小鼠内毒素性肺损伤时SIRT3与线粒体功能的关系

目的:评价小鼠内毒素性肺损伤时沉默信息调节因子2相关酶3(SIRT3)与线粒体功能的关系。方法:清洁级健康成年雄性野生C57BL/6(SIRT3 +/+)小鼠20只,SIRT3基因敲除(SIRT3 -/-)小鼠20只,体重20~25 g,6~8周龄,采用随机数字表法,将SIRT3 +...     

高尔基体形态结构变化与小鼠内毒素性急性肺损伤的关系

目的:评价高尔基体形态结构变化与小鼠内毒素性急性肺损伤的关系。方法:健康清洁级雄性C57BL/6J小鼠20只,体重18～20 g,6～8周龄,采用随机数字表法分为2组( n＝10)：假手术组(Sham组)和内毒素性急性肺损伤组(ALI组)。ALI组静脉注射LPS 10 mg/kg,Sham组给予等容量生理盐...     

HO-1在小鼠内毒素急性肺损伤中的作用：与调控线粒体质量控制的关系

目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)在小鼠内毒素急性肺损伤中的作用及其与调控线粒体质量控制的关系。方法清洁级健康雄性成年C57BL/6小鼠, 基于CRISPER/Cas9开发的EGE系统制备HO-1诱导性基因敲除小鼠, 并构建HO-1过表达腺病毒载体诱导HO-1基因过表达小鼠, 6～8周龄, 体重20～25 g, 采用随机数字表法, 将野生型C57BL/6(WT)、HO-1基因敲除型小鼠(HO-1-/-)和HO-1基因过表达型小鼠(HO-1+/+)分别分为2组(n=6):对照组(WT组、HO-1-/-组和HO-1+/+组)和内毒素急性肺损伤组(ALI组、HO-1-/-+ALI组和HO-1+/++ALI组)。经尾静脉注射LPS 15 mg/kg制备小鼠内毒素急性肺损伤模型, 各对照组给予等容量生理盐水。给予LPS或生理盐水后12 h时处死小鼠取肺组织, 光镜下观察肺组织病理学结果并进行肺损伤评分, 测定肺组织还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量, 计算GSH/GSSG比值, 透射电镜下观察线粒体超微结构, 测定线粒体膜电位(MMP)水平, 采用Western blot...     

氯胺酮对家兔内毒素性急性肺损伤的影响

目的研究氯胺酮对家兔内毒素(ET)性急性肺损伤(ALI)的影响。方法采用两次注射脂多糖(LPS)的方法复制家兔ALI模型。动物随机分为四组,每组6只:氯胺酮1组(K1组)、氯胺酮2组(K2组)、LPS组(阳性对照)、生理盐水(NS)组(阴性对照),第2次LPS注射后8 h结束实验,测定以下指标变化:支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞和肺泡上皮细胞计数、肺水含量、肺通透指数(LPI)、肺组织髓过氧化物酶(MPO)含量、肺组织病理。结果LPS组BALF中白细胞和肺泡上皮细胞数量、肺水含量、LPI和肺MPO含量均较NS组明显上升(P<0.01)。NS组肺病理检查正常;LPS组双肺明显肿胀,表面有点片状出血,轻挤切面有水肿液溢出,镜下有明显肺不张和肺泡萎陷,肺间质增厚,内有大量白细胞浸润,肺血管淤血;K1组与K2组前述各指标和病理变化的程度轻于LPS组,其中K2组又明显好于K1组。结论氯胺酮可减轻LPS注射后家兔ALI程度。     

氨基胍对大鼠内毒素性肺损伤的影响

目的 观察诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍(AG)对内毒素性肺损伤的影响。方法 采用静脉注射脂多糖(LPS)制备内毒素性肺损伤大鼠模型。将40只SD雄性大鼠随机分为5组：空白对照组、LPS组、AG高剂量(100mg／kg)、中剂量(50mg／kg)、低剂量(25mg／kg)治疗组，LPS组、AG高剂量、中剂量和低剂量治疗组手术后稳定1h静脉注射LPS(5mg／kg)，空白对照组给等量生理盐水，AG高剂量、中剂量和低剂量治疗组于给予LPS 3h后经腹腔给AG，空白对照组和LPS组给等量生理盐水。实验过程中监测平均动脉压(MAP)，于注射LPS后1、3和6h时取静脉血0．4Tnl测定血浆NO浓度，于注射LPS 6h后处死大鼠，迅速取出肺脏，测定肺系数、肺含水量和肺组织中丙二醛(MDA)含量、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化；在光镜下观察肺形态结构的变化。结果 LPS可明显降低MAP，升高肺系数和肺含水量，升高血浆中NO含量，可显著升高肺组织中NOS活性、增加MDA含量、降低SOD活性，引起肺形态结构的病理变化。氨基胍可明显改善吣引起的以上肺损伤，病理变化也表明：AG使肺泡萎陷明显减轻，肺间隔变窄，毛细血管增生不明显，肺间隔炎细胞浸润减轻，且高剂量比低剂量明显。结论 静脉注射LPS(5mg/kg)可成功制备大鼠内毒素性肺损伤模型；氨基胍可减轻内毒素性肺损伤，且随剂量增大作用增强。     

