评估PCR-荧光探针法在临床标本诊断中的应用价值

目的评估PCR-荧光探针法在临床标本中快速检测结核分枝杆菌(MTB)和非结核分枝杆菌(NTM)的临床价值。方法收集贵阳市肺科医院2012年4月-2013年2月住院及门诊的2 403例患者送检标本,包括痰液、纤维支气管镜刷检物、胸水标本、脓性分泌物,对标本涂片抗酸染色检测,同时采用PCR-荧光探针法,即用双重PCR技术和Taqman探针技术相结合,提取患者标本中的分枝杆菌核酸进行定性检测,比较两者结果。结果 2 403例患者临床标本经萋尼抗酸染色涂片镜检阳性696例,抗酸染色涂片镜检阴性1 707例,其中非肺结核患者539例,菌阴肺结核患者1 168例;在696例涂片阳性的标本中,应用PCR-荧光探针法,MTB核酸阳性标本635例和NTM核酸阳性9例;1 707例抗酸杆菌涂片阴性标本中MTB核酸阳性264例和NTM阳性6例,539例非肺结核患者标本中检测出MTB核酸假阳性4例;MTB感染患者标本经抗酸染色涂片与PCR-荧光探针法检测,阳性率分别为37.3%及48.8%,即PCR-荧光探针法检测灵敏度较高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论利用PCR-荧光探针法可快速在临床标本中检测和区分MTB和NTM,具有较高的敏感性和特异性,值得在临床中推广应用。     

PCR-RDB和SAT与改良罗氏培养法检测临床标本分枝杆菌研究

目的对比研究PCR-反向点杂交技术(PCR-RDB)与RNA恒温扩增法(SAT)快速检测临床标本中分枝杆菌菌种的应用价值。方法选取2016年7月-2017年6月医院2 069份活动性肺结核、疑似非结核分枝杆菌感染、肺外结核感染等患者的临床标本,采用PCR-反向点杂交技术进行分枝杆菌菌种检测。同时随机选择临床标本200份行SAT检测;437份行改良罗氏培养法(L-J法)培养和菌种初步鉴定,明确PCR-RDB法临床应用价值。结果 PCR-RDB、SAT法阳性率分别为38.5%(796/2069)、41.5%(83/200),高于L-J法的33.0%(144/437)(P0.05);PCR-RDB法不仅阳性率高,而且还可以鉴定分枝杆菌菌种,其中检出结核分枝杆菌群(MTC)682份,占分枝杆菌阳性率85.7%(682/796),非结核分枝杆菌(NTM)114份,占分枝杆菌阳性率14.3%(114/796)。结论PCR-RDB法阳性率远高于培养法,略低于SAT法,但PCR-RDB方法简便、结果准确,且能够快速检测临床标本中分枝杆菌菌种,具有良好的临床应用价值。     

自贡市44株临床非结核分枝杆菌的鉴定

目的对自贡市2012—2016年临床分离44株疑似非结核分枝杆菌进行菌种鉴定。方法使用PCR-荧光探针法对自贡市临床44份疑似非结核患者的菌株进行初步筛查,并对44份菌株的hsp65及rpoB基因进行扩增并测序,通过序列比对获得菌株型别。结果 44株菌株分枝杆菌经PCR-荧光探针法检测结果显示均为非结核分枝杆菌.对44株分枝杆菌进行hsp65及rpoB基因测序比对,进一步菌种鉴定结果显示,44株分枝杆菌分别为11种非结核分枝杆菌。结论自贡市非结核分枝杆菌种类较多,44株菌即分为11个种。PCR-荧光探针法及基因测序法可对临床非结核分枝杆菌进行快速、准确的鉴定。     

反向杂交膜片检测结核菌耐利福平基因突变

目的利用一种新型的反向点杂交膜片,快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变.方法根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计寡核苷酸探针并固定于尼龙膜上,用生物素标记的引物增扩结核分枝杆菌rpoB基因片断,与膜片上探针杂交,膜片检测结果与常规药敏试验结果和测序结果进行对照.结果对63株临床分离株进行检测,10株利福平敏感株未检测到突变,53株耐利福平株,其中48株检测到突变.灵敏度为90.6%,特异度为100%,阳性预测值100%,阴性预测值66.7%.用反向点杂交膜片检测27份肺结核患者的痰标本,17份非结核的痰液标本.12份耐利福平的痰标本中,11份检测到突变,膜片检测与药敏结果的符合率为92.3%;15份利福平敏感的痰标本中,膜片检测结果有6份出现突变信号;17份非结核病的其他患者的痰液标本中有1份检测到突变.检测痰标本的灵敏度为91.7%,特异度为78.1%,阳性预测值61.1%,阴性预测值96.1%.结论反向点杂交膜片可简便、快速、较准确地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变.     

