固定液对恒冷箱切片组织结构与染色效果的比较观察

对Ｗｉｓｔａｒ大鼠６种器官进行恒冷箱新鲜冰冻切片,采用９种固定液分别固定切片,在同等条件下做Ｈ．Ｅ染色,观察不同固定液对器官组织结构与染色效果的影响,以寻找适用于恒冷箱切片的最佳固定液．结果表明：１０％中性甲醛固定的切片,器官的组织结构清晰,染色好,镜下与石蜡切片相似,我们推荐在恒冷箱切片Ｈ．Ｅ染色时选用１０％中性甲醛作为固定液,这对提高恒冷箱切片染色技术和临床病理快速诊断的准确性,有一定指导意义。     

甲醛固定组织中毒鼠强的检测

目的 测定甲醛固定后组织中毒鼠强的含量。方法 组织经苯萃取后用GC／MS—SIM法检测固定10d、30d后的肝组织、肾组织中毒鼠强含量。结果 固定10d的上述组织中毒鼠强含量与未固定组织含量无显著差异，固定30d后的上述组织毒鼠强检测结果略高。结论 中毒肝组织、肾组织经甲醛固定后仍可检出毒鼠强，甲醛固定对含量测定短时期内没有影响。     

病检组织邮寄袋技术

为了方便送检和保证病检组织的优良固定,我们自1987年11月起,收检应用病检组织邮寄袋的病例400例次,现介绍如下。材料和方法一、材料邮寄袋和邮寄固定剂由我院研制而成。邮寄袋为薄膜塑料袋,长5厘米,宽4厘米,透明聚氯乙烯制做。邮寄固定剂由丙三酮和甲醛配制。邮寄固定剂配方:丙三酮 1份7.4％甲醛溶液 2份邮寄固定剂配制方法:取市售37％甲醛溶液2份,加水8份,即配成7.4％甲醛     

组织检材的PCR性别鉴定研究

作者用引物Ｙ３、Ｙ４通过ＰＣＲ技术对微量陈旧的组织检材进行了扩增，扩增的靶序列位于Ｙ染色体ＤＮＡ特异３．４Ｋｂ重复序列中，产物为４４６ｐｂ。检材是新鲜组织、甲醛固定组织、石蜡包埋组织和ＨＥ染色切片组织。检材的保存时间从凡小时到五年。结果表明：新鲜组织，１０％中性缓冲甲醛固定一年以下的组织和石蜡包埋３年以下的组织均可做为ＰＣＲ性别鉴定的良好检材。     

组织检材的PCR性别鉴定研究

作者用引物Ｙ３、Ｙ４通过ＰＣＲ技术对微量陈旧的组织检材进行了扩增，扩增的靶序列位于Ｙ染色体ＤＮＡ特异３．４Ｋｂ重复序列中，产物为４４６ｐｂ。检材是新鲜组织、甲醛固定组织、石蜡包埋组织和ＨＥ染色切片组织。检材的保存时间从几小时到五年。结果表明：新鲜组织，１０％中性缓冲甲醛固定一年以下的组织和石蜡包埋３年以下的组织均可做为ＰＣＲ性别鉴定的良好检材。     

微波技术在免疫组化中的应用

免疫组织化学 (简称免疫组化 )自 1 974年用于病理诊断以来 ,已成为病理科一种常用手段。但目前进行的常规石蜡切片标本 ,一般用甲醛固定 ,其免疫组化标记敏感性明显降低 ,造成显色困难。因此在染色时 ,有些抗原须先进行修复或暴露。笔者采用本科总结的微波修复技术先对病变组织进行修复。然后再观察病变组织中激素受体的表达。并与对照组进行比较。1　材料与方法1 .1　材料　 40例乳腺浸润性导管癌病变组织均为我院 1 997年 4月～ 1 998年 1 0月乳腺手术切除标本。所有标本均为 1 0 %福尔马林固定 ,常规石蜡包埋 ,HE染色。每例取病变最为…     