丹参对大鼠内毒素休克性肺损伤的保护作用

目的　探讨丹参对内毒素休克性肺损伤的防治作用。方法　选用SD大鼠 5 4只 ,随机分成对照组、肺损伤组和丹参防治组。三组动物根据注入内毒素后时间不同分为 1、2和 4小时三小组。丹参防治组按 8g/kg体重经颈静脉注入丹参 ,30分钟后 ,再按 5mg/kg体重经颈静脉注入大肠杆菌内毒素 ;肺损伤组以生理盐水代替丹参 ;对照组中 ,丹参和内毒素均以等量生理盐水代替。实验结束后 ,取血和肺组织行血浆P 选择素、肺组织MPO活性、肺毛细血管通透性和血液流变学检测。结果　 (1)肺损伤组各时相点血浆P 选择素、肺组织MPO活性、肺毛细血管通透性均较对照组显著增高 (P <0 0 1) ;丹参防治组较肺损伤组有所下降 ,以 4小时为甚 (P <0 0 1)。 (2 )肺损伤组血液流变学指标较对照组明显升高 (P <0 0 1) ;丹参防治组与肺损伤组比较 ,血液流变学指标有不同程度的降低 ,以高中切变率 ηb和ERI差异有显著 (P <0 0 5或P <0 0 1)。 结论　丹参通过改善血液流变性 ,抑制P 选择素介导的PMN的浸润发挥对肺损伤的保护作用     

中性粒细胞胶原酶在内毒素性急性肺损伤中的作用

目的 研究中性粒细胞胶原酶(MMP-8)在内毒素(LPS)致急性肺损伤(ALI)中的作用。方法 30只SD大鼠以LPS静脉注射建立ALI模型,随机分为对照组及LPS静注后2、4、6、8 h组,取肺组织免疫组化法观察MMP-8和Ⅰ型胶原表达的变化,检测肺组织中CrossLaps蛋白含量以及髓过氧化物酶(MPO)活性、肺湿/干重比(W/D)、肺通透指数、肺内中性粒细胞数的变化。结果 LPS静脉注射后,4、6、8 h组MMP-8含量、CrossLaps蛋白含量、MPO活性、肺湿/干重比(W/D)、肺通透指数、肺内中性粒细胞数显著性高于对照组(P<0.01),Ⅰ型胶原表达相应减少(P<0.01)。结论 MMP-8介导了中性粒细胞对Ⅰ型胶原的降解作用,与ALI的发生密切相关。     

内毒素所致急性肺损伤发病机制的研究进展

急性肺损伤是临床常见的危重症。内毒素是导致急性肺损伤最常见的原因。近年来关于内毒素所致的急性肺损伤发病机制的研究发现：核转录因子κB、IL-8和中性粒细胞在促炎/抗炎反应的失衡中发挥重要作用,组织因子和肺泡上皮细胞在调节促凝/抗凝反应的失衡中发挥重要作用,而氧化应激和炎症反应之间可以相互促进。而且肺泡上皮细胞和PMN凋亡功能的紊乱、肺泡上皮细胞上Na＋通道的下调、PMN释放的中性粒细胞弹性蛋白酶等在LPS导致的ALI发展过程中都发挥重要作用。     

内毒素及肿瘤坏死因子在大鼠胰源性肺损伤发病过程中？…

目的：比较观察内毒素及肿瘤坏死因子在胰源性损伤动物实验中不同时间的变化及致损作用。方法：在制备胰源性肺损伤大鼠模型基础上，给予通里攻下中药治疗，分设治疗组、造模组、正常对照组，并在三组不同时间检测内毒素及肿瘤坏死因子的含量。结果：治疗组与造模组之间差别显著（Ｐ〈０．０１），造模组与正常对照组之间差别亦显著（Ｐ〈０．０１）。结论：内毒素及肿瘤坏死因子参与了胰源性肺损伤的全过程，且通里攻下治疗起到了清     