TB-LAMP法检测阳性痰标本再培养增加耐药肺结核发现率

目的 评价结核分枝杆菌环介导等温扩增法(TB-LAMP)在检测肺结核患者痰标本LAMP阳性后再培养及表型药物敏感试验对耐药结核分枝杆菌的检出效果。方法 随机收集2017年5月至2019年2月于遵义医科大学附属医院结核病专科门诊就诊和结核病区住院的疑诊肺结核患者7823例,每例留取4份痰标本,随机分别进行1份痰涂片镜检、2份传统罗氏培养和1份TB-LAMP核酸检测,将TB-LAMP阳性标本进一步行传统罗氏培养及表型药物敏感试验,分析TB-LAMP阳性标本再培养对耐药结核病的诊断价值,提高对耐药结核病的防治意识。采用graphpad prism6.0软件进行分析,χ2检验,P<0.05为差异具有统计学意义。结果 所纳入的可疑肺结核患者7823例,TB-LAMP法、传统罗氏培养和涂片镜检的阳性检出率分别为16.6%、7.8%和4.6%,痰TB-LAMP法阳性检出率与痰涂片抗酸染色、传统L-J培养检查相比,差异具有统计学意义(分别为χ2＝593.57,P＜0 .01;χ2＝283.49,P＜0 .01)。TB-LAMP阳性痰标本再培养阳性率为44%(574/1298),其中52.8%(303/574)与传统结核分枝杆菌培养共同阳性,另外47.2%(271/574)为传统结核分枝杆菌培养阴性,而TB-LAMP阳性标本再培养阳性;228株结核分枝杆菌临床分离株进行结核分枝杆菌药物敏感试验,敏感结核分枝杆菌占75%(171/228),耐药结核分枝杆菌25%(57/228),其中RR-/MDR-TB为12.72%(29/228)。结论 TB-LAMP阳性标本再培养可提高RR-/MDR-TB发现率,为耐药结核病的早诊断、早治疗、减少传播提供了检测思路,值得推广应用。     

环介导等温扩增法诊断初诊肺结核病研究

目的:初步评价环介导等温扩增法(Lamp)检测痰中结核分枝杆菌的准确性,探讨临床诊断初诊肺结核病人的应用价值。方法:选取249例初诊疑似肺结核病人的痰标本,同时进行Lamp、直接涂片抗酸染色法和改良罗氏培养基培养法检测。结果:剔除培养失败和非结核杆菌的标本,共检测了739份痰标本,其中直接涂片抗酸染色法检出阳性标本70份,阳性率9.47%;培养检出阳性标本118份,阳性率15.97%;Lamp检出阳性标本99份,阳性率13.40%。以培养法为标准,涂片法的灵敏度57.63%,特异度99.68%,符合率为94.30%;Lamp的灵敏度77.12%,特异度98.71%,符合率为96.61%。结论:Lamp在检测初诊疑似肺结核病人中有较高的灵敏度和特异性,适用于基层结核病工作中初诊肺结核病人的诊断。     

检测结核分枝杆菌两种不同方法的比较

目的比较实时荧光定量PCR法与细菌培养法检验结核分枝杆菌的能力。方法收集2013-2014年天津市某三甲医院痰涂片抗酸染色阳性肺结核患者的痰液标本200份,分别应用细菌培养法与实时荧光定量PCR法,对上述患者的痰标本进行检测。结果痰涂片抗酸染色阳性结核病患者的痰标本中,应用实时荧光定量PCR法检测结核分枝杆菌的阳性率为58.5%,应用结核分枝杆菌培养法检测的阳性率为42.0%,差异有统计学意义(P0.05)。结论荧光定量PCR技术与细菌培养法尚不能取代痰涂片抗酸染色检测结核分枝杆菌。     

骨与关节结核患者病灶感染病原菌检测结果分析

目的分析临床诊断骨与关节结核患者病灶感染病原菌的种类和耐药性,为临床抗结核治疗方案的制定提供参考。方法选取医院收治的临床诊断骨与关节结核并接受手术治疗的患者58例,收集所有患者病灶部位的脓液、坏死组织、肉芽组织等作为标本进行病原菌培养和药敏试验,对比不同临床资料患者的病原菌培养阳性率并分析病原菌的耐药性。结果 58份标本中分枝杆菌属培养阳性率为56.90%;15份抗酸染色阳性的标本中,分枝杆菌属培养阳性率为93.33%,显著高于抗酸染色阴性的标本(P<0.05);31例有结核中毒症状患者的标本中,分枝杆菌属培养阳性率为70.97%,显著高于无结核中毒症状患者的标本(P<0.05);共培养出结核分枝杆菌20株、牛分枝杆菌8株、肺结核分枝杆菌5株;其中12株为耐药株,占36.36%,其对链霉素和异烟肼的耐药率最高,达75.00%,对磺胺甲氧嗪的耐药率最低,为0。结论结核分枝杆菌是骨与关节结核主要的病原菌,分枝杆菌属对链霉素、异烟肼的耐药率较高,临床上应重视药敏试验,以指导临床抗结核药物的选择,提高临床治疗效果,减少耐药菌株的产生。     

