黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU145凋亡的体外研究

目的 :探讨黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU14 5凋亡的作用机制。方法 :采用不同浓度的黄芩苷处理细胞后 ,用流式细胞仪检测前列腺癌细胞DU14 5的凋亡率及细胞周期分布 ;电镜下观察细胞超微结构 ;免疫组织化学染色检测凋亡相关蛋白的表达。结果 :5 0 ,12 5 μmol·L^-1黄芩苷能诱导前列腺癌细胞DU14 5凋亡 ,凋亡率与剂量正相关 ;DU14 5随药物浓度及作用时间变化 ,细胞周期分布呈现G₁期细胞比例逐渐增高 ,并出现典型的凋亡峰 ;电镜下可见特征性的凋亡小体 ;免疫组织化学染色提示bcl 2在药物处理的DU14 5中表达下调 ,Bax表达缺失 ,Fas表达上调。结论 :黄芩苷能诱导前列腺癌细胞凋亡 ,并明显抑制癌细胞增殖 ,具有直接抗肿瘤作用。     

黄芩苷对人肺腺癌A549细胞的抑制作用及相关机制

目的体外观察黄芩苷对人肺腺癌细胞株A549凋亡的影响及其可能机制。方法采用0、0.625、1.25、2.5、5.0、10.0 mg/L黄芩苷作用于A549细胞24、48、72 h,MTT法检测药物对A549细胞的抑制率;RT-PCR法检测1.22mg/L黄芩苷处理A549细胞24 h Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA的表达情况。结果不同质量浓度的黄芩苷呈时间、剂量依赖性地抑制A549细胞的生长,1.22 mg/L黄芩苷作用A549细胞24 h后,Bax、Caspase-3 mRNA表达水平显著升高,Bcl-2 mRNA表达显著下降,Bcl-2/Bax比值显著降低(均P<0.01)。结论黄芩苷体外能诱导A549细胞凋亡,与上调Bax、Caspase-3表达,下调Bcl-2表达有关。     

黄芩苷抑制肝癌HepG-2细胞增殖的实验研究

目的观察黄芩苷对肝癌HepG-2细胞增殖的影响。方法采用MTT比色法观察黄芩苷抑制肝癌HepG-2细胞增殖；采用流式细胞仪检测黄芩苷对HepG-2细胞周期分布的影响。结果黄芩苷可抑制肝癌HepG-2细胞增殖，其作用具有时间和浓度依赖性；黄芩苷可诱导细胞凋亡，同时改变细胞周期分布，多数细胞阻滞于S期，与对照组比较，细胞凋亡率差异有显著性。结论黄芩苷可诱导肝癌HepG-2细胞凋亡，改变细胞周期分布，从而抑制细胞增殖。     

黄芩苷、黄芩素对变形链球菌生物膜抑制作用的研究

目的探讨黄芩苷、黄芩素对变形链球菌生物膜形成的影响,为中药生物膜抑制剂的研究开发提供一定的基础。方法以变形链球菌10556为研究对象,以氯已定为阳性对照药,测试黄芩苷、黄芩素对变形链球菌的最低抑制浓度(MIC);采用倍比稀释法对生物膜内活菌菌落计数;以原子力显微镜和扫描电镜观察其对生物膜形态结构的影响;结晶紫染色法测定对生物膜的抑制率。结果形态学观察可见生物膜被破坏,基质样物变稀疏,细菌群聚大为降低;同时,黄芩苷、黄芩素对变形链球菌生物膜形成具有明显的抑制作用。结论黄芩苷、黄芩素具有明显的体外抑菌作用,该结果可为中药黄芩抗菌作用的物质基础研究提供依据。     

野黄芩苷对人胎儿平滑肌细胞增殖的抑制作用

利用体外细胞培养技术 ,通过 MTT测定、细胞计数等方法 ,观察野黄芩苷对人胎儿平滑肌细胞的保护作用。结果表明 :野黄芩苷可呈浓度依赖性地抑制平滑肌细胞的增殖并可显著抑制高脂血清对平滑肌细胞 (SMC)的促增殖作用。提示 :野黄芩苷对动脉粥样硬化的防治可能具有一定的积极作用     

