原位杂交测肿瘤坏死因子mRNA在宫颈细胞及子宫内膜组织的定位表达

目的观察肿瘤坏死因子(mRNA)在宫颈细胞及子宫内膜组织的表达及其在不同病变组织中的分布特点。方法采用非同位素原位杂交法对3个传代的宫颈细胞系(HiSa、W12、NCx)、石蜡包埋的宫颈组织96例、子宫内膜组织75例进行了TNFmRNA定位表达的研究。结果TNFαmRNA在SiHa和W12细胞中有阳性表达,NCx细胞未见阳性表达;在宫颈组织中阳性表达见于上皮、间质、血管壁及平滑肌;子宫内膜癌组织中阳性表达见于间质单个核细胞和平滑肌细胞,对照组未见阳性表达。结论宫颈尖锐湿疣及宫颈鳞癌来源的上皮为TNF生成细胞之一;TNFmRNA表达强度与细胞增生程度有关;宫颈HPV感染对细胞内TNFmRNA表达有促进作用。     

原位杂交测肿瘤坏死因子mRNA在宫颈细胞及子宫内膜组织的定位表达

目的 观察肿瘤坏死因子（mRNA）在宫颈细胞及子宫内膜组织的表达及其在不同病变组织中的分布特点。方法 采用非同位素原位杂交法对3个传代的宫颈细胞系（HiSa、W12、NCx），石蜡包埋的宫颈组织96例、子宫内膜组织75例进行了TNFmRNA写位表达的研究。结果 TNFαmRNA和W12细胞中有阳性表达，NCx细胞未见阳性表达；在宫颈组织中阳性表达见于上皮、间质、血管壁及平滑肌；子宫内膜癌组织中阳性表达见于间质单个核细胞和平滑肌细胞，对照组未见阳性表达。结果 宫颈尖脱湿疣及宫颈鳞癌来源的上皮为TNF生成细胞之一;TNFmRNA表达强度与细胞增生程度有关；宫颈HPV感染对细胞内TNFmRNA表达有促进作用。     

t al Department of Pathology, Qingdao Medical College, Qingdao 2660

①目的探讨肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）对肿瘤细胞的杀伤作用,并观察重组人干扰素（ＩＦＮγ）对ＴＮＦα细胞毒性的协同作用。②方法采用非同位素细胞毒试验,对３个子宫颈来源的细胞系进行传代培养,与ＴＮＦα接触后检测其杀伤细胞情况。③结果ＴＮＦα对子宫颈良、恶性肿瘤细胞均呈微弱的细胞毒作用,而ＩＦＮγ与ＴＮＦα联用则对宫颈癌来源的细胞系具有明显杀伤作用（Ｆ＝１１．２５,Ｐ＜０．０１）,对源于正常、良性肿瘤的细胞系则无明显作用（Ｆ＝１．１５,１．２３,Ｐ＞０．０５）。④结论ＴＮＦα对肿瘤细胞具有杀伤作用,且ＩＦＮγ能促进这种杀伤作用     

rh-TNFα单用及与化疗药物合用对消化道癌细胞系的杀伤作用

观察重组人肿瘤坏死因子α(rh—TNFα)及其与化疗药物合用对五株消化道癌细胞的细胞毒作用,结果发现,rh—TNFα对五种细胞株均有不同程度的细胞毒效应。随着浓度的增高,其作用呈递增趋势。其中尤以对213细胞和C1184细胞的作用为明显(P<0.05);当rh—TNFα与5—Fu或PYM或MMC合用时,其细胞毒作用明显增强(P<0.05)。提示rh—TNFα对几种消化道癌细胞具有较广谱的杀伤活性,对临床试验治疗具有一定的参考价值。     

