喷昔洛韦对单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的抑制作用

目的　评估喷昔洛韦钠盐在体内外对HSV Ⅰ和HSV Ⅱ感染的抑制作用。方法　在组织培养中用CPE抑制实验测定喷昔洛韦钠盐对HSV Ⅰ和HSV Ⅱ所致vero细胞病变的抑制作用 ;在BALB/c小鼠中测定其对HSV Ⅰ感染BALB/c小鼠所致耳部皮损的治疗作用。结果　喷昔洛韦钠盐能有效抑制 10 0TCID50 HSV Ⅰ (sm44株 )和HSV Ⅱ (3 3 3株 )感染vero细胞所产生的细胞病变作用 ,半数有效剂量 (IC50 )分别为 1.95 μg/ml和 3 .90 μg/ml ;使HSV Ⅰ病毒感染性滴度下降 99%的药物浓度 (IC99)为 2 .40 μg/ml。在HSV Ⅰ (sm44)感染BALB/c小鼠中 ,喷昔洛韦钠盐大剂量组 (2 5 0mg/kg·d)、中剂量组 (10 0mg/kg·d)、小剂量组 (5 0mg/kg·d)均能明显降低HSV Ⅰ感染BALB/c小鼠所致耳部皮损作用。 结论　喷昔洛韦钠盐在体内外具有抗HSV Ⅰ和HSV Ⅱ感染的作用。     

小檗碱衍生物HB-13体外抗单纯疱疹病毒的研究

目的 探讨小檗碱衍生物HB-13及其前体小檗碱体外抗HSV-1和HSV-2的活性.方法 利用Vero细胞体外培养模型,以阿昔洛韦(ACV)为对照药,通过观察细胞病变效应,检测HB-13和小檗碱的细胞毒性、HSV-1和HSV-2液的病毒滴度及药物抑制病毒致细胞病变效应.结果 HB-13、小檗碱和阿昔洛韦的半数中毒质量浓度(TC50)分别为31.99,380和>800 μg/mL;对HSV-1的半数抑制质量浓度(IC₅₀)分别为1.328,>100和0.443 μg/mL,治疗指数分别为24.09,<3.80和>1805.87;对HSV-2的IC₅₀分别为1.344,>100和0.679μg/mL;治疗指数分别为23.80,<3.80和>1178.20.结论 HB-13具有明显的抗HSV作用,而小檗碱无实用抗HSV活性.     

单纯疱疹病毒2型药物敏感性测定及其阿昔洛韦耐药株的建立

目的应用空斑抑制试验测定单纯疱疹病毒2型(HSV-2)药物敏感性,并建立体外耐药病毒株。方法将HSV-2接种于乳兔肾细胞中,加入不同浓度的阿昔洛韦(ACV),培养72h后固定、染色、清点空斑数并计算药物的半数抑制浓度(IC50),通过IC50来判断HSV-2的药物敏感性。将HSV-2在含ACV环境中连续培养9代,分别在第3,6和9代测定其IC50。结果ACV对HSV-2标准株Sav毒株的IC50为1.1μg/mL。HSV-2在含ACV的环境中连续培养3代后即产生了耐药性,第3,6和9代的IC50分别为8.4μg/mL,56.9μg/mL和121.3μg/mL。结论空斑抑制试验是测定病毒药物敏感性的有效、实用的方法,建立的体外耐药病毒株可用于HSV-2的耐药性研究。     

解脲及人型支原体对9种药物体外敏感性的实验研究

本文用肉汤稀释法,进行10株解脲支原体和10株人型支原体临床株对盐酸四环素等9种药物的体外敏感性测定。结果表明,四环素类药物,特别是强力霉素对解脲支原体的体外抑制作用最强,最低抑菌浓度(MIC)范围为<0.06～4μg/ml,其次为氟嗪酸、环丙氟哌酸及罗氟酸、红霉素四种,它们的MIC范围为0.25～4μg/ml,乙酰螺旋霉对解脲支原体的活性较差,MIC50为8μg/ml。人型支原体对强力霉素及盐酸四环素最敏感,MIC为<0.06～0.5μg/ml,环丙氟哌酸、氟嗪酸及罗氟酸次之,MIC范围为<0.06～4μg/ml,乙酰螺旋霉素和美满霉素的MIC50分别为1μg/ml及2μg/ml,而解脲支原体及人型支原体对头孢拉啶不敏感,MIC>256μg/ml。     

