高产AmpC酶阴沟肠杆菌的耐药性及同源性分析

目的掌握阴沟肠杆菌的耐药谱及分子流行病学特征.方法高产AmpC酶采用表型筛选法,耐药谱选用改良K-B法,基因分型采用随机扩增多态DNA(RAPD)法.结果50株阴沟肠杆菌中表现高产AmpC酶株有16株(32%)、单产ESBLs菌株有8株(16%)、同时产AmpC酶和ESBLs的菌株有8株(16%),未发现亚胺培南耐药株,产酶和不产酶菌株间的耐药率差异存在显著性,RAPD基因分型得的遗传聚类图,可分为4类.结论阴沟肠杆菌有很高的耐药性,阴沟肠杆菌感染的治疗应首选亚胺培南,RAPD技术对阴沟肠杆菌感染同源性分析是一个有效的方法.     

全耐药鲍氏不动杆菌的随机扩增DNA多态性分析

目的 通过全耐药鲍氏不动杆菌随机扩增DNA多态性(RAPD)基因分型同源性分析,以用于医院感染的追踪控制和流行病学的调查研究.方法 收集8个月内从医院分离的15株全耐药鲍氏不动杆菌,提取DNA后进行RAPD分型,同时进行抗菌药物敏感试验和流行病学分析.结果 15株全耐药菌株被分为6个RAPD型,其中ICU1、ICU2分别存在两株克隆株,从ICU1转入外科病区的患者,同源件与其完全相同,全敏感菌株与全耐药菌株的同源性差异性很明显.结论 ICU存在全耐药鲍氏不动杆菌的局部流行.     

耐碳青霉烯酶肠杆菌感染患儿的耐药特征及基因分型

目的研究小儿感染耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的耐药特征及基因分型,提高临床诊治水平。方法收集2010年10月-2013年10月在医院就诊的患儿中分离得到的54株耐碳青霉烯酶肠杆菌,按照琼脂稀释法测定菌株对于抗菌药物的耐药性,采用改良Hodge试验和改良双纸片协同试验对54株肠杆菌科细菌产生的碳青霉烯酶和金属β-内酰胺酶的表型进行检测,采用PCR法检测耐药菌株的耐药基因。结果从分离出的3 146株肠杆菌科细菌中共检出54株耐碳青霉烯酶肠杆菌,检出率1.72%;其中肺炎克雷伯菌31株占57.4%,大肠埃希菌13株占24.1%,阴沟肠杆10株占18.5%;耐碳青霉烯酶肠杆菌的标本分布以痰液为主占48.1%,其次为尿液和血液;肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南耐药率分别为71.0%和80.6%、大肠埃希菌的耐药率分别是84.6%和100.0%、阴沟肠杆菌的耐药率分别为80.0%和100.0%;54株耐碳青霉烯酶肠杆菌中,改良Hodge试验阳性检出总准确率达到94.4%,改良双纸片协同试验阳性检出总准确率达到98.1%,经PCR检测呈阳性的有49例占90.7%。结论小儿感染耐碳青霉烯酶肠杆菌科细菌中,肺炎克雷伯菌最多,其次为大肠埃希菌和阴沟肠杆菌,3种细菌对于碳青霉烯类抗菌药物美罗培南的耐药性高于亚胺培南,主要产生B类金属酶(IMP),肺炎克雷伯菌还产生碳青霉烯酶A类(KPC)。     

质粒分析在阴沟肠杆菌引起的医院内输液反应中的应用

应用生物分型、耐药性谱模式分型和质粒分析，对某医院１９９２年７月份发生的８例阴沟肠杆菌引起的输液反应进行了流行病学调查，结果发现：生物分型和耐药性谱模式分型均不能分辨这８株阴沟肠杆菌的不同克隆菌株，而质粒分析却能对这８株阴沟肠杆菌分辨出４个不同的克隆菌株，显示了它特异和敏感的特性。结合临床资料还发现，这８例阴沟肠杆菌引起的输液反应并非来自同一污染源，各科室存在各自的污染源。半年后的重复试验表明，这８株细菌的生物型和耐药性谱模式分型均有所改变，而它们的质粒图谱却基本保持一致，显示了质粒分析稳定的特性。     

