鼠的肺组织炎症因子表达,降低肺损伤程度,其机制可能与抑制JNK信号通路激活有关。     

PIAS1对重症急性胰腺炎继发急性肺损伤血气屏障影响的研究

背景:研究发现STAT活化抑制蛋白1(PIAS1)可抑制急性坏死性胰腺炎(ANP)继发急性肺损伤,但机制尚不明确。目的:探讨PIAS1对ANP大鼠继发急性肺损伤血气屏障的作用及其机制。方法:构建重组腺病毒Ad5/F35-PIAS1和Ad5/F35-Null质粒。以3.5%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导大鼠ANP模型,并于造模前1 d分别经阴茎静脉注射Ad5/F35-PIAS1、Ad5/F35-Null和PBS液,设立假手术组作为对照。造模16 h后处死大鼠。观察胰腺和肺组织的病理学变化和超微结构改变。测定支气管肺泡灌洗液炎性细胞计数和肺组织湿/干重系数,以免疫组化法检测RECK定位表达,蛋白质印迹法检测肺组织RECK、MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达。结果:与ANP组和Ad5/F35-Null组相比,Ad5/F35-PIAS1组胰腺和肺组织病理学明显改善,肺组织病理学评分显著降低(P<0.01),超微结构示肺泡毛细血管间血气屏障结构破坏减轻;支气管肺泡灌洗液中性粒细胞和巨噬细胞计数、湿/干重系数均显著降低(P<0.01);肺组织RECK蛋白表达显著升高(P<0.01),MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达显著下调(P<0.01);Ad5/F35-PIAS1组上述指标与对照组相比均无明显差异(P>0.05)。结论:PIAS1可能通过增强RECK蛋白表达、抑制MMP-2、MMP-9、ICAM-1蛋白表达,降低血气屏障通透性,抑制炎性细胞外渗,进而改善ANP继发急性肺损伤的炎症程度。     

抑制JAK／STAT信号通路对实验性急性胰腺炎大鼠肝损伤的保护作用

背景：JAK／STAT细胞内信号通路广泛参与细胞的增殖、分化、凋亡以及炎症、肿瘤的发生等多种生理、病理生理过程，然而关于其在重症急性胰腺炎（SAP）急性肝损伤中作用的研究尚少。目的：观察抑制JAK〈STAT通路对实验性急性胰腺炎（AP）大鼠肝损伤的保护作用。方法：56只Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、3组AP模型组和3组JAK特异性抑制剂AG490干预组。以4％牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射诱导AP模型。分批处死各组大鼠，动态测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平，观察肝脏大体和组织学表现，以免疫组化染色和蛋白质印迹法检测肝组织中JAK2的定位和表达。结果：与正常对照组相比，AP模型组各时间点血清ALT、AST水平均显著升高；肝组织大体和组织学损伤随病情进展而逐渐加重；肝组织JAK2表达逐渐增强，于18h时达高峰。经AG490预处理的大鼠，上述各项指标均较同时间点AP模型组显著改善。结论：JAK2参与了大鼠实验性AP肝损伤的病理过程，抑制肝组织JAK／STAT通路活化有助于SAP急性肝损伤的防治。     

雷贝拉唑对重症急性胰腺炎患者上消化道出血的预防作用

背景:重症急性胰腺炎(SAP)是一种临床常见的危重疾病,急性胃黏膜病变引起的上消化道出血是SAP较为常见的并发症。目的:观察雷贝拉唑对SAP患者上消化道出血的预防作用。方法:30例SAP患者随机分为两组,分别予雷贝拉唑20mg每日1次口服(n=20)和法莫替丁40mg每日2次静脉滴注(n=10),疗程1周。于用药前24h至用药后72h连续监测上消化道出血的发生情况和胃内pH的变化。结果:雷贝拉唑组患者无呕血和黑粪出现,法莫替丁组有1例患者出现黑粪,发生率为10%。用药后,两组患者的胃内pH和pH>3、pH>4、pH>5的时间百分比均显著升高,雷贝拉唑组升高较法莫替丁组显著(P<0.05)。两组患者均未发生明显不良反应。结论:雷贝拉唑和法莫替丁均能升高SAP患者的胃内pH,对上消化道出血有预防作用,且无明显不良反应。雷贝拉唑维持胃内较高pH的时间较法莫替丁更长。     

早期空肠内营养在重症急性胰腺炎综合治疗中的疗效观察

背景：营养支持治疗是重症急性胰腺炎（SAP）综合治疗的重要组成部分，其方式和方法的选择对改善SAP患者全身状况、防治肠道功能衰竭、减轻全身性炎症反应、减少感染机会以及改善预后尤为重要。目的：探讨早期空肠内营养支持疗法对SAP患者病程、一般情况和预后的影响。方法：38例SAP患者随机分为肠内营养（EN）组和全胃肠外营养（TPN）组；EN组（18例）于发病早期（3～5d）胃镜下放置空肠营养管，并给予空肠内要素饮食；TPN组（20例）常规给予静脉营养支持治疗。所有患者冶疔前后定期检测血常规、血糖、肝功能、肾功能、血清白蛋向和前白蛋白水平等，并予腹部超声、CT或磁共振成像（MRI）检查以评估胰腺和腹腔病变情况等变化。结果：两组治疗前肝功能、肾功能、外周血向细胞汁数等均无显著差别。治疗2，3周后EN组白细胞恢复正常时间显著短于TPN组（P〈0.01）。EN组治疗后血清白蛋门水平和前白蛋白水平均显著高于其治疗前水平（P〈0.01和P〈0．001）和TPN组治疗后水平（P〈0．01和P〈0．001）：EN组的并发症发生率、感染率和死亡率均低于TPN组。但无显著性差异（P〉0．05）。结论：早期空肠内营养支持疗法可促进SAP患者肝脏蛋白合成，提高血清白蛋白和前白蛋白水平，并有可能降低感染率和并发症的发生率，改善SAP患者的预后。     