新型重组毒素hIL15M/TNFαM的构建、表达与活性测定

目的　构建、表达hIL15M TNFαM融合毒素 ,为研制可消除hIL15受体高表达细胞的特异性导向药物奠定基础。方法　人白介素 15突变体 (hIL15M)对靶细胞不具有激动作用 ,将该突变体与TNFα突变体 (TNFαM)编码基因直接融合克隆至pET表达载体 ,并纯化出融合蛋白hIL15M TNFαM ,MTT法测定该蛋白的细胞毒活性。结果　SDS PAGE分析表明 ,重组菌株诱导后可以表达出 3 0× 10 3与预期大小一致的特异蛋白带。纯化的hIL15M TNFαM对PHA激活的T细胞的杀伤作用是静止性T细胞的 13倍。结论　hIL15M TNFαM融合蛋白对高表达hIL15受体的细胞具有较强的杀伤性作用 ,提示其对由活化的异常T细胞增多所致的疾病具有潜在的治疗作用。     

宫颈上皮脱落细胞mybl2 mRNA表达水平及意义

目的 探讨宫颈上皮脱落细胞中mybl2 mRNA表达水平与宫颈病变程度、人乳头瘤病毒(HPV)感染三者间的关系.方法 收集宫颈上皮脱落细胞共232例,根据液基薄层细胞检测结果 对标本进行分组,其中不能明确意义的非典型鳞状细胞(ASC-US)组68例,低度鳞状上皮内病变(LSIL)组98例,高度鳞状上皮内病变(HSIL)组42例,宫颈癌(SCC)组24例.Trizol法提取细胞总RNA,RT-PCR法检测mybl2 mRNA的表达水平,分析细胞mybl2 mRNA表达水平与宫颈病变程度的关系;同时收集被检者HPV检测结果资料,分析细胞mybl2 mRNA表达水平与HPV感染的关系.结果(1)232例宫颈上皮脱落细胞均检测到mybl2 mRNA表达,不同病变程度的宫颈上皮脱落细胞中mybl2 mRNA表达水平差异有统计学意义(F=68.491,P<0.01),其表达水平与宫颈病变程度呈正相关,以SCC组脱落细胞的mybl2 mRNA表达水平最高.(2)宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA表达水平与HPV感染有关,差异有统计学意义(F=12.15,P<0.01),以HPV16+和(或)HPV18+的脱落细胞表达量最高.结论 宫颈上皮脱落细胞中mybl2 mRNA表达水平与宫颈病变程度呈正相关,且与HPV感染有关,可能与宫颈癌的疾病进展有关,有望作为宫颈病变进展的新的生物标志物.     

宫颈癌组织细胞分化抑制因子-1表达及其意义

目的 了解细胞分化抑制因子-1 (Id-1) mRNA和蛋白在人宫颈癌组织中的表达及其意义.方法 分别应用荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应和免疫组织化学方法,检测Id-1 mRNA和蛋白在6例人正常宫颈、6例宫颈上皮内瘤样变(CIN)和24例宫颈癌组织中的相对表达定量,分析Id-1表达与宫颈癌病理参数间的相关性.结果 Id-1蛋白在正常宫颈组织未见阳性表达,在CIN组织中有少量表达,在宫颈浸润癌组织中呈明显的阳性表达,宫颈浸润癌组织Id-1蛋白阳性面积百分比和阳性染色吸光度均显著高于CIN组织(t=7.80、3.15,P＜0.05).正常宫颈组织、CIN组织和宫颈癌组织Id-1 mRNA相对定量依次增高,差异有显著性(F=3 030.30,q=17.78、95.04,P＜0.01).宫颈癌组织中Id-1 mRNA和蛋白表达呈正相关(r=0.89,P＜0.01).Id-1表达和宫颈癌组织分级及FIGO分期呈正相关(r=0.67、0.58,P＜0.01、0.05).结论 检测Id-1表达有助于宫颈癌的辅助诊断.     