天疱疮或大疱性类天疱疮合并单纯疱疹病毒感染8例临床特征及治疗分析

目的回顾分析天疱疮/大疱性类天疱疮(BP)合并单纯疱疹病毒(HSV)感染的临床特征及治疗方法。方法回顾分析2016—2021年在武汉市第一医院住院治疗的天疱疮/BP合并HSV感染病例的临床特征及治疗和随访情况。结果 8例天疱疮/BP合并HSV感染患者中, 男2例, 女6例, 年龄(50.6 ± 8.3)岁, 包括5例寻常型天疱疮, 1例落叶型天疱疮, 2例BP。7例合并HSV-1感染, 1例合并HSV-2感染。8例均因天疱疮或BP接受系统糖皮质激素及免疫抑制剂治疗, 并对治疗抵抗入院, 其中7例表现为原发病灶加重或复发, 1例表现为全身皮损增加。HSV感染位于躯干4例, 口腔4例, 头皮3例, 面部2例。皮疹表现为不规则的糜烂面, 伴血痂, 部分为中央有脐凹的脓疱, 7例伴有皮疹处明显疼痛。发生HSV感染时, 6例天疱疮患者抗Dsg1抗体均下降, 5例寻常型天疱疮中4例抗Dsg3抗体下降;2例BP患者中1例抗BP180抗体降低, 1例升高。予足量足疗程抗病毒治疗(伐昔洛韦或更昔洛韦治疗7 ～ 14 d), 所有患者HSV感染均被控制, 自身免疫性大疱性皮肤病严重程度评分较抗病毒治疗前均...     

单纯疱疹病毒2型临床分离株体外对阿昔洛韦和伐昔洛韦的敏感性测定

目的 测定南京地区收集的15株单纯疱疹病毒2型(HSV-2)对阿昔洛韦和伐昔洛韦的敏感性,初步建立空斑法提取阿昔洛韦耐药株.方法 Vero细胞培养法分离扩增出临床毒株,直接免疫荧光法分型,并用MTT法测定15株2型毒株对阿昔洛韦、伐昔洛韦的敏感性.体外阿昔洛韦诱导,空斑纯化HSV耐药株.结果 15株临床株对阿昔洛韦和伐昔洛韦的半数病毒抑制质量浓度(IC₅₀)分别为0.0215～0.2799μg/mL(平均0.0766μg/mL),0.0549～0.4575μg/mL(平均0.1605μg/mL).生殖器疱疹初发组与复发组、用药组与未用药组对2种药物的敏感性采用Wilcoxon秩和检验,P值均>0.05,差异无统计学意义.从15株HSV-2临床株中未提取到耐药空斑;从HSV-1 Sam实验室标准株提取到一个耐药空斑,MTT法测定阿昔洛韦IC₅₀为13.36μg/mL;从HSV-2 333标准株中提取到9个耐药空斑,扩增后MTT法测定其对阿昔洛韦的IC₅₀为1.04～5.08 μg/mL.结论 目前在南京地区收集的HSV-2型毒株对阿昔洛韦和伐昔洛韦敏感性较高,尚未发现耐药株.体外药物诱导、空斑纯化能较快提取到HSV耐药株.     

生殖器部位皮损的单纯疱疹病毒检测及分型

目的 探讨生殖器疱疹部位皮损的不典型表现及其与单纯疱疹病毒型别的关系。方法 对外生殖器部位及其周围有硬结或疖肿、裂隙、毛囊炎等非水疱性皮肤黏膜损害的患者进行临床资料采集和分析,并对皮损标本进行单纯疱疹病毒的分离培养、PCR检测和病毒分型。结果 105例有外生殖器部位非水疱性皮损的患者入选本研究,在硬结(或疖肿)、裂隙、毛囊炎、类似擦破、单个溃疡、非特异性红斑和红肿渗液性包皮龟头炎皮损中,PCR检测HSV的阳性率分别33.3%(6/18)、20%(3/15)、37.5%(6/16)、28.6%(2/7)、33.3%(4/12)、20%(5/25)和50%(6/12),总的检出阳性率为30.5%(32/105)。分离培养法检测HSV的阳性率分别为22.2%(4/18)、13.3%(2/15)、25%(4/16)、14.3%(1/7)、33.3%(4/12)、8%(2/25)和41.7%(5/12),总的检出阳性率为21%(22/105)。两种方法检测HSV的总检出率差异无统计学意义(κ=0.095,P=0.114)。HSV-PCR分型结果与荧光单克隆抗体分型结果相符。在所有HSV阳性者中,HSV-1感染占9.4%(3/32),HSV-2感染占90.6%(29/32)。结论 生殖器HSV感染的皮肤黏膜损害多样,可为外生殖器部位的硬结(疖肿)、裂隙、毛囊炎、类似擦破、单个溃疡、非特异性红斑和红肿渗液性包皮龟头炎等不典型表现,而且主要由HSV-2感染引起。     

