碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌同源性及碳青霉烯酶基因分析

目的研究云南省昆明地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的耐药性、同源性及碳青霉烯酶基因的携带情况。方法收集2009年10月-2010年10月云南省昆明地区临床分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌215株。应用改良Hodge试验、EDTA双纸片增效试验筛选产碳青霉烯酶的菌株,PCR扩增分析碳青霉烯酶的基因型,随机扩增多态性技术(RAPD)分析菌株的同源性。结果 215株多重耐药鲍曼不动杆菌中,190株(88.4%)检出OXA-51基因;150株(69.8%)检测出OXA-23基因,其中140株OXA-23表达菌在改良Hodge试验中为阳性;12株(5.6%)检出VIM基因且EDTA协同实验均为阳性。RAPD技术将215株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分为7个基因型,其中A型为主要克隆。结论 OXA-23和OXA-51是本地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的主要基因型,已出现VIM型碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,且多重耐药鲍曼不动杆菌存在院内感染的现象。     

江西地区鲍曼不动杆菌NDM-1及其他碳青霉烯酶基因检测研究

目的了解江西地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)NDM-1及其他碳青霉烯酶基因携带情况,为预防和控制医院感染提供实验室依据。方法收集2015年1月—2016年6月江西地区3所三级甲等医院临床标本分离的CRAB共64株,采用K-B法测定其对常用抗菌药物的敏感性,采用改良Hodge试验和EDTA协同试验筛查CRAB产碳青霉烯酶和金属酶的情况,采用聚合酶链反应(PCR)检测碳青霉烯酶基因,对产NDM-1的鲍曼不动杆菌进行接合试验。结果 CRAB对氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星、庆大霉素、左氧氟沙星耐药率高达95.31%、98.44%、90.63%、54.69%。CRAB菌株改良Hodge试验阳性率为76.56%,EDTA协同试验阳性率为96.88%。PCR扩增结果显示,87.50%(56株)的CRAB携带OXA-23、VIM-1基因,18.75%(12株)携带SIM基因,3.13%(2株)携带OXA-24基因,26.56%(17株)携带NDM-1基因。携带NDM-1基因的CRAB均来自于南昌大学第一附属医院,其中64.70%(11/17)表现为泛耐药。接合试验结果显示,携带NDM-1基因的菌株可将NDM-1基因传递给受体菌大肠埃希菌J53,使其获得对亚胺培南的耐药性。结论该地区临床分离的CRAB耐药率高,碳青霉烯酶基因以OXA-23、VIM-1基因型为主,检出NDM-1基因阳性CRAB,NDM-1基因可能存在医院内的克隆传播,应尽快采取有效措施预防和控制NDM-1基因阳性CRAB的传播。     

耐碳青霉烯类鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因型及插入序列ISAba1研究

目的了解耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌的临床分布及耐药特征,探讨插入序列ISAba1和碳青霉烯酶与其耐药的关系。方法收集270株耐碳青霉烯类药物的鲍氏不动杆菌,K-B法检测菌株的药物敏感性;改良Hodge试验检测碳青霉烯酶;双纸片协同试验检测金属酶;多重PCR检测OXA-51、OXA-23、OXA-58、OXA-24、IMP、VIM、SIM,PCR检测ISAbal-OXA-23、ISAbal-OXA-51基因并进行测序分析;采用WHONET 5.6软件对菌株药敏结果进行统计分析。结果在检测的18种药物中,14种药物耐药率超过90.0%,哌拉西林耐药率最高为100.0%,头孢哌酮/舒巴坦的耐药率最低为48.9%;改良Hodge试验阳性156株,阳性率57.8%;金属酶表型检测均为阴性;270株菌均检测到了OXA-51基因,267株菌检测到OXA-23基因,1株检测到OXA-58基因,未检测到OXA-24、IMP、VIM、SIM基因;267株菌的OXA-23基因上游均检测到插入序列ISAbal,所有OXA-51基因上游均未检测到ISAbal。结论耐碳青霉烯类药物鲍氏不动杆菌耐药十分严重;OXA-51和OXA-23型碳青霉烯酶是本地区鲍氏不动杆菌的主要碳青霉烯酶;ISAba1常在OXA-23基因上游出现,ISAbalOXA-23是鲍氏不动杆菌对碳青霉烯类药物耐药的重要机制。     

