液相色谱-串联质谱法测定尿中乳果糖、甘露醇和乳糖含量

目的建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS／MS）测定人尿中乳果糖、甘露醇和乳糖含量。方法尿样用水和乙腈直接稀释后，以LunaNH2（100×2．0mm，5μm）为分析柱，乙腈-水（80：20，v／v）为流动相，0．3mL／min流速进行色谱分离。采用负离子化电喷雾、多反应监测（MRM）扫描方式进行质谱定量分析，离子通道选择m／z为：甘露醇181．1／88．9，乳果糖和乳糖341．3／160．9，内标353．4／166．9。结果甘露醇、乳果糖、乳糖和内标的保留时间分别为2．9、4．1、4．7和4．7min。在0、1～40μg／mL浓度范围内线性关系良好（r≥0．9980）。最低定量限分别为0．1μg／mL（甘露醇、乳果糖）和0．2μg／mL（乳糖）。日内、日间精密度（CV％）分别为0．60％～4．31％、2．55％～7．71％，准确度分别为86．4％～107．6％、95．9％～102．9％。回收率为84．7％～105．5％。结论该方法的样品处理简单快速，检测专一灵敏、准确可靠，可用于肠通透性评价中甘露醇及乳果糖的含量测定。     

小鼠窦前卵泡体外培养的研究

目的探讨不同直径的窦前卵泡的培养对获得成熟卵母细胞的影响。方法出生10天的小鼠窦前卵泡体外培养12 天。直径小于80μm的卵泡258个为A组;直径80-110μm的卵泡306个为B组。观察卵泡形态的变化,测量卵泡直径的变化。结果 A组卵泡成活率56．2％,窦腔形成率13．1％,卵母细胞成熟率11．7%;B组卵泡成活率89．5％,窦腔形成率51．8％,卵母细胞成熟率56．6％。B组卵泡成活率、窦腔形成率和卵母细胞成熟率显著高于A组(P<0．05,P<0．01,P<0．01)。A组卵泡直径(72．5±15．7)μm,培养后卵泡直径(246．3±22．2)μm(P<0．01);B组卵泡直径(101．7±20．1)μm,培养后卵泡直径(370．3 ±33．9)μm(P<0．05)。A组卵母细胞直径(52．3±4．4)μm,培养后卵母细胞直径(68．5±9．3)μm(P<0．01);B组卵母细胞直径(55．6±5．8)μm,培养后卵母细胞直径(71．9±5．7)μm(P<0．01)。结论出生10天小鼠窦前卵泡培养后可以得到第二次减数分裂中期(MⅡ期)卵母细胞;直径80μm以上的卵泡成活率,窦腔形成率,卵母细胞成熟率较高,培养效果较好。     

RP—HPLC测定拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度

目的：建立RP—HPLC法同时测定人血清中抗癫痫药拉莫三嗪和苯巴比妥浓度的方法。方法：采用AgilentZorbax XDB—C18（4．6mm×150mm,5μm）色谱柱;流动相：0．1％乙酸-乙腈,梯度洗脱;检测波长：240nm;流速：1．0ml／min。结果：拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度分别在0．02-1．00μg、0．02-3．00μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为97．62％和97．96％,拉莫三嗪2．0、20．0、40．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为4．3％、3．9％和2．9％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．1％、5.4％％和3．9％;苯巴比妥5．0、20．0和50．0μg/ml日内精密度（RSD,n=5）分别为3．5％、4．2％和3．6％,日间精密度（RSD,n=5）分别为5．0％、4．7％和4．2％。结论：本方法简便、准确、重现性好,可用于临床上常规监测拉莫三嗪和苯巴比妥的血药浓度。     