性病门诊患者单纯疱疹病毒血清型特异性抗体的检测

目的了解本地区性病门诊患者单纯疱疹病毒感染的血清学特征。方法用酶联免疫吸附试验法对864例性病患者及100例健康对照人群进行血清HSV1及HSV2抗体检测。结果性病患者血清HSV1IgM,HSV1IgG,HSV2IgM,HSV2IgG抗体阳性率分别为13.8%,90.3%,15.4%,42.4%,明显高于健康对照者的5.0%,82.0%,0,4.0%。女性患者HSV1型和2型IgM抗体阳性率分别为17.3%和23.0%,明显高于男性患者的11.0%和9.0%;男女患者HSV1型和2型IgG抗体阳性率均无统计学差异。结论性病门诊患者HSV感染严重,尤其是HSV2感染。对血清HSV2抗体阳性者采取行为干预及预防性治疗,对降低HSV传播的危险性及复发频率具有十分重要的意义。     

性病与HIV感染者中HSV2、HBsAg和HCV的检测

目的 比较性病患者和HIV感染者血清中单纯疱疹病毒(HSV)、乙型肝炎病毒(HBV)及丙型肝炎病毒(HCV)的感染情况,为采取综合性的防治方案提供参考依据。方法 对经蛋白印迹法确证的HIV(+)/AIDS库存血清标本和梅毒、淋病及衣原体感染患者血清标本,用ELISA方法同时检测HSV2-IgG、HSV2-IgM、HBsAg和HCV-IgG4项指标,并对2组标本的检测结果进行比较。结果 在76份性病样品中,检出HSV2-IgG24例占31.58%;HSV2-IgM1例占1.32%;HBsAg8例占10.53%和HCV1例占1.32%。在另外分组的14例HIV阳性标本中,检出HSV2-IgG7例占50.00%;HSV2-IgM5例占35.71%;HBsAg8例占57.14%和HCV3例占21.43%。在总共90份标本中,有6例标本同时检测到HSV和HBV;2例标本同时检出HSV-IgM和HBV;2例同时检出上述4项指标。统计分析发现,HIV(+)/AIDS组中HSV、HBV和HCV的检出率明显高于性病组(P<0.05)。结论 HIV(+)/AIDS患者中合并HSV、HBV及HCV的感染率明显高于其他性病患者。     

紫草抗Ⅱ型单纯疱疹病毒的实验研究

采用原代兔肾细胞培养方法对紫草水煎液抗Ⅱ型疱病毒的作用进行研究,结果其MIC为3．125mg/ml,MFC为6．25mg/ml,并对HSV的感染有预防作用和对病毒颗粒有直接杀伤作用。     

Herpes simplex virus: isolation,cytopathological characterization and antiviral sensitivity

BACKGROUND

Herpes simplex virus (HSV) infection is an endemic disease and it is estimated that 6095% of the adult population are infected with symptoms that are usually self-limiting, though they can be serious, extensive and prolonged in immunocompromised individuals, highlighted by the emergence of drug-resistant strains. The study of the wild-type HSV strains based on the cytopathogenic features and its antiviral sensitivity are important in the establishment of an antivirogram for controlling the infection.

OBJECTIVE

This study sought to isolate and examine the cytopathological characteristics of circulating strains of the Herpes simplex virus, from clinical specimens and their sensitivity to commercially available antiherpesvirus drugs, acyclovir, phosphonophormic acid and trifluridine.

METHODS

Herpes simplex virus isolation, cytopathological features and antiviral sensitivity assays were performed in cell culture by tissue culture infectious dose or plaque forming unit assay.

RESULTS

From twenty-two clinical specimens, we isolated and adapted nine strains. Overall, the cytopathic effect was detected 24 h post-infection (p.i.) and the presence of syncytia was remarkable 48 h p.i., observed after cell staining. Out of eight isolates, four developed plaques of varying sizes. All the isolates were sensitive to acyclovir, phosphonophormic and trifluridine, with the percentage of virus inhibition (%VI) ranging from 49.7-100%.

CONCLUSIONS

The methodology for HSV isolation and characterization is a straightforward approach, but the drug sensitivity test, regarded as being of great practical importance, needs to be better understood.     