碳青霉烯类抗菌药物耐药鲍氏不动杆菌分布和耐药基因检测

目的分析医院耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍氏不动杆菌(CRAB)的临床分布和耐药基因,指导临床合理用药,防止产碳青霉烯类鲍氏不动杆菌的发生及传播。方法收集2013年9月-2015年9月台州市中心医院住院患者送检标本中分离132株CRAB,统计CRAB临床分布,并进行耐药性分析;采用法国生物梅里埃公司Vitek-2compact全自动细菌鉴定/药敏分析仪进行体外药敏试验;采用PCR方法扩增碳青霉烯酶基因,分析耐药机制。结果 132株非重复性CRAB菌株中,临床科室分布排前4位依次为ICU、脑外科、急诊ICU和呼吸内科,分别占50.8%、12.9%、11.4%和6.8%;132株CRAB除对阿米卡星、替加环素、左氧氟沙星有一定的敏感性外,对其余抗菌药物耐药率均很高;所有菌株OXA-51-like基因阳性,120株OXA-23-like基因阳性,未发现OXA-24-like和OXA-58-like基因阳性菌株;金属酶基因IMP、VIM检测为阴性。结论 CRAB主要分布在ICU和脑外科等科室;OXA-51和OXA-23基因是鲍氏不动杆菌最主要的碳青霉烯酶基因型。     

碳青霉烯不敏感鲍曼不动杆菌耐药性与碳青霉烯酶耐药基因检测

目的调查碳青霉烯不敏感鲍曼不动杆菌(CNSAB)的耐药性及其产碳青霉烯酶的基因型,探讨其耐药机制。方法采用琼脂稀释法检测美罗培南等15种抗菌药对2009年深圳市人民医院住院患者分离CNSAB(美罗培南或亚胺培南MIC≥8 mg/L)的最低抑菌浓度(MIC),采用多重PCR法分别检测OXA-51-like、OXA-23-like、OXA-24-like、OXA-58-like和OXA-143-like型酶基因及IMP、VIM、GIM、SPM和SIM型金属酶基因;PCR分别扩增OXA-51-like型酶基因上游插入序列ISAba1和KPC酶基因。对扩增的碳青霉烯酶基因产物测序确定其基因型。结果 109株CNSAB对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶、头孢曲松、头孢吡肟、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、复方新诺明高度耐药(耐药率86.2%~100%),且多重耐药。多粘菌素B对CNSAB抗菌活性最强,敏感率100%,MIC50和MIC90均为1 mg/L;其次为米诺环素,敏感率94.5%,MIC50和MIC90均为4mg/L。92.7%(101/109)CNSAB检出OXA-23型基因,4.6%(5/109)CNSAB检出OXA-58型基因,2.8%(3/109)CNSAB检出OXA-66基因上游携带ISAbal;未发现OXA-24-like基因、OXA-143-like基因。所有菌株均未检出IMP、VIM、GIM、SPM、SIM型金属酶基因和KPC酶基因。结论携带OXA-23型碳青霉烯酶基因是本院CNSAB对碳青霉烯耐药的主要因素;本院CNSAB对多粘菌素B和米诺环素高度敏感。     

对亚胺培南不敏感菌株的产碳青霉烯酶的情况分析

目的:探讨对亚胺培南不敏感的革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的分布与变迁情况,为临床合理诊治提供指导。方法:收集2005年5月-2009年8月间临床分离的革兰阴性杆菌,用K-B法筛选对亚胺培南不敏感的菌株;改良Hodge试验检测革兰阴性杆菌产碳青霉烯酶的情况;核酸扩增碳青霉烯酶相关基因NDM-1、KPC、VIM、IMP、OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58。结果:铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌是碳青霉烯类药物不敏感的主要病原菌,54株亚胺培南不敏感的菌株中Hodge试验阳性5株,阳性率为9.3%。携带耐药基因包括IMP 2株,VIM 2株,OXA23 3株,OXA51 2株,OXA65 1株。其中有2株同时携带两种耐药基因。结论:我院亚胺培南不敏感分离株与产碳青霉烯酶IMP、VIM、OXA51、OXA23、OXA65耐药基因有关。     

耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶基因分析

目的分析医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌(IRAB)的碳青霉烯酶基因型和基因周围环境,为临床用药及医院感染的预防控制提供理论基础。方法采用VITEK-2药敏分析系统进行药敏试验,用改良Hodge试验和组合纸片法分别检测碳青霉烯酶和金属酶表型,PCR检测KPC、OXA-23组、OXA-24组、OXA-51组、OXA-58组基因及插入序列ISAba1。结果 36株IRAB改良Hodge阳性率33.3%;未检测到金属酶;36株均携带OXA基因,其中32株OXA-23+OXA-66阳性,2株仅OXA-66阳性,1株仅OXA-23阳性,1株仅OXA-58阳性;所有OXA-23上游均存在ISAba1,未检出KPC、OXA-24组基因。结论该院IRAB主要携带OXA-23、OXA-66型碳青霉烯酶,OXA-23与ISAba1关系密切,存在OXA-58阳性鲍氏不动杆菌。     

鲍氏不动杆菌D类碳青霉烯酶及插入序列ISAba1研究

目的研究临床分离耐亚胺培南鲍氏不动杆菌(IRAB)的耐药性、D类碳青霉烯酶及ISAba1流行情况,为临床合理用药及抗感染提供依据。方法收集医院2011年10月-2012年6月分离的鲍氏不动杆菌(ABA)140株,多重PCR鉴定ABA ITS基因型,K-B纸片法进行药敏试验,改良Hodges试验对产碳青霉烯酶菌株初筛,多重PCR检测D类碳青霉烯酶及整合酶基因,PCR方法分别检测blaOXA-23-like和blaOXA-51-like上游ISAba1,对部分blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-51-like阳性菌株测序并确定基因型。结果 140株ABA经扩增16S-23SrRNA基因间隔序列后137株基因型是ABA;124株为IRAB,13株为亚胺培南敏感鲍氏不动杆菌(ISAB),IRAB对大多数抗菌药物的耐药率>90.00%;blaOXA-23-like、blaOXA-51-like基因检出率,分别为91.24%、94.89%,未检测到blaOXA-58-like基因;部分blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-51-like阳性菌株全基因测序后分别为OXA-23、OXA-72、OXA-66。结论哈尔滨地区鲍氏不动杆菌耐药情况十分严重,OXA-23型酶是其耐药的主要原因,ISAba1对其表达起主要作用。     

鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶检测及流行病学分析

目的调查临床分离鲍氏不动杆菌耐药性及产碳青霉烯酶情况,探讨产碳青霉烯酶菌株分子流行病学及耐药机制。方法收集医院2009年1-6月临床分离的鲍氏不动杆菌179株,应用纸片扩散法进行药敏检测,改良Hodge试验进行碳青霉烯酶筛查;PCR扩增和测序分析碳青霉烯酶基因;质粒接合转移试验及ERIC-PCR分型以阐述其耐药分子机制及流行病学特征。结果 179株鲍氏不动杆菌对亚胺培南、美罗培南、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦和米诺环素的耐药率分别为49.2%、48.0%、45.3%、6.7%和7.8%,其余抗菌药物耐药率均>50.0%;74株菌改良Hodge试验阳性;71株菌携带OXA-23基因;接合试验证实碳青霉烯酶基因不能经质粒转移;ERIC-PCR分型发现,74株菌分为4个基因型且在医院内多个科室克隆传播。结论医院鲍氏不动杆菌耐药严重,产碳青霉烯酶菌株较多,OXA-23基因是主要的碳青霉烯酶基因型,产酶菌株的克隆传播是碳青霉烯类耐药率较高的重要原因。     

耐亚胺培南鲍氏不动杆菌的碳青霉烯酶研究

目的了解医院耐亚胺培南鲍氏不动杆菌碳青霉烯酶携带情况,对临床预防其感染及抗菌药物应用提供参考依据。方法收集2008年9月-2010年12月耐亚胺培南鲍氏不动杆菌65株,K-B纸片法测定其对抗菌药物的敏感性,琼脂稀释法测定其对多黏菌素B的MIC;改良Hodge试验检测碳青霉烯酶,EDTA纸片协同试验检测金属酶表型;PCR检测OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58、IMP、VIM编码基因。结果 65株鲍氏不动杆菌对米诺环素敏感率为19.0%,对其他11种抗菌药物敏感率均10.0%;对多黏菌素B的MIC均≤2μg/ml;改良Hodge阳性率为52.3%,所有菌株OXA-51均阳性,OXA-23阳性率为93.85%,OXA-24、OXA-58均阴性,未检测到金属酶基因。结论耐亚胺培南鲍氏不动杆菌主要携带OXA-23型碳青霉烯酶。