针灸后局部结核感染的实验室检测报告

目的：检测某中医诊所受诊者局部感染病原菌,为探索事件致病原因提供科学依据。方法：采集病人局部感染脓液和痰液标本,进行涂片、分离培养、药敏试验、结核分枝杆菌鉴定等检测。结果：检测46例病人的脓液标本78份,其中48份标本检出人结核分枝杆菌,涉及病例32人,受检病例阳性率为69.57%（32/46）,脓液标本检出率为61.54%（48/78）。检测11例患者痰液标本,9例结核分枝杆菌阳性,阳性率为81.82%（9/11）。9例痰液阳性标本与48份脓液阳性标本结核分枝杆菌鉴定,为同源人结核分枝杆菌。结论：该中医诊所在诊疗过程中陆续引发受诊者针灸部位局部感染,其病原菌为人结核分枝杆菌。为现场流行病学分析致病原因和受感染患者的医疗救治提供了科学依据。     

荧光PCR熔解曲线法分析宜昌地区非结核分枝杆菌感染的流行特征

目的 应用荧光PCR熔解曲线法分析宜昌地区非结核分枝杆菌(NTM)的感染趋势、分布特征、流行状况,为该地区NTM感染的防治提供参考依据。方法 收集2016—2020年间宜昌地区在某院就诊的疑似结核病患者的胸腔积液、腹腔积液、痰、支气管肺泡灌洗液标本,经萋-尼抗酸染色涂片、MGIT 960快速培养和改良罗氏培养检出的所有分枝杆菌阳性标本进一步经荧光PCR熔解曲线法鉴定结核分枝杆菌(MTB)及NTM菌种。以全基因组测序(WGS)为金标准,对比分析荧光PCR熔解曲线法鉴定MTB及NTM的准确性,总结该地区NTM感染患者的临床特征。结果 共收集7 496份分枝杆菌阳性标本,经荧光PCR熔解曲线法鉴定,检出6 997株(93.34%)MTB与499株(6.66%)NTM。NTM菌种鉴定共确定469株(93.99%)NTM菌种,其余30株(6.01%)为未知菌种。检出最多的NTM为胞内分枝杆菌(189,37.88%),其次依次为脓肿分枝杆菌(68株,13.63%)、戈登分枝杆菌(25株,5.01%)。选择荧光PCR熔解曲线法鉴定的22株MTB和18株NTM行WGS,符合率为98.15%,灵敏度为9...     

对医院护理管理队伍建设的几点思考

文章分析了当前医院护理管理队伍存在的主要问题：知识结构不合理；专业思想不纯正；接受继续教育不足：工作效能低下。提出了建设高素质护理管理人才队伍的思路：严格标准，搞好选才；加强思想教育和引导；加大培养力度；建立科学考评和激励机制；完善人才合理流动措施；合理编制，突出效率。     

医学科技成果信息资源网络开放利用的原则探析

医学科技成果信息资源网络开放利用，为资源的开放共享创造了良好条件，它使医学科技信息得到了高效传播和最大利用。网络开放利用医学科技成果信息资源，利用的主体和核心是其信息内容。信息内容是网络用户从中提取知识和所需资料的主要来源，同时也是信息破坏者发动攻击的主要目标之一，因而，信息内容的安全是信息安全的基本问题，主要包括信息内容的规范性、完整性与真实性、知识产权保护与利用的合理性等。要做好这些工作，应该遵循相应的原则和要求。     

政府公共财政支出分配公平性研究进展

政府公共财政支出是社会再分配的一种形式，其目的是促进社会公平。因此，政府的公共财政支出应该具有较强的目标针对性，应该向社会贫困人群倾斜，使其从中受益。本文通过查阅国内外政府公共财政支出分配公平性的相关文献资料。阐述了相关研究的进展情况，井着重探讨了政府公共财政支出分配公平性的内涵、研究范围、测算方法和研究意义。以及实际研究中存在的问题，最后提出我国政府公共财政支出分配公平性的研究方向和需要进一步完善的地方。     

长春新碱过量引起严重毒副反应1例的护理体会

报道1例霍奇金淋巴瘤患者因误用长春新碱（VCR）10mg一次性静脉推注后治疗护理情况。其出现间断性神志恍惚、眼睑闭合不全、言语不清、口腔黏膜糜烂、全身疼痛、麻痹性肠梗阻、尿潴留、手足麻木等症状,经积极解救,禁食,持续胃肠减压、胃管内注入麻油、开塞露、生理盐水灌肠,合理应用肠外营养,注重疼痛、心理护理,做好口腔、肛周护理,预防感染加重,患者病情得到控制好转出院。