天疱疮合并单纯疱疹病毒感染的研究进展

【摘要】 病毒感染是天疱疮常见的并发症之一,近年来天疱疮合并病毒感染的相关研究主要集中于单纯疱疹病毒（HSV）。有研究显示,HSV感染会对天疱疮患者的病程、治疗效果甚至皮损形态等产生影响。但由于现有研究在样本量、检验方式等方面存在较多差异,故HSV在天疱疮患者中的发生率及对天疱疮临床特征的总结在各研究结果中差异较大。本文就天疱疮合并HSV感染的发生率及临床特征做一综述,以提高临床医生对该病的认识并为诊治提供依据。     

荧光多重实时PCR检测单纯疱疹病毒

目的建立单纯疱疹病毒的荧光多重实时PCR检测及分型技术，为生殖器疱疹的诊断及病毒分型提供快捷、敏感、特异的方法。方法以细胞培养法为对照，用Smart Cycler System作为实验平台，以DNA探针荧光标记技术建立荧光多重实时PCR，用于检测生殖器疱疹患者临床标本中的1型和2型单纯疱疹病毒(HSV1、HSV2)DNA。结果荧光多重实时PXR检测HSV1和HSV2 DNA的敏感性和特异性均为100％，可检测出低至1～5拷贝的HSV DNA，30min左右即可完成整个检测过程．而细胞培养的敏感性和特异性分别为70．10％和100％。结论基于Smart Cycler System的荧光多重实时PCR是一种易于操作、扩增效率高、封闭式的核酸扩增技术，可用一次PCR反应就能快速、敏感、准确地对临床标本中的单纯疱疹病毒进行检测和分型。     

COVID-19 infection and vaccines: potential triggers of Herpesviridae reactivation

Since the onset of the COVID-19 outbreak, numerous articles have highlighted a possible link between COVID-19 vaccination or infection and Herpesviridae co-infection or reactivation. The authors conducted an exhaustive literature review on this topic, the results of which are presented individually for each member of the Herpesviridae family: Herpes Simplex Virus (HSV) types-1 (HSV-1) and 2 (HSV-2); Varicella-Zoster Virus (VZV); Epstein-Barr Virus (EBV); Cytomegalovirus (CMV); HHV-6; HHV-7; and HHV-8. These human herpesviruses can serve as prognostic markers for the COVID-19 infection and may even underlie some of the clinical manifestations initially attributed to SARS-CoV-2. In addition to SARS-CoV-2 infection, all corresponding vaccines approved to date in Europe appear capable of inducing herpesvirus reactivation. It is important to consider all viruses of the Herpesviridae family when managing patients infected with or recently vaccinated against COVID-19.     

皮肤淋巴瘤与EB病毒潜伏感染的关系及病毒亚型的分析

目的 探讨EB病毒潜伏感染及其亚型与皮肤淋巴瘤的相关性.方法 标本来源于41例淋巴瘤患者的皮肤组织和38例健康成人咽部洗漱液.采用原位杂交、PCR、巢式PCR、Southern杂交方法检测EB病毒及其亚型.通过Southern杂交对5例自然杀伤/T细胞淋巴瘤病例中EB病毒末端重复序列进行分析.结果 8例自然杀伤/T细胞淋巴瘤、4例皮下脂膜炎型淋巴瘤、1例自然杀伤/T淋巴细胞增生症、1例血管免疫母细胞恶性淋巴瘤和1例组织细胞样淋巴瘤EB病毒原位杂交和PCR结果均阳性.38例正常人中有14例咽部携带有EB病毒.15例蕈样肉芽肿、5例Sézary综合征病例中,EB病毒原位杂交和EB病毒BMRF1基因PCR扩增均为阴性.除1例淋巴细胞增生症患者为EB病毒亚型1和2双重感染外,其它病例均为亚型1感染.正常人群咽部携带亚型1EB病毒.5例自然杀伤/T细胞淋巴瘤与EB病毒末端重复序列特异性探针杂交后,均只产生一条杂交带.结论 EB病毒潜伏感染与皮肤自然杀伤/T细胞淋巴瘤及皮下脂膜炎型淋巴瘤相关,但与蕈样肉芽肿和Sézary综合征无明显相关性.肿瘤细胞中的EB病毒与正常人群咽部所携带的病毒亚型相同,均为亚型1.肿瘤细胞单克隆增殖发生于EB病毒感染之后,此结论支持EB病毒在自然杀伤/T细胞淋巴瘤中的致病作用.     