地震创伤性感染病原菌状况分析

目的 了解地震受伤患者创面感染情况,为抗感染治疗提供科学依据.方法 对14例开放性骨折或骨筋膜室综合征患者的创面进行床边采样,并进行细菌、真菌和厌氧菌培养,根据病原菌生长情况进行药物敏感性试验.结果 14例地震受伤患者中有10例的创面有细菌生长,感染率为71.43%;14例患者送检的17份标本中有12份细菌培养阳性,4份真菌培养阳性,1份厌氧菌培养阳性,阳性率分别为70.59%,23.53%和5.89%,未分离出产气荚膜梭菌和破伤风梭菌,初次分离病原菌以阴沟肠杆菌、凝同酶阴性葡萄球菌和不动杆菌届为主,并分离出5株真菌内1株假丝酵母菌属.结论 灾区受伤患者伤口感染率高,创面多为混合感染,且存在医院感染,感染病原菌耐药严重,及时快速查找病原菌并根据药敏结果进行抗感染治疗是治疗创伤感染的关键.     

尿源性大肠埃希菌的随机扩增DNA多态性分型及耐药性分析

目的分析尿源性大肠埃希菌随机扩增DNA多态性(RAPD)基因分型同源性及耐药性,以用于医院感染控制和流行病学调查研究。方法收集2009年7-12月从医院分离的60株尿源性大肠埃希菌(UPEC),提取DNA进行RAPD分型,并同时进行耐药性分析及流行病学调查。结果 60株尿源性大肠埃希菌分为16个RAPD型,医院感染患者分离出38株,仅R1、3、7、9、111、6 RAPD分型,而社区获得性感染患者分离出22株,却有R1～8、R10～16 RAPD分型;尿源性大肠埃希菌耐药率普遍较高,ESBLs检出率高达78.9%,门诊分离株抗菌药物敏感性普遍高于住院分离株,除磺胺甲噁唑/甲氧苄啶外差异均无统计学意义。结论尿源性大肠埃希菌耐药率较高,且本院存在RAPD R1型的局部病区流行,RAPD技术能在DNA水平上对尿源性大肠埃希菌分型,其方法快速、简易、特异、可靠,适用于该菌致医院感染的追踪及流行病学研究。     

携qnrA耐药基因阴沟肠杆菌的分子流行病学研究

目的了解深圳地区临床分离的qnrA基因阳性阴沟肠杆菌的分子流行病学特征。方法采用PCR和产物直接测序法,检测58株临床分离阴沟肠杆菌的qnrA基因,脉冲场电泳进行菌株的DNA分型。结果11株阴沟肠杆菌中检出qnrA基因,其中甲医院6株、乙医院5株;前者可分为A和B 2个克隆系,A系包括3个相同和1个密切相关克隆,B系包括2个相同的克隆;后者5株菌间无相同或密切相关克隆。结论携qnrA基因阴沟肠杆菌的流行不仅存在散发模式,而且存在克隆株医院感染暴发的模式,应加强其医院感染的监控和分子流行病学研究。     

重症监护病房与普通住院科室医院感染中阴沟肠杆菌的耐药性对比

目的对比重症监护病房(ICU)与普通住院科室医院感染中的阴沟肠杆菌的耐药性,为医院感染预防控制工作提供依据。方法选取2013年1月-2016年8月在ICU住院患者(110例)和普通病房住院治疗患者(562例)的516份送检标本作为研究资料,对其阴沟肠杆菌感染情况及耐药性进行观察和分析。结果在57例患者的病原学标本中检出阴沟肠杆菌,ICU与普通病房患者阴沟杆菌感染率的差异无统计学意义,共检出阴沟肠杆菌65株,菌株主要来源于痰液、切口分泌物和伤口分泌物,构成比分别占64.6%、7.7%和6.2%;ICU分离阴沟肠杆菌对头孢曲松、氯霉素、头孢唑林、头孢噻肟、头孢呋辛的耐药率较高,分别为100.0%、100.0%、75.0%、75.0%和75.0%,普通病房分离的阴沟肠杆菌对头孢唑林、氨苄西林的耐药率较高,分别为94.3%和92.5%,所有菌株对氧氟沙星、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、哌拉西林/舒巴坦较敏感;ICU分离菌株对头孢曲松、头孢噻肟、庆大霉素、环丙沙星、呋喃妥因、哌拉西林、哌拉西林/舒巴坦、头孢哌酮、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、美罗培南、妥布霉素、奈替米星、氯霉素的耐药率均显著高于普通病房,普通病房分离的菌株对头孢唑林、氨苄西林的耐药率均高于ICU,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。结论临床分离的阴沟肠杆菌的耐药性较强,且ICU分离菌株的耐药性要高于普通病房分离株,临床医师应给予高度重视并选用敏感药物进行抗感染治疗。     