HPLC法测定四倍体黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的含量

目的测定四倍体黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的含量并与二倍体进行比较,以扩大黄芩种质资源。方法采用高效液相色谱法。色谱柱:INERTSIL ODS-SP(4.6mm×150mm,5μm)柱;流动相:甲醇-水-磷酸(49:51:0.2);流速:1.0 mL/min,检测波长为280 nm。结果四倍体黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的含量由二倍体的12.83%、3.35%增为20.69%、6.23%,分别提高了61.26%和85.97%。结论本实验建立的方法简便、准确,可用于黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的含量测定;四倍体黄芩中黄芩苷和汉黄芩苷的含量显著高于二倍体黄芩,可以做为开发四倍体黄芩的理论依据。     

黄芩苷抗神经元损伤作用机制的研究

神经元损伤是多种中枢神经系统疾病发生发展过程中的主要表现,其症状可表现为学习记忆障碍及情感行为异常。神经元损伤对患者的身心均造成不良影响,降低患者的生存质量。黄芩苷是天然中草药黄芩的主要活性成分,具有抗炎、抗凋亡和抗氧化等多种药理作用。本文主要论述黄芩苷通过抗炎、抗凋亡等途径对缺血性脑卒中、癫痫和抑郁所引起的神经元损伤的保护作用及其可能的作用机制。黄芩苷能够在多种中枢神经系统疾病中发挥抗神经元损伤的作用,且其安全性高、毒副作用小,可能成为治疗相关脑病潜在药物的研究热点。     

黄芩苷对大鼠肝细胞凋亡的影响

目的 :研究黄芩苷对体外培养大鼠肝细胞凋亡的影响。方法 :将黄芩苷作用于体外培养的大鼠肝细胞 ,以肿瘤坏死因子 (TNF-α)和放线菌素D(Act D)诱导细胞凋亡 ,MTT法检测细胞活性 (A值 ) ;溴甲酚绿法检测细胞功能 (ALB值) ;琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术检测法定性定量检测细胞凋亡情况。结果 :经 0.2,2.0μg·ml^-1浓度黄芩苷作用后肝细胞活性 (A值)及分泌白蛋白功能 (培养上清中ALB值 )均高于凋亡模型组 (A值P<0.05,ALB值P<0.01) ,其中 0.2μg·ml-1浓度组肝细胞的ALB值比空白对照组还高 (P<0.01) ;琼脂糖凝胶电泳显示 :只有凋亡模型组出现了典型的”梯状”条带 ;流式细胞术检测结果表明 :各中药组的凋亡率与凋亡模型组相比均有显著性差异 (P<0.01)。结论 :不同浓度的黄芩苷均对TNF-α和ActD所诱导的肝细胞凋亡有抑制作用。     

HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量

目的考察4种不同规格并头黄芩的药用价值和黄芩苷提取条件。方法采用HPLC法测定不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量。结果4种不同规格并头黄芩中黄芩苷含量依次为12.89%、13.82%、11.75%和10.85%,汉黄芩苷含量依次为0.28%、0.22%、0.24%和0.27%;随提取溶剂中醇浓度的增加,黄芩苷提取率先增高后降低,碱性条件降低黄芩苷提取率。结论4种不同规格并头黄芩的黄芩苷和汉黄芩苷含量差异不大,且黄芩苷含量均高于《中华人民共和国药典》要求;提取条件为50%中性乙醇提取最佳。     

黄芩苷的研究近况

根据国内有关文献，从黄芩苷的提取、化学成分、鉴别、含量测定及药理作用等方面的研究进行综述，为黄芩苷的进一步研究提供参考。     

七叶皂苷对结直肠癌细胞增殖、侵袭的作用及机制研究

目的：探究七叶皂苷对氧化三甲胺（TMAO）诱导的结直肠癌细胞株增殖及迁移侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法：取结直肠癌HCT116细胞系,分为对照组、TMAO组、观察组3组,并分别进行处理。对照组不做处理,TMAO组仅使用100 μmol/L TMAO诱导,观察组使用同剂量TMAO诱导后再进行10 μmol/L七叶皂苷治疗处理。随后使用四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、划痕愈合实验及细胞迁移侵袭试验技术(Transwell)实验分别检测细胞的增殖、迁移及侵袭行为,并使用蛋白质印迹（Western Blotting）实验检测SRC、pBTK、pTRIO蛋白表达情况。结果：TMAO诱导可增强HCT116增殖及迁移侵袭能力,并显著上调SRC-BTK-TRIO通路相关基因的mRNA水平,而七叶皂苷干预能抑制癌细胞增殖（P<0.01）并降低其迁移（P<0.001）、侵袭（P<0.01）能力,同时下调SRC（P<0.05）、BTK（P<0.01）、TRIO（P<0.05）蛋白的表达。结论:七叶皂苷可通过下调SRC-BTK-TRIO通路显著抑制HCT116细胞增殖及迁移侵袭能力。     

