硫酸铍对小鼠脾脏淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响

目的观察硫酸铍(BeSO4)对BALB/C小鼠脾脏淋巴细胞增殖及T细胞亚群的影响。方法 BALB/C小鼠随机分为对照组和BeSO4染毒低(2.5mg·kg-1)、中(5.0mg·kg-1)、高(10.0mg·kg-1)剂量组。每周称量小鼠体重一次,染毒结束后小鼠脱颈椎处死,无菌取出脾脏并称重。MTT法检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖,流式细胞术测定T淋巴细胞亚群。结果 BeSO4染毒5周后,低、中、高剂量组BALB/C小鼠体重均下降,其中中、高剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量BeSO4染毒组脾脏重量及脾脏系数均高于对照组(P<0.05);经BeSO4染毒后小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力增强,低、中、高剂量组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);三种剂量BeSO4染毒均可明显增加小鼠脾脏CD4+T细胞数量及CD4+T细胞与CD8+T细胞的比值(P<0.05)。结论 BeSO4可致BALB/C小鼠细胞免疫功能紊乱。     

冷冻-脱钙-脱脂-干燥异体骨移植的组织学观察

同种异体骨移植,都具有不同程度的免疫反应。反应的强弱与种源血缘的组织相容密切相关。同种异体骨经过处理后,可以降低抗原性,提高植骨成功率。本文小结冷冻、脱钙、脱脂、干燥异体骨移植的组织学观察。     

脱钙骨植入修复桡骨缺损的动物实验

在54只兔的108例桡骨上分别造成1cm的骨缺损,将其平分为三组,分别植入脱钙同种异体骨、新鲜自体骨和新鲜同种异体骨。并于第1、3、5、7、10和13周,每组杀3只兔,用X线照片及组织学切片观察骨的愈合情况。结果发现新鲜异体骨植入后有排斥反应,而脱钙异体骨植入无此反应。实验证明脱钙同种异体骨是一种较好的植入物。彼优于新鲜异体骨,与新鲜自体骨植入无显著差异。新骨及软骨出现在植入物中而不在邻近宿主骨处,表明新骨形成可能是骨诱导作用的结果。     

同种移植骨的处理及应用

由于自体骨在数量和种类上不能完全满足骨科手术需要，而需同种异体骨大量补充。处理同种异体骨常用方法有深低温冷冻(深冻)和冷冻干燥(冻干)，脱脂和脱钙后灭菌，使被移植骨达到安全有效。笔者现仅就移植骨的脱钙和脱脂、灭菌及疗效进行综述。     

二步冷冻保存同种异体骨-ACL-骨移植后排斥反应的影响

目的 :探讨新鲜异体和二步冷冻保存同种异体骨 前交叉韧带 (ACL) 骨移植后排斥反应的差异。方法 :将 6 0只新西兰兔和 6 0只日本大耳兔分别随机分成自体骨 ACL 骨移植组、新鲜异体骨 ACL 骨移植组和二步冷冻保存同种异体骨 ACL 骨移植组 ,分别于术前及术后 1周、2周、3周、4周各采血 2ml测定血清中白细胞介素 2 (IL 2 )水平 ,术后 4周、12周切取移植关节 ,作苏木精 -伊红染色。结果 :光镜下检查显示 ,自体移植组和二步冷冻保存移植组均未见明显炎性细胞浸润 ,胶原排列规则 ,分化成熟。新鲜异体移植组有大量淋巴细胞浸润 ,其IL 2水平明显高于自体移植组和二步冷冻保存同种异体移植组且高于术前水平 (P <0 .0 1)。结论 :二步冷冻减轻了同种异体骨 ACL 骨移植后排斥反应 ,移植后其组织学改变同自体移植相似     

同种异体脱钙骨基质研究现状

同种异体骨为替代自体骨移植的首选材料。经脱脂、脱水、脱钙、冻干等处理制备的脱钙骨基质,具有较低的免疫源性,又保留骨形态发生蛋白等一些骨生长因子而具有骨诱导活性,已广泛运用于骨科临床。本文对同种异体脱钙骨基质的成骨能力,及其构成复合材料、组织工程材料的研究方面进行综述。     

