靶向survivin基因siRNA对宫颈癌细胞放射敏感性影响的实验 

 目的 探讨survivin表达对宫颈癌放射敏感性的影响。 方法 RT-PCR和Western blot法分析survivin基因mRNA和蛋白的表达, 平板集落形成实验检测细胞 增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率。 survivin siRNA转染HeLa细胞,比较survivin siRNA对细胞凋亡、增殖以及放射敏感性的 影响。 结果 在宫颈癌HeLa细胞中存在survivin的表达,survivin siRNA可诱导HeLa细胞凋亡并抑制增殖 。 结论 survivin siRNA可通过影响细胞凋亡和增殖来增加HeLa细胞的放射敏感性     

肿瘤抗原致敏树突状细胞协同CD3AK细胞的抗肿瘤作用

目的:观察雷公藤内酯醇是否能抑制肿瘤细胞增殖,并探讨其是否通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用.方法:选择人宫颈癌细胞株HeLa为研究对象,以MTr实验检测肿瘤细胞的增殖,以AnnexinV/PI染色检测细胞的凋亡,R123染色检测线粒体膜电势的变化.Hoechst 33258荧光染色法观察细胞形态学改变,琼脂糖凝胶电泳检测染色体DNA断裂.结果:雷公藤内酯醇能明显抑制HeLa细胞的增殖;AnnexinV/PI染色结果证明雷公藤内酯醇能诱导HeLa细胞凋亡,R123染色结果说明雷公藤内酯醇诱导的细胞凋亡与线粒体膜电势的变化有关.雷公藤内酯醇处理的HeLa细胞可见凋亡特有的形态学及生物化学改变,DNA电泳呈梯状条带.结论:雷公藤内酯醇可以通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用.     

SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞凋亡的影响

目的:观察特异性JNK抑制剂[specificc-junNH2terminalproteinkinase(JNK)inhibitor]SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖{[2-(3-carboxy-1-oxopropyl)a-mino-2-deoxy-D-Glucose],COPADG}诱导Eca-109细胞凋亡的影响并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,用COPADG及SP600125对细胞进行处理。细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;MTT检测不同时间点的细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,同时,COPADG诱导的Eca-109细胞凋亡率明显减低,细胞增殖抑制率下降明显,与COPADG单独作用组之间比较差异有统计学意义。结论:SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物CO-PADG诱导Eca-109细胞凋亡具有抑制作用,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。     

JNK抑制剂对D-氨基葡萄糖衍生物诱导Eca-109细胞Caspase-3活化的影响

目的:观察特异性c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125对D-氨基葡萄糖衍生物(COPADG)诱导的Eca-109细胞Caspase-3激活及细胞凋亡的影响,并探讨COPADG诱导Eca-109细胞凋亡的潜在分子机制。方法:体外培养Eca-109细胞,以COPADG及SP600125与细胞作用,细胞间接免疫荧光染色观察P-JNK蛋白表达的改变,流式细胞术检测细胞凋亡率及Caspase-3活性的变化。结果:经SP600125处理后,COPADG诱导的Eca-109细胞P-JNK蛋白表达明显减弱,凋亡率明显减低,Caspase-3活性显著下调,与COPADG单作用组之间有显著性差异。结论:SP600125能够显著抑制COPADG诱导Eca-109细胞Caspase-3激活以及COPADG诱导Eca-109细胞凋亡,并间接证明JNK信号转导通路在COPADG诱导Eca-109细胞凋亡过程中发挥着重要作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡的机制