人血浆中磺胺甲噁唑和代谢产物的HPLC法测定及其药代动力学研究

目的建立人血浆中磺胺甲噁唑及其代谢产物的RP—HPLC测定法,研究磺胺甲噁唑及其代谢产物N4-乙酰磺胺甲噁唑的药代动力学特征。方法血样经高氯酸预处理后,进行HPLC分析,色谱柱为Lichrospher C18（5μm,250inm×4．6mm）,流动相为乙腈-水-冰乙酸-三乙胺（38：62：0．4：0．3,v／v）,流速为1．0ml／min,检测波长为240／lm。结果磺胺甲噁唑和N4-乙酰磺胺甲噁唑分别在1～160μg／ml和0．5～20μg／ml的范围内浓度与峰面积线性关系良好,定量限分别为1μg/ml和0．5μg/ml,日内精密度分别为0．91％～6．83％和1．80％-7．66％,日间精密度分别为2．12％～6．09％和4．16％～8．15％,回收率分别为95．9％～106．0％和98．8％～110．3％。结论建立的人血浆中磺胺甲噁唑及其代谢产物的RP—HPLC分析方法灵敏、准确、简便,适合于磺胺甲噁唑及其代谢产物N4-乙酰磺胺甲噁唑的药代动力学研究。     

多发脑动脉瘤危险因素的临床研究

目的：探讨多发脑动脉瘤发生的主要危险因素，为脑动脉瘤的防治提供理论依据。方法：应用病例对照研究对42例多发脑动脉瘤病例和164例单发脑动脉瘤对照主要危险因素进行单因素和多因素分析。结果：单因素分析有5个变量达到了统计学意义，分别为性别(女性)、高血压、吸烟、月经状况、脑血管病家族史，其OR(95％CI)分别为3．7(1．5～9．7)、2．7(1．2～6．0)、0．3(0．08～0．96)、2．4(1．1～6．0)、3．5(1．2～9．7)。多因素分析性别、高血压、脑血管病家族史进入最后的模型，其OR(95％CI)分别为3．5(1．7～8．9)、3．0(1．1～5．2)、3．2(1．4～8．6)。结论：女性、高血压、脑血管病家族史为发生多发脑动脉瘤的高危因素。     

HPLC法测定血浆中5-氟尿嘧啶水平

目的：建立快速测定人血浆中5-氟尿嘧啶（5-Fu）浓度的方法。方法：乙酸乙酯提取血浆中5-Fu，高压液相色谱法测定其浓度。色谱柱为YWGC18，流动相为0．03mol磷酸氢二钾（2．5：1），pH7．0，流速为1．0mL／min。紫外检测波长254nm。结果：分别在血浆低浓度（0．1μg／mL～5μg／mL）和高浓度（5μg/mL～40μg／mL）呈良好线性关系。5-Fu在5μg／mL、10μg／mL、40μg／mL、300μg／mL、500μg／mL5个浓度点日间平均回收率和RSD分别为95．2％、4．6％；90．5％、6．9％；95．9％、0．93％；107％、8．5％；106％、6．0％。结论：本方法快速、准确，适合于5-Fu临床用药浓度的观察及个体药代动力学研究。     

5—羟色胺抗独特型单克隆抗体的功能鉴定

对5-羟色胺（5-HT）抗独特型单克隆抗体的功能进行鉴定．方法：细胞培养法，免疫组织化学ABC法和形态计量法．结果：培养平滑肌细胞显示5-HT受体免疫反应阳性，在正常培养基培养的平滑肌细胞的平均长度为（18．8±35．4）μm．培养基中含不同浓度的5-HT抗独特型单克隆抗体（分别为0．01％，0．03％，0．10％，0．30％，1％抗体原液），平滑肌细胞的平均长度分别缩短为（175．6±43．3）μm，（16．2±46．2）μm，（116．9±25．8）μm，（89．5±22．8）μm，（79．9±21．6）μm，除含0．01％抗体原液组外均比正常组有非常显著的差别（P＜0．01）．结论：该抗独特型单克隆抗体具有与5-HT相类似的诱导平滑肌收缩的功能，5-HT受体可能介导了这种功能．     

