滤过泡内注射自家血治疗青光眼术后滤过过强

滤过泡内注射自家血治疗青光眼术后滤过过强温州医学院附属一院眼科（３２５０００）孔丽萍由于丝裂霉素Ｃ能抑制成纤维细胞的增殖，防止滤过泡的纤维化，保护滤过泡有较强的滤过率。因此，它的应用增加了青光眼滤过手术的成功率，但随着丝裂霉素Ｃ越来越频繁的试用，问题...     

热休克蛋白47在大鼠抗青光眼滤过术后滤过泡中的动态表达

背景抗青光眼滤过术后抗滤过泡的瘢痕化是眼科研究的热点和难点，研究已证实热休克蛋白47（HSP47）的表达上调与人体多个器官和组织胶原纤维的合成以及组织纤维化过程密切相关，但其与青光眼术后滤过泡的纤维化是否有关尚不清楚。目的探讨HSP47与大鼠抗青光眼滤过术后滤过泡组织纤维增生的关系。方法健康雄性SPF级Spargue—Dawley（SD）大鼠10只，所有大鼠右眼均行常规抗青光眼滤过手术，左眼为正常对照眼。应用随机数字法将术眼随机分为术后7d组和14d组，每组5只。术后每日在裂隙灯显微镜下观察滤过泡形态及眼前节情况。分别于术后7d和14d采用过量麻醉法处死大鼠，并制备正常对照眼结膜组织和手术眼术区组织标本，分别行苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色，检测组织标本中胶原纤维的增生及HSP47在滤过泡中的表达情况，计算标本中HSP47阳性细胞数占总细胞数的百分比，即阳性细胞百分比。结果10只大鼠右眼术后均可见弥散隆起的结膜滤过泡，局部炎症反应轻微。苏木精一伊红染色结果表明，与正常对照眼结膜下组织比较，抗青光跟滤过术后术跟滤过泡组织中可见成纤维细胞增生，胶原纤维增多，呈疏松束状至致密束状排列。HSP47在SD大鼠正常对照眼结膜组织的成纤维细胞和血管内皮细胞的细胞质中可见棕黄色染色，而在滤过术后7d的滤过泡组织中，HSP47在阳性细胞中染色强度较正常对照组增强，HSP47阳性细胞百分比为（56．40±1．12）％，与正常对照组的（13．70±0．74）％相比，差异有统计学意义（P=0．000）；滤过术后14d时HSP47在滤过泡中的阳性细胞百分比为（23．90±0．76）％，与术后7d时比较，差异有统计学意义（P=0．000），但是仍高于正常对照组，差异有统计学意义（P=0．000）。结论SD大鼠抗青光眼滤过术后HSP47的表达量与滤过泡中成纤维细胞的活性相一致，提示HSP47在胶原合成过程中发挥作用。     

低剂量高三尖杉酯碱防治青光眼滤过术后瘢痕化

为防止青光眼滤过术后滤过泡的瘢痕化，对２０例２２只青光眼滤过术后，结膜下注射低剂量高三尖杉酯碱。术后功能性滤过泡的形成为９０．９％，术后眼压均值为２．０４±０．６８ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ），与对照组比较差异有非常显著性（Ｐ≤０．０１）。结果提示：低剂量高三尖杉酯碱毒副作用小，可抑制成纤维细胞的增殖，对促进功能性滤过泡的形成，提高手术成功率有一定作用。     

RNA干扰在防治滤过泡瘢痕化方面的研究

滤过性手术是目前最常用的抗青光眼手术方法,但术后滤过泡瘢痕化的发生明显降低了手术成功率.RNA干扰(RNAi)是一种序列特异性的转录后基因沉默技术,具有特异性、高效性等特点.近年来,研究者逐渐将此技术运用于滤过泡瘢痕化发生机制及防治方面的研究,并取得了一定的研究成果.组织转谷氨酰胺酶(tTgase)表达和活性的增加在创伤后结膜下伤口愈合及纤维化反应过程中发挥重要作用.针对LIM激酶1的RNAi,有可能用于防治青光眼滤过手术后瘢痕的形成.RNAi技术可作为抑制大鼠Tenon囊成纤维细胞表达转化生长因子β2的工具.核因子-κB抑制剂激酶β-siRNA介导的核因子-κB通路的抑制,能够抑制人Tenon囊成纤维细胞的增生.     

