血清乙型肝炎病毒表面抗原大蛋白检测的临床意义与评价

目的通过对乙型病毒性肝炎(乙肝)患者血清中乙肝表面抗原大蛋白(LHBs)、HBV DNA、乙肝前S1(PreS1)及传统的乙肝两对半的检测与平行比较研究,探讨LHBs用于临床诊断乙型肝炎的意义。方法检测385例乙肝患者的血清标本,LHBs、PreS1及乙肝两对半采用酶联免疫方法,HBV DNA检测采用实时荧光定量PCR法。结果307份HBV DNA阳性标本中LHBs的阳性率(86.97%)明显高于PreS1的阳性率(49.5%),两者差异有统计学意义(P<0.05);LHBs含量与HBV DNA拷贝数呈正相关性,r=0.935;HBeAg阴性标本中LHBs的检出率为76.92%,比较HBV DNA的检出率(67.95%)无统计学意义;PreS1的检出率(45.73%)则明显低于LHBs和HBV DNA。结论乙肝患者血清中LHBs表达与HBV DNA拷贝数呈正相关,两者的检出率与符合率均高于PreS1,LHBs检测可以用于反映乙肝患者病毒复制的血清免疫学指标。     

荧光定量聚合酶链反应检测血清中HBV-DNA

目的 :研究荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)检测HBV DNA对辨别病毒复制的临床意义。方法 :采用FQ PCR和ELISA方法 ,检测 79例患者血清HBV DNA拷贝数和免疫学血清指标。结果 :2 6例HBsAg、HBeAg、抗 HBc均阳性的标本 ,HBV DNA也全部阳性 ,平均拷贝数为 2 .7× 10 5/mL。 8例HBsAg、HBeAg阳性的标本 ,HBV DNA也全部阳性 ,平均拷贝数为5 .2× 10 4/mL。 2 1例HBsAg、抗 HBe、抗 HBc均阳性的标本HBV DNA阳性率为 6 6 .7% ,平均拷贝数为 3.1× 10 4/mL。 9例HBsAg阳性的标本HBV DNA阳性率为 11%。平均拷贝数为1.4× 10 3 /mL。结论 :荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA可以更加准确地判断HBV的感染和复制情况。     

高灵敏度乙肝HBV DNA检测在乙肝诊疗中的应用及临床意义

目的探讨高灵敏度乙肝HBV DNA检测在乙肝诊疗中的应用及临床意义。方法收集23例普通荧光定量PCR(常规)检测HBV DNA为阴性患者的血清,采用高灵敏度乙肝HBV DNA检测,将检测数据进行整理,与其临床实验室资料相结合,进行综合分析,归纳总结。结果23例国产乙肝荧光定量 PCR检测均为阴性患者,使用高灵敏度乙肝HBV DNA检测结果为13例阳性（最低检测限20IU/mL）,阴性10例,阳性检出率为56.52%,显然高灵敏度乙肝 HBV DNA检测的灵敏度高于常规检测方法。结论高灵敏度乙肝HBV DNA检测,其检测敏感性远高于常规检测方法,能检测到体内低水平的 HBV DNA,结合患者其他实验室资料及用药史综合分析,对乙型肝炎诊断和治疗具有重要的指导意义。     

荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒DNA

目的：了解不同乙型肝炎病毒(HBV)感染患者血清HBV-DNA含量与乙肝血清免疫标志物的关系并探讨其临床意义。方法：用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法定量检测375例不同临床类型HBV感染者及70例正常人血清HBV-DNA含量。结果：血清HBsAg阳性组与HBeAg阳性组HBV-DNA的检出率及含量均明显高于HBsAg阴性组和HBeAg阴性组，且HBeAg即使阴性，不论HBeAb阳性组或阴性组均仍有较高的HBV-DNA检出率。不同临床类型HBV感染者中均有HBV-DNA的检出。结论：定量PCR可真实反映HBV感染、复制及病程变化，对乙型肝炎临床诊断及治疗均有一定的临床意义。     

乙肝两种血清学模式HBV DNA与HBV M定量结果的关系

近年来有关乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)与乙型肝炎病毒血清学标志物(HBV M)的定性评价已有报道[1-3],我们对HBsAg阳性感染者的HBV DNA和HBV M进行定量测定,并对两种常见阳性模式(HBsAg/HBeAg/抗-HBc,HBsAg/抗-HBe/抗-HBc)的HBV DNA与HBV M结果进行定量分析,揭示两种模式HBV DNA与HBV M之间的关系。1材料和方法1.1材料收集HBsAg阳性血清标本共225份。HBV DNA采用荧光定量PCR测定,仪器为PE7000型PCR仪及上海申友试剂;HBV M采用微粒子酶免法,仪器为AXSYM免疫分析仪及配套试剂。1.2方法对225份血清标本进行HB…     