黄芩苷抑制炎性因子对牙周炎症的影响及其相关机制研究

目的:探讨黄芩苷对牙周炎症的影响,并研究其相关分子机制.方法:将50只无特定病原级雌性大鼠分为空白组(不作任何处理)、对照1组(于右侧上颌第2磨牙颊侧正中龈沟底注射生理盐水)、对照2组[于右侧上颌第2磨牙颊侧正中龈沟底注射含脂多糖(LPS)的生理盐水]、实验1组(于右侧上颌第2磨牙颊侧正中龈沟底注射含LPS的生理盐水和...     

汉黄芩素调控Ywhaz蛋白抑制结肠癌细胞增殖及侵袭转移

目的:探讨汉黄芩素对人结肠癌细胞HCT116和HT29细胞系的增殖、侵袭能力的影响,并研究汉黄芩素对酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(Ywhaz)蛋白水平的影响。方法:体外培养HCT116和HT29细胞系,设空白组、汉黄芩素不同浓度组(浓度分别为5,10,20,40μmol·L-1)作用不同时间后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测汉黄芩素对结肠癌细胞增殖的影响,并用Annexin V-FITC/PI双标后流式细胞仪检测结肠癌细胞的凋亡率;穿透小室(Transwell)小室法检测处理24 h后细胞侵袭和迁移力的变化;实时荧光定量-聚合酶链式反应(q PCR)检测不同浓度汉黄芩素作用24 h后Ywhaz mRNA的水平,并运用蛋白质免疫印迹(Western blot)检测该蛋白及其磷酸化水平。结果:与空白组比较,汉黄芩素可明显抑制结肠癌细胞系的增殖,具有浓度和时间依赖性,并促进结肠癌细胞系的凋亡率,其中20和40μmol·L-1的汉黄芩素抑制细胞增殖作用显著(P0.01),且不同浓度的汉黄芩素(10,20,40μmol·L-1)作用于结肠癌细胞后,明显降低肿瘤细胞的穿膜数(P0.05,P0.01),汉黄芩素可下调Ywhaz mRNA水平和蛋白水平的表达,并降低Ywhaz的磷酸化水平(P0.05,P0.01)。结论:汉黄芩素可显著抑制HCT116和HT29细胞系的增殖、侵袭和迁移能力,并诱导细胞凋亡,其抗肿瘤机制可能与下调Ywhaz的蛋白水平及其蛋白的磷酸化水平有关。     

肉豆蔻醚抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制研究＊

目的 探讨肉豆蔻醚（myristicin）对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 MTT法检测肉豆蔻醚在体外对结肠癌细胞HCT116和LOVO增殖的影响；Annexin V/PI双染法检测肉豆蔻醚对HCT116和LOVO细胞凋亡的影响；划痕试验和Transwell实验分别检测肉豆蔻醚对HCT116和LOVO细胞迁移和侵袭的影响；western blot实验检测肉豆蔻醚对p-MEK1/2、p-ERK1/2、CyclinD1、E-cadherin、MMP-2以及MMP-9表达的影响。结果 肉豆蔻醚作用后，HCT116和LOVO细胞增殖、迁移和侵袭受到显著抑制，细胞出现显著凋亡；肉豆蔻醚作用后，HCT116和LOVO细胞内MEK1/2、ERK1/2、CyclinD1、MMP-2以及MMP-9蛋白表达水平显著降低，而E-cadherin蛋白表达水平显著增高。结论 本研究发现肉豆蔻醚在体外具有抑制结肠癌细胞生长的作用，为临床用药提供一定的实验依据，为肿瘤治疗提供新的靶点和策略。     