用丝裂霉素C作青光眼辅助药的研究进展

青光眼滤过术后纤维细胞的增殖和胶原的产生是引起巩膜伤口瘢痕化导致滤过泡失败的主要原因。尤其是年轻人、无晶体眼、眼前节新生血管形成、炎症、以前失败过的滤过术等危险因素更容易降低手术疗效。实验和临床研究证实,术中单独一次应用抗代谢药丝裂霉素C能抑制成纤维细胞增殖,阻止巩膜伤口纤维化,增加手术预后差的眼的滤过术成功率。它所引起的副作用,如角膜上皮缺损比较低,给药方式也较好。但它在眼部抗纤维化治疗中的作用尚需进一步研究。     

细胞因子、纤维化与青光眼滤过术的失败

目前对青光眼滤过术后滤过口瘢痕化的治疗虽有效，但常产生有害的副作用。对纤维化反应细胞学基础的研究会有助于抗纤维化治疗。伤口的修复包括血管新生和成纤维细胞的活化，它们都是在细胞因子的参与下完成的。细胞因子在这复杂的网络中相互作用促使成纤维细胞趋化、增殖和收缩，并刺激产生葡萄糖胺聚糖及胶原。干扰素可能会抑制上述纤维化反应的多个环节，其在眼部抗纤维化治疗中的作用尚需作进一步的评价。     

干扰素对原发性青光眼小梁切除术后滤过泡影响的临床观察

目的　应用α—2b 干扰素10 万单位,青光眼滤过术后滤过泡内注射,对原发性青光眼小梁切除术后滤过泡瘢痕化的临床疗效评价及不良反应的观察。方法　随机将60 例患者分试验组30 例,对照组30 例。统一诊断标准、手术标准及术后疗效评价标准。观察半年以上的临床效应。结果　α- 2b 干扰素试验组临床疗效与对照组相比有高度显著性差异, P 均< 0.01,且未发现毒副反应。结论　应用α- 2b 干扰素10 万单位青光眼滤过术后滤过泡内注射,能有效的抑制成纤维细胞的增殖,从而对减少滤过泡瘢痕化的形成起了关键性作用     

γ-干扰素对实验性青光眼滤过术瘢痕形成的影响

目的探讨γ-干扰素（γ-interferon，γ-IF）在实验性青光眼滤过术中抗结膜下瘢痕形成的效果。方法16只家兔随机分为对照组和用药组，每组8只16眼。均行小梁切除术，用药组于术毕即刻、术后第3天、第7天、第14天结膜下注射γ-IF500×10^3 IU，对照组注射生理盐水。分别作眼压（intraocular pressure，IOP）、滤过泡及透射电镜和光镜观察。结果IOP：2组术后IOP均较术前下降，但2组间术后IOP无差异。功能性滤过泡：用药组14眼，对照组6眼。电镜观察：术后21d，用药组纤维排列整齐；对照组纤维排列紊乱。光镜观察：术后21d，用药组结膜下组织疏松，可见纤维间隙，成纤维细胞较少；对照组结膜下被纤维组织填充，成纤维细胞较多。结论γ-IF可有效防止滤过泡瘢痕化及巩膜瘘道阻塞，提高滤过术成功率，有临床应用价值。【眼科新进展2007；27（2）：99-101]     