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对人胃癌BGC-823细胞增殖的影响及其可能的机制。方法:不同浓度EGCG单独或联合c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)抑制剂SP600125作用BGC-823细胞后,应用MTT法检测BGC-823细胞的增殖抑制率,显微镜下观察细胞的形态学改变,FCM检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测细胞中p-JNK和p-c-jun蛋白的表达情况,免疫细胞化学法检测细胞中caspase-3的表达。结果:EGCG可抑制BGC-823细胞的增殖(P<0.05),呈时间和剂量依赖效应;EGCG可诱导BGC-823细胞凋亡,细胞凋亡率呈剂量依赖效应(P<0.05);EGCG可上调BGC-823细胞中p-JNK、p-c-jun和caspase-3的表达(P<0.05)。EGCG引起的BGC-823细胞增殖抑制和caspase-3表达水平的上调可被SP600125部分抑制。结论:EGCG可诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡,其作用机制可能与激活JNK信号转导途径并上调caspase-3的表达有关。     

重楼皂苷通过JNK/p53诱导肺癌细胞铁死亡的作用机制研究

目的 分析重楼皂苷对肺癌细胞铁死亡的诱导作用及可能机制。方法 取对数期A549细胞，分为对照组、重楼皂苷组、SP600125组、联合组，对照组常规培养，重楼皂苷组加入重楼皂苷(4 g/L),SP600125组加入SP600125(10μmol/L),联合组加入重楼皂苷(4 g/L)及SP600125(10μmol/L)。MTT实验检测细胞铁死亡抗性；荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)堆积；检测细胞丙二醛(MDA)水平；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot法检测溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX4)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、p53蛋白表达。结果 与对照组比较，重楼皂苷组铁死亡抗性，SLC7A11、GPX4蛋白表达降低，ROS阳性细胞数增加，细胞内MDA水平、细胞凋亡率、p-JNK/JNK及p53蛋白表达升高(P<0.05),SP600125组铁死亡抗性，SLC7A11、GPX4蛋白表达升高，ROS阳性细胞数减少，细胞内MDA水平、细胞凋亡率、p-JNK/JNK及p53蛋白表达降低(P<0.05);与重楼皂...     

棉酚联合放疗诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的研究

目的:研究棉酚(gossypol)联合放疗对宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制与促细胞凋亡作用,以探讨棉酚的抗肿瘤作用机制.方法:利用MTT法检测棉酚对HeLa细胞生长抑制率的影响;采用丫啶橙/溴化乙锭双染色法、FCM观察细胞凋亡形态并检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测Bcl-2和Bcl-xL蛋白的表达水平.结果:棉酚对HeLa细胞增殖有明显的抑制作用,且呈剂量及时间依赖性;棉酚、放疗、棉酚联合放疗能明显诱导HeLa细胞凋亡,且棉酚联合放疗组的诱导作用明显优于2者单独处理组.棉酚、放疗和棉酚联合放疗均可降低HeLa细胞内Bcl-2和Bcl-xL蛋白的表达水平,但棉酚联合放疗组的作用弱于2者单独处理组.结论:棉酚可抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖并诱导细胞凋亡,可能增加放疗对宫颈癌HeLa细胞的敏感性.     

敲除人乳腺癌MCF-7细胞中PTEN基因对JNK通路活性的影响

背景与目的:PTEN与多种肿瘤发生发展密切相关,大量研究表明PTEN基因通过直接或间接作用整合复杂的信号网络系统,并影响靶分子及其下游信号级联反应.本研究探讨敲除MCF-7细胞中PTEN基因对JNK通路活性的影响.方法:PTEN反义寡核苷酸转染后,激光共聚焦显微镜检测MCF-7细胞内PTEN蛋白表达:流式细胞术、四甲基偶氮唑蓝(MTT)及Western blot法分别检测SP600125诱导的细胞早期凋亡和细胞周期改变、细胞增殖抑制、细胞中JNK及其下游底物ATF-2、C-Jun的磷酸化水平.结果:FTEN反义寡核苷酸有效封闭MCF-7细胞中PTEN蛋白表达:SP600125(10 μmol/L)诱导已敲除PTEN的MCF-7细胞发生早期凋亡.凋亡率达(32.4±2.4)%,细胞发生G1期阻滞、细胞增殖明显受抑制,与SP600125组、反义组细胞相比差异有显著性(P<0.05);反义+SP600125组MCF-7细胞中磷酸化JNK及其下游底物ATF-2及C-Jun磷酸化水平下调.结论:MCF-7细胞中JNK通路激活与PTEN表达水平相关,PTEN缺失使MCF-7细胞中JNK通路活化,细胞对JNK相关抑制剂的敏感性增加.     