枸骨中芦丁和槲皮素含量测定

目的：采用高效液相色谱法测定枸骨不同部位（嫩叶、老叶、枝、青果、红果）及不同采收期枸骨叶中芦丁和槲皮素的含量。方法采用C18色谱柱（250 mm ×4．6 mm ,5μm）,流动相为甲醇－0．5％磷酸水溶液（47∶53）,流速为0．7 ml／min ,检测波长为356 nm ,柱温25℃,测定枸骨中芦丁和槲皮素含量。结果芦丁和槲皮素线性范围分别为0．52～5．2μg和0．34～3．4μg,相关系数 r均为0．9999,平均回收率分别为98．6％和99．2％,RSD分别为1．70％和1．91％（n＝6）。结论枸骨不同部位及不同采收期枸骨叶中芦丁和槲皮素含量有明显差异。     

毛细管气相色谱法测定新鱼腥草素钠中两种有机溶剂的残留量

目的：建立新鱼腥草素钠中2种有机溶剂残留量的测定方法。方法：用大口径毛细管柱气相色谱法,以外标法计算残留溶剂的含量。结果：乙醇、甲苯两种有机溶剂均完全分离,线性范围分别为0．02501-0．12505μg／ml（r=0．9993）、0．00445～0．02225μg／ml（r=0．9996）;平均回收率分别为99．2％、98．9％、99．5％、102．1％、101．3％;RSD分别为2．O％、1．9％、1．5％、2．5％、1．2％（n=5）。结论：所建方法灵敏、准确,可用于新鱼腥草素钠中两种残留溶剂的同时测定。     

五虎散质量标准的研究

目的建立五虎散的质量标准。方法采用TLC法对处方中当归、白芷、红花进行定性鉴别；采用HPLC法测定升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量。结果升麻苷在0．3700～1．8500μg，5-O-甲基维斯阿米醇苷在0．1910～0．9550μg与峰面积具有良好的线性关系；平均回收率分别为100．74％和98．33％，RSD分别为0．67％和1．91％(n=5)。结论建立的方法简便、准确、可靠，可作为控制该药品的质量标准。     

液相色谱-质谱联用法测定猪肉组织中3种β-激动剂

目的建立高灵敏度的猪肉组织中沙丁胺醇、莱克多巴胺和克伦特罗同时测定的方法。方法样品匀浆好后用5％高氯酸溶液振荡提取,反相C18小柱净化浓缩,以乙腈-2mmol／L醋酸铵＋0．1％甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,通过液相色谱-质谱以MRM方式检测,以D厂沙丁胺醇为内标定量。结果测定3种13激动剂的方法的线性范围均为O．1—10．0μg/L,线性相关系数分别为0．9998、0．9991和0．9992,定量检出限分别为0．2p,g／kg、0．3μg/kg及0．5μg,回收率分别为89．9％～96．7％、84．9％～90．1％及88．4％-96．2％。结论方法简便,灵敏度好,选择性好,适合于猪肉组织样品中沙丁胺醇、莱克多巴胺及克伦特罗残留进行检测及结构确证。     

HPLC法同时测定复方北豆根氨酚那敏片中咖啡因和对乙酰氨基酚的含量

目的：探讨高效液相色谱法（HPLC）建立复方北豆根氨酚那敏片的质量控制方法。方法采用C18（4．6mm×150mm ,5μm）色谱柱;流动相为甲醇（A）：水（B）＝25：75;检测波长：214nm ;柱温：25℃;流速：0．6ml/min ;进样量：10μl。结果咖啡因和对乙酰氨基酚分别在0．030～0．295μg、0．763～7．625μg范围内呈良好的线性关系,线性回归方程分别为：y ＝1．0×107x -8728．1,r ＝1．0000和 y ＝3．6×106x＋6．1×105,r ＝0．9995。回收率分别为100．60％和98．33％, RSD分别为0．59％和0．52％（ n ＝9）。结论该方法科学、简便、快速、准确,能同时对复方北豆根氨酚那敏片中咖啡因和对乙酰氨基酚两种成分有效地进行质量控制。     