EB病毒感染相关的皮肤淋巴增殖性疾病二例

目的 报道EB病毒感染相关的皮肤淋巴增殖性疾病2例及其与慢性活动性EB病毒感染的关系。方法 分析2例皮肤淋巴增殖性疾病患者的临床资料、实验室检查、治疗和转归。结果 2例患者均有间断性发热,淋巴结肿大,反复发作的丘疹、丘疱疹、坏死、痘疮样瘢痕,皮疹分布于曝光和非曝光部位。皮损组织病理示真皮内淋巴样细胞浸润,细胞形态异形,侵犯血管周围及部分皮下组织。免疫组化显示浸润细胞以CD8+细胞为主;T细胞受体γ基因（TCRγ基因）阴性;EB病毒原位杂交阳性。外周血EB病毒DNA拷贝数高于正常。糖皮质激素治疗后病情缓解。结论 2例皮肤淋巴增殖性疾病的生物学行为呈慢性惰性经过,与慢性活动性EB病毒感染密切相关。     

药疹患者人类疱疹病毒7型感染的检测

目的 探讨人类疱疹病毒7型（HHV-7）感染在药疹发病中的作用。 方法 收集50例药疹患者（其中重型药疹15例）及50例健康人外周血,采用PCR检测外周血单一核细胞中HHV-7 DNA特异性片段;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清HHV-7 IgM水平。 结果 50例药疹患者HHV-7 DNA阳性率（82.00%,41例）高于健康对照组（62.00%,31例）,两组差异有统计学意义（χ2 = 4.96,P < 0.05）;重型药疹患者（93.33%,14/15）、轻型药疹患者（77.14%,27/35）及健康对照组HHV-7 DNA阳性率差异有统计学意义（χ2 = 6.32,P < 0.05）,其中重型组高于对照组（q = 3.50,P < 0.05）;重型药疹患者急性期与恢复期HHV-7 DNA阳性率差异无统计学意义（P > 0.05）。药疹患者HHV-7 IgM水平（69.3190 ± 25.2897 ng/L）高于健康对照组（59.7853 ± 22.4382 ng/L,t = 1.99,P < 0.05）;轻型药疹（65.4791 ± 21.3261 ng/L）、重型药疹（74.3407 ± 31.4112 ng/L）及健康对照组间差异均无统计学意义（均P > 0.05）。HHV-7 DNA阳性与阴性药疹患者HHV-7特异性IgM水平（分别为63.7481 ± 27.2391 ng/L、65.5802 ± 36.2584 ng/L）差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 药疹患者中存在HHV-7活动性感染,HHV-7感染可能是药疹发病或加重的因素。     

武汉地区水痘带状疱疹病毒基因型分析

目的 探讨武汉地区水痘带状疱疹病毒流行的主要基因型。方法 收集96例水痘、带状疱疹患者皮损标本。采用煮沸、冻融方法提取标本中的DNA。多重PCR扩增水痘带状疱疹病毒ORF22、38、54,并测序。用ClustalW软件比对和Primer premier 5软件酶切位点分析核酸序列。结果 多重PCR检测水痘、带状疱疹患者皮损标本阳性率为81.3%（78/96）。与Dumas序列进行对比,78份阳性标本ORF22在37902、38055、38081、38177存在点突变,符合基因型J型特点。ORF38和 ORF54分别存在PstI和BglI酶切位点。结论 武汉地区水痘带状疱疹病毒流行的主要基因型为J型、ORF38 （PstI+） 和 ORF54 （BglI+）。     

Epstein-Barr病毒感染与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的探讨Epstein-Barr病毒(EBV)感染在系统性红斑狼疮(SLE)病因学中的作用以及EBV活动性感染与疾病活动期的关系。方法PCR技术检测85例SLE患者和43例正常人外周血单一核细胞中EBVDNA,采用巢式PCR(Nested-PCR)技术检测EBVDNA阳性标本EBV增殖期基因BZLF1mRNA的表达,ELISA法检测血清EBV特异性IgM抗体。结果SLE患者组EBVDNA阳性率明显高于对照组(P<0.05),EBV即刻早期基因BZLF1mRNA的表达在SLE患者组与对照组中阳性率差异无显著性(P>0.05),ELISA法检测血清EBV特异性IgM抗体,SLE患者组阳性率高于对照组(P<0.05)。结论SLE患者EBVDNA阳性率高于正常对照组,部分SLE患者存在EBV活动性感染,EBV感染可能与SLE的发生发展有关。