Guttiferone K抑制静止期前列腺癌细胞重新激活的作用研究

目的:观察从云南藤黄(Garcinia yunnanensis)中提取分离得到的PPAPs(Polycyclic Polyprenylated Acylphloroglucinol)类化合物Guttiferone K(GUTK)对人静止期前列腺癌LNCa P细胞重新激活的影响。方法:处于对数生长期的人前列腺癌LNCa P细胞去除血清培养7d诱导其进入静止期,通过再次加入血清培养使其重新激活进入细胞周期,同时给予GUTK进行干预。用免疫细胞化学的方法检测Ki-67蛋白表达的变化;利用PI染色的流式分析法和Ed U Incorporation法检测GUTK对细胞周期分布的影响;利用Western Blotting法检测Cyclin D1/3、CDK4/6和E2F1蛋白表达水平的变化。结果:GUTK呈剂量依赖性地抑制静止期LNCa P细胞的再次增殖并阻止静止期LNCa P细胞重新进入S期;GUTK在静止期LNCa P细胞激活的早期明显下调了Cyclin D1/3、CDK4/6和E2F1蛋白的表达水平。结论:从云南藤黄中提取分离得到的化合物GUTK能够抑制人静止期前列腺癌LNCa P细胞的重新激活,具有潜在的延缓前列腺癌病情发展和预防复发的作用。     

消癌平注射液联合紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用及机制研究

目的:探讨消癌平注射液联合紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用及机制。方法:体外培养人乳腺癌MCF-7细胞,以不同浓度的消癌平注射液联合紫杉醇进行干预,并与消癌平注射液、紫杉醇单药组进行比较,采用MTT法、细胞克隆实验和LDH检测细胞增殖和细胞毒性,DCFH-DA荧光探针检测细胞内ROS的产生,RT-PCR检测Mfn2 mRNA的表达。结果:消癌平注射液可显著抑制MCF-7细胞的增殖和克隆,增加LDH的释放,且消癌平注射液联合紫杉醇组较紫杉醇单药组作用更为显著;消癌平注射液可显著增加ROS的生成,但联合用药组与单药组相比无统计学差异;消癌平注射液可上调Mfn2 mRNA的表达,并显著提高紫杉醇引起的Mfn2 mRNA低表达。结论:消癌平注射液联合紫杉醇可能会通过调控Mfn2 mRNA的表达,引起线粒体功能损伤并抑制乳腺癌细胞的增殖,对紫杉醇抗乳腺癌发挥增效作用。     

黄芩苷对人肺腺癌LTEP-A2细胞的抑制作用及机制研究

目的:研究观察黄芩苷对人肺腺癌LTEP-A2细胞株体外的抑制作用及相关机制。方法:采用不同浓度的黄芩苷干预人肺腺癌LTEP-A2细胞株,用CCK-8方法检测不同时间点不同浓度的黄芩苷对肺癌细胞增殖的抑制程度,接着用细胞划痕试验和Transwell小室侵袭试验观察黄芩苷对肺癌细胞体外迁移、侵袭能力的影响;用Western blot进一步检测黄芩苷干预后肺癌细胞MMP-2、MMP-9、TGF-β的表达的变化。结果:黄芩苷能明显抑制肺癌细胞增殖;能不同程度降低肺癌细胞的迁移、侵袭、体外划痕愈合能力,呈浓度依赖性;黄芩苷能不同程度下调MMP-2、MMP-9表达,其中以高浓度效果明显,中浓度居中,低浓度作用稍弱,与空白对照组比较,组间差异有统计学意义,P0.05;对肺癌细胞TGF-β的表达没有显著影响,与对照组比较,P0.05。结论:黄芩苷能不同程度地降低肺癌增殖迁移侵袭的能力,其机制可能是通过下调MMP-2、MMP-9的表达从而对肺癌细胞的增殖、迁移、侵袭发挥抑制作用。     

小柴胡汤对H22肝癌小鼠癌细胞的增殖抑制作用及其作用机制研究

目的:探讨小柴胡汤对改善H22肝癌小鼠免疫功能及其抑制肿瘤增殖的效果,为H22肝癌临床治疗提供实验依据。方法:优选昆明小鼠30只为研究对象,通过腹腔注射H22瘤株建立H22肝癌小鼠模型。随机将其分为健康对照组、低剂量小柴胡、中剂量小柴胡、高剂量小柴胡、5-FU组以及H22肝癌模型组,每组小鼠各5只。对比分析治疗组各组用药前后体重、抑瘤率、血清肿瘤标记物以及炎症因子水平的差异。结果:①体重分析:小柴胡中、高剂量组用药后小鼠体重与正常对照组无统计学意义(P>0.05),5-FU组小鼠与对照组相比体重显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。②抑瘤率:5-FU组抑瘤率高于其他治疗组,而小柴胡中、高剂量组抑瘤率高于低剂量组,差异有统计学意义(P<0.05)。③血清肿瘤标记物:柴胡中、高剂量组血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)低于低剂量组及5-FU组,而铁蛋白(SF)高于低剂量组及5—FU组。④炎症因子水平:小柴胡中、高剂量组NK细胞活性、IL—2、INF—γ水平显著高于低剂量组及5—FU组,而TNF—α水平显著低于低剂量组及5—FU组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:一定剂量的小柴胡汤能有效抑制H22肝癌小鼠癌细胞的生长,并能改善机体免疫水平。     

