膀胱移行细胞癌中fhit基因和survivin基因的表达和意义

目的探讨fhit基因和survivin基因在膀胱移行细胞癌中的表达和意义。方法用免疫组化S-P法检测62例膀胱移行细胞癌组织及10例正常膀胱粘膜组织中fhit蛋白和survivin蛋白的表达。结果10例正常膀胱粘膜组织中fhit蛋白表达均为阳性，survivin蛋白表达均为阴性；fhit蛋白在膀胱移行细胞癌中阳性表达率为46．77％（29／62），肿瘤不同分级中随恶性程度的增长表达减少，Ⅰ级与Ⅲ级比较，差异有统计学意义（P〈0．05），不同临床分期中随分期的增长表达减少，Tis～T1与T2～T4比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；survivin蛋白在膀胱移行细胞癌中阳性表达率为56．5％（35／62），肿瘤不同分级中随恶性程度的增高表达增高（P〈0．05），不同临床分期中随分期的增长表达增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；fhit蛋白和survivin蛋白表达相关（P〈0．05）。结论Fhit基因和survivin基因在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起着重要的作用。Fhit基因可能通过肿瘤凋亡抑制途径发挥作用的。     

结肠癌STK15基因表达的病理学分析

目的探讨丝氨酸，苏氨酸激酶15（serine／threonine kinase15，STK15）在结肠癌组织中的表达，以及与临床病理指标间的关系。方法采用免疫组化检测STK15在67例手术切除结肠癌的肿瘤组织及邻近非肿瘤组织中的表达。结果STK15在结肠癌组织中的阳性率为40．29％（27／67），显著高于邻近的非癌组织8．95％（6／67，P〈0．01），STK15基因过表达与结肠癌分化以及浸润深度密切相关（P〈0．05），与其它临床病理指标无关。结论STK15基因可能在结肠癌的发生发展中起相应作用，其过表达程度可作为一新的结肠癌某些生物学行为判定指标。     

p21WAF1基因表达对人骨肉瘤预后的价值

目的 探讨骨肉瘤组织中p21^WAF1基因的表达与骨肉瘤生物学特性及预后的关系。方法 采用原位杂交及免疫组织化学（LSAB法）检测p21^WAF1mRNA及p21蛋白在45例骨肉瘤、10例骨纤维结构不良实体瘤组织标本的表达。结果 （1）p21蛋白阳性表达率在骨肉瘤中为17．7％（8／45）;（2）骨肉瘤组织高分化组与低分化组的p21蛋白阳性表达率之间的差异有统计学意义（40．0％,11．4％,X^2=4．34,P〈0．05）;（3）p21^WAF1mRNA表达阳性率在骨肉瘤中为42．2％（19／45）,骨肉瘤组织高分化组与低分化组的p21^WAF1mRNA阳性表达率之间的差异有统计学意义（60．0％,37．1％,X^2=20．6,P〈0．01）;（4）p21^WAF1mRNA表达阳性者术后生存时间高于表达阴性者术后生存时间（P〈0．05）。结论 （1）随着骨肉瘤恶性度的升高,p21^WAF1基因mRNA及p21蛋白的表达下降。（2）p21WAF1基因mRNA在骨肉瘤中的表达对评价患者的预后有一定价值。     