阴沟肠杆菌临床感染分析及药敏监测

目的分析医院阴沟肠杆菌感染的临床分布及耐药性,以指导临床合理用药。方法对医院近2年分离出的阴沟肠杆菌的临床分布特点及耐药情况进行总结分析。结果2005年1月-2006年12月共分离出148株阴沟肠杆菌,菌株来源主要为痰液、尿液,分别占53.4%、16.2%;菌株分布于多个病区;阴沟肠杆菌对碳青酶烯类、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、莫西沙星的敏感性较高。结论阴沟肠杆菌主要引起呼吸道、尿路感染;对三代头孢菌素耐药严重,呈多药耐药性,亚胺培南仍为治疗阴沟肠杆菌严重感染的首选用药。     

医院感染去阻遏持续高产AmpC酶阴沟肠杆菌的调查

目的探讨医院感染阴沟肠杆菌产AmpC酶的分离情况、分布特征及耐药性。方法对医院感染81株鲍阴沟肠杆菌分布科室和感染部位分析,并用三维试验检测AmpC酶。结果医院感染81株阴沟肠杆菌中产AmpC酶38株,产AmpC酶阳性率为46.91%;而非院内感染101株阴沟肠杆菌中产AmpC酶18株,产AmpC酶阳性率为17.82%。医院感染阴沟肠杆菌在临床科室的检出主要以神经外科、心胸外科为主,而感染部位则是呼吸道和皮肤软组织两者共占90%以上。医院感染阴沟肠杆菌的耐药性明显高于非院内感染。结论医院感染阴沟肠杆菌产AmpC酶的分离率高,耐药率也较高,应针对它的易感因素,采取相应的措施,防止该菌引起的医院感染。     

人乳头瘤病毒分型联合宫颈液基薄层细胞学检测在宫颈癌筛查中的应用

[目的]探讨第三代人乳头状瘤病毒核酸检测杂交捕获定量分型技术(DH3)分型检测人乳头瘤病毒(HPV)联合宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)在宫颈癌筛查中的应用价值.[方法]选择2020年10月—2021年3月在广西医科大学第四附属医院柳州市工人医院进行HPV分型和TCT宫颈筛查的女性患者进行回顾性分析,共1582例,以病...     

武汉市2010年志贺氏菌菌株情况分析

目的 掌握武汉市2010年细菌性痢疾监测中分离的志贺氏菌的生化血清学分型、药物敏感状况及毒力基因携带情况.方法 按<全国细菌性痢疾监测方案>提供的方法进行病原菌分离鉴定和药敏试验;利用PCR方法分别对志贺氏菌分离株7对毒力相关基因进行检测.结果 2010年分离志贺氏菌15株,宋内氏菌12株,福氏志贺氏菌3株.志贺氏菌敏...     

