江苏地区医院艰难梭菌流行病学研究

目的通过对江苏地区两所不同规模医院的高危人群进行艰难梭菌筛查,以了解医院内艰难梭菌的感染和定植,从而为预防艰难梭菌的流行提供参考数据。方法 2015年11月对A医院和B医院高危科室的所有住院患者进行肛门拭子采样,共采集122份标本,所有的标本经厌氧培养,VIDAS荧光酶联免疫技术检测艰难梭菌毒素A/B,同时利用多重PCR检测技术测定其毒素基因。结果 A医院接受检测的104例患者中艰难梭菌培养阳性29例,阳性率为27.88%,其中感染10例、定植19例;B医院的18例患者中艰难梭菌培养阳性9例,阳性率为50.00%,其中感染1例、定植8例;38株艰难梭菌中有25株艰难梭菌A/B毒素检测阳性;多重PCR结果显示,25株为tcdA和tcdB双阳性,4株tcdA阳性tcdB阴性,9株tcdA和tcdB双阴性,38株艰难梭菌均未检测到二元毒素基因。结论江苏地区不同规模医院的高危科室均存在艰难梭菌感染和传播的风险,对高危人群的腹泻患者进行艰难梭菌的检测,有利于病情的确诊和尽快采取有效的治疗。     

临床患者粪便标本中艰难梭菌感染状况研究

目的 探讨医院艰难梭菌带菌及感染状况,分析艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)的临床特征,为临床提高艰难梭菌分离率以及采取积极有效的防控措施奠定基础.方法随机收集20例要求做粪便培养的患者标本,采用艰难梭菌毒素A/B检测试剂盒进行毒素检测,对标本进行厌氧培养与分离,并进行耐氧实验,用API 20A生化条进行确证.结果 20例患者经艰难梭菌选择性培养基培养后,8株疑似菌落进行涂片镜检和耐氧实验,6株革兰阳性杆菌耐氧实验阳性,再经API 20A鉴定,4株为艰难梭菌,占所有患者的20%;毒素阳性1例,占5%.结论艰难梭菌的感染与某些内科基础性疾病的存在相关;水样的粪便标本更易于培养出艰难梭菌.     

艰难梭菌分离培养与病原学分子特征研究

目的：建立艰难梭菌分离培养与鉴定的表型诊断技术,并对分离获得的艰难梭菌进行分子学特征研究。方法采集杭州某医院ICU住院患者肛拭标本,接种厌氧血琼脂平皿,置厌氧培养箱,可疑菌株采用厌氧菌鉴定试剂条鉴定;用VIDAS荧光酶联免疫技术检测A/B毒素;用PCR技术检测艰难梭菌毒素基因和核糖体分型。结果28例 ICU 患者检出艰难梭菌9株,检出率为32.14%。9株艰难梭菌中, A/B 毒素表型阳性7株（77.78%）,毒素基因检测均阳性。9株艰难梭菌可分为3种核糖型,其中R3型为优势株,占77.78%。结论杭州市ICU患者检出艰难梭菌的比例较高,均携带A/B毒素基因,且存在优势型别。     

多重聚合酶链反应方法检测艰难梭菌毒素基因研究

目的探讨同时检测艰难梭菌毒素A、B基因和二元毒素基因的多重聚合酶链反应(PCR)方法。方法收集2014年1-9月医院120例住院腹泻患者的粪便标本,用艰难梭菌选择性培养基CCFA分离培养艰难梭菌;采用法国生物梅里埃公司厌氧菌鉴定试剂盒鉴定;采用酶免夹心与终点荧光检测相结合技术(ELFA),检测艰难梭菌毒素A、B基因,并分析其毒素特征;将艰难梭菌纯培养出的菌落用多重PCR方法测定艰难梭菌的毒素A、B基因和二元毒素基因。结果 120例腹泻患者送检粪便标本中,分离培养出19株艰难梭菌,艰难梭菌分离率达15.8%;应用免疫学方法检测毒素检出率为52.63%;用多重PCR方法艰难梭菌A、B毒素基因检出率为94.7%;15例患者送检粪便标本检测艰难梭菌A、B毒素阳性中,10株分离培养并鉴定出艰难梭菌;105例患者送检粪便标本检测艰难梭菌A、B毒素阴性中,有9例分离培养并鉴定出艰难梭菌。结论利用多重PCR检测艰难梭菌毒素A、B基因和二元毒素基因,较传统的免疫学方法敏感性高,能够准确地区分艰难梭菌毒素基因的类型,多重PCR是一种快速、特异的一步筛选艰难梭菌毒素基因的方法。     

