涂阴肺结核病人血清蛋白组学研究及SHBG蛋白验证

目的 利用蛋白质组学方法发现和验证涂阴肺结核的候选血清标志物。方法 采用iTRAQ标记结合MALDI-TOF/MS筛选30例健康对照者和30例涂阴肺结核患者血清的差异表达蛋白,通过生物信息学分析差异蛋白之间的相互作用;对差异蛋白SHBG进一步ELISA验证,应用SPSS 20.0统计软件绘制ROC曲线。结果 三次独立重复实验一共筛选和鉴定置信度在95%以上蛋白283种;以正常人血清为对照,涂阴肺结核患者血清中有差异表达蛋白31种（P<0.05）,其中17个蛋白表达上调,14个蛋白表达下调;蛋白相互作用发现SHBG等12种蛋白处于相互作用网络关键节点;ELISA验证结果显示涂阴肺结核组血清SHBG蛋白浓度高于正常对照组和肺炎组（P<0.001）,与蛋白组学筛选和鉴定的结果一致;以SHBG检测值绘制的ROC曲线下的面积是0.92（P<0.001）,其诊断涂阴结核病的灵敏度和特异度分别是87.14%和85.11%。结论 iTRAQ标记结合MALDI-TOF/MS技术筛选和鉴定到的12种关键节点蛋白可能是涂阴结核病潜在标志物,SHBG是值得进一步研究的肺结核候选血清标志物。     

蛋白组技术发现和验证耐多药肺结核潜在血清标志物FCN3

目的利用血清蛋白组学技术筛选和鉴定耐多药肺结核患者血清差异表达蛋白。方法采用i TRAQ标记结合MALDI-TOF/MS筛选健康体检者、肺炎患者和耐多药肺结核患者血清的差异表达蛋白,并进行生物信息学分析;对差异蛋白FCN3进行MRM相对定量验证。结果一共筛选和鉴定到248种蛋白质,其中置信度在95%以上有92种;以正常对照者和肺炎患者血清为对照,在耐多药肺结核患者血清中发现和鉴定出29种差异表达蛋白(P0.05),其中16种表达显著增高,13种表达显著降低,FCN3在耐多药肺结核患者血清中表达降低(P0.05);MRM相对定量验证显示,与正常对照组相比,FCN3在肺炎和耐多药肺结核组中积分峰面积分别为0.818 5±0.037 7和0.378 6±0.020 2,FCN3在耐多药肺结核组表达水平明显降低(P0.005)。结论 MRM验证FCN3的表达水平与血清蛋白组学筛选的结果一致,FCN3可能是耐多药肺结核潜在的血清标志物。     

不明原因流产与正常早孕妇女血清蛋白质谱

目的研究不明原因流产患者血清蛋白质谱特征,探讨不明原因自发性流产的可能病因。方法采用表面增强激光解离飞行时间质谱技术(SELDI-TOFMS),运用WCX2蛋白质芯片检测39例不明原因流产患者和30例正常早孕血清蛋白质谱,获得的蛋白质谱用Biomarker Wizard软件分析,初步筛选蛋白质峰,结合生物信息学的支持向量机方法建立并测试不明原因流产患者血清蛋白质指纹图谱模型。结果在芯片上捕获到251种蛋白质,经蛋白质质谱仪分析发现不明原因流产患者与正常对照组有29种差异蛋白,从中筛出差异显著的5种蛋白质组成原发不孕患者血清的蛋白质谱最佳优化模型,其中质荷比(m／z)分别为8 350,6 954,8 634,8 826的4种蛋白质表达下降,质荷比为(m／z)6 628的蛋白质表达上调。模型经三倍交叉验证实验测定,其敏感性为83．9％,特异性为83.7％。阳性预测值为81．1％。结论不明原因流产患者与正常早孕者血清蛋白质谱存在明显差异,深入研究可能为不明原因流产的病因学提供基础,同时有助于自发性流产血清生物标记物的筛查和发现。     

1592份痰标本结核杆菌涂片镜检与培养结果分析

目的评价肺结核患者痰涂片与痰培养检测的临床效果。方法收集1592份痰标本,采用直接涂片萋尼染色法和分枝杆菌分离培养法进行检查,并对结果进行χ2检验,以P0.05为差异有统计学意义。结果涂片阳性率为11.9%,培养阳性率为12.7%。其中初诊涂阳率为12.8%,培阳率为15.8%;随访患者涂阳率为9.4%,培阳率为4.4%;初诊患者培阳率与涂阳率之间的差异有统计学意义(χ2=4.32,P0.05)。初诊患者涂阴培阳率为3.7%,涂阳培阴率为0.7%;随访患者涂阴培阳率为2.1%,涂阳培阴率为7.1%,涂阳培阴标本痰菌量为79.5%(31/39)在2+以下,77.4%(24/31)涂阳培阴出现在治疗第2、3月末的痰标本。随访患者涂阳培阴率明显高于初诊患者,差异有统计学意义(χ2=54.93,P0.01)。培养和涂片联合检出阳性率为15.1%,其中初诊患者阳性率为16.5%,随访患者阳性率为11.5%。结论痰涂片和痰培养联合检测,可以大大提高肺结核患者痰标本中结核杆菌的检出率。     