HPLC法测定三叶委陵菜药材中儿茶素含量研究

目的建立HPLC测定三叶委陵菜药材中儿茶素含量的方法。方法色谱柱：ZorbaxSB—C18（4．6×250mm,5μm）,流动相：甲醇-水-冰醋酸（15：84：1）,流速：0．9ml·min^-1,检测波长：278nm。结果儿茶素的线性范围为0．64～3．20μg,r=0．9997,平均回收率为100．05％,RSD=1．73％,采于恩施、宣恩和利川三地药材中的儿茶素含量分别为0．153％、0．520％、0．442％。结论以上测定方法简便、准确,可用于测定三叶委陵菜中儿茶素含量。     

高效液相色谱法测定维药蜀葵花中芦丁和紫云英苷含量

目的：建立高效液相色谱法（HPLC 法）测定维药蜀葵花中芦丁和紫云英苷的含量。方法采用YMC-Pack ODS-A C18（4．6 mm＆#215;250 mm,5μm）色谱柱,以流动相 A（0．2％磷酸水溶液）和流动相 B（0．2％磷酸乙腈溶液）进行梯度洗脱,检测波长为360 nm,流速为0．6 mL/min,进样体积10μL。结果芦丁和紫云英苷分别在0．5～6．0μg/mL 和1．0～12．0μg/mL 浓度范围内呈良好线性关系;线性方程分别为 A ＝583．5C -0．623和 A ＝628．3C -0．27,相关系数 r 分别为0．9995和0．9991;芦丁和紫云英苷的平均加样回收率（n ＝6）分别为102．3％和100．8％,RSD 分别为0．89％和0．60％,蜀葵花样品中芦丁和紫云英苷的含量分别为0．30～0．32 mg/g 和0．43～0．46 mg/g。结论本方法简便、准确,重复性好,可用于维药蜀葵花中芦丁和紫云英苷的含量测定,为其质量控制提供参考。     

大口径毛细管气相色谱法测定丙帕他莫中3种有机溶剂的残留量

建立丙帕他莫中3种有机溶剂残留量的测定方法。方法：用大口径毛细管拄气柑色谱法,以外标法计算战留溶剂的含量。结果：3种有机溶剂均完全分离,乙醇、丙酮、二氯甲烷的线性范围分别为100．72～1007．2μg／ml（r=0．9997）、103．86～1038．6μg／ml（r=0．9996）、12．94～129．4μg／ml（r=0．9997）,平均回收率分别为99．9％、99．5％、100．8％,P．SD分别为1．1％、1．3％、16％（n=5）。结论：所建方法灵敏、准确,可用于丙帕他莫中3种残留溶剂的同时测定。     

应用高效液相色谱法测定玫芦消痤膏中苦参碱的含量

目的：应用高效液相色谱（HPLC）法对玫芦消痤膏中苦参碱的含量进行测定。方法：采用Hypersil C18（250mm-4．6mm5μm）;以辛烷磺酸钠-氯化钠-水-甲醇-磷酸-三乙胺（1．1：0．5：320：180：1．1：0．4）为流动相,流速：0．8ml／min;检测波长：220nm柱温：30℃。结果：苦参碱与其它成分分离良好,在0．992～5．952μg与峰面积呈良好的线性关系（线性回归方程为：y=468215x,r=0．9999）,平均回收率分别为：100．58％、99．57％、100．13％,RSI）分别为：0．64％、0．18％、0．037％（n=9）。结论：该方法简便、快速、准确,可以作为玫芦消痤膏中苦参碱的含量测定方法。     