乙肝肝硬化患者血清HBV DNA与透明质酸的关系

目的研究乙肝肝硬化患者血清HBV DNA水平和血清透明质酸的关系。方法临床确诊为乙肝肝硬化的62例患者,采用荧光定量PCR检测血清HBV DNA水平,放射免疫法检测血清透明质酸,对血清HBV DNA水平和透明质酸的关系进行研究分析。结果乙肝肝硬化患者的血清透明质酸水平显著升高,随Child分级的加重血清透明质酸也呈增高趋势(P<0.05),但与血清HBV DNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙肝肝硬化患者的血清HBV DNA和肝硬化的程度及血清透明质酸水平无显著相关性。     

高灵敏度乙肝核酸定量与乙肝血清标志物的相关性分析

目的 探讨高灵敏度的荧光定量PCR检测的乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)与乙肝血清免疫标志物(HBV M)之间的相关性及临床意义.方法 选取234例患者标本,同时检测HBV DNA载量和HBV M.根据HBV M模式将结果分为五组,并对HBV DNA载量和HBV M之间的关系进行分析.选取177例乙肝患者,分析HBV DNA载量水平与HBeAg之间的关系.结果 Ⅰ组HBV DNA阳性率为77.4％;Ⅱ组HBV DNA阳性率为70.4％,两者之间差异无统计学意义(χ2=0.617,P ＞0.05).HBeAg表达水平与HBV DNA载量之间存在正相关关系(γ=0.812,P＜0.01).结论 高灵敏度HBVDNA与经典化学发光法的检测结果之间有很好的相关性.提高HBV DNA的检测灵敏度对于乙型肝炎患者,尤其对小三阳患者的病情和疗效评估具有重要的临床意义.     

时间分辨荧光免疫分析法和免疫放射分析法检测HBsAg的对比分析

HBsAg存在于HBV的外壳部分,是乙型肝炎的早期诊断指标之一。绝大多数HBV感染者外周血出现HBsAg。我们用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)法和免疫放射分析(IRMA)法对400份临床血清标本以及定值血清进行了HBsAg对比检测,现报道如下。材料与方法1材料血清:受检标本为广州邮电医院检验科收集的各类患者血清,检测前的标本保存于-20℃。adr亚型浓度为0.2μg/L、1.0μg/L定值血清,购自中国药品生物制品检定所。稀释用小牛血清购自郑州佰安生物有限公司。试剂:TRFIA定量检测试剂盒为广州市丰华生物工程有限公司和中山生物有限公司联合研制…     

荧光定量检测乙肝病毒含量在PHC患者中的临床应用

为进一步探讨HBV感染与原发性肝癌（PHC）的关系,本文采用实时荧光定量PCR法（Fluorescence quantitative PCR,FQ—PCR）对238例PHC患者进行HBV—DNA定量分析,旨在了解PHC患者HBV的定量情况,探讨HBV—DNA定量检测的应用价值,以及与乙肝标志物（HBV—M）的关系。     

抗-HBc单项阳性患者中的隐匿性HBV感染

目的 研究抗-HBc单项强阳性患者中的隐匿性HBV感染发生率并分析发生原因.方法 收集183例血清学检测抗-HBc单项强阳性（A≤0.1）患者血清标本,采用实时定量PCR进行HBV DNA含量检测.对于DNA定量阳性的标本,PCR扩增HBV pre-S/S区基因,并进行克隆测序.结果 183例血清标本中3例HBV DNA定量结果大于103拷贝/ml,占1.6%.这3例标本中有2例得到pre-S/S区测序结果,2例标本均存在S基因＂a＂决定簇内Q129R/P点突变,且突变株与野生型共存.结论 抗-HBc单项阳性患者中存在隐匿性HBV感染,HBsAg血清免疫学方法的漏检与HBV S基因突变有关,同时与循环中HBsAg量低于检测限也有一定关系.HBV隐匿感染不仅可以造成临床诊断失误,更为严重的是献血员HBV隐匿感染造成血液的污染.     