柯里拉京对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:研究柯里拉京对转移性人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法:分别通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法,划痕实验,transwell实验检测不同浓度的柯里拉京对肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H的增殖、迁移和侵袭的作用;通过细胞免疫荧光法观察不同浓度柯里拉京对肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H肌动蛋白纤维的分布、丝状和片状伪足形成等的影响;通过蛋白免疫印迹法(Western blot)研究柯里拉京抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用机制。结果:MTT实验显示,柯里拉京抑制人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H增殖的半数抑制浓度(IC50)分别为388.67,314.42μmol·L~(-1)。划痕实验显示,200μmol·L~(-1)柯里拉京对SMMC7721细胞迁移的抑制作用最强,迁移率为12.16%;120μmol·L~(-1)柯里拉京对MHCC97H细胞迁移的抑制作用最强,迁移率为9.84%。Transwell实验显示,200μmol·L~(-1)柯里拉京对SMMC7721细胞和MHCC97H细胞侵袭的抑制作用最强,侵袭的细胞数分别为(40.44±3.01),(36.69±3.36)个。细胞免疫荧光显示,柯里拉京可使SMCC7771,MHCC97H中F-肌动蛋白(F-actin)骨架发生重塑,浓度增高,细胞边缘的丝状伪足和片状伪足形成逐渐减少、张力纤维数目逐渐增多,这种影响在SMMC7721为200μmol·L~(-1)时最显著,MHCC97H为120μmol·L~(-1)最明显。Western blot显示,柯里拉京能明显下调肝癌细胞SMMC7721和MHCC97H上皮-间充质转分化(EMT)的钙黏附蛋白-N(N-Cad)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达(P0.05),下调有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的磷酸化-细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白表达(P0.05),上调磷酸化-p38(p-p38)蛋白表达(P0.05)。结论:柯里拉京能抑制2种人肝癌细胞SMMC7721,MHCC97H的增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能是通过抑制EMT通路中的N-Cad,Vimentin,MAPK信号通路p-ERK蛋白表达和上调p-p38蛋白表达,从而调控细胞骨架重塑来实现的。     

康艾注射液对人类乳腺癌细胞增殖的抑制作用及其分子机制研究

目的:本研究旨在研究和探讨康艾注射液对于人类乳腺癌细胞增殖的抑制作用及其分子机制研究,从而为临床上应用康艾注射液治疗乳腺癌提供一定的理论依据。方法:本研究利用体外细胞实验,研究了康艾注射液对于乳腺癌细胞的增殖、克隆形成以及凋亡的影响。并且采用Western blot的方法检测了乳腺癌细胞中p-AKT蛋白和p-AMPK蛋白的表达。结果:人类乳腺癌细胞MDA-MB-435S、MDA-MB-231、SK-BR-3以及HCC-1937经康艾注射液干预48h后,细胞活性较对照组分别减少(19.49±2.92)%,(45.41±7.95)%,(53.84±5.53)%,(64.04±4.36)%。经康艾注射液处理2周后,人类乳腺癌细胞MDA-MB-435S、MDA-MB-231、SK-BR-3以及HCC-1937的细胞克隆数较正常对照组均明显减少。康艾注射液在人类乳腺癌细胞诱导细胞凋亡。其对于MDA-MB-435S、MDA-MB-231、SK-BR-3以及HCC-1937的凋亡诱导率为(11.67±1.17)%,(17.54±1.83)%,(15.45±1.55)%,(15.54±1.57)%。Western blot显示,康艾注射液处理细胞后磷酸化的AKT蛋白(p-AKT)表达降低,而AMPK(p-AMPK)蛋白表达增加。结论:康艾注射液可以抑制乳腺癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。这可能是通过AMPK/m TOR信号传导通路而达成的。