针拨联合5-氟尿嘧啶结膜下注射治疗小梁切除术后功能不良滤过泡

小梁切除术是治疗青光眼的主要手段,但术后常因纤维增殖和瘢痕形成而失去滤过功能。因此,对术后早期即将失败的滤过泡及时干预有助于防止滤过失败或挽回滤过功能,进而改善手术的整体效果。我们对22眼小梁切除术后滤过泡功能不良的患者,采用针拨联合滤过泡旁结膜下注射5-氟尿嘧啶（5-FU）进行治疗,疗效满意,现报告如下。     

兔青光眼术后成纤维细胞内结缔组织生长因子的调节

目的观察青光眼滤过手术后滤过泡瘢痕内成纤维细胞中反义寡核苷酸（ASODN）对结缔组织生长因子（CTGF）的调节,为抗青光眼术后滤过泡区瘢痕形成提出新的解决思路。方法取兔眼小梁切除术后第5天的手术区结膜及板层巩膜行成纤维细胞的原代培养。培养的细胞根据干预方式的不同分为CTGFASODN-脂质体复合物组、CTGFASODN对照组、CTGF随机序列寡核苷酸（SCODN）-脂质体复合物组和空白对照组。利用脂质体介导,将经异硫氰酸荧光素（FITC）标记的CTGFASODN转染至兔抗青光眼滤过手术后滤过泡瘢痕组织成纤维细胞中,利用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CTGFmRNA在成纤维细胞中的表达,采用Westernblot法检测CTGF蛋白的合成量,以相对灰度值为指标,观察CTGFASODN对CTGF在手术区结膜及板层巩膜行成纤维细胞中表达的抑制效果。结果组织块培养法培养的成纤维细胞在13～14d达到融合。CTGFASODN-脂质体复合物组转染6h后可见培养的细胞质中出现少量黄绿色荧光,12h后荧光依然存在;CTGFmRNA在成纤维细胞中表达的相对灰度值明显低于空白对照组（0.457±0.035vs0.790±0.037）,差异有统计学意义（P〈0.01）;CTGF蛋白水平表达也呈相同趋势（0.177±0.022vs0.557±0.024）（P〈0.01）。CTGFASODN对照组、CTGFSCODN-脂质体复合物组CTGF在成纤维细胞中的表达与空白对照组相比差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论脂质体能有效地将CTGFASODN转染进入体外培养的成纤维细胞;CTGF在青光眼滤过手术后的瘢痕形成过程中发挥重要作用;CTGFASODN能在脂质体介导下抑制CTGF在成纤维细胞中的表达。     

Enhanced short-term plasmid transfection of filtration surgery tissues

PURPOSE: To quantify and localize plasmid transfection of filtration surgery tissues using two delivery techniques. METHODS: Full-thickness filtering procedures were performed on eyes of New Zealand albino rabbits. In 10 eyes, naked plasmid DNA in saline was either injected beneath Tenon's capsule at the filtration site or absorbed into a collagen shield that was then placed external to the sclerostomy and under the Tenon's capsule. Forty-eight hours after surgery, levels of the reporter gene, chloramphenicol acetyltransferase (CAT) were measured in samples of ocular tissues. In two additional eyes, the ss-galactosidase (ss-GAL:) reporter gene expression was localized histologically. RESULTS: Injection of plasmid DNA in saline vehicle into the filtration bleb produced readily detectable CAT activity in bleb tissue (conjunctiva, Tenon's capsule, and sclera) whereas CAT activity was nearly undetectable in samples of the cornea, iris-ciliary body, and tissues located opposite the bleb site. Delivery of the plasmid DNA into the bleb through a collagen shield increased CAT activity 30-fold over injection of plasmid in saline (2711 +/- 567 mU/mg versus 92 +/- 38 mU/mg). ss-Gal activity was imaged only in the region of the bleb, and microscopic examination showed ss-Gal activity localized to Tenon's capsule fibroblasts, with minimal ss-Gal activity observed in inflammatory cells or scleral fibroblasts. CONCLUSIONS: Transfection of filtration tissues is enhanced by absorption of naked DNA into a collagen shield. Furthermore, transfection is localized to the fibroblasts and inflammatory cells of the filtration bleb site. Gene therapy using naked plasmid DNA and a simple collagen shield delivery vehicle may be useful for regulating wound healing after glaucoma surgery.     