SEL1L基因在食管癌中的表达及意义

目的探讨SEL1L（human Sel-1-like）mRNA及其蛋白在食管癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测90例手术切除的食管鳞状细胞癌、35例距癌灶边缘5am以上切缘的正常黏膜、60例癌旁黏膜及20例内窥镜活检的食管鳞状上皮不典型增生组织中SEL1L蛋白的表达;运用原位分子杂交技术检测上述癌组织、正常黏膜、癌旁黏膜中SEL1L mRNA的表达。结果（1）SEL1L mRNA在食管鳞状细胞癌的表达率为80．0％（72／90）,较正常黏膜的14．3％（5／35）和癌旁黏膜的16．7％（10／60）高（P〈0．01）;SEL1L mRNA在有淋巴结转移组的表达阳性率为92．7％（38／41）比无淋巴结转移组69．4％（34／49）高（P〈0．01）。（2）SEL1L蛋白在鳞状细胞癌的表达阳性率为87．8％（79／90）,在鳞状上皮不典型增生中的表达阳性率为90．0％（18／20）。分别较正常黏膜的14．3％（5／35）和癌旁黏膜的13．3％（8／60）高（P〈0．01）。SEL1L蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床分期均无明显相关性（P〉0．05）。（3）食管鳞状细胞癌组织中SEL1L mRNA和SEL1L蛋白的表达呈明显正相关（r=0．492,P〈0．01）。结论（1）SEL1L蛋白表达的调控主要在转录水平,SEL1L蛋白表达水平的升高主要是相应转录水平上调的结果。（2）SEL1L蛋白过表达可能是食管鳞状细胞癌发生的早期表现,SEL1L蛋白的检测可作为识别食管癌高风险患者的生物标记物。     

STK 15基因沉默导致胃癌细胞分裂停滞

目的探讨丝氨酸／苏氨酸激酶15（serine／threonine kinase15,STK15）基因在胃癌细胞有丝分裂中的作用。方法应用RNA干扰技术（RNAi）抑制胃癌细胞株MKN45细胞STK15基因表达;real-time定量PCR及Western blot检测干扰前后STK15 mRNA及蛋白质表达的变化;倒置显微镜观察MKN45细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞周期的变化;MTT法检测细胞增殖速度的变化;免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察MKN45细胞微管及有丝分裂表型的改变。结果STK15基因沉默后。其mRNA及蛋白质表达明显下降,real-time PCR结果显示,转染后48h,STK15^-组STK15 mRNA水平较对照siRNA组的下降了89．54％;Western blot灰度比半定量检测显示,STK15蛋白水平较对照siRNA组降低了57．18％。较多MKN45细胞呈圆形改变并呈现G2期细胞的DNA含量,STK15^-组3个时间点的圆形细胞占18．95％,而对照siRNA组为8．34％,差异有统计学意义（P〈0．05）;流式细胞仪检测结果显示,STK15。组G2期DNA含量细胞平均值为26．13％,而对照siRNA组G2期DNA含量细胞平均值12．46％（P〈0．05）。细胞增殖速度减慢（P〈0．05）。细胞有丝分裂表型发生改变（P〈0．05）。结论STK15基因在MKN45细胞有丝分裂过程中可能起着关键作用,阻断其表达可导致MKN45细胞有丝分裂停滞。     

喉癌 STK15基因异常与中心体扩增的研究

目的　研究喉癌中 STK15基因的异常及中心体扩增情况。方法　应用逆转录 -聚合酶链反应方法 ,检测 6 2例喉鳞状细胞癌和人喉鳞状细胞癌细胞系 Hep- 2中 STK15基因 m RNA表达水平 ;应用聚合酶链反应 -单链构象多态性检测上述组织及细胞中 STK15基因第 6、7外显子突变 ;以 Hep- 2细胞系为代表应用免疫荧光方法检测中心体扩增情况。结果　在 39例 ( 6 3% )喉癌及 Hep- 2细胞系中检测到了STK15基因的高表达 ;在上述组织和细胞中均未检测到 STK15基因第 6、7外显子的突变 ;Hep- 2细胞系有明显的中心体扩增 :单个细胞中心体数目变化范围为 1～ 7,有中心体扩增的细胞数为 11%～ 2 3%。结论　在 Hep- 2细胞系中发现了 STK15基因高表达与中心体扩增 ,提示 STK15基因高表达引起中心体扩增 ,可能是导致该细胞系染色体不稳定的重要因素 ;在喉癌组织中观察到了STK15基因高表达 ,提示它可能是导致喉癌发生的多因素之一     