HBV-DNA与乙肝免疫标志物的相关性研究

本文通过对2002年～2003年期间本院收治的632例乙型肝炎患者血清进行免疫标志物和HBV实时定量PCR检测,分析HBV-DNA含量与乙肝标志物的关系,探讨其对临床诊断的指导价值。     

乙肝患者血清标志物和病毒含量的相关性研究

为探讨乙肝患者血清病毒标志物(HBV-M)和乙肝病毒DNA(HBV-DNA)含量之间的关系,分离618例乙肝患者血清标本,采用电化学发光免疫分析法检测乙肝两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb),实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法检测HBV-DNA含量.结果显示,618例患者血清中,HB...     

检测乙型肝炎病毒前S1抗原的临床价值

目的 通过检测乙肝病毒前S1抗原、乙肝病毒DNA以及乙肝两对半（HRV M）,探讨乙肝病毒前S1抗原用于临床诊断乙型肝炎的意义.方法 共检测276例乙肝患者血清标本,乙肝病毒前S1抗原和乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBVDNA.结果 血清中HBeAg、前S1抗原和HBV DNA的阳性率分别为56.5％、73.9％和76.0％;HBeAg阳性的156份标本中,HBV DNA的阳性率（94.8％）与前S1的阳性率（92.3％）之间差异没有统计学意义,HBeAg阴性的120份标本中前S1的阳性率与HBV DNA差异无统计学意义;HBV DNA高拷贝组[1.0×（105～108）、1.0×（103～105）]前S1抗原的阳性率明显高于低拷贝组（＜1.0×103）结论 前S1抗原、HBeAg与HBV DNA符合率较高,对无条件检测HBV DNA而HBe Ag阴性的血清,检测前S1抗原可起到提示病毒是否复制的补充作用.     

AmpliSenSOr-PCR定量检测血清乙型肝炎病毒

聚合酶链反应(PCR)技术应用于乙肝病毒的诊断具有特异性强、敏感度高、早期诊断等特点,但只能对HBV DNA做定性检测,且易产生交叉污染和假阳性等问题.我们应用AmpliSensor-PCR检测方法,杜绝了常规PCR所存在的缺点,直接由患者血清中检测HBV DNA的精确含量,探讨不同组别乙肝患者血清标志物的拷贝数在临床上的意义.     

荧光定量聚合酶链反应检测HBV-DNA的意义

目的　研究HBV DNA与HBV M、乙型肝炎临床类型的相关性 (意义 )。方法　用荧光定量聚合酶联反应 (FQ PCR)检测 10 5例乙型肝炎患者HBV DNA含量 ,分析其在乙型肝炎 5项指标(HBV M)中的检出率 ,在乙型肝炎不同类型中的分布。结果　HBV DNA与HBV M对比 ,HBsAg( )、HBeAg( )、HBcAb( )患者的检出率为 97% ,HBsAg( )、HBeAb( )、HBcAb( )患者的检出率为75 % ,HBsAg( )、HBcAb( )患者的检出率为 6 0 % ,HBsAg( )患者的检出率为 4 0 % ,HBsAb( )、HBeAb( )、HBcAb( )的 (或HBsAb阳性、HBcAb阳性 )病例未检测到HBV DNA。表明HBV DNA与HBV M的抗原呈正相关 ,组间差异有非常显著意义 (P <0 0 5 )。急性乙型肝炎血清HBV DNA检出率为 72 2 % ,慢性乙型肝炎检出率为 75 % ,肝硬化检出率为 70 %。血清HBV DNA与乙型肝炎不同临床类型差异无显著意义 (P >0 0 5 )。结论　HBV DNA的复制状态与不同乙型肝炎临床类型无明显相关性。与乙型肝炎抗原呈正相关。     

荧光定量聚合酶链反应检测解脲支原体感染的临床意义

目的　采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ -PCR)技术 ,准确定量检测待检标本中解脲支原体 (UU)的感染状况。方法　采用FQ -PCR技术 ,检测男女生殖道标本 76 5份 ,并同时用常规PCR技术 ,对比检测了 85例。结果　FQ -PCR检测76 5份标本 ,UU -DNA阳性 2 79份 ,阳性率 36 .5 % ,其DNA平均拷贝数为 2 .4× 10 4。 38例阳性患者治疗两周内复查 ,转阴率仅为 4 4 .7% ,治疗 3w后复查 ,转阴率达 76 % (P <0 .0 0 5 )。常规PCR结果重复检测时 ,2 5例阳性中 2例变为阴性 ,而 6 0例阴性中 4例变为阳性。FQ -PCR结果重复时完全吻合。结论　FQ -PCR检测UU ,具有快速、特异性高、定量准确等优点 ,并可为临床评价疗效提供依据。     