携带blaNDM-1耐药基因肺炎克雷伯菌的耐药性及分子流行特征研究

目的 了解耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌（Carbapenem Resistant Klebsiella Pneum-oniae,CRKP）blaNDM基因的携带率、常用抗生素的耐药情况及分子流行特征,为临床CRKP感染治疗及防控提供理论依据。方法 收集2016年1月至2018年9月四川省中医院临床分离的74株CRKP,采用Vitek 2 Compact仪器进行细菌鉴定及药敏试验,mCIM试验和eCIM试验进行B类金属酶表型确证;PCR扩增blaNDM基因并对阳性产物进行测序以确定基因型别;采用多位点序列分型技术（MLST）对产NDM酶菌株进行同源性分析。结果 PCR扩增及测序结果显示,74株CRKP中有8株携带blaNDM-1;携带blaNDM-1基因菌株药敏结果显示对试验的所有头孢菌素类、喹诺酮类抗生素为全耐药,仅对阿米卡星和替加环素敏感。74株CRKP的mCIM试验和eCIM试验的阳性率分别为98.65%和10.81%,8株产NDM酶菌株eCIM试验均阳性。MLST结果显示8株产NDM酶菌株均为ST307型。结论 CRKP菌株blaNDM-1携带率较高,耐药程度严重;ST307型CRKP可能更易捕获携带blaNDM-1的耐药质粒,医院应加强防控该类细菌的播散。     

老年患者中检出产ESBLs大肠埃希菌的耐药性和基因分型

目的了解本地区老年患者临床分离的产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的耐药基因型别和耐药性的变化情况。方法收集来自老年患者分离鉴定的大肠埃希菌株1 327株,通过K-B法作药敏试验,采用美国NC-CLS1999年推荐的抑制剂增强纸片法确认产ESBLs株,并对ESBLs进行初步基因分型。结果检出产ESBLs菌株702株,检出率为52.9%,产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为54.5%~100.0%;PCR初步分型结果：单独携带TEM型基因的占56.7%,单独携带SHV型基因的占15.0%,携带两种基因的占25.8%。结论产ESBLs大肠埃希菌检出率逐年上升,具有多重耐药的特点;产ESBLs大肠埃希菌主要携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因,其中绝大部分为产TEM型β-内酰胺酶。     

医院感染耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性与SCCmec分型及同源性研究

目的 研究医院耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性及分子流行病学特点,为预防和控制医院感染提供参考.方法 采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及葡萄球菌A蛋白(spa)分型技术,2009年3-4月对烧伤科、ICU、呼吸内科、急诊科、血液内科、儿童急救科和儿童呼吸科住院患者、医务人员及环境分离的MRSA,进行了药敏试验和同源性分析,并检测其杀白细胞毒素(pvl)基因.结果 从1352份标本中分离出108株金黄色葡萄球菌,MRSA为54株占50.0％,主要分离于烧伤科42株占77.8％;分离的临床菌株总体耐药率较高,除万古霉索外耐药率均＞50.0％,未发现万古霉素耐药株;SCCmec分型结果显示,54株MRSA以Ⅲ型为主占68.5％,pvl基因均为阴性;进行spa分型研究的23株MRSA中,22株为t030,1株为t2270,呈现高度的克隆一致性.结论 医护人员MRSA带菌率较高,部分医务人员、住院患者和环境中分离的MRSA有较高的同源性,存在人与人和人与环境之间的MRSA传播.     

福建地区河弧菌噬菌体分型研究

采用７ 株噬菌体按 Ｇｅｒｓｈｍａｎ 的分型法,对从福建地区的人和外环境标本检出的２７１ 株河弧菌作了分型试验。结果有２２３ 株菌能被分型,分型率为８２２９ ％ ,共检出３８ 个不同噬菌体型,其中以６００ 、４００ 、７４０ 、５００ 、６４０ 、７６０ 、０２０ 和６２０ 等８个型较常见,占总分型 菌的４９０８ ％ ;发现人源菌的常见型别与海产品源菌、水源菌和食品源菌的型别关系密切。     

人源与动物源大肠埃希菌的同源性分析

目的研究某大规模养殖场与某院临床患者分离的大肠埃希菌的同源性。方法泰安地区某大规模养殖场分离出4株耐多粘菌素大肠埃希菌,泰安中心医院临床患者分离出12株耐碳青霉烯类大肠埃希菌;对目的菌株进行耐药基因测序,通过多位点序列分型(MLST)和脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性检测,探讨分析人源与鸭源大肠埃希菌的同源性。结果共有16株大肠埃希菌,4株鸭源菌株中2株ST为5912型;12株人源菌株中5株ST为167型,3株ST为405型;1株鸭源与1株人源ST相同,为ST10,但PFGE分型发现这2株菌相似度为64.7%。结论泰安地区人源与鸭源大肠埃希菌菌株同源性不高。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药机制与分子流行病学特征