喉癌中EGFR基因扩增、表达及临床意义

目的研究喉癌中表皮生长因子受体(EGFR)基因的扩增、表达,探讨其在喉癌发生、发展中的作用及临床意义。方法采用差异PCR(differential PCR)方法检测40例喉鳞状细胞癌及配对癌旁正常组织中EGFR基因的扩增(即基因拷贝数增加);应用RT-PCR方法检测EGFR mRNA水平;应用SPSS13.0软件对数据进行统计学分析。结果喉癌组织中有13例(占32.5%)EGFR基因拷贝数增加,癌旁对照组中则未检测到(χ2=15.537,P<0.005);喉癌组织中EGFR mRNA平均积分光密度为872.356±62.340,癌旁对照组为346.425±57.380(t=5.959,P<0.001);喉癌组织分化程度越低,病理分期越晚,EGFR基因扩增和mRNA表达水平越高(P<0.05)。结论喉癌中EGFR基因在DNA水平上的扩增是EGFR mRNA过表达的原因之一,EGFR的扩增和过表达在喉癌的发生、进展中发挥一定作用。     

显色原位杂交和免疫组织化学检测乳腺癌HER2/neu基因状况和蛋白表达的对照性研究

目的探讨显色原位杂交（CISH）在检测乳腺癌中HER2／neu基因扩增上的作用。方法挑选乳腺浸润性导管癌患者组织石蜡蜡块（回顾性255例,前瞻性271例）,进行免疫组织化学（IHC）、CISH检测。15例回顾性标本送往德国HERA检测中心进行FISH检测。结果（1）回顾性病例中IHC阳性3＋者CISH基因扩增率为91．6％（120／131）,IHC2＋者CISH基因扩增率为56．5％（39／69）,IHC与CISH检测结果符合率为81．2％（207／255）,两者明显相关（P〈0．01）。（2）前瞻性病例中IHC蛋白过表达率31．7％．CISH基因扩增率27．3％。IHC3＋者CISH基因扩增率为91．4％（53／58）,IHC2＋者CISH基因扩增率为46．4％（13／28）,IHC与CISH检测结果符合率为89．7％（243／271）,两者明显相关（P〈0．01）。（3）经德国检测中心荧光原位杂交（FISH）检测的15例中14例和CISH结果完全一致,1例检测失败,而CISH为无扩增。（4）CISH检测基因扩增与雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达明显负相关（P值均〈0．01）。结论CISH检测HER2基因扩增结果与IHC检测蛋白过表达及FISH结果高度一致,CISH是检测HER2基因扩增的一项新技术。     

Bcl-2和ER在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的：探讨细胞凋亡相关基因bcl-2和雌激素受体（ER）在甲状腺乳头状癌中的表达及意义。方法：用免疫组织化学sP法研究不同甲状腺组织中ER和bcl-2的表达，其中甲状腺乳头状癌50例、甲状腺良性腺瘤30例、腺瘤旁正常组织16例。结果：甲状腺乳头状癌组织中ER和bcl-2蛋白阳性率分别为54．0％（27／50）、66．0％（33／50），甲状腺良性腺瘤中ER和bcl-2蛋白阳性率分别为26．7％（8／30）、36．7％（11／30），正常甲状腺组织中ER阳性率为12．5％（2／16）、而bcl-2则不表达。甲状腺乳头状癌中ER的表达明显高于甲状腺良性腺瘤和正常甲状腺组织（P〈0．05），bcl-2的表达明显高于甲状腺良性腺瘤（P〈0．05）；且甲状腺乳头状癌中bcl-2和ER表达存在正相关关系（P〈0．05）。结论：雌激素在甲状腺乳头状癌的发生、发展中有促进细胞增殖的作用；对ER和bcl-2的联合检测在甲状腺乳头状癌的诊断及内分泌治疗有一定的临床意义。     