白桦酯醇诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及作用机制的研究

目的:研究白桦酯醇(betulin)体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用,并探讨其可能的作用机制.方法:以不同浓度的白桦酯醇处理HeLa细胞,采用MTT法检测白桦酯醇作用24、48和72 h时对细胞生长抑制的情况;倒置相差显微镜下观察对HeLa细胞形态学变化的影响;TUNEL法检测对细胞凋亡的影响;FCM检测细胞的凋亡率;蛋白质印迹法检测对HeLa细胞中caspase-3和多聚ADP-核糖聚合酶[poly (ADP-ribose) polymerase,PARP]蛋白表达的影响.结果:不同浓度的白桦酯醇能抑制HeLa细胞的增殖,且呈时间-剂量依赖关系(P＜0.01);倒置相差显微镜下观察结果显示,白桦酯醇处理24 h后,细胞体积缩小,核固缩,细胞的折光性减弱,且随着白桦酯醇浓度的增加上述形态变化增强,呈典型的凋亡形态学改变;TUNEL法及FCM检测结果显示,经不同浓度白桦酯醇处理24 h后,HeLa细胞发生凋亡,且随药物浓度的增加凋亡率明显增高;蛋白质印迹法检测结果显示,随加药浓度的增加,HeLa细胞中caspase-3和PARP蛋白表达均呈不同程度的上调.结论:在一定的浓度范围内,白桦酯醇可在体外抑制Hela细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与其上调caspase-3及PARP蛋白的表达有关.     

索拉非尼对宫颈癌细胞的增殖抑制作用及对PCNA、Survivin表达的影响

目的 探讨索拉非尼对宫颈癌细胞株增殖和凋亡的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa、SiHa细胞株,实验分为空白对照组、阴性对照组（DMSO）和索拉非尼（0、25、5、10、20 μmol／L）处理组。光学显微镜观察各组细胞形态学改变;Hoechst荧光染色观察凋亡细胞核的形态学变化;采用MTS法检测索拉非尼对HeLa和SiHa细胞的增殖抑制作用;免疫细胞化学法检测索拉非尼（10 μmol／L）处理HeLa、SiHa细胞48 h后Survivin蛋白的表达;Western blotting检测索拉非尼对宫颈癌HeLa、SiHa细胞PCNA、Survivin蛋白表达的影响。结果不同浓度索拉非尼作用48 h后,HeLa、SiHa细胞出现了凋亡形态学改变;Hoechst染色显示,HeLa、SiHa细胞的胞核变小、固缩,荧光明显增强。MTS检测显示,索拉非尼可抑制宫颈癌HeLa、SiHa细胞增殖,并呈浓度依赖性（P＜0.05）。免疫细胞化学法检测显示,阴性对照组Survivin在HeLa和SiHa细胞中的平均光密度值分别为0.19±0.05和0.17±0.07,与索拉非尼处理组的0.13±0.01和0.13±0.03比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Western blotting检测显示,索拉非尼在蛋白水平上能够降低PCNA、Survivin表达,且这种下调作用具有浓度依赖性。结论索拉非尼能诱导HeLa、SiHa细胞凋亡,抑制其增殖且呈浓度依赖性,其机制可能与下调癌基因 PCNA、Survivin表达有关。     