NFκ-B抑制剂PDTC抑制鼠眼滤过术后瘢痕化的研究

目的探讨NFκ-B抑制剂四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯（PDTC）在大鼠滤过性手术中抗瘢痕化的作用。方法将24只SD大鼠随机分为阴性对照组、PDTC组、丝裂霉素C（MMC）组3组,双眼均行手术。术后每日观察滤过泡形态及并发症,记录滤过泡存活时间。另取9只SD大鼠,每组3只,单眼手术,7 d后处死,观察滤过泡组织病理学改变。结果滤过泡存活时间,PDTC组为（13.16±2.588）d,MMC组为（13.75±2.352）d,阴性对照组为（10.06±1.806）d,前2组与阴性对照组相比差异均有统计学意义（P〈0.01）。术后角膜混浊,MMC组3眼,PDTC组1眼。病理切片显示术后7 d,对照组见较多纤维母细胞及胶原组织。结论PDTC抗瘢痕作用与MMC类似,无明显不良反应,有望成为青光眼术中抗瘢痕增生的辅助用药。     

针刺分离联合结膜下注射5-FU治疗青光眼术后早期滤过泡功能不良

目的:探讨对于青光眼术后早期功能不良的滤过泡采用针刺分离联合结膜下注射5-FU的治疗效果。方法:青光眼滤过术后3mo内25眼功能不良的滤过泡采用针刺分离滤过泡周围纤维瘢痕,然后结膜下注射5-FU5～10mg,隔日1次共5次,分析治疗后眼压和滤过泡形态的变化及治疗后的眼部并发症。结果:25眼中,21眼眼压控制在21mmHg以下,其中18眼在15mmHg以下;滤过泡形态:有19眼表现为功能性滤过泡;并发症:常见并发症有角膜上皮损伤、结膜下出血、滤过泡损伤等。结论:对于青光眼术后早期功能不良的滤过泡采用针刺分离联合结膜下注射5-FU是安全、有效的。     

青光眼滤过术后角膜缘切口手术治疗白内障的临床观察

目的探讨青光眼滤过术后白内障手术治疗的方式及疗效。方法对88例（112只眼）青光眼滤过术后白内障患者施以滤过泡前角膜缘切口手术资料进行分析,观察术中术后并发症及视力情况。结果术后随访观察1～3个月,术后裸眼视力〉0.5者39只眼（35%）,0.25～0.5者63只眼（56%）,≤0.2者10只眼（8.9%）。结论青光眼滤过术后经滤过泡前角膜缘切口行白内障手术安全有效。     