微波组织处理方法初探

<正> 微波炉是近年来深受国际市场欢迎的一种新型炉具,正越来越多的从家庭走进实验室。最近我们利用微波炉对组织的固定、脱水、浸蜡等全过程进行处理,初步摸索到一些经验,介绍如下。1 材料和方法组织取材于尸检、外检标本及动物实验材料,包括乳腺、甲状腺、肝、脾、肺、子宫     

微波辅助组织脱水在病理制片中的应用

Ｍａｙｅｒｓ于 1970年首次应用微波技术热固定组织获得成功 ,这项技术在临床病理的快速诊断中对提高工作质量方面具有一定的意义。Ｂｏｏｎ于 1986年利用微波进行常规组织脱水、透明和浸蜡。经过微波处理后的组织具有核膜清淅、染色均匀、组织收缩小等特点。我科应用微波技术对各类组织脱水进行了尝试 ,获得了良好效果。1　材料和方法1.1　材料　选用已固定的子宫及左右附件材料 9份 ,淋巴结2份 ,皮肤 2份 ,左、右乳腺及腋下淋巴结 6份 ,大部胃切组织5份 ,阑尾 10份 ,食管组织 2份 ,腭部肿物 1份。组织块大小可为 2 .5ｃｍ× 1.5ｃｍ× 0 .…     

CD15抗原在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

应用免疫组化法对乳腺癌、乳腺良性病变和正常乳腺组织进行了ＣＤ１５抗原检层,并与组织蛋白酶Ｄ（Ｃａｔｈ－Ｄ）和ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白的表达作对比研究,以探讨ＣＤ１５的表达及其与乳腺癌病理指标和预后的关系。１　材料与方法１．１　材料标本取自我院１９９４～１９９７年间手术切除治疗的女性乳腺癌９４例和乳腺良性病变４１例。１０例正常乳腺组织作为对照观察。标本均经１０％甲醛固定,石蜡包埋,４μｍ连续切片。所有病例均按照“中国常见恶性肿瘤诊治规范”进行诊断、分型和分期。参照改良的Ｂｏｏｍ和Ｒｉｃｈａｒｄｓｏ…     

骨髓组织制片和胶原与网状纤维复合染色的应用

在病理活检组织中 ,骨髓穿刺标本的制片和特殊染色要求较高。为适应临床诊断和研究工作的需要 ,我们对组织制片和染色方法进行改进 ,提高组织固定液的浓度 ,以加强对组织细胞的渗透能力 ;选用酸和醛脱钙液 ,以减少对骨髓的损害程度 ,控制组织脱水、透明和浸蜡时间 ,提高制片质量。为了更好地证明骨髓纤维化中含有两种纤维成分 ,我们改进了双重染色法 ,能够较好地同时显示胶原和网状纤维成分 ,其色彩鲜艳、对比清晰 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　组织制片方法1.1.1　组织固定与脱钙　选用 15 %中性甲醛液固定 3 h,使组织得到及时固定 ,组…     

去氧核糖核酸Feulgen染色方法的改进

Ｆｅｕｌｇｅｎ染色是经典显示去氧核糖核酸的方法 ,该法要求用Ｃａｒｎａｙ氏液固定的新鲜组织效果最好 ,洒精———甲醛液次之 ,单纯甲醛固定欠佳 ,效果不满意。我们在给研究生作“心肌缺血再灌注的保护用”课题时 ,在甲醛固定的组织作Ｆｅｕｌｇｅｎ染色过程中 ,增加了Ｃａｒｎａｙ氏液再固定程序 ,提高了反应效果 ,结果比较满意。改进后用 0 .0 5 %光绿作对比染色效果极佳 ,现将改进方法介绍如下。1　材料与方法1.1　取材料片小白鼠心肌组织 8块 ,用 10 %甲醛固定 ,石蜡包埋 ,常规制片 ,切片 4 μｍ ,每块切片 5张 ,1张作Ｈ·Ｅ染色 ,2…     