地塞米松对内毒素性急性肺损伤兔肺的保护作用

本研究拟探讨在内毒素感染早期应用地塞米松阻断急性肺损伤(ALI)发生发展的作用机理。     

内毒素性肺损伤外周血中性粒细胞CD11b表达的意义

目的：探讨内毒素血症大鼠外周血中性粒细胞（PMN）表面CD11b表达与内毒素性肺损伤的关系。方法：大肠杆菌E-Coli O111B4 4mg／kg尾静脉注射制备大鼠内毒素血症动物模型。112只大鼠随机分为对照组（静脉注射等量生理盐水）及内毒素注射后1h组、2h组、4h组、8h组、12h组、24h组,每组16只动物。在相应时间点放血处死动物,分别取股静脉血、肺组织及进行支气管肺泡灌洗,测定肺组织湿／干重（W／D）比值、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性和支气管肺泡灌洗液（BALF）总蛋白定量等肺损伤指标。流式细胞仪测定外周血PMN表面CD11b表达。另取16只大鼠,内毒素注射后2h时测定外周血PMN表面CD11b表达,24h时放血处死,测定上述指标。结果：①大鼠内毒素血症可以造成明显的急性肺损伤,表现为肺组织W／D比值、MPO活性和BALF总蛋白明显增高,分别在2h、8h和2h显著高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）,峰值分别出现在内毒素注射后12h、24h和12h;②大鼠内毒素性肺损伤时,外周血PMN表面CD11b表达水平在早期（1h）明显升高（与对照组比较,P〈O．05）,在2h达到峰值,之后逐渐降低;③外周血CD11b表达峰值明显早于肺组织W／D比、MPO和BALF总蛋白等肺损伤指标的峰值出现时间;④同一动物2h时外周血PMN表面CD11b的表达水平与其24h时肺组织W／D比、MPO和BALF总蛋白含量呈显著正相关（r分别为0．78、0．77和0．73,P〈0．05）。结论：内毒素性肺损伤中,外周血CD11b表达升高可能有助于内毒素性肺损伤的早期诊断,并可能预示以后的肺损伤程度。     

氢气对内毒素小鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨氢气对内毒素(LPS)诱导的急性肺损伤的影响及机制。方法 选择SPF级雄性ICR小鼠12只,6～8周龄,体质量25～35 g。采用随机数字表法将小鼠分为四组：对照组(C组)、吸入氢气组(H组)、肺损伤模型组(L组)和肺损伤模型+吸入氢气组(LH组),每组3只。C组不做处理;H组仅吸入4%氢气,持续12 h; L组和LH组采用腹腔注射LPS 10 mg/kg建立肺损伤模型,LH组在建立肺损伤模型后即刻吸入4%氢气。于建模后12 h行肺超声检测肺水肿,超声检测完成后迅速处死小鼠,开胸取双肺组织,左肺组织采用Western blot法检测p-AMPK、p-ERK和p-p38蛋白含量,右肺组织采用HE染色行肺损伤评分并观察肺组织病理学改变。结果 与C组比较,L组和LH组B线面积明显增大,p-AMPK、p-ERK和p-p38蛋白含量明显升高(P<0.05);H组p-AMPK蛋白含量明显升高(P<0.05);L组肺损伤评分明显升高(P<0.05)。与L组比较,LH组B线的面积明显减小,p-ERK、p-ERK和p-p38蛋白含量、肺损伤评分明显降低(P<0.05)。...     

热毒清对家兔内毒素性DIC急性肺损伤的保护作用

采用间隔２４小时两次注射大肠杆菌内毒素方法复制家兔急性肺损伤模型，检测血浆、肺组织及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中白细胞介素８（ＩＬ－８）、硝酸盐／亚硝酸盐（ＮＯ２／ＮＯ３）水平及有关指标改变，观察中药制剂热毒清（ＲＤＱ）对家兔内毒素性肺损伤的保护作用。发现ＲＤＱ可降低肺系数及通透指数，减少ＢＡＬＦ中白细胞计数；ＩＬ－８、ＮＯ２－／ＮＯ３－水平、酸性磷酸酶（ＡＣＰ）活性亦显著降低（Ｐ＜０．０１），肺组织学损伤减轻。证实ＲＤＱ对内毒素所致的家兔急性肺损伤具有一定的保护作用。     