CircHIPK3通过调控p53-Akt-Mdm2通路影响食管鳞癌的恶性表型

目的 研究食管鳞癌组织中CircHIPK3的表达差异,以寻找食管鳞癌诊断和靶向治疗的新思路。方法 qRT-PCR、CCK-8法、Transwell法和流式细胞术检测CircHIPK3在食管鳞癌和癌旁组织中的表达差异以及其对细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡的影响;生物信息数据分析确定CircHIPK3的可能作用通路,Western blot对其通路相关功能蛋白加以验证。结果 11例患者的癌组织和对应的7例癌旁组织中CircHIPK3表达异常（P=0.027）;CircHIPK3高表达的细胞增殖（P<0.001）、迁移（P<0.001）、侵袭（P<0.001）能力增强;CircHIPK3过表达的EC9706细胞凋亡受到抑制,抑癌基因p53被明显抑制,而Akt-Mdm2信号通路处于激活状态,p53-Akt-Mdm2通路蛋白的表达量随之增加,最终导致癌细胞增殖、迁移、侵袭以及相关癌症蛋白的表达增加。结论 CircHIPK3可能通过调节p53-Akt-Mdm2信号通路促进人食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制细胞凋亡,其可能是食管鳞癌诊断和治疗的潜在靶点。     

结直肠癌组织中NEK2的表达及其对HCT116细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨中心体相关激酶2(NEK2)在结直肠癌组织中的表达及对结直肠癌细胞HCT116增殖、侵袭及迁移的影响.方法 构建针对NEK2的小干扰RNA(si-NEK2),脂质体法转染HCT116细胞.CCK8实验、流式细胞术、划痕实验和Transwell小室实验检测敲低NEK2表达后细胞增殖、周期分布、侵袭和迁移能力的改...     

茯苓多糖对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、促凋亡的影响及其机制

目的 探讨茯苓多糖（Pachymaran）对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、促凋亡的作用及其相关机制。方法 MTT法检测细胞增殖率并筛选出适宜的茯苓多糖低、中、高浓度用于后续实验；不同浓度的茯苓多糖处理细胞后，倒置相差显微镜观察细胞形态学变化；Hoechst 33342染色观察细胞核的变化；平板克隆实验检测细胞克隆形成能力；细胞划痕实验检测细胞迁移能力；流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期；Western blot法检测凋亡、迁移及ERK通路相关蛋白的表达。结果 茯苓多糖浓度对HeLa细胞活力的影响实验得出，取30、40、50 mg/ml茯苓多糖作为低、中、高浓度进行后续实验；中、高浓度茯苓多糖处理细胞后，细胞和细胞核发生显著的凋亡形态学变化，低浓度下形态学变化不显著；不同浓度茯苓多糖均能降低细胞克隆形成能力；降低细胞迁移率（P<0.05）；使细胞凋亡率增加（P<0.05）；使S期细胞减少并阻滞于G₂/M期（P<0.05）；Cleaved Caspase 3、Cleaved Caspase 8、Cleaved Caspase 9、Bax表达较对照组明显增多，Bcl-2、MMP-9、VEGFA、p-ERK1/2表达明显减少（P<0.05）。ERK1/2表达无明显变化。结论 茯苓多糖能显著抑制HeLa细胞增殖，并诱导其凋亡。其促凋亡机制可能与下调p-ERK1/2表达，抑制ERK信号通路磷酸化有关。同时，茯苓多糖对抑制HeLa细胞的迁移也有一定的作用。     

ECT2基因对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制

目的 探讨ECT2基因对宫颈癌细胞增殖的影响及其机制。方法 构建ECT2过表达及敲低的宫颈癌细胞株,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期。IPA软件查找ECT2的相互作用蛋白,免疫荧光亚细胞定位验证两者间的关系。qPCR及Western blot检测mRNA及蛋白的表达情况。结果 ECT2可能与CDK1相互作用,促进细胞由G₂期进入G₁期,促进细胞增殖。ECT2过表达后宫颈癌细胞中Rac1、Cdc42、CDK1、CyclinB1 mRNA及蛋白的表达水平均升高（均P<0.001）;敲低则作用相反（P<0.05）。结论 ECT2可能通过下游Cdc42/Rac1信号通路,同时与CDK1相互作用促进细胞周期G2向G1转化,进而促进宫颈癌细胞增殖     