单核细胞乙型肝炎病毒cccDNA检测方法及应用价值

目的 建立检测HBV共价闭合环状DNA（ cccDNA）的巢式-荧光定量PCR法,检测外周血单核细胞（ PBMC）及骨髓单核细胞（MMNC）中cccDNA。方法 根据HBV cccDNA与松弛结构DNA（rcDNA）结构上的差异,设计2对跨缺口的特异性引物及下游的特异性TaqMan探针。根据Mung Bean Nuclease对rcDNA与cccDNA作用的不同,使cccDNA扩增而使rcDNA降解,分别用外引物及内引物进行PCR反应,再用荧光探针进行实时荧光定量PCR,根据阳性参照物,计算出检测标本定量值。结果 成功建立了HBV cccDNA巢式-荧光定量PCR的检测方法,线性范围为5.0× 10２～3.9×107拷贝/ml。用上述方法检测25例慢乙肝及肝硬化血清HBV DNA阳性患者外周血单核细胞中cccDNA,7例骨髓单核细胞中cccDNA,21例健康献血者外周血单核细胞中cccDNA,骨髓标本中有3例cccDNA阳性,25例外周血标本中有9例cccDNA阳性。结论 巢式-荧光定量PCR法可检测乙肝患者PBMC及MMNC中的HBVcccDNA含量。PBMC及MMNC中可检测到HBVcccDNA.     

乙型肝炎表面抗原定量与肝组织病理关系的临床研究

目的 探讨慢性乙型肝炎病毒感染者血清乙肝表面抗原定量水平与肝脏病理之间的关系.方法 收集我院272例乙肝表面抗原阳性超过6个月并接受肝脏穿刺活检的患者的临床资料.检测血清乙肝表面抗原定量、乙肝病毒基因型、ALT、HBV DNA、血常规、肝脏组织病理等各项资料,分别按照肝脏炎症活动程度(G0、G1、G2、G3、G4)和纤维化程度(S0、S1、S2、S3、S4)分组.观察分析乙肝表面抗原定量、HBV DNA与肝组织炎症活动程度和纤维化程度之间的关系.分析乙肝表面抗原定量与HBV DNA之间的相关性.结果 乙肝表面抗原定量与HBV DNA之间的相关性是显著的,表面抗原定量对数是对肝脏纤维化有显著影响的变量.结论 乙肝表面抗原对数是较DNA定量对数特异度和灵敏度更高的诊断肝脏纤维化程度的指标.     

慢性乙型肝炎患者HBV cccDNA定量方法的建立及应用

目的 建立慢性乙型肝炎患者HBV cccDNA荧光定量检测方法 ,并检测慢性乙型肝炎患者血清中HBV cccDNA含量.方法 根据HBV DNA结构特点,于HBV cicada缺口两侧高度保守区域设计巢式PCR引物和探针,并优化PCR反应条件;选取175例慢性乙型肝炎患者,提取抗病毒治疗前后血清DNA,以不降解质粒的ATP依赖的DNA酶(PSAD)进行酶切,进行rcDNA定量检测;分析影响血清HBV cccDNA检出率的相关因素,探讨血清HBV cccDNA载量与慢性乙型肝炎患者临床特征的关系.结果 慢性乙型肝炎患者血清中可检测到HBV cccDNA.血清HBV cccDNA检出率与血清HBV DNA载量相关.HBeAg阳性慢性乙肝患者血清HBV cccDNA载量高于HBeAg阴性慢性乙肝患者.结论 本方法 具有较好的敏感性,可用于HBV cccDNA的检测.     

探讨携带乙型肝炎病毒产妇母乳喂养安全性检测评价指标

目的 探讨乙肝产妇母乳喂养的安全性检测评价指标.方法 荧光定量PCR检测252例乙肝产妇的血清及乳汁HBV DNA.结果 乙肝产妇血清与乳汁的HBV DNA总阳性率无统计学差异(P＞0.05),双阳乙肝产妇血清及乳汁HBV DNA阳性率明显高于单阳乙肝产妇(P＜0.01).结论 同时检测HBeAg、血清及乳汁的HBV DNA对指导乙肝产妇母乳喂养有重要意义.