淫羊藿苷对模拟高原环境下雄性大鼠生殖系统损伤的保护作用研究

目的 研究淫羊藿苷对模拟高原环境下雄性大鼠生殖系统损伤的保护作用,并初步探讨相关作用机制。方法 选取30只12周龄雄性Wistar大鼠,随机分为平原对照组、高原模型组以及淫羊藿苷实验组,每组10只。平原对照组饲养于本院动物实验中心(海拔1 400 m),高原模型组以及淫羊藿苷实验组置入模拟海拔高度6 000 m高原环境动物实验舱;淫羊藿苷实验组给予100 mg/kg淫羊藿苷悬浊液于每日上午9时舱内灌胃,其余两组给予等体积生理盐水灌胃。模拟高原环境干预满30 d后麻醉取材,睾丸组织称重后一侧多聚甲醛固定用于进行苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠睾丸组织形态学改变,一侧破碎匀浆处理用于检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)氧化应激指标检测;附睾尾制备成精子悬液,检测精子质量。取大鼠血清检测睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)等激素水平。结果 (1)高原模型组与淫羊藿苷实验组的体重增长显著低于平原对照组(P<0.05),且高原模型组睾丸指数显著低于平原对照组与淫羊藿苷实验组(P<0.05)。(2)HE染色结果示,高原模型组睾丸组织生精小管内各级生精细胞排列不...     

淫羊藿和女贞子配伍对绝经后骨质疏松症大鼠TGF-β1/Smads信号通路的实验研究

目的 研究淫羊藿和女贞子配伍对绝经后骨质疏松症（postmenopausal osteoporosis,PMOP）大鼠转化生长因子（transforming growth factor,TGF）-β1/Smads信号通路的影响。方法 将48只SPF级8月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、淫羊藿组、女贞子组、淫羊藿和女贞子配伍组（配伍组）、雷洛昔芬组。对大鼠行双侧卵巢切除术造模,术后1周开始给予相应的药物治疗至术后13周结束。运用酶免法检测血清TGF-β1含量、蛋白免疫印迹法（western blot,WB）和免疫荧光法（immunofluorescence staining,IF）检测骨组织中TGF-β1、p-Smad2/3和Smad7蛋白表达,通过实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）法检测骨组织中TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA的表达。结果 与模型组比较,淫羊藿、女贞子配伍组能增加大鼠血清TGF-β1含量（P<0.05）,上调骨组织中TGF-β1、Smad2、Smad3的mRNA表达和TGF-β1、p-Smad2/3的蛋白表达（P均< 0.01）,下调骨组织中Smad7的mRNA和蛋白表达（P均< 0.01）,且配伍组对上述指标的调节作用优于淫羊藿或女贞子单用。结论 淫羊藿和女贞子配伍可以调节PMOP大鼠TGF-β1/Smads信号通路中细胞因子的表达,从而调节骨代谢。     

淫羊藿苷上调NRF2改善SHR大鼠勃起功能

目的:研究淫羊藿苷是否通过调节核因子类红细胞2-相关因子2(NRF2)通路改善自发性高血压大鼠(SHR)的勃起功能.方法:随机将10周龄健康雄性WKY大鼠(WKR)与雄性SHR大鼠分为4组(每组6只,共24只):WKY对照组、WKR+淫羊藿苷组[10 mg/(kg·d)灌胃]、SHR对照组,SHR+淫羊藿苷组[10 m...     

淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ通过BMP/Runx2/Osx信号通路促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的观察淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)成骨分化过程中BMP-2/Runx2/Osx信号通路的影响,探讨其可能的作用机制。方法贴壁筛选法体外培养BMSCs,随机分为空白对照组、阳性转化液组、抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅰ+抑制剂组、淫羊藿次苷Ⅱ组及淫羊藿次苷Ⅱ+抑制剂组。通过茜素红染色,对各组促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化作用进行药效学评价; ELISA法检测各组ALP活性、BGP、COL-Ⅰ、BMP2蛋白分泌量;RTReal-TimePCR法检测各组ALP、BGP、Osterix和Runx-2 mRNA基因表达。结果茜素红染色结果表明,淫羊藿次苷Ⅰ组及淫羊藿次苷Ⅱ组均可明显观察到大量的矿化结节的形成;ELISA实验结果表明,与空白对照组比较,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均能明显促进ALP细胞活性及BGP、COL-Ⅰ、BMP-2蛋白分泌量,并且差异具有统计学意义(P0.05);两组药物作用强度均已达到阳性转化液组的80%以上。同时,淫羊藿次苷Ⅰ对ALP活性、 BGP蛋白表达均明显强于淫羊藿次苷Ⅱ,并且差异具有统计学意义(P0.05);对COL-Ⅰ、BMP-2的蛋白表达量,两者差异无统计学意义(P0.05)。RT-PCR实验结果表明,与空白对照组相比,淫羊藿次苷Ⅰ及淫羊藿次苷Ⅱ均可显著上调成骨相关转录因子ALP、BGP、RunX2,并进一步调节其下游基因Osterix的转录表达,差异具有统计学意义(P0.05);与阳性对照液组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对ALP、Osterix的mRNA表达无明显差异(P0.05);淫羊藿次苷Ⅰ与淫羊藿次苷Ⅱ组比较,淫羊藿次苷Ⅱ对Osterix mRNA的表达明显强于淫羊藿次苷Ⅰ,并且差异具有统计学意义(P0.05)。对ALP、BGP、RunX2 mRNA的表达二者无显著性差异(P0.05)。结论淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ均能促进BMSCs定向成骨转化,其作用机制可能与激活BMP/Runx2/Osx信号通路有关。淫羊藿次苷Ⅰ和淫羊藿次苷Ⅱ作用差异可能与淫羊藿次苷Ⅰ在体内生物转化为淫羊藿次苷Ⅱ有关。     