艰难梭菌培养联合酶法检测毒素蛋白(A/B)的临床应用价值探索

目的通过对艰难梭菌培养及毒素检测方法比较,建立艰难梭菌培养联合酶法检测毒素蛋白(A/B)的检测流程,评估其临床应用。方法收集2015年-2017年住院腹泻患者粪便标本852份,采用显色培养法(ChromID~(TM))培养艰难梭菌,阳性菌株用酶联免疫荧光法检测其毒素蛋白A/B(Clostridium difficile toxins A and B,CDAB);用酶联免疫荧光法检测毒素蛋白A/B及阳性菌株,用PCR方法检测其tcdA和(或)tcdB基因进行比较,运用检出率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值进行效能评价。结果 852例粪便标本经显色培养共分离菌108株,粪便直接酶法A/B毒素蛋白检出率为5.99%(51/852);阳性菌株联合酶法检测A/B毒素蛋白检出率为10.92%(93/852);108株阳性菌株联合PCR方法93株表达tcdA~+tcdB~+;6株表达tcdA~-tcdB~+;9株未表达,为tcdA~-tcdB~-;阳性菌株用酶法检测毒素蛋白A/B结果93株阳性,15株阴性,且93株阳性经PCR检测基因均表达tcdA~+tcdB~+;以PCR检测艰难梭菌毒素基因作为参考方法,培养阳性菌株联合酶法、粪便直接酶法检测毒素蛋白A/B的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为93.94%、100%、100%、60%和51.52%、100%、100%、15.79%;一致性检验Kappa值分别为0.721和0.150。结论显色培养后阳性菌株联合酶法检测艰难梭菌毒素蛋白A/B可以提高艰难梭菌检出率,与PCR毒素基因检测有较好一致性,操作简单,具有较好的临床应用价值。     

艰难梭菌无症状携带者危险因素分析

目的探讨艰难梭菌无症状携带者的危险因素,为制定针对性的预防控制策略提供一定理论依据。方法采用单纯随机抽样,选取2014年9月21-27日于医院住院2周的患者128例为研究对象,收集其肛拭子标本,通过厌氧培养,经VIDAS荧光酶联免疫技术进行艰难梭菌毒素A/B检测,利用多重PCR技术进行艰难梭菌毒素基因检测,并利用SPSS 19.0软件进行艰难梭菌无症状携带者危险因素的多因素分析。结果 128例患者肛拭子标本中培养艰难梭菌阳性22株,阳性率为17.19%,均为无症状携带者;单因素分析显示,艰难梭菌无症状携带者在年龄、糖尿病史、使用抗菌药物、抗菌药物使用天数、使用氟喹诺酮类药物等方面差异有统计学意义(P0.05);logistic回归分析显示,近期使用抗菌药物和有糖尿病史可能为患者无症状携带艰难梭菌的独立危险因素,OR值分别为5.70(95%CI:1.69~19.21)和3.86(95%CI:1.21~12.26)。结论医院住院患者艰难梭菌培养阳性率较高,应加强对其监测和筛查,特别是对使用抗菌药物或患有糖尿病的患者更应密切关注。     

住院腹泻患者艰难梭菌检测与分析

目的通过对住院腹泻患者粪便标本中的艰难梭菌进行筛查和不同时期检出率的比较,了解某院腹泻患者艰难梭菌的感染情况。方法收集该院2009年2—12月和2011年4—7月住院腹泻患者粪便标本106份,进行厌氧培养和API鉴定,对培养鉴定获得的菌株应用聚合酶链反应（PCR）扩增法进行A、B毒素及二元毒素基因检测;酶联荧光免疫法检测毒素A/B。结果 106份标本中,厌氧培养艰难梭菌阳性16株（15.09%）。16株菌经PCR扩增,A、B毒素均阳性,二元毒素均阴性。直接毒素A/B检测阳性率为12.26%（13/106）,与厌氧培养阳性率比较,差异无统计学意义（χ^20.16,P〉0.05）。2009年2—12月和2011年4—7月两个时期的标本厌氧培养艰难梭菌阳性率分别为22.81%（13/57）、6.12%（3/49）,两者比较,差异有统计学意义（χ^25.73,P〈0.05）;毒素A/B检出率分别为17.54%（10/57）、6.12%（3/49）,差异无统计学意义（χ^23.18,P〉0.05）。艰难梭菌检测阳性患者住院期间均使用过头孢类、喹诺酮类、碳青霉烯类、广谱青霉素、克林霉素等其中一种或多种抗菌药物。结论该院艰难梭菌相关性腹泻比较严重,抗菌药物的使用是诱使艰难梭菌感染的重要因素。     