去细胞异种神经移植后T细胞亚群及细胞内细胞因子的实验研究

目的为化学去细胞异种周围神经移植的临床应用提供进一步的免疫学实验依据。方法 128只BALB/C小鼠随机分为假手术组、自体神经移植组、新鲜同种异体神经移植组和化学去细胞异种神经移植组,每组32只。对各实验组分别进行相应的手术。分别在术后3、7、14、28d将各组8只小鼠脾淋巴细胞进行分离,特异性荧光标记的单克隆抗体作用后,经流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群及细胞内细胞因子的水平及其变化趋势。结果在各时间点中,化学去细胞异种神经移植组CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD25＋阳性细胞率以及IL-2、IFN-γ、TNF-α阳性细胞率与假手术组、自体神经移植组相比无显著性差异。而新鲜异体神经移植组与其他3组比较有显著性差异。结论化学去细胞处理的异种神经的免疫原性等于或接近于自体神经,明显低于新鲜同种异体神经。     

兔组织工程化骨异体植入修复骨缺损中外周血T淋巴细胞亚群的检测

目的通过对T淋巴细胞亚群的检测,从免疫学方面探讨同种异体骨髓基质细胞组织工程化骨植入兔体内修复长段骨缺损的可行性。方法用骨髓基质细胞（MSCs）、重组人骨形态蛋白2（rhBMP2）与纤维蛋白胶（FG）复合培养,体外构建组织工程化骨,植入5只异体兔的桡骨1．5cm节段骨缺损作为实验组;另5只兔用单纯FG植入同样大小骨缺损作为对照组;分别于术后1、2、3、6、8周抽取静脉血,应用流式细胞术检测样本中T淋巴细胞亚群CD4^＋、CD8^＋阳性率并计算CD4^＋／CD8^＋比值。结果术后实验组和对照组的1、2、3、6、8周各时间点T淋巴细胞亚群CD4^＋、CD8^＋和CD4^＋／CD8^＋比值分别与术前的T淋巴细胞亚群两两相比,两者阳性率差异均无显著性（P〉0．05）。结论FG、rh-BMP2和兔MSCs复合构建组织工程化骨植入异体兔体内其术后8周内免疫反应水平低,可用以修复兔节段骨缺损。     

多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的动态观察

目的:动态观察多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗免疫小鼠后脾细胞亚群的变化.方法:将疫苗采用鼻腔内接种免疫BALB/C鼠,在免疫后0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周各剖杀4只小鼠取脾,分离脾细胞,流式细胞仪检测脾CD4 和CD8 T淋巴细胞亚群的百分比,同时设有PBS对照.结果:疫苗接种组的脾CD4 和CD8 T细胞亚群分别在免疫后2～12周和2～18周升高,分别在免疫后6和10周达最高水平.结论:CD4 T细胞亚群数目在多房棘球绦虫混合重组BCG-EmⅡ/3和BCG-Em 14-3-3疫苗免疫早期(2～6周)显著增加.     

间充质干细胞复合同种异体脱钙骨的形态学观察

目的探讨以间充质干细胞(MSC)与同种异体脱钙骨复合培养法构建组织工程化生物衍生骨的可行性。方法预先制备同种异体脱钙骨,取健康成人骨髓,用单核细胞分离液分离MSC,间充质干细胞基础培养基原代和传代培养。倒置显微镜下观察细胞生物学特性,用FITC标记的抗CD105对第3代细胞进行流式细胞鉴定,并与同种异体脱钙骨复合培养1周后行扫描电镜观察。结果原代及传代培养的MSC增殖迅速,第3代CD105阳性细胞占64.1%,复合同种异体脱钙骨培养1周后细胞生长状态良好,增殖迅速,在材料表面形成细胞层。结论未诱导的MSC是骨组织工程适宜的种子细胞,与同种异体脱钙骨复合可作为骨组织工程的载体。