RP—HPLC法测定人血浆中头孢拉定的浓度

目的：建立测定血浆中头孢拉定浓度的高效液相色谱法。方法：色谱柱为DiamonsilC18柱（200mm×4．6mm，5μm）；流动相：0．05mol／LKH2PO4-乙腈（85：15）；柱温：35℃；流速：1．0ml／min；检测波长：262nm；进样量：20μl。结果：头孢拉定在0．5-40．0μg／ml范围内有良好的线性关系，r=0．9999；血浆中药物最低检测浓度为0．25μg/ml（S／N=3）：提取回收率为75％；血浆中三种浓度回收率分别为（106．0±6．3）％、（103．0±4．6）％、（97．5±1．2）％，日内、日间RSD分别为419％-26％、1．0％及7．9％、3．2％、1．9％。结论：本法操作简单、快捷、专属性强，方法灵敏度和准确度均较高，适用于头孢拉定血药浓度及生物利用度的测定。     

芬太尼对罗哌卡因腰麻与硬膜外联合阻滞分娩镇痛效果的影响

目的探讨椎管内罗哌卡因(Ropi)复合不同剂量芬太尼对腰麻与硬膜外联合分娩镇痛效果的影响。方法80例单胎足月初产妇,随机分为4组(R组含Ropi 2 mg、RF1组含Ropi 2 mg 芬太尼10μg、RF2组及RF3组均为Ropi 2 mg 芬太尼20μg,各组n=20)。所有产妇常规行L2-3硬膜外穿刺,采用腰麻与硬膜外联合阻滞技术,蛛网膜下腔注入各组不同药液2．5 ml。当产妇自觉疼痛时启动各组不同溶液的硬膜外自控镇痛,给药模式为LCP(R、RF1、RF2组均为0．1％Ropi 芬太尼1μg／ml,RF3组为0．1％Ropi 芬太尼2μg/ml)。监测妇儿情况、评估镇痛效果及不良反应。结果RF1、RF2、RF3起效时间比R组缩短(P<0．05),分别为(7．6±2．1)、(6．1±1．6)、(6．0±1．8)、(9．7±3．5)min;维持时间延长(P<0．05),分别为(62．8±6．5)、(93．0±8．2)、(98．7±10．6)、(38．5±9．7)min;硬膜外用药量R组多于其余组(P<0．05);R组3例(15％)出现下肢运动阻滞、RF1和RF2组各1例(5％),但RF2和RF3组前胸瘙痒的发生率比R组高(P<0．05),也高于RF1组,但差异无统计学意义。RF3组有1例(5％)出现胎儿心动过缓。结论蛛网膜下腔罗哌卡因2 mg复合芬太尼20μg可加快镇痛起效,维持时间明显延长;硬膜外0．1％罗哌卡因复合芬太尼1μg／ml可取得较好镇痛效果,不良反应较少。     

外伤性视神经损伤手术时机选择的实验研究

【目的】通过视神经外伤后视网膜形态的变化，了解外伤性视神经损伤的手术时机与疗效间的相关关系。【方法】建立外伤性视神经损伤和不同时间减压动物模型，对视网膜神经节细胞(RGCs)、视网膜等进行了定量分析。【结果】正常对照组RGCs相对体积数密度(体密度，Vv)为0．072，小细胞所占比例为49．5％，视网膜厚度为108．9μm，节细胞以内层的厚度为19．5μm；48h减压组RGCs体密度为0．052，小细胞占比例为66．8％，视网膜总厚度为101．9μm，节细胞以内层厚度为16．9μm；14d减压组RGCs体密度为0．042，小细胞占比例为76．4％，视网膜总厚度为96．5μm，节细胞以内层为15．5μm。【结论】48h减压较14d减压可以较好的保存RGCs和视网膜的形态，外伤性视神经损伤后应该尽早解除周围因素对视神经的压迫。     

HPLC法测定复方诺氟沙星滴眼液中诺氟沙星和地塞米松磷酸钠的含量

采用HLPC法同时测定复方诺氟沙星滴眼渡中诺氟沙星和地塞米松磷酸钠的含量。结果诺氟沙星和地塞米松磷酸钠的线性范围分别为30～120μg／ml和2．5～10μg/ml,平均回收率与RSD(n=4)分别为99．62％,0．69％;99.77％,0．33％。该方法适用于本品的质量控制。