重症急性胰腺炎对肠黏膜屏障损伤影响的研究进展

肠黏膜屏障功能是肠道的重要特征之一,大量研究表明重症急性胰腺炎(SAP)患者易发生肠屏障功能障碍,而肠屏障功能障碍又可进一步继发感染,甚至诱发和加重全身炎症反应综合征(SIRS)、多器官功能障碍综合征(MODS)。本文就SAP对肠黏膜屏障损伤影响的研究进展作一简要综述。     

预防性应用抗生素在重症急性胰腺炎中的作用

急性胰腺炎是消化系常见急症，可分为轻症急性胰腺炎（MAP）和重症急性胰腺炎（SAP）。SAP症状较重，病死率高，患者主要死于早期毒血症、全身炎症反应综合征（SIRS）、多器官功能衰竭（MODS）等严重并发症和后期继发感染。随着重症监护、影像学、内镜检查和外科技术的发展，多数患者能度过早期SIRS、MODS等并发症，但后期继发感染仍是患者致死的主要危险因素。因此．目前早期应用抗生素能否预防SAP后期继发感染已成为研究热点。本文就预防性应用抗生素在SAP中作用的研究进展作一综述。     

肠内营养和全胃肠外营养治疗重症急性胰腺炎疗效的荟萃分析

背景：营养支持是重症急性胰腺炎（SAP）的重要治疗措施,然而目前对选择肠内营养（EN）或全胃肠外营养（TPN）治疗SAP仍存在争议.目的：系统性评价EN和TPN治疗SAP/预期SAP患者的临床效果.方法：检索MEDLINE、EMBASE、Cochrane图书馆、万方数据资源系统和中国期刊网（1966年1月～2010年4月）,纳人有关EN和TPN治疗的随机对照试验（RCT）.2名评价者对入选研究的试验设计、研究对象特征、研究结果等内容进行独立摘录,并应用RevMan 4.2软件进行荟萃分析.结果：共纳入14项RCT,包括701例患者.与TPN相比,EN能显著降低感染率（RR=0.43,95%CI：0.28～0.66,P〈0.0001）、外科干预率（RR=0.45,95%CI：0.29～0.70,P=0.0004）、器官衰竭率（RR=0.45,95%CI：0.26～0.78,P=0.004）和死亡率（RR=0.37,95% CI：0.23～0.58,P〈0.0001）.结论：EN治疗SAP优于TPN,若无EN禁忌症,应优先选择EN.     

MRI和增强CT诊断重症急性胰腺炎的比较研究

背景：CT尤其是增强CT（CECT）是判断急性胰腺炎严重程度和预后的重要方法,然而近年MRI有取代CT的趋势。目的：比较MRI与CECT诊断重症急性胰腺炎（SAP）的准确性。方法：2006年1月-2008年9月于泰州市人民医院确诊为SAP的住院患者纳入研究。回顾性分析人选患者的临床以及MRI和CECT表现,以Bahhazar分级系统评估MRI严重指数（MRSI）和CT严重指数（CTSI）。结果：共36例患者临床评估为SAP,入院2d内和第7d的MRSI与C偈I无明显差异。MRI诊断SAP的准确率高于CECT（94．4％对83.3％）,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：MRI用于SAP的诊断,效果与CECT相似且禁忌证相对较少,是判断急性胰腺炎严重程度的可靠方法。     

我国重症急性胰腺炎临床救治现状与思考

经过国内外学者的共同探索和努力,重症急性胰腺炎的治疗理念日趋完善,疗效有显著提高,尤其是内镜和微创技术的广泛应用．带来了重症急性胰腺炎治疗策略上的变化．但仍面临着巨大的历史挑战。如何进一步规范重症急性胰腺炎的治疗,提高救治成功率,同时真正规范地开展相关临床科研,提高该领域的研究质量,还需作出很大的努力.     

N-乙酰半胱氨酸预防重症急性胰腺炎的实验研究

背景：还原型谷胱甘肽（GSH）是细胞内最重要的非酶类抗氧化剂,各种急性胰腺炎（AP）动物模型均存在腺泡细胞GSH耗竭。目的：探讨N-乙酰半胱氨酸（NAC）对重症急性胰腺炎（SAP）的预防作用及其可能机制。方法：54只健康雄性Wistar大鼠随机分为3组,正常对照组予假手术,AP模型组和NAC预处理组胰胆管逆行注射牛磺胆酸钠以模拟人类SAP,NAC预处理组于造模前30min腹腔注射NAC。分别于术后3h、6h、12h检测血清Ca^2＋、丙二醛（MDA）和胰腺组织GSH,透射电子显微镜（TEM）观察胰腺组织超微结构。结果：术后3h、6h至12h,各组血清Ca^＋浓度、胰腺组织GSH含量逐渐降低,血清MDA水平逐渐升高。NAC预处理组各时点血清Ca^2＋浓度、胰腺组织GSH含量均显著高于AP模型组（P〈0．05）,血清MDA水平显著低于AP模型组（P〈0．05）。TEM观察显示AP模型组腺泡细胞胞质内可见大量空泡,酶原颗粒分泌、排出明显减少;NAC预处理组空泡体积较小,酶原颗粒排出增加。结论：NAC可在SAP早期恢复腺泡细胞的GSH含量,通过抗氧化作用减轻腺泡细胞的氧化损伤,维持细胞内钙平衡,改善酶原颗粒的转运和排泌,从而对SAP的发展产生预防作用。