二甲双胍对LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞的影响

目的 研究二甲双胍对LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞的增殖与细胞周期的影响。方法 以不同浓度的二甲双胍作用于LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞（LKB组）与缺失LKB1基因表达的HEC-1A细胞（CON组）。用流式细胞术仪检测各组HEC-1A细胞的细胞周期;RT-PCR法和Western blot技术检测各组HEC-1A细胞的LKB1、mTOR基因与蛋白的表达;以平板克隆法与细胞迁移实验检测各组细胞的细胞增殖水平。结果 与缺失LKB1基因表达的HEC-1A细胞比较,LKB1基因过表达的HEC-1A细胞随着二甲双胍浓度的升高明显降低细胞克隆形成率、细胞迁移率、S 期细胞比例及mTOR基因与蛋白的表达,而增加G₀ /G₁期细胞比例及LKB1基因与蛋白的表达,差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 二甲双胍抑制LKB1基因过表达的子宫内膜癌HEC-1A细胞的生长和侵袭,其机制可能为介导LKB1/mTOR信号传导通路而抑制子宫内膜癌细胞的增殖。     

Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响

目的 探讨Tspan8基因敲除联合安罗替尼对结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 采用CRISPR/Cas9技术构建质粒并敲除SW480细胞的Tspan8基因,Western blot法检测敲除效果。采用MTT法计算安罗替尼的半数抑制浓度（IC₅₀）。实验分为对照组、安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组。采用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕实验、Transwell小室法和流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移、侵袭和凋亡情况;Western blot法检测安罗替尼对SW480细胞中Tspan8表达水平的影响。结果 在Tspan8敲除组中,SW480-KO-Ⅲ细胞的敲除效率最高,用于后续实验。不同浓度的安罗替尼在不同作用时间均能抑制SW480细胞的增殖（P<0.01）,且呈浓度依赖性和时间依赖性（P<0.01）,根据IC50选择14 μmol/L为后续实验浓度。与对照组相比,安罗替尼组、Tspan8敲除组和联合组的细胞增殖、迁移及侵袭能力显著降低,细胞凋亡水平明显提高（P<0.05）,且联合组的上述变化较安罗替尼组或Tspan8敲除组更为显著（P<0.05）。与对照组相比,安罗替尼组SW480细胞的Tspan8表达水平明显下降（P<0.01）。结论 Tspan8基因敲除联合安罗替尼能协同抑制SW480细胞增殖、迁移、侵袭,并促进其凋亡。     

FOXK1对肝癌高转移细胞系Huh7侵袭和迁移能力的影响

目的 探讨叉头框转录因子1(FOXK1)对肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力的影响。方法 采用实时定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测40例肝癌组织及其癌旁正常组织FOXK1 mRNA的表达,qRT-PCR和Western blot检测正常肝细胞HL7702、肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白的表达。小RNA干扰技术下调FOXK1表达后,qRT-PCR和Western blot检测肝癌高转移细胞Huh7 FOXK1 mRNA和蛋白的表达,Transwell实验检测其侵袭和迁移能力。 结果 qRT-PCR检测结果显示,肝癌组织中FOXK1 mRNA的表达高于癌旁正常组织(2.87±0.21 vs 1.35±0.11,P=0.004);qRT-PCR和Western blot检测结果显示,相比正常肝细胞HL7702,肝癌细胞BEL7402和肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达升高(P<0.001)。下调FOXK1表达后,肝癌高转移细胞Huh7中FOXK1 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.01),侵袭和迁移细胞数目明显减少(P<0.01)。结论 下调FOXK1表达能抑制肝癌高转移细胞Huh7侵袭和迁移能力。     

Bcl-2 overexpression attenuates SP600125-induced apoptosis in human leukemia U937 cells

