ICU患者感染泛耐药鲍氏不动杆菌携带OXA酶与AmpC酶的研究

目的了解ICU患者感染泛耐药鲍氏不动杆菌携带碳青霉烯酶基因、头孢菌素酶(AmpC酶)基因,从而分析其耐药机制。方法常规细菌培养方法分离细菌,用VITEK-2全自动微生物鉴定/药敏测试系统进行菌种鉴定及体外敏感测定;采用多重PCR检测25株鲍氏不动杆菌携带的碳青霉烯酶、AmpC酶相关耐药基因(16S rRNA、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、ADC、DHA、ISAba1),并对耐药基因扩增的阳性产物进行DNA序列分析。结果 ICU患者感染泛耐药鲍氏不动杆菌均携带OXA-23、OXA-51、ADC基因,21株携带插入序列ISAba1;DNA序列分析结果显示,OXA-23、OXA-51、ADC分别与NCBI的序列同源性均为99.0%。结论产OXA-23型碳青霉烯酶可能是ICU患者感染鲍氏不动杆菌对碳青霉烯酶类抗菌药物耐药的主要原因,且为同一克隆株传播。     

重症监护病房耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌耐药性及基因同源性分析

目的研究绍兴市中心医院ICU住院患者临床分离的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的耐药性和基因分型。方法收集2016年绍兴市中心医院ICU住院患者临床分离的耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌60株。微量稀释法进行常规药敏试验。采用多重PCR技术检测菌株携带的耐药基因,PFGE分型技术对鲍氏不动杆菌进行基因同源性分析。结果抗菌药物敏感性试验显示所有菌株具有多药耐药性,对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟耐药率>90%,对阿米卡星的敏感率较高为62.4%,其次为头孢哌酮/舒巴坦和左氧氟沙星;PCR检出60株鲍氏不动杆菌均为OXA-23型和OXA-51型。PFGE分型均为同一型别。结论绍兴市中心医院ICU分离的耐碳青霉烯鲍氏不动杆菌的耐药基因为OXA-23型和OXA-51型,为同一来源,考虑为医院感染所致,因此应采取有效措施来控制该耐药株的传播。     

重症医学科耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌耐药基因研究

目的了解鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因型,探讨其耐药性与治疗策略。方法分离2014年-2016年重症医学科(ICU)耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌208株,用VITEK 2全自动微生物鉴定系统进行菌种鉴定及药敏检测,PCR法检测OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-58基因。结果耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对ICU常用药物除头孢哌酮/舒巴坦外耐药率均 50%。OXA-23、OXA-24、OXA-51和OXA-58基因的检出率分别为89. 95%、0. 00%、100. 00%、67. 72%。结论 ICU耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌广泛携带OXA型耐药基因,需要调整用药,加强监测。     

鲍氏不动杆菌的耐药性分析及β-内酰胺类耐药基因的初步研究

目的分析临床分离的鲍氏不动杆菌耐药性,研究耐亚胺培南菌株的碳青霉烯酶基因型。方法利用VITEK-2系统检测85株鲍氏不动杆菌的药物敏感性,聚合酶链反应(PCR)技术检测耐亚胺培南菌株的碳青霉烯酶基因型。结果 85株鲍氏不动杆菌对氨苄西林的耐药率最高,为94.1%,对亚胺培南的耐药率为64.7%;亚胺培南的耐药的菌株中携带OXA-23基因有46株,占83.6%,携带OXA-64-like基因有32株,占58.2%,携带OXA-58基因有13株,占23.6%,以上阳性产物经测序比对与GenBank提供的标准序列99.0%同源;其余OXA-20、OXA-24、OXA-48基因型检测结果均为阴性。结论医院检测的鲍氏不动杆菌对β-内酰胺类耐药严重,并以携带OXA-23基因型碳青霉烯酶为主。     

对亚胺培南不敏感菌株的产碳青霉烯酶的情况分析

目的:探讨对亚胺培南不敏感的革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的分布与变迁情况,为临床合理诊治提供指导。方法:收集2005年5月-2009年8月间临床分离的革兰阴性杆菌,用K-B法筛选对亚胺培南不敏感的菌株;改良Hodge试验检测革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的情况;核酸扩增碳青霉烯酶相关基因NDM-1、KPC、VIM、IMP、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58。结果:铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌是碳青霉烯类药物不敏感的主要病原菌,54株亚胺培南不敏感的菌株中Hodge试验阳性5株,阳性率为9.3%。携带耐药基因包括IMP 2株,VIM 2株,OXA23 3株,OXA51 2株,OXA65 1株。其中有2株同时携带两种耐药基因。结论:我院亚胺培南不敏感分离株与产碳青霉烯酶IMP、VIM、OXA51、OXA23、OXA65耐药基因有关。     

耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因型及插入序列ISAba1研究

目的了解耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌的临床分布及耐药特征,探讨插入序列ISAba1和碳青霉烯酶与其耐药的关系。方法收集270株耐碳青霉烯类药物的鲍氏不动杆菌,K-B法检测菌株的药物敏感性;改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;双纸片协同试验检测金属酶;多重PCR检测OXA-51、OXA-23、OXA-58、OXA-24、IMP、VIM、SIM,PCR检测ISAbal-OXA-23、ISAbal-OXA-51基因并进行测序分析;采用WHONET 5.6软件对菌株药敏结果进行统计分析。结果在检测的18种药物中,14种药物耐药率超过90.0%,哌拉西林耐药率最高为100.0%,头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为48.9%;改良Hodge试验阳性156株,阳性率57.8%;金属酶表型检测均为阴性;270株菌均检测到了OXA-51基因,267株菌检测到OXA-23基因,1株检测到OXA-58基因,未检测到OXA-24、IMP、VIM、SIM基因;267株菌的OXA-23基因上游均检测到插入序列ISAbal,所有OXA-51基因上游均未检测到ISAbal。结论耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌耐药十分严重;OXA-51和OXA-23型碳青霉烯酶是本地区鲍氏不动杆菌的主要碳青霉烯酶;ISAba1常在OXA-23基因上游出现,ISAbalOXA-23是鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制。     

鲍氏不动杆菌耐药性及相关耐药基因检测分析

目的检测分析鲍氏不动杆菌耐药性及相关耐药基因。方法采用K-B法(CLSI 2008年标准)测定鲍氏不动杆菌临床分离株耐药性;PCR方法检测TEM、SHV、CTX-M、I MP、VI M、OXA-23、OXA-24耐药基因以及Ⅰ、Ⅱ类整合酶。结果 130株鲍氏不动杆菌,除阿米卡星和碳青霉烯类外,对其他抗菌药物耐药率非常高,TEM、SHV、CTX-M、Int1、Int2基因阳性率分别为68.5%、10.8%、17.7%、75.4%、0;51株耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌中I MP、VI M、OXA-23、OXA-24基因阳性率分别为25.5%、19.6%、72.5%、0。结论鲍氏不动杆菌耐药性较高,携带TEM型β-内酰胺酶、OXA-23、I MP和VI M型碳青霉烯酶基因和Ⅰ类整合酶;产生OXA-23型碳青霉烯酶和金属酶是医院鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类耐药的主要机制。     

检测多药耐药鲍氏不动杆菌的碳青酶烯酶及整合酶基因

目的检测多药耐药鲍氏不动杆菌(MDRAba)的碳青酶烯酶及整合酶基因。方法从70株对耐亚胺培南鲍氏不动杆菌中用PCR方法测定碳青酶烯酶OXA23类、OXA24类、OXA51类和OXA58类基因及Ⅰ类和Ⅱ类整合酶基因,对扩增阳性的碳青酶烯酶基因进行测序分析;抗菌药物敏感试验采用琼脂稀释法。结果获得OXA-23类基因阳性56株,占80.0%,OXA-58类基因阳性1株,仅1株菌OXA51类基因阴性;Ⅰ类整合酶基因阳性61株,占87.1%,未测得OXA24类碳青酶烯酶和Ⅱ类整合酶基因;序列分析提示分离的CRAba为OXA-23型和OXA-58型,所测菌株对环丙沙星、头孢他啶、庆大霉素、哌拉西林/他唑巴坦高度耐药,对多黏菌素B一致性敏感。结论新近出现的CRAba菌株主要是以Ⅰ类整合子携带的OXA-23型碳青酶烯酶。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因分析

目的研究云南省昆明地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集2009年10月-2010年10月云南省昆明地区临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌215株。应用改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型,随机扩增多态性技术(RAPD)分析菌株的同源性。结果 215株多重耐药鲍曼不动杆菌中,190株(88.4%)检出OXA-51基因;150株(69.8%)检测出OXA-23基因,其中140株OXA-23表达菌在改良Hodge试验中为阳性;12株(5.6%)检出VIM基因且EDTA协同实验均为阳性。RAPD技术将215株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分为7个基因型,其中A型为主要克隆。结论 OXA-23和OXA-51是本地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要基因型,已出现VIM型碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,且多重耐药鲍曼不动杆菌存在院内感染的现象。     

耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因分析

目的分析医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌(IRAB)的碳青霉烯酶基因型和基因周围环境,为临床用药及医院感染的预防控制提供理论基础。方法采用VITEK-2药敏分析系统进行药敏试验,用改良Hodge试验和组合纸片法分别检测碳青霉烯酶和金属酶表型,PCR检测KPC、OXA-23组、OXA-24组、OXA-51组、OXA-58组基因及插入序列ISAba1。结果 36株IRAB改良Hodge阳性率33.3%;未检测到金属酶;36株均携带OXA基因,其中32株OXA-23+OXA-66阳性,2株仅OXA-66阳性,1株仅OXA-23阳性,1株仅OXA-58阳性;所有OXA-23上游均存在ISAba1,未检出KPC、OXA-24组基因。结论该院IRAB主要携带OXA-23、OXA-66型碳青霉烯酶,OXA-23与ISAba1关系密切,存在OXA-58阳性鲍氏不动杆菌。     

广州市ICU环境中耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的克隆相关性

目的了解广州市重症监护病房(ICU)环境中耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)的克隆相关性,明确其基因分型,为预防和控制医院感染提供依据。方法收集广州市7所医院ICU环境中分离的39株CRAB,采用K-B法测定其对10种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)检测菌株的OXA基因,采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)对CRAB菌株进行克隆多态性分析。结果 39株CRAB对左氧氟沙星耐药率最低,为56.4%,对其余9种抗菌药物耐药率均90%。PCR扩增结果显示,39株(100%)CRAB均携带OXA-51基因,37株(94.9%)携带OXA-23基因,OXA-24和OXA-58基因未检出。PFGE技术显示,其中38株CRAB分为5个克隆群,A群为主要流行克隆;MLST分析结果显示,CRAB的主要流行克隆型为ST195。结论广州市ICU环境中存在携带OXA-23基因的CRAB克隆传播,应加强ICU环境的清洁和消毒,减少由CRAB引起的医院感染。     

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌感染暴发的分子流行病学研究

目的分析某院耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）的分子流行病学特征和耐药机制,为预防和控制医院感染提供依据。方法对该院2010年1月-2012 年5月临床分离的32株CRAB,采用随机扩增多态性DNA法进行基因分型,并进行流行病学分析;通过改良Hodge试验和EDTA协同试验对碳青霉烯酶进行表型分析;检测外排泵抑制剂羰基氰氯苯腙（CCCP）对美罗培南最低抑菌浓度（MIC）的影响,筛选外排泵表型阳性菌株。结果32株CRAB检测出9种基因型,其中以A（10株）、H（7株）两种基因型为主,其次为I型（4株）,B和E基因型各3株,其他基因型各有1或2株。2012年3-5月分离11株CRAB,10株为H(7株)和I(3株)两种基因型,1株为A型。21株（65.63%）CRAB检测到OXA 23特异性条带,且其在改良Hodge试验中均为阳性（包括2012年3-5月分离的11株CRAB）;除1株CRAB检测到NDM 1外,其余金属β 内酰胺酶基因检测均为阴性;CRAB在CCCP存在的条件下对美罗培南MIC仅有轻微改变,均为外排泵表型阴性。CRAB主要分布在重症监护室（13株）和神经外科（7株）。结论该院2012年3-5月间暴发了CRAB同一基因型克隆株的医院感染,鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的主要机制是表达OXA 23;鲍曼不动杆菌对美罗培南耐药与外排泵无关,产NDM 1菌株已在该院出现。     