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对兔眼滤过术后肌成纤维细胞分化及细胞外基质合成的作用

背景 各种原因导致滤过手术失败的共同点是滤过通道的成纤维细胞过度增生、分化,导致过度纤维化、瘢痕形成.研究发现,p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通道在成纤维细胞表型转化过程中发挥重要作用. 目的 探讨p38 MAPK抑制剂SB203580对滤过手术后结膜下纤维化反应的抑制效果及其作用机制.方法 12只清洁级新西兰白兔行常规青光眼滤过手术制作双眼滤过手术模型,模型兔按随机数字表法随机分为单纯滤过手术组、SB203580治疗组和丝裂霉素C(MMC)对照组.SB203580治疗组兔眼滤过术毕立即结膜下注射0.2 g/L SB203580溶液1 ml,MMC对照组兔眼术中用浸泡0.2 g/L MMC的棉片置于术区结膜下及巩膜瓣下3 min.各组兔术后进行裂隙灯显微镜观察,术后1、3、7、10、14d使用Icare回弹式眼压计测量眼压,术后14 d抽取房水0.2ml,并获取手术滤过区结膜下组织标本,用ELISA法检测房水及滤过区结膜组织中的α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)、纤维连接蛋白的表达,用荧光实时定量PGR检测各组兔术眼滤过区结膜组织中ACTA2、结缔组织生长因子(CTGF)和Ⅰ型胶原蛋白α2链(COL1 A2) mRNA的表达. 结果 术后14d,单纯滤过手术组滤过泡血管化、瘢痕形成,SB203580治疗组滤过泡扁平、弥散,MMC对照组滤过泡呈苍白缺血状、扁平弥散.单纯滤过手术组、SB203580治疗组和MMC对照组兔间术前眼压值差异无统计学意义( F=0.065,P=0.937),术后眼压值随着时间的延长逐渐升高,各时间点的总体比较差异有统计学意义(F=32.873,P=0.030).ELISA法检测SB203580治疗组和MMC对照组兔房水及滤过区结膜下组织中的α-SMA质量浓度均明显低于单纯滤过手术组,而MMC组α-SMA质量浓度明显低于SB203580治疗组,差异均有统计学意义(P＜0.05).SB203580治疗组和MMC对照组兔房水及滤过区结膜下组织中的纤维连接蛋白质量浓度均明显低于单纯滤过手术组,而MMC对照组α-SMA质量浓度明显低于SB203580治疗组,差异均有统计学意义(P＜0.05).荧光实时定量PCR检测表明,各组兔术眼滤过区结膜下组织ACTA2、CTGF、COL1A2mRNA表达差异均有统计学意义(P＜0.01),以单纯滤过手术组表达量最高,SB203580治疗组次之,MMC对照组最低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 p38 MAPK抑制剂SB203580能减少肌成纤维细胞分化及细胞外基质合成,减轻兔眼滤过手术后的组织纤维化反应.     

双切口超声乳化三联术治疗青光眼合并白内障疗效观察

目的观察经透明角膜切口行白内障超声乳化及人工晶体植入联合小梁切除术治疗青光眼合并白内障的临床疗效。方法回顾分析2012年1月至8月患青光眼白内障在我院行经透明角膜切口超声乳化白内障吸除及人工晶体植入联合小梁切除术(以下简称双切口超乳三联术)的患者13例(13只眼),记录手术前、后的视力和眼压,记求手术并发症和滤过泡情况。结果术后平均眼压为12.12 mm H g,术后3个月随访,眼压控制良好,术后视力均有显著提高,术后无严重并发症发生。结论双切口超乳三联术具有损伤小,术后反应轻,双切口互不干扰,保留经典小梁切除滤过通道,可更安全有效治疗青光眼合并白内障。     