SP600125 is a specific inhibitor of c-Jun N-terminal kinase (JNK) that is known to strongly induce apoptosis and block cell cycle progression in G₂/M phase. In this study, we demonstrated that treatment of U937 cells with SP600125 resulted in significant G₂/M cell cycle arrest that was due to decreased cyclin B1 and cdc25c protein levels. Moreover, SP600125 promoted LDH release and DNA fragmentation that was associated with caspase-3 activation and degradation of its substrates. In contrast, overexpression of the antiapoptotic protein Bcl-2 rendered leukemia cells resistant to SP600125-induced apoptosis, but more sensitive to G₂/M phase arrest and endoreduplication (>4N DNA). Overexpression of Bcl-2 significantly inhibited SP600125-induced caspase-3 activation and degradation of its substrates, and sustained expression levels of the IAP-2 proteins following SP600125 treatment. The inhibitory effect of Bcl-2 on apoptosis was attenuated by treatment with the small molecule Bcl-2 inhibitor, HA14-1. These data provide important mechanistic insights related to Bcl-2-mediated resistance to SP600125-induced apoptosis, and induction of G₂/M phase arrest and endoreduplication.     

miR-497-5p靶向调控CCNE1基因抑制胰腺癌细胞增殖

目的 明确miR-497-5p在胰腺癌（PaCa）中的表达及临床意义,并探究其对PaCa细胞增殖的影响及机制。方法 实时荧光定量PCR实验检测miR-497-5p的表达,卡方检验和Kaplan-Meier生存法分析miR-497-5p的表达与临床病理特征及预后的关系;CCK-8实验和流式细胞术检测过表达miR-497-5p对Capan-2和PANC-1细胞增殖和周期的影响,Spearman相关性检验分析miR-497-5p表达与G₁/S特异性细胞周期蛋白E1（cyclin E1, CCNE1）mRNA表达的关系;双荧光素酶报告基因实验和蛋白质印迹法验证miR-497-5p对CCNE1表达的调控作用。结果 miR-497-5p在癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织（P<0.001）,T3+T4期患者癌组织中miR-497-5p的表达显著低于T1+T2期癌组织（P<0.001）;低表达miR-497-5p 与较高的T分期相关（P=0.003）;低表达miR-497-5p的患者5年总体生存率显著低于高表达者（P=0.036）。与对照组相比,miR-497-5p过表达组细胞增殖显著降低,G₀/G₁期比例增加,S期比例减少。CCNE1 mRNA在癌组织的表达显著高于癌旁正常组织（P<0.001）,且与miR-497-5p表达呈负相关（P<0.001）。miR-497-5p可直接与CCNE1 mRNA 3’-UTR互补结合从而抑制CCNE1蛋白的表达。结论 miR-497-5p在PaCa中低表达,且与较高的T分期及不良预后相关;过表达miR-497-5p通过靶向调控CCNE1基因诱导细胞周期阻滞进而抑制PaCa细胞增殖。     

沉默ANLN基因对胃癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡的影响

目的 探讨肌动蛋白结合蛋白ANLN在体外对胃癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。方法 RT-PCR和Western blot检测胃癌细胞株、胃黏膜细胞株中ANLN的表达情况和验证siRNA对ANLN基因的敲减情况。划痕实验和Transwell检测沉默ANLN基因表达对胃癌细胞迁移、侵袭能力的影响。CCK-8实验、细胞荧光染色和流式细胞术检测沉默ANLN基因表达对胃癌细胞增殖和凋亡的变化。结果 胃癌细胞株SGC-7901/MGC-803中的ANLN的mRNA和蛋白表达显著高于正常胃黏膜细胞株GES-1（P<0.001）。siRNA干扰后RT-PCR和Western blot结果证明转染成功,转染组的mRNA和蛋白表达量与对照组差异有统计学意义（P<0.05）。下调ANLN能够显著降低胃癌细胞的迁移、侵袭、增殖和凋亡能力。结论 下调ANLN的表达可以显著降低胃癌细胞侵袭、迁移、增殖和凋亡能力。