大黄对兔内毒素性急性肺损伤胃肠粘膜pH值的影响

目的　研究大黄对兔内毒素性急性肺损伤 (ALI)胃肠粘膜 pH值 (i pH)的影响。 方法　 12只雄性新西兰兔 ,体重为 2 0～ 2 5kg ,随机分为生理盐水对照组 (CON组 ,n =6 )和内毒素组(LPS组 ,n =6 ) ,静注内毒素复制ALI模型。动物在注入LPS后 (2 0 5± 1 0 5 )h ,氧合指数 (PaO2 /FIO2 )≤ 30 0。此时为ALI,肺组织学可见肺泡水肿 ,肺泡壁淤血 ,肺泡内可见中性粒细胞浸润。另取12只雄性新西兰兔 ,待ALI模型成功 ,动物随机分为两组 :大黄组 (D组 ,n =6 )和对照组 (NS组 ,n =6 )。D组从胃管内注入大黄 2 0g/kg ,NS组从胃管中注入生理盐水 2 0 g/kg ,作为对照。观察各时点i pH的变化 (时点分为 :基础值时、ALI时、ALI后 1、2、3、4、5及 6h)。 结果　NS组i pH在ALI后 4、5及 6h较基础值时降低 (P <0 0 5 ) ,在ALI后 5h及 6h较ALI时降低 (P <0 0 5 ) ;D组i pH在ALI后 4h及 5h较NS组升高 (P <0 0 5 ) ,而在ALI后 6h较NS组同时点显著升高 (P <0 0 1)。结论　大黄可提高LPS性兔ALI胃肠粘膜pH值 ,因而对兔胃肠粘膜有保护作用     

一氧化氮吸入复合米力农治疗内毒素致兔早期急性肺损伤

目的 观察一氧化氮(NO)吸入复合米力农治疗内毒素滴入兔气管内致早期急性肺损伤(ALI)的疗效.方法 将30只兔麻醉后气管切开行机械通气,监测平均动脉压(MAP)和平均肺动脉压(MPAP).随机选择6只为正常对照组(V组),其他兔采用内毒素滴入气管内复制ALI模型,随机分为NO复合米力农治疗组(1组)、NO治疗组(Ⅱ组)、米力农治疗组(Ⅲ组)和模型组(Ⅳ组).在建模前、建模后0、120、150min,行血气分析并计算肺内分流率(Qs/Qt),采集静脉血测丙二醛(MDA);计算肺湿/干重比(W/D),观察对支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数、中性粒细胞(PMN)百分比的影响并检测蛋白含量;观察肺组织形态学变化.结果 与Ⅳ组比较,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组建模后120min MPAP和Qs/Qt下降显著,通气功能改善,PaO2显著提高(P<0.05);血清MDA显著下降,BALF中细胞总数、PMN比例和蛋白含量减少(P<0.05).I组上述各指标改善较其他两治疗组更加显著(P<0.05),显微镜下肺泡扩张较好,肺泡间隔薄,炎性细胞显著减少,肺损伤程度明显减轻.结论 米力农有抗炎作用,具有一定的肺保护作用;吸入NO复合米力农后可能有着协同作用,能更好地改善肺部氧合,具有更强的抑制炎症能力,抑制病情进展,减轻ALI.     

急性肺损伤中线粒体动力学变化

背景 急性肺损伤(acute lung injury,ALI)病因复杂,病情发展迅速,死亡率高,是临床常见的急危重症. 目的 探讨ALI时线粒体动力学变化及影响因素. 内容 ALI时线粒体融合减少及分裂增加,致线粒体片段化,功能失调.线粒体动力学的这些改变与体内活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成过多、炎症因子过度释放及细胞凋亡等有关. 趋向 随着ALI时线粒体动力学变化机制的不断深入研究,可望为ALI的治疗提供新思路.     

艾司氯胺酮对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织细胞焦亡的影响

目的:评价艾司氯胺酮对内毒素性急性肺损伤大鼠肺组织细胞焦亡的影响。方法:SPF级健康成年雄性SD大鼠30只,体重200～220 g,8周龄。采用随机数字表法分为3组( n＝10)：对照组(C组)、内毒素性急性肺损伤组(ALI组)和艾司氯胺酮组(E组)。采用腹腔注射LPS 10 mg/kg的方法制备大鼠内毒素...     