MiR-26b增强顺铂对宫颈癌细胞株Hela的杀伤活性

目的:研究microRNA-26b(miR-26b)是否能增强顺铂对宫颈癌细胞的杀伤活性及机制。方法:用荧光定量PCR方法检测人正常宫颈上皮细胞系CRL-2614及宫颈癌细胞系Hela、SiHa和C-33a miR-26b的表达水平。MTT法检测顺铂单独治疗及联合miR-26b治疗对宫颈癌细胞系Hela的杀伤活性。利用生物信息学及western blot方法验证miR-26b是否调节Hela细胞Mcl-1的表达。构建Mcl-1真核表达载体,MTT法检测Mcl-1表达载体转染对miR-26b联合顺铂杀伤Hela细胞疗效的影响。结果:宫颈癌细胞系Hela(0.21±0.04)、SiHa(0.42±0.03)和C-33a(0.33±0.03)的miR-26b的相对表达水平显著低于正常宫颈上皮细胞系CRL-2614 (1.00±0.05)。miR-26b联合1mmol/L顺铂治疗组对Hela细胞的杀伤活性(细胞活力抑制率为52.6±6.9)显著高于1mmol/L顺铂单治疗组(细胞活力抑制率为6.7±3.5)。miR-26b转染后,Hela细胞Mcl-1的蛋白表达水平下降。miR-26b联合1mmol/L顺铂在Mcl-1表达载体转染后对Hela细胞的杀伤活性(细胞活力抑制率为19.6±6.7)显著低于未转染Mcl-1表达载体的miR-26b联合1mmol/L顺铂组(细胞活力抑制率为55.7±7.6)。结论:MiR-26b通过靶向于Mcl-1增强顺铂对宫颈癌细胞系Hela的杀伤活性。     

SALL3甲基化与宫颈癌的相关性

目的 检测正常宫颈组织、宫颈癌组织及宫颈癌细胞系中SALL3基因启动子区的甲基化状态,探讨其甲基化状态与SALL3基因表达的关系。方法 采用甲基化特异性PCR(MS-PCR)分析正常宫颈、宫颈癌组织及宫颈癌细胞系中SALL3基因启动子区DNA的甲基化状态,RT-PCR检测宫颈癌细胞系、宫颈癌组织及正常宫颈组织中SALL3基因mRNA表达。 结果 宫颈癌和癌旁组织中的SALL3基因启动子区甲基化水平分别为0.60(IQR:0.73,秩均值:16.70)(P=0.046)和0.82(IQR:0.50,秩均值:17.15)(P=0.039),均显著高于正常宫颈组织的0.03(IQR:0.39,秩均值:8.44)。宫颈癌及癌旁组织中SALL3蛋白的表达分别为0.10(IQR:0.17,秩均值:8.40)(P=0.012)和0.26(IQR:0.21,秩均值:15.6)(P=0.000),均显著低于正常宫颈组织的0.57(IQR:0.73,秩均值:20.75)。给予0、5、10 μmol/L 5-Azacytidine去甲基化处理HeLa及SiHa细胞后,HeLa(F=28.704,P=0.001)和SiHa细胞(F=29.783,P=0.002)中SALL3 mRNA的表达水平均随5-Azacytidine作用浓度的升高而升高。与高危型人乳头瘤病毒(HPV)阳性组织相比,HPV阴性宫颈组织中SALL3基因启动子区的甲基化水平明显降低(P=0.014),蛋白表达水平明显升高(P=0.021)。结论 宫颈癌组织中SALL3基因启动子区的DNA高甲基化使其表达沉默,高危型HPV感染可能通过增加SALL3启动子区甲基化使其沉默促进宫颈癌的发生。     

TNFα联合VP16对肺腺癌细胞株抑制、粘附分子表达及细胞周期的影响

目的　研究肿瘤坏死因子 (TNFα)和足叶乙甙 (VP16 )联合对肺癌细胞包株的作用及其机制。方法　用MTT法检测不同浓度的TNFα、VP16及TNFα联合VP16对人肺癌细胞系A5 4 9的细胞毒作用以及用间接荧光标记法、流式细胞仪观察TNFα、VP16及TNFα联合VP16对A5 4 9的细胞周期、粘附分子表达的影响。结果　TNFα、VP16对A5 4 9细胞的生长抑制作用有剂量依赖关系 ,而TNFα联合VP16对A5 4 9抑制作用较TNFα、VP16作用显著 (P <0 .0 1)。TNFα、TNFα联合VP16能上调CD5 4表达 ,与VP16均能上调CD95表达 ,而粘附分子CD11α、CD18、CD4 0、CD80、CD137等用药后仍不表达。对细胞周期用药后G2 期明显下降 (13.2 %下降至 3.0 % ) ,S期上升 (2 7.3%上升至 4 2 .5 % )。结论　TNFα联合VP16增加A5 4 9的抑制率 ,增强CD5 4、CD95表达。推测TNFα联合VP16对A5 4 9细胞的作用是通过抑制DNA合成及有丝分裂 ,使G0 +G1+S期不能及时转至G2 、M期并促进肺癌细胞凋亡     