羟基喜树碱对抗青光眼滤过术后功能性滤过泡的维持作用

1背景眼外滤过手术一直是治疗青光眼的主要术式,而其术后滤过道瘢痕化是导致青光眼手术失败的主要原因。寻找有效和安全的抗瘢痕药物是抗青光眼滤过手术的研究热点。目的探讨羟基喜树碱（HCPT）在小梁切除术中的应用,评价HCPT对结膜下滤过泡的抗增生作用及其最佳剂量。方法12～16周龄健康新西兰大白兔40只制作抗青光眼滤过手术模型,采用随机数字表法将动物随机分为生理盐水组、丝裂霉素C（MMC）组、0．3g／LHCPT组及1．0g／LHCPT组,每组10只,均取右眼行常规小梁切除术,术中在不同组兔眼巩膜表面及巩膜瓣下分别放置含生理盐水、0．3g／LMMC、0．3g／LHCPT及1．0g／LHCPT的棉片5min。于术后l、4、7、14、21、28d用Icare眼压计测量眼压;裂隙灯显微镜下观察术眼滤过泡情况以评价各种药物的疗效,球结膜、角膜、前房炎症反应、虹膜周边切口及晶状体混浊情况,加前置镜后观察视网膜情况,以评估药物不良反应。于术后7、14、28d分别处死3、3、4只动物,取术眼5mm×5mm手术区组织,包括球结膜、结膜下组织及巩膜,分别行苏木精-伊红染色及Masson三重染色,比较各种药物的抗纤维组织增生效果。采用Kaplan—Meier分析比较各组兔术眼功能性滤过泡的生存时间。结果各组伺实验兔术眼的眼压随着时间的变化明显不同,差异均有统计学意义（F分组=20．79,P=0．00;F时间=85．34,P=0．00;F交互作用=2．13,P=0．01）,其中MMC组和1．0g／LHCPT组术眼术后各时间点的眼压值均明显低于术前,差异均有统计学意义（P〈0．05）,生理盐水组和0．3g／LHCPT组仅能分别维持低眼压至术后第7天和第14天。术后生理盐水组、MMC组、0．3g／LHCPT组及1．0g／LHCPT组术眼滤过泡存活时间分别为（11．3±2．8）、（19．5±2．4）、（13．3±2．2）和（20．2±4．5）d,差异有统计学意义（log rank=11．92,P〈0．01）,1．0g／LHCPT组术眼滤过泡存活时间较其他组明显延长。术后7d内,各组术眼滤过泡面积和高度分级的差异均无统计学意义（P〉0．05）,而术后7、14、28d,生理盐水组和0．3g／LHCPT组较1．0g／LHCPT组与MMC组的滤过泡面积明显减小,差异均有统计学意义（P〈0．05）。苏木精-伊红染色和Masson染色表明,MMC组与1．0g／LHCPT组术区组织中炎性细胞明：显减少,结膜下组织中纤维细胞增生量下降,胶原纤维染色减少。结论小梁切除术中局部应用1．0g／LHCPT能抑制术区组织的炎症反应和胶原纤维的增生,有效降低眼压,且功能性滤过泡维持时间长。【     

两种结膜瓣在复合式小梁切除术后对形成功能性滤过泡的影响

目的比较穹隆部为基底的球结膜瓣和角膜缘为基底的球结膜瓣在青光眼复合式小梁切除术后对形成功能性滤过泡的影响。方法将45例（55眼）原发性青光眼并接受复合小梁切除术者随机分成2组：A组：27眼以角膜缘为基底的球结膜瓣;B组：28眼以穹隆部为基底的球结膜瓣。术后观察2组患眼眼压、滤泡、前房深度。全部患者术后观察6个月。结果2种结膜瓣的复合式小梁切除术均有显著降眼压效果（P〈0．01）;功能性滤过泡的形成率差异也无统计学意义（P〉0．05）;术后早期眼球按摩促进滤泡形成中出现被动性滤泡渗漏B组多于A组。结论2种结膜瓣的复合小梁切除术治疗青光眼都有相同良好的效果。鉴于穹隆部为基底的球结膜瓣在眼球按摩中有较高被动性滤泡渗漏,因此角膜缘为基底球结膜瓣的复合小梁切除术更安全。     

Paclitaxel inhibits growth, migration and collagen production of human Tenon's fibroblasts—potential use in drug-eluting glaucoma drainage devices

Objective/Aim  

One of the factors limiting the long-term success of glaucoma drainage devices and traditional filtering surgery is the tendency of bleb encapsulation. Glaucoma shunts present an opportunity of introducing drug-eluting mechanisms for a lasting exposure of the bleb to anti-proliferative substances. The aim of this in vitro study was to investigate the effects of short- and long-term exposure of primary cultures of human Tenon's fibroblasts to different concentrations of paclitaxel on cell proliferation, migration, collagen production and cytotoxicity, in order to evaluate the suitability of the drug for the use in such a device.