血清蛋白指纹图谱筛选乳腺癌血清标记物的意义

目的 探讨利用血清蛋白指纹图谱筛选乳腺癌血清标记物对乳腺癌临床诊断的价值和意义.方法利用美国蛋白芯片系统PBS II/C型 包括蛋白指纹图谱仪和蛋白质芯片检测42例乳腺癌患者血清蛋白质的相对含量,同时以42例正常人血清作对照.结果 在乳腺癌患者和正常人患者中共发现三个表达峰有统计学差异的蛋白质,其质荷比分别为4800Da、6410Da和9300Da,其灵敏性89.3%、特异性92.7%,显示这三个血清标记物对乳腺癌诊断诊断效果明显.结论 血清蛋白指纹图谱技术在筛选乳腺癌血清标记物的数据可靠,能够应用于乳腺癌的生物学诊断中来,应该加以推广.     

SELDI检测结核血清蛋白指纹图谱及与同类研究比较

目的利用SELDI技术筛选肺结核患者血清差异表达蛋白并与同类研究的结果进行比较。方法采用SELDI-TOF-MS筛选30例肺结核患者和30例正常对照血清的差异表达蛋白,建立诊断模型;对105例样本进行盲法验证;与同类研究比较寻找共同差异表达蛋白。结果 SELDI筛选出86个差异有统计学意义的蛋白(P﹤0.05)。从中筛选出了6个最具有诊断价值的潜在标志蛋白建立诊断模型,该诊断模型的ROC曲线下面积为0.983;盲法验证ROC曲线下面积为0.837。与同类研究比较发现,11个差异有统计学意义(P﹤0.001)的差异表达蛋白在本研究中重现。结论肺结核病人与对照的血清蛋白图谱存在差异,两个独立实验共同得到的11个差异表达蛋白与结核病的关系值得深入研究。     

血清蛋白质谱结合人工神经网络在宫颈癌诊断中的应用

目的:采用蛋白质芯片表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测宫颈癌病人血清蛋白指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物。方法:应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集58例宫颈癌患者和57例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白质组。将115例血清随机分为两组:以训练组30例宫颈癌患者和30例健康人建立人工神经网络(ANN)模型,以验证组28例宫颈癌患者和27例健康人血清标本用于模型的双盲法验证。结果:宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有145个差异表达的蛋白质峰(P0.05),筛选出质荷比(M/Z)分别为5912、5642、8702、4320、6432的标志蛋白(P10-6),建立人工神经网络模型,其对宫颈癌的诊断敏感性为92.86%,特异性为88.89%,阳性预测值为89.66%,阴性预测值为92.31%。结论:特征蛋白在宫颈癌患者较正常人血清明显的高表达或低表达,可能对宫颈癌的早期诊断和治疗后随访具有重要的指导意义。     

东台市台城镇2005-2010年结核病项目实施效果分析

目的:了解东台市台城镇2005-2010年结核病项目实施效果.方法:采用描述流行病学方法对台城镇2005-2010年结核病相关资料进行分析.结果::6年累计接诊上报可疑肺结核病人970例,发现活动性肺结核病人543例,其中初治涂阳病人345例,复治涂阳病人69例,初治涂阴病人129例,痰涂片阳性检出率为42.68%,新...     

涂阳肺结核患者密切接触者筛查情况分析

目的通过对涂阳肺结核患者密切接触者采用不同方法进行筛查,比较不同方法对结核患者发现的影响,为政府制定结核病控制政策措施提供科学依据。方法 2010年对密切接触者先问诊,对有肺结核可疑症状者再拍摄X线胸片和3次痰涂片检查。2011年对所有涂阳肺结核患者的密切接触者均拍摄X线胸片和3次痰涂片检查,并分析不同筛查方法对结核患者发现率的影响。结果 2010年共筛查密切接触者421例,其中问诊发现可疑肺结核的密切接触者共139例,后续筛查发现肺结核患者1例,患者发现率为0.24%;2011年共筛查密切接触者358例,发现肺结核患者7例,患者发现率为1.96%。结论对所有涂阳肺结核患者密切接触者直接进行拍摄X线胸片和3次痰涂片检查是发现新结核患者的有效方法。     

11579名赴美移民的肺结核检出情况及防治对策

采用常规胸部X线摄片和痰涂片检查的方法,并按照<赴美签证申请人体检指导>中有关肺结核的分级标准对11579名赴美移民进行肺部结核病的检查.发现肺结核表现共1269例,总检出率10.96%,其中检出活动性肺结核52例(A级--渗出性肺结核9例,B1级一渗出性肺结核并部分增殖43例),检出率0.45%;非活动性肺结核B2级(纤维化表现)和B3级(钙化)的检出率分别为2.22%和8.29%.痰涂片检查52例,阳性9例,涂阳率17.31%.对9例涂阳者进行短程化疗,6个月后复查,痰涂阴转率88.89%.本文就如何防止结核病通过移民传播,提出了具体防治对策.