SIRT1在内毒素性脑损伤小鼠线粒体功能障碍中的作用

目的评价海马沉默信息因子1(SIRT1)在内毒素性脑损伤小鼠线粒体功能障碍中的作用。方法清洁级雄性C57BL/6小鼠80只, 6～8周龄, 采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(C组)、内毒素性脑损伤组(LPS组)、内毒素性脑损伤+SIRT1抑制剂组(LPS+E组)和内毒素性脑损伤+SIRT1激动剂(LPS+S组)。静脉注射LPS 10 mg/kg制备小鼠内毒素性脑损伤模型。于注射LPS前72 h时, LPS+E组腹腔注射SIRT1抑制剂EX527 10 mg/kg, 其余3组腹腔注射等容量DMSO;于注射LPS前30 min时LPS+S组腹腔注射SIRT1激动剂SRT1720 100 mg/kg, 其余3组腹腔注射等容量DMSO。注射LPS 24 h时行新物体识别实验, 安乐处死小鼠, 取海马组织行尼氏染色, 光镜下观察病理学结果, 并计数海马CA1区正常神经元;采用分光光度法测定海马ATP含量和线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的活性, Jc-1染色法检测线粒体膜电位(MMP), 透射电镜观察神经元线粒体超微结构。结果与C组比较, LPS组、LPS+S组和LPS+E组新物体识...     

急性感染性腹膜炎患者外周血内毒素水平与急性肺损伤的相关性分析

目的观察急性感染性腹膜炎手术患者外周血内毒素水平与急性肺损伤(ALI)发生的相关性分析。方法选取我院2008年12月～2010年6月诊断感染性腹膜炎入住我院重症医学科(ICU)患者32例,根据是否合并肺损伤分为急性肺损伤组(ALI)和无急性肺损伤组(NALI),每组16例。分别检测术前1小时、术后第0、2、5、14天外周血内毒素水平(ETX)、IL-6、氧合指数(PaO2/FiO2)、肺顺应性(Cs)等指标。结果感染性腹膜炎患者术前外周血内毒素水平与肺损伤的发生呈明显相关性,术前1 h内素素水平的升高与术后第0、2天IL-6分泌的异常增加呈明显正相关(P0.01);术后第2、5天IL-6的升高与ALI的程度以及MOF的发生呈显著正相关。经术中及术后抗感染、引流、腹腔冲洗等去除肠源性感染诱因等综合治疗,随内毒素水平的下降,IL-6分泌逐渐下调,ALI程度逐渐减轻。结论内毒素血症是感染性腹膜炎诱发ALI的重要因素之一。及早选择合适的治疗措施,防止或减轻内毒素水平的增高,减少肠道内毒素的移位、进而减少IL-6失控性分泌,则在阻止内毒素性急性肺损伤、MODS的发生可能起到重要的防治作用。     

糖皮质激素受体对内毒素性急性肺损伤大鼠的保护作用及机制

目的 探讨糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在内毒素急性肺损伤(acute lung injury,ALI)中的作用及机制.方法 SD雄性大鼠84只,随机数字表法分为5组:Control组,仅注射生理盐水;脂多糖(lipopoIysaccharide,LPS)组,经尾静脉注射LPS 5 mg/kg;地塞米松(dexamethasone,DEX)+LPS组,注射LPS前30 min腹腔注射Dex 6 mg/kg;米非司酮(RU486)组,皮下注射GR拮抗剂RU486 20 mg/kg,90 min后经尾静脉注射生理盐水;RU486+Dex+LPS组,按照上述顺序分别注射RU486、Dex和LPS.Control组和RU486组6 h后,其余3组分别在1、3、6 h各时间点处死.检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液(brobehoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白浓度,肺水系数(1ung index,LI),肺组织的病理变化,凋亡指数(apoptosis index,AI)以及肺组织中p38MAPK的活化状态及表达.结果 与Control组BALF中蛋白浓度(49±5)g/L、LI(2.36±0.14)、AI(12.0±1.7)%相比,LPS组分别为(77±9)g/L、5.93±0.44、(43.9±3.1)%(P＜0.05),HE染色显示肺组织炎症和损伤严重.与LPS组相比,Dex+LPS组分别为(54±4)g/L、3.77±0.48、(32.7±2.7)%(P＜0.05),且肺组织损伤程度减轻,应用GR抑制剂RU486后,Dex的肺保护作用消失.另外,LPS组肺组织中磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)的表达与Control组相比显著升高(P＜0.05);与LPS相比,Dex+LPS组p-p38MAPK表达下调(P＜0.05),而RU486+Dex+LPS组的表达上调(P＞0.05).结论 糖皮质激素受体在内毒素导致的急性肺损伤中发挥着重要的作用.激素活化的GR可能通过抑制p38MAPK的活化/磷酸化抑制肺组织细胞的凋亡,缓解肺损伤的程度.