目的了解耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的碳青霉烯酶基因携带情况及分子流行病学特点,为医院感染控制和临床治疗提供实验室依据。方法收集山东省泰安市中心医院2014年1—11月临床分离的CRKP 13株,采用Walk Away 96 PLUS型全自动细菌分析仪进行细菌鉴定和药敏试验;改良Hodge试验及EDTA协同试验进行碳青霉烯酶表型的确认;采用多聚酶链反应(PCR)方法扩增相关碳青霉烯类耐药基因(bla KPC、bla IMP、bla VIM、bla GIM及bla NDM-1)并测序;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)调查菌株的克隆相关性并进行流行病学比较。结果 13株CRKP主要来源于痰(7株,53.85%)及尿(4株,30.77%),对复方磺胺甲口恶唑、四环素的耐药率较低(均40%),对其他抗菌药物(除阿米卡星)的耐药率均70%,对碳青霉烯类药物的耐药率均为100%;13株细菌改良Hodge试验均为阳性,5株细菌EDTA协同试验阳性;经PCR测序确认,碳青霉烯酶基因中,bla KPC基因最常见(13/13),其次为bla NDM-1基因(5/13),未发现其基因bla IMP、bla VIM和bla GIM;PFGE聚类结果显示,13株肺炎克雷伯菌被分为5型,主要为C型(9/13),且均属于ST11,其他分别为ST37、ST626、ST628和ST668型。结论碳青霉烯酶基因bla KPC与bla NDM-1是引起该院肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ST11是主要的克隆类型,医院需尽快强化医院感染预防控制措施。     

江苏农村地区结核杆菌基因分型及耐药性分析

目的 研究江苏省农村地区分离的结核分枝杆菌基因多态性,从而了解菌株基因型与耐药之间的相关性。方法 采用罗氏培养基分离来自结核病患者痰标本中的结核分枝杆菌,进行间隔区寡核苷酸分型(spacer oligonucleotide typing,Spoligotyping)和比例法进行4种一线抗结核药物的药敏试验。经统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义。结果 547株结核分枝杆菌的Spoligotyping分型结果通过与SpolDB4.0数据库比对后显示,试验菌株被分为18个簇,57个基因型,以北京基因型菌株为主,占79.89%,非北京家族菌株包括T(T1、T2)、U、H、 MANU2、LAM10-CAM和CAS-DELH1等型别,各占11.15%、0.91%、0.37%、0.91%、0.18%和0.18%,以及26个型别(35株菌)为“新型”。药敏试验发现,总耐药率为21.94%,耐多药率为7.68%;单药耐药中,主要以链霉素和异烟肼耐药为主。经χ2检验和Fisher确切概率法分析发现,北京基因型与非北京基因型菌株的耐多药性方面差异具有显著统计学意义。结论 江苏省农村分离的结核分枝杆菌具有明显的基因多态性,北京基因型为主要流行型,并且北京家族菌株与耐多药之间具有一定的相关性。     

Clonal population of flucytosine-resistant Candida tropicalis from blood cultures, Paris, France

Candida tropicalis is a diploid ascomycetes yeast responsible for 4%-24% of candidemia. Resistance to flucytosine is rarely described for this species but was observed for 45 (35%) of 130 C. tropicalis isolates recovered from blood cultures in the Paris area in a 4-year survey. The aims of this study were to test the hypothesis that the flucytosine-resistant isolates could represent a subgroup and to determine the relationship between epidemiologic and genomic data. Epidemiologic data and gene sequences were analyzed, and molecular typing was performed. Our results suggest that a clone of flucytosine-resistant isolates, associated with malignancies and a lower mortality than that for other C. tropicalis isolates, is widespread in the Paris area. We propose the analysis of 2 polymorphic microsatellite markers coupled with URA3 sequencing to track the clone.