学龄前患儿艰难梭菌毒素基因分型及患儿临床特点分析

目的探讨学龄前患儿艰难梭菌毒素基因分型及患儿临床特点。方法选取2017年10月—2020年10月在嘉兴市第二医院儿科住院的148例腹泻患儿为研究对象,所有患儿均留取48 h内粪便,将粪便标本置于-80℃冰箱中,进行艰难梭菌培养,实时荧光定量PCR完成DNA提取及毒素基因检测,酶联免疫吸附法测毒素A/B。结果148例腹泻患者的粪便标本培养出24株艰难梭菌,分离率16.21%。发现粪便标本培养阳性及培养阴性患儿近2个月抗生素使用情况、血红蛋白含量、白蛋白含量及粪便性状差异有统计学意义(P<0.05)。用PCR法对24株艰难梭菌毒素基因检测,tcdA和tcdB均为阳性菌株9株(37.50%),均为阴性3株(12.50%)。tcdA或tcdB阳性有12株(50.00%),其中tcdA^(-)tcdB^(+)菌株9株,tcdA^(+)tcdB^(-)菌株3株。酶联免疫吸附法检测,测得毒素阳性21例,阳性率为87.50%,其中毒素A^(+)B^(-)9例,毒素A^(+)B^(+)6例,毒素A^(-)B^(+)6例。建立logistic回归模型分析,抗生素过去2个月、白蛋白与粪便性状是艰难梭菌感染的危险因素(P<0.05)。结论艰难梭菌培养以产毒株tcdA^(-)tcdB^(+)、A^(+)B^(-)为主,艰难梭菌感染与抗生素过去2个月、白蛋白与粪便性状体有关,为艰难梭菌监测、预防具有指导价值。     

北京一所教学医院艰难梭菌感染分析

目的研究2014-2016年医院艰难梭菌感染情况。方法 2014年6月-2016年5月,临床标本的毒素检测采用酶联免疫法(EIA);随机选择69例非重复住院患者的毒素送检粪便同时进行EIA、GeneXpert PCR和艰难梭菌培养并比较,结合病历回顾研究培养和/或毒素阳性患者的感染及治疗。结果艰难梭菌培养和毒素检测同时送检的非重复患者640例,85例培养或/和毒素阳性,培养阳性率为8.91%,毒素阳性率为7.97%;培养阳性率>10%的科室有胃肠外科、肾内科、风湿免疫内科、消化内科;毒素阳性率>10%的科室有肾内科、骨肿瘤科、风湿免疫内科、胃肠外科、消化内科。标本送检占比56.88%的血液科,其培养、毒素阳性率仅分别为8.24%、5.49%;随机选择的69例非重复患者标本,有9例属于艰难梭菌感染,阳性率为13.04%,培养的灵敏度、特异度分别为66.67%、98.33%;EIA的灵敏度、特异度分别为44.44%、93.33%;PCR的灵敏度、特异度分别为100%、95.00%;相关因素分析,"腹泻时长≥48h"、"每日腹泻≥3次"在艰难梭菌感染组与非感染组中具有显著性差异;培养阳性或毒素阳性均有阳性提示意义,若伴随腹泻症状,应重点考虑艰难梭菌感染并予以万古霉素、甲硝唑和/或肠道菌群调节药物。结论应规范送检标本,选择合适检验方法,重视艰难梭菌感染,避免其成为我国的公共健康威胁。     

北京一所教学医院艰难梭菌感染分析北大核心CSCD

目的研究2014-2016年医院艰难梭菌感染情况。方法 2014年6月-2016年5月,临床标本的毒素检测采用酶联免疫法(EIA);随机选择69例非重复住院患者的毒素送检粪便同时进行EIA、GeneXpert PCR和艰难梭菌培养并比较,结合病历回顾研究培养和/或毒素阳性患者的感染及治疗。结果艰难梭菌培养和毒素检测同时送检的非重复患者640例,85例培养或/和毒素阳性,培养阳性率为8.91%,毒素阳性率为7.97%;培养阳性率>10%的科室有胃肠外科、肾内科、风湿免疫内科、消化内科;毒素阳性率>10%的科室有肾内科、骨肿瘤科、风湿免疫内科、胃肠外科、消化内科。标本送检占比56.88%的血液科,其培养、毒素阳性率仅分别为8.24%、5.49%;随机选择的69例非重复患者标本,有9例属于艰难梭菌感染,阳性率为13.04%,培养的灵敏度、特异度分别为66.67%、98.33%;EIA的灵敏度、特异度分别为44.44%、93.33%;PCR的灵敏度、特异度分别为100%、95.00%;相关因素分析,"腹泻时长≥48h"、"每日腹泻≥3次"在艰难梭菌感染组与非感染组中具有显著性差异;培养阳性或毒素阳性均有阳性提示意义,若伴随腹泻症状,应重点考虑艰难梭菌感染并予以万古霉素、甲硝唑和/或肠道菌群调节药物。结论应规范送检标本,选择合适检验方法,重视艰难梭菌感染,避免其成为我国的公共健康威胁。