口腔鳞状细胞癌细胞周期蛋白E表达与中心体扩增相关性

目的了解口腔鳞状细胞癌细胞周期蛋白E（cyclin E）表达与中心体扩增相关性,探讨其中心体扩增的可能分子机制。方法正常口腔黏膜组织12例,不同分化程度的口腔鳞状细胞癌46例石蜡包埋组织,采用间接免疫荧光双重染色（γ-微管蛋白单克隆抗体及细胞角蛋白多克隆抗体）观察口腔鳞状细胞癌中心体扩增状况;采用免疫组织化学（SABC法）检测相应组织cyclin E蛋白表达情况,分析cyclin E蛋白表达与中心体扩增之间的相关性。结果中心体扩增可见于80．4％（37／46）口腔鳞状细胞癌组织中,而cyclin E蛋白过表达可在65．2％（30／46）的口腔鳞状细胞癌组织中见到;中心体扩增发生率在cyclin E阳性组为90．0％（27／30）,而在cyclin E蛋白阴性组为10／16,两组间差异有统计学意义（x^2=5．014,P〈0．05）;Spearman相关分析显示中心体扩增与cyclin E蛋白阳性表达间存在相关关系（r=0．330,P〈0．05）;绝对危险度分析OR值为5．400（1．130,25．809）。结论肿瘤细胞中心体循环调控可能是一个多因素参与的复杂过程,cyclin E蛋白表达的高调作为危险因素之一可能在口腔鳞状细胞癌中心体扩增中起一定作用。     

HINT1基因在喉鳞状细胞癌中的表达和意义

目的组氨酸三聚体核苷结合蛋白1(histidine triad nucleotide-binding protein1,HINT1)基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达情况及其与患者临床病理特征的关系,探讨HINT1基因在喉鳞状细胞癌发病过程中的作用。方法通过实时定量PCR和免疫组织化学检测82例喉鳞状细胞癌组织和56例癌旁组织中HINT1mRNA和蛋白水平的表达,分析其蛋白表达与患者临床病理特征的关系。结果喉鳞状细胞癌组织HINT1mRNA水平显著低于癌旁组织(P<0.01),HINT1蛋白表达阳性率显著低于癌旁组织(P<0.05)。晚期喉鳞状细胞癌组织中HINT1蛋白表达显著低于早期喉鳞状细胞癌组织(P<0.05)。结论 HINT1在喉鳞状细胞癌中可能发挥抑癌基因的作用。     

卵巢癌中myc基因家族扩增的初步分析

本研究采用聚合酶链反应（PCR）结合中性聚丙烯酰胺凝胶电泳和激光扫描技术，对38例卵巢癌、20例癌旁组织、4例卵巢良性上皮性肿瘤及2例正常卵巢组织进行myc基因家族检测，发现在卵巢癌组织中C－myc、N－myc、L－myc扩增率分别为47％、42％、42％。癌旁组织扩增率分别为40％、20％、40％。在淋巴结转移的10例卵巢癌标本中，C－myc与N－myc全部扩增，L－myc扩增只有2例，良性肿瘤及正常组织均未有扩增。结果还显示：L－myc和N－myc同时扩增占16％（6／38），N－myc和C－myc同时扩增占26％（10／38），而C－myc和L－myc同时扩增占16％（6／38），没有一例三种基因同时扩增。大多数扩增与临床分期、病理分化程度、淋巴结转移密切相关。     

MUS81基因在喉癌中的突变和表达

目的 探讨MUS81基因突变和表达与喉癌发生发展的相关性.方法 应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术结合DNA测序检测分析了42例喉癌患者MUS81基因第9、10外显子的突变;应用半定量逆转录-PCR和Western印迹方法分析MUS81基因在喉癌组织中的表达情况.结果 42例喉癌、癌旁组织标本中,癌旁正常组织均无突变,喉癌组织标本中19例发生突变,占45.2%(19/42),11例喉癌组织第9外显子发现有突变,占26.2%(11/42),8 例喉癌组织第10外显子有突变,占19%(8/42),分析表明具有统计学意义(P<0.01).逆转录-PCR结果表明,42例喉癌中有17例MUS81基因mRNA低表达,占40.48%(17/42).Western印迹方法分析结果表明,42例喉癌中有17例MUS81蛋白质低表达,占40.48%(17/42),经统计学分析肿瘤组与对照组差异有统计学意义(P<0.01).分析表明MUS81基因突变与mRNA和蛋白质低表达有显著相关性(P<0.01).统计结果显示喉癌MUS81基因突变与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性(P>0.05).MUS81基因低表达与TNM分期、年龄和淋巴结转移无相关性(P>0.05).结论 发现MUS81基因在喉癌组织中有突变发生及表达异常,提示MU81基因突变和表达异常可能是喉癌发生及发展的重要因素之一.     