吴江地区多重耐药鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶基因携带情况及同源性

目的了解吴江地区临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB)碳青霉烯酶基因携带情况和同源性。方法收集吴江地区3所综合性医院2010年1月—2013年12月临床分离的非重复MDRAB 44株,测定其最低抑菌浓度(MIC);采用聚合酶链反应（PCR）扩增碳青霉烯酶基因OXA 51、OXA 23、OXA 24、OXA 58、IMP、TEM、SHV和GES,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株同源性。结果44株MDRAB主要来源标本为痰（占93.18%）,主要分布在重症监护病房（ICU）、呼吸科和神经外科,各占45.45%、27.27%和13.64%;MDRAB对米诺环素和多粘菌素B均敏感,对哌拉西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星耐药率均为100.00%,对亚胺培南和美罗培南耐药率均为97.73%。44株MDRAB均检出OXA 51、OXA 23和TEM基因,其中12株菌GES基因阳性,OXA 58和SHV基因阳性各1株,未检测到OXA 24及IMP基因;MDRAB分为A—G 7个型别,分别为19、3、9、3、1、4、5株。A型主要来源于吴江地区的两所大型综合性医院（吴江第一人民医院和盛泽医院）,吴江第一人民医院未发现B、D和E型;E型仅1株,分布在永鼎医院,其余型别散在分布。结论吴江地区临床分离鲍曼不动杆菌多重耐药严重,基因OXA 23和TEM是鲍曼不动杆菌多重耐药的主要原因,并以A、C型为主,呈克隆性传播。     

Molecular findings and antibiotic-resistance in an outbreak of Acinetobacter baumannii in an intensive care unit

We investigated an outbreak of Acinetobacter baumannii in the intensive care unit (ICU) of a hospital in Rome, Italy. The outbreak involved 14 patients whose isolates were most frequently recovered from bronchoalveolar lavage. All isolates were multidrug-resistant and showed diminished susceptibility or resistance to carbapenems. A. baumannii strains with a similar antibiotic susceptibility pattern were isolated from the environment. Pulsed-field gel electrophoresis identified a single clone from both the patients' and environmental isolates. Because of the lack of a single source of infection, the eradication of the epidemic required a broad approach, including contact isolation and cohorting, aggressive environmental disinfection, and close monitoring of the ward staff's performance. Infected patients were successfully treated with combined therapy. Although considered of low virulence, A. baumannii can be particularly aggressive and difficult to treat in ICU patients.     

多耐药洋葱伯克霍尔德菌医院感染暴发调查

目的对某院多耐药洋葱伯克霍尔德菌医院感染暴发流行进行调查，查找传染源和传播途径，为预防和控制医院感染提供参考。方法采集患者标本和环境标本进行培养，根据医院感染诊断标准、区域分布、暴露时间判断是否为暴发。结果从感染患者痰标本分离出病原菌4株，均为多耐药洋葱伯克霍尔德菌。4例感染者均来自重症监护室同一病区，床位相邻；发病时间集中，为2011年1月16-22日。环境标本分离病原菌5株，分别分离自上述患者所在病区的床头柜、呼吸机管道、治疗车、被子、医务人员手，其他病房环境中未检出该菌。患者来源和环境来源的病原菌耐药谱基本一致。结论此次多耐药洋葱伯克霍尔德菌医院感染的暴发流行主要是重症监护室医疗用品被该菌污染所致。     

呼和浩特地区耐亚胺培南鲍曼不动杆菌耐药性及OXA基因检测

目的了解呼和浩特地区临床分离耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)的耐药性和OXA碳青霉烯酶基因携带情况,为预防和控制多重耐药鲍曼不动杆菌医院感染提供依据。方法收集2012年1—12月3所呼和浩特三级甲等医院患者临床分离的非重复IRAB49株,采用纸片扩散法进行药敏试验,应用聚合酶链反应(PCR)检测4种OXA碳青霉烯酶基因(blaOXA-51-like、blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-58-like)的携带情况。结果 49株IRAB对米诺环素的耐药率(8.16%)较低,对其他抗菌药物均具有较高的耐药率(81.63%~100.00%)。49株IRAB均携带blaOXA-51-like基因(检出率为100.00%),其中42株同时携带blaOXA-23-like基因(检出率为85.71%);3所医院均检出blaOXA-23-like、blaOXA-51-like基因,均未检出blaOXA-24-like、blaOXA-58-like。结论 IRAB呈多重耐药现象,对米诺环素耐药率最低;该地区IRAB的主要耐药机制是产OXA-23型碳青霉烯酶。     