不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片质量的影响

目的 探讨不同固定液对大鼠肝脏组织石蜡切片HE染色效果.方法 应用SD大鼠肝脏组织分别在动物空腹和空腹条件下,选择三种常规的固定液：体积分数10％甲醛固定液、Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液,对肝脏组织进行固定、石蜡包埋、切片和HE染色,观察动物空腹与未空腹条件下组织固定对切片质量的影响,以及不同固定液对肝脏组织切片质量的影响.结果 在未空腹的条件下,肝脏组织结构显示不清晰,呈水样变性的形态改变;Bouin＇s固定液和改良Davidson＇s固定液固定的组织结构更清晰,但是切片色泽不如体积分数10％甲醛固定液的鲜亮.结论 大鼠是否处于空腹状态对肝脏组织结构影响很大,三种固定方法对大鼠肝脏组织切片质量影响差异不大.     

改良一步法从甲醛固定-石蜡包埋组织中提取RNA

作者利用自行改良的一步法(异硫氰酸胍方法),从甲醛固定石蜡包埋组织提取ＲＮＡ并获得成功,现报道如下。一、材料与方法1组织材料及细胞:35例胆囊组织石蜡包埋标本在手术中切下后常规10%甲醛固定2～10ｈ,石蜡包埋。标本在常温下已保存1～7年。ＫＢＶ1细胞株是人类Ｈｅｌａ细胞的子代细胞。从ＫＢＶ1细胞抽提的ＲＮＡ用作逆转录聚合酶链式反应(ＲＴＰＣＲ)实验的对照组。2.从石蜡包埋组织中分离ＲＮＡ:实验过程从一步法[1]中改良得来。根据蜡块中组织块的大小取40～100μｍ组织切片。经脱蜡、离心和梯度乙醇清洗后获取组织。组织干燥后加入0.…     

骨与钙化组织脱钙方法的改进

制作骨组织及其钙化组织切片时 ,必须经过脱除钙盐的过程[1 ] 。在脱钙过程中 ,常遇到脱钙剂引起组织结构的严重破坏、除酸时间长、染色效果不理想等问题 ,在不同程度上影响了病理诊断的及时性和准确性[2 ] 。作者采用新的脱钙液来进行脱钙 ,取得满意效果。1　材料与方法1 .1　材料　生理盐水、浓盐酸、甲醛、甲酸、氯化铝、冰乙酸等。1 .2　骨和钙化组织的原脱钙方法　将在甲醛中充分固定的骨块或含钙组织先置于硝酸溶液中脱钙 ,硝酸的体积分数为5 % ,每d更换新溶液 ,最好早晚 2次 ,直至可用针刺入组织而无阻力感时为止 ,一般需 1～ 3d ,如…     

两种固定方法检测抗中性粒细胞胞浆抗体的比较

目的:寻找敏感性、特异性较高的中性粒细胞固定方法,以提高IIF法检测ANCA的特异性;方法:分别用乙醇和甲醛固定的人中性粒细胞及人类上皮细胞和猴肝组织作为实验基质,以IIF法检测SLE患者的ANA和ANCA,再用抗原特异性ANCA～ELISA试剂进一步确认,比较乙醇和甲醛固定的人中性粒细胞检测ANCA的结果;结果:67例SLE患者ANA62例阳性,阳性率为92.5 %(62/67),乙醇固定法检测ANCA的阳性率为11.9 %(8/67),甲醛固定法检测ANCA的阳性率为3 %(2/67),抗原特异性ANCA～ELISA试剂确认2例ANCA阳性,乙醇固定法检测ANCA有6例假阳性;结论:单纯用乙醇固定的人中性粒细胞检测ANCA有假阳性,同时用乙醇和甲醛固定的人中性粒细胞检测ANCA可提高特异性.     