肝细胞癌细胞周期蛋白D1基因的扩增和表达

目的　探讨细胞周期蛋白 (cyclin)D1基因 (CCND1)扩增和cyclinD1在肝细胞癌 (HCC)中的表达情况及其与HCC发生发展的关系。方法　分别应用差异聚合酶链反应 (DPCR)、逆转录(RT) PCR和免疫组织化学法检测 2 0例HCC中cyclinD1基因扩增率、mRNA和蛋白表达状况 ,并分析其与HCC组织学分级的关系。结果　cyclinD1基因扩增结果为 6/ 2 0 ,其mRNA和蛋白过表达分别为9/ 2 0和 14 / 2 0。cyclinD1mRNA表达与基因扩增相关 (P <0 .0 5) ,也和蛋白表达水平相关 (P <0 .0 5)。cyclinD1蛋白表达与HCC组织学分级具有相关性 (P <0 .0 5)。结论　cyclinD1基因扩增在HCC中较常见 ,是引起cyclinD1mRNA和蛋白过表达的主要原因之一。cyclinD1蛋白过表达与HCC的组织学分级相关。cyclinD1基因扩增及过表达可能在肝癌的演进和分化中起重要作用     

STK15基因与恶性肿瘤发生发展的关系

摘要：丝氨酸苏氨酸激酶15（STK15）基因扩增和高表达可引起中心体扩增，染色体不稳定，最终导致细胞的恶性转化。本文综述了STK15基因与恶性肿瘤的关系，对研究STK15基因在肿瘤的发生机制、诊断及治疗中的应用前景等作以阐述并提出了一些尚需探讨的问题。     

The role of HER2/neu overexpression/amplification in the progression of ductal carcinoma in situ to invasive carcinoma of the breast.

HER2/neu overexpression/amplification is seen more frequently in ductal carcinoma in situ, particularly high-grade ductal carcinoma in situ (50-60%), than in invasive ductal carcinoma of the breast (25-30%). To date, however, the role of HER2/neu in the progression of in situ to invasive disease has not been clarified. Two hundred fifty-one breast tumors were retrieved from the pathology files at Mount Sinai Hospital. These included 91 cases of ductal carcinoma in situ, 136 cases of invasive ductal carcinomas with associated ductal carcinoma in situ, and 24 cases of pure invasive carcinomas. All cases were reviewed and stained with two monoclonal antibodies to HER2/neu (CB11 and TAB250). Immunohistochemical staining was recorded using a semiquantitative scoring system (1). Representative cases were also investigated using fluorescence in situ hybridization. HER2/neu protein overexpression (defined as immunohistochemical staining with score of >or=5) was seen in 34% of cases of pure ductal carcinoma in situ, 17% of invasive carcinomas with associated ductal carcinoma in situ, and 12.5% of pure invasive carcinomas (P =.01). Sixty percent of cases of high-grade ductal carcinoma in situ showed HER2/neu protein overexpression, versus 29% of high-grade invasive carcinomas with associated ductal carcinoma in situ and 22% of high-grade pure invasive ductal carcinomas (P =.02). The concordance between the immunohistochemical staining in the in situ and invasive components of individual tumors was 90%. Thirty-three cases were also evaluated by fluorescence in situ hybridization and showed concordance between the immunohistochemical results and the degree of gene amplification in 91% of cases, whereas 3 of 33 cases showed HER2/neu gene amplification (HER2/CEP17 = 2.3-3.7) by fluorescence in situ hybridization in the absence of positive immunohistochemical staining. One case showed HER2/neu gene amplification in the associated ductal carcinoma in situ (HER2/CEP17 ratio = 6.5), with no evidence of gene amplification in the invasive tumor (HER2/CEP17 ratio = 1.14). Multiple genetic events are required for the development of an invasive phenotype. The findings from this study suggest that the genetic event of HER2/neu gene amplification/protein overexpression may not play a key role in the progression of ductal carcinoma in situ to invasive carcinoma and that other molecular alterations may be more important in the initiation of invasion in ductal carcinoma of the breast.