院内不同标本类型肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的监测院内不同标本类型和不同病区分离肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供理论依据。 方法用WHONET5.6对2016年1月1日至12月31日间我院临床主要标本类型来源分离的非重复肺炎克雷伯菌(痰液445株、尿液118株、血液58株)和不同病区分离的肺炎克雷伯菌(儿科病房143株、ICU病房74株、神经外科病房71株)进行耐药性分析。 结果血液标本、痰液标本和尿液标本类型分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南的耐药率分别为5.17%、6.07%和7.63%。ICU病房、神经外科病房和儿内科病房分离的肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗菌药物亚胺培南的耐药率分别为14.86%、8.48%、8.39%。 结论我院不同标本类型和不同病区分离的肺炎克雷伯菌对临床部分常用抗菌药物的耐药率相差较大,临床医师及时了解不同来源肺炎克雷伯菌的耐药性,可提高临床医师经验用药的准确率。     

Clonal spread of Acinetobacter baumannii in a general intensive care unit

The epidemiological characterization of multiply resistant Acinetobacter baumannii isolates from a six-bed Intensive Care Unit (ICU) is described. Investigations for A. baumannii were performed in three subsequent surveillance studies. In the first study, surveillance cultures were taken from patients, health care personnel and the environment; in the second study surveillance cultures were taken at 0, 4, and 7 days from all patients admitted consecutively to the ward; and in the third study surveillance cultures were taken from patients, health care personnel and the environment. During the first study all four hospitalized patients were found to harbour A. baumannii. Hand cultures did not grow any A. baumannii when staff entered the ward from home, but 7 positive health care workers were identified out of 25 samples taken during work, and two cultures of environmental specimens grew A. baumannii. During the second study, 4 of 86 (4.6%) patients resulted colonized with A. baumannii. In the third epidemiological study, no A. baumannii was cultured from either patients, health care personnel or the environment. All isolates recovered from various patients or sources produced conserved macrorestriction Pulsed-Field Gel Electrophoresis (PFGE) patterns and showed the same antibiotic resistance; therefore, they can be considered indistinguishable. The same antibiotic resistance and macrorestriction patterns were observed in previously isolated A. baumannii strains in the ward during May 1997, suggesting the persistence of a single A. baumannii in the ICU. The present study confirms that molecular typing is an essential tool in the epidemiology and control of nosocomial infections, showing here the persistence of a single A. baumannii clone in the ICU. The origin of this strain remains unknown but, when basic infection control measures were reinforced, emphasizing the importance of hand antisepsis and judicious use of gloves, control of A. baumannii spread in the ward was achieved.     

ICU标准化建设对其病原菌流行病学的影响

目的 探讨重症监护病房(ICU)标准化建设,对其病原菌流行病学的影响.方法 采用回顾性对照分析的方法,比较医院ICU标准化建设前后年内相同时间段ICU病原菌流行病学的变化.结果 与2008年7-12月非标准化ICU相比,2009年7-12月标准化建设的ICU其收治患者的性别、平均年龄和APACHEⅡ评分比较,两者差异无统计学意义；标准化ICU床位数较前增加1倍,临床分离菌株数由702株增加至1794株；主要为呼吸道和胸、腹腔引流液,菌株来源无明显变化；但标准化建设后血源性菌株检出率由18株上升至87株、革兰阳性菌检出率由245株下降至127株、革兰阴性菌检出率由509株上升至1444株,差异均有统计学意义(均P＜0.05)；金黄色葡萄球菌、屎肠球菌分离率明显下降.结论 ICU标准化建设对病原菌流行病学有明显的影响,明显减少了金黄色葡萄球菌和屎肠球菌的检出率,在医院感染的控制和经验性治疗工作中应引起关注.     

鲍氏不动杆菌对9种抗菌药物敏感性及其多重耐药分析

目的调查我院鲍氏不动杆菌对9种抗菌药物的敏感性,分析其多重耐药特点,指导临床用药。方法收集我院2002~2004年临床分离221株鲍氏不动杆菌,使用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法测定其对9种抗菌药物的抑菌环直径,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)2002年标准判读结果。结果ICU病房分离株对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为25.3%和26.4%,分别比非ICU病房高13.4%和12.2%(P<0.05),对哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、环丙沙星、庆大霉素和阿米卡星的耐药率高于非ICU病房13.8%~36.9%(P<0.01);非呼吸道标本分离菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟和环丙沙星的耐药率比呼吸道标本高15.6%~17.9%(P<0.05),对头孢他啶和阿米卡星的耐药率比呼吸道标本分别高18.9%和19.1%(P<0.01);非ICU病房和ICU病房多重耐药菌分别占35.8%和65.4%(P<0.01)。结论我院ICU病房分离鲍氏不动杆菌对多种抗菌药物的耐药率高于非ICU病房,ICU和非ICU病房均分离出大量多重耐药株。