消除肝组织免疫组化中非特异性显色的探讨

目的:初步研究加热抗原修复对内源性抗生物素蛋白结合物(EABA)的影响,探讨蛋清液在封闭肝组织EABA、消除非特异性显色中的作用.方法:采用免疫组化SP法及蛋清液封闭法,对甲醛固定石蜡包埋的30例肝细胞癌组织,30例门脉性肝硬化组织,10例肝脏海绵状血管瘤之周围正常肝组织进行EABA检查.结果:①经甲醛固定石蜡包埋后肝组织中的EABA被封闭.②加热抗原修复可造成EABA暴露.③EABA在正常肝组织、肝硬化组织及肝癌组织中都有分布,主要以颗粒状形式存在于胞质中,造成非特异性显色.④20%蛋清液可封闭肝组织中的EABA,消除它对正常染色的干扰.结论:加热修复可使甲醛固定石蜡包埋组织中的EABA重新暴露,暴露的EABA见于人体正常肝组织、肝硬化组织和肝癌组织中,因而对正常免疫组化染色可造成干扰;暴露的EABA可被蛋清液封闭,以蛋清液消除肝组织中非特异性显色的方法经济便捷,效果良好.     

冰冻切片免疫荧光中组织固定方法研究

目的通过对3种不同固定液对肝组织冰冻切片免疫荧光过程中固定情况的比较,探寻保存抗原最佳固定效果的方法。方法取Wistar大鼠肝脏,OCT包埋后置于冰冻机切片,片厚8～10μm。分别用10%甲醛、丙酮和1%多聚甲醛3种固定液固定后,进行免疫荧光染色,经Image-pro图像分析软件及单因素方差分析统计,比较其染色效果。结果丙酮固定的肝组织的免疫荧光组织结构清晰,核浆对比度好,其Heppar肝细胞抗原的阳性面积为(73.2±1.2)%,与10%甲醛(46.2±1.5)%及1%多聚甲醛(62.2±1.1)%固定的肝组织比较差异有统计学意义。结论在保存肝组织中抗原活性方面,相对于10%甲醛和1%多聚甲醛液,以丙酮固定液固定效果最好。     

应用微波辐射缩短组织块HE染色时间

HE染色是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。组织块染色也具有节省药品与适于大批量切片制做等特点 ,但常规组织块HE染色周期一般在半个月以上 ,作者根据微波辐射能推动分子振动原理 ,对HE染色过程中的媒染、苏木素染色、伊红染色等步骤进行了微波辐射处理实验 ,报道如下。1　材料与方法取羊肝与蛙食管、胃、肠等四种不同质地与大小的组织块为染色材料 ,组织块厚 1～ 5mm ,以WD90 0“格兰仕”微波炉为微波辐射仪器。所有材料用 1 0 %福尔马林 (36 %～ 38%甲醛水溶液 1 0ml+水 90ml)水溶液固定后水洗 1 2…     

两种固定方法检测抗中性粒细胞胞浆抗体的比较

目的 :寻找敏感性、特异性较高的中性粒细胞固定方法 ,以提高 IIF法检测 ANCA的特异性 ;方法 :分别用乙醇和甲醛固定的人中性粒细胞及人类上皮细胞和猴肝组织作为实验基质 ,以 IIF法检测 SL E患者的 ANA和 ANCA,再用抗原特异性 ANCA～ EL ISA试剂进一步确认 ,比较乙醇和甲醛固定的人中性粒细胞检测 ANCA的结果 ;结果 :6 7例 SL E患者 ANA6 2例阳性 ,阳性率为 92 .5 % (6 2 / 6 7) ,乙醇固定法检测 ANCA的阳性率为 11.9% (8/ 6 7) ,甲醛固定法检测 ANCA的阳性率为 3% (2 / 6 7) ,抗原特异性 ANCA～ EL ISA试剂确认 2例 ANCA阳性 ,乙醇固定法检测 ANCA有 6例假阳性 ;结论 :单纯用乙醇固定的人中性粒细胞检测 ANCA有假阳性 ,同时用乙醇和甲醛固定的人中性粒细胞检测 ANCA可提高特异性。     

PCR-RFLP技术在甲醛固定石蜡包埋组织中的应用

目的:探讨mtDNA分析技术在甲醛固定石蜡包埋组织中的应用.方法:应用限制酶RsaI和MnlI消化mtDNA D-LOOP区(HVI16106-16297)PCR扩增产物,聚丙烯凝胶电泳进行RFLP分型的方法,对随机个体血液样品150例.正常组织10例和甲醛固定石蜡包埋组织5例进行检验.结果:在150例随机个体中,Rs...