基于肿瘤抗原的肿瘤免疫治疗

基于肿瘤抗原的免疫治疗主要在于肿瘤疫苗、包括肿瘤细胞疫苗、肿瘤抗原疫苗、多肽疫苗、基因疫苗、树突状细胞肿瘤疫苗。本文对此进行综述。     

miRNA与肿瘤

miRNA是一类真核生物内源性小分子单链RNA,长约18～26个核苷酸,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对引起靶mRNA的降解或者翻译抑制,对基因进行转录后表达的调控.miRNA能够调控多种生理学和病理学的过程.随着研究的不断深入,目前认为miRNA在肿瘤的发生发展过程中,具有与癌基因或抗癌基因相似的作用.本文对miRNA的产生、作用机制与肿瘤的关系及其在肿瘤生物治疗方面的潜在作用进行综述.     

垂体瘤转化基因在消化系统肿瘤中的研究进展

垂体瘤转化基因(PTTG)是新近发现的癌基因,它在多种肿瘤和肿瘤细胞系中高表达,在少数的正常组织中低表达.本文总结其在包括食管癌、胃癌、胆囊癌、肝癌、结肠癌等消化道肿瘤中的研究.     

脑干肿瘤的诊断

本文报告２３例脑干肿瘤，均经ＭＲＩ检查和手术、病理证实。脑干肿瘤可分为延髓、桥脑和中脑肿瘤；按生长方向不同，各部位肿瘤又各分为若干个亚型。ＭＲＩ诊断脑干肿瘤，具有精确、安全、无痛苦，能直观显示肿瘤的部位和三维成像等优点，对定性诊断和确定手术入路有极大帮助。诊断脑干肿瘤时，需注意与桥小脑角肿瘤、小脑蚓部肿瘤、胃炎、脑干脑炎和脑干内血肿等鉴别。     

河北省肿瘤医院1981～1997年收治住院肿瘤患者分析

目的 把现代信息技术引入医院管理，从而使信息更好地服务于行政决策。方法 运用ＰｏｘＰｒｏｗ数据管理系统构建了包含全部住院患者病历资料的ＤＢＦ数据库，用Ｆｏｘ语言编程统计分析，结果 揭示了该院各癌肿瘤患者的年代变化趋势和地区来源，指出了该院目前和将来的发展方向和建设重点，总结了该字过去１７年对各主要癌肿的治疗情况，结论 为今后肿瘤医院的管理工作打下了基础。     

卵巢颗粒细胞瘤及卵泡膜细胞瘤临床病理分析

通过随访、病理复查、单变量及多因素逐步回归分析，探讨５２例卵巢颗粒细胞瘤及卵泡膜细胞瘤的转移、复发及死亡率，判断其恶性程度和预后。结果显示：颗粒细胞瘤３９例，术后转移复发死亡率低于其它类卵巢恶性肿瘤。早期预后好，晚期预后类似其它类卵巢恶性肿瘤。预后与临床分期、病理类型及其分级、病程、手术种类及化疗均有关。卵泡膜细胞瘤１３例无复发死亡。     

眼眶肿瘤的CT诊断

本文回顾性总结了４２例眼眶肿瘤的ＣＴ表现。其中原发性眼眶肿瘤４０例，继发性肿瘤２例。分析和讨论了各类肿瘤的ＣＴ特点及诊断与鉴别诊断。我们认为ＣＴ扫描对眼眶肿瘤的定位与定量诊断很准确，有些还可作出定性诊断，但对部分肿瘤（尤其是恶性者）的定性诊断困难