淫羊藿苷保护脑死亡大鼠肾损伤的作用及机制研究

目的探讨淫羊藿苷对脑死亡大鼠肾损伤的保护作用及其作用机制。方法 30只SD大鼠被随机分为3组,每组各10只,分别为脑死亡组、治疗组和假手术组。脑死亡组大鼠在诱导脑死亡后不接受任何治疗;治疗组大鼠在诱导脑死亡后腹腔注射淫羊藿苷,剂量为100 mg/kg;假手术组保持颅内压正常并在麻醉状态下接受机械通气6 h。脑死亡组和治疗组分别在诱导脑死亡6 h后处死大鼠,假手术组在机械通气6 h后处死大鼠,分别取血清和肾组织进行检测。计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用单因素方差分析比较3组大鼠血清肌酐、尿素氮、Paller评分、CD68+巨噬细胞计数、促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)及趋化因子(MCP-1、IP-10)的转录水平,组间两两比较采用LSD法。P0.05为差异有统计学意义。结果淫羊藿苷治疗组脑死亡大鼠血清尿素氮和血清肌酐水平明显降低,分别为(10.0±1.5)、(92±12)mmol/L,与其他两组比较差异均有统计学意义(P均0.05);组织病理学示肾小管损伤评分明显降低,透射电镜示线粒体和内质网损伤减轻。淫羊藿苷可明显降低脑死亡大鼠肾组织内促炎因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)和趋化因子(MCP-1、IP-10)的转录水平及CD68+巨噬细胞浸润,并明显降低c-Jun氨基末端激酶、p38丝裂原活化蛋白激酶和信号传导与转录激活因子3蛋白质磷酸化水平。结论淫羊藿苷能减轻脑死亡大鼠肾损伤,保护肾功能,可能通过抑制炎性反应和SAPK、JAK-STAT信号通路发挥作用。     

淫羊藿总黄酮调节骨代谢作用及药理机制的研究新进展

实验研究发现淫羊藿对不同类型骨质疏松大鼠模型均有骨代谢调节作用,临床研究亦发现采用淫羊藿治疗绝经后骨质疏松症也取得了明显的效果。其药理作用机制可能与降低破骨细胞内Ca2+浓度,影响成骨细胞增殖、分化、矿化;增加骨护骨素(OPG)mRNA的表达,提高成骨细胞Osterix基因表达水平,从而促进骨形成;通过升高人成骨细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)mRNA的表达,增加骨形态生成蛋白2的生成刺激人类成骨细胞的增殖和分化;通过抑制TNF-αmRNA和促进TGF-β1mRNA的表达促进转化生长因子(TGF)-β1的产生,抑制肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,进而阻止骨髓基质中破骨细胞的生成,减少骨质丢失;淫羊藿总黄酮增加骨桥蛋白(OPN)mRNA和Ⅰ型胶原的表达促进骨的生成;淫羊藿苷可通过选择性上调下丘脑和海马ERα,ERβmRNA的表达,降低骨组织中IL-6的表达,从而减少骨吸收;淫羊藿总黄酮可通过抑制DKK1蛋白的表达,调控去势雌性大鼠BMSCs成骨和成脂分化平衡调节骨代谢;淫羊藿苷通过上调Cbfal、BMP2和BMP4mRNA的表达而促进成骨细胞的分化,诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化;淫羊藿总黄酮可显著改善雄性生殖系统和生殖内分泌功能,促进性腺的分泌,产生类雄激素样作用而促进成骨细胞的增殖与分化。笔者从多个层面对淫羊藿黄酮类成分抗骨质疏松作用机制进行阐述,提出今后在此研究基础上尚需进一步深入全面、系统的研究和阐述。     

淫羊藿次苷Ⅱ对大鼠阴茎海绵体压力、平均动脉血压的影响及其作用机制的研究

目的 淫羊藿次苷Ⅱ是淫羊藿中提取分离的单体,为了解淫羊藿次苷Ⅱ对阴茎性功能障碍(ED)的疗效,通过体内试验观察其对阴茎海绵体压力和平均动脉血压的影响及作用机制.方法 麻醉下游离大鼠左侧颈总动脉和左侧阴茎海绵体,允别插管与电生理仪连接;游离左侧海绵体神经(CN),采用电生理仪刺激器连接双极电极刺激;检测不同浓度的淫羊藿次苷Ⅱ在刺激CN后对阴茎海绵体压力(ICP)和平均动脉血压(MAP)影响,淫羊藿苷、西地那非、罂粟碱作为对照组.同时观察可溶性环鸟苷酸(sGC)抑制剂H-[1,2,4]噁二唑[4,3.A]喹喔啉(ODQ)、一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N~ω硝基-L-精氨酸(LNNA)及一氧化氮生成抑制剂亚甲蓝(methylene blue,MB)对淫羊藿次苷Ⅱ(10~(-4)mol/L)诱发ICP/MAP变化的影响.结果 4组药物均剂量依赖性显著提高ICP(P<0.01),淫羊藿次苷Ⅱ、淫羊藿苷和西地那非对MAP无显著影响(P>0.05),而罂粟碱浓度达10~(-4)mol/L后,即可显著降低MAP(P<0.01).在受试浓度下,LNNA、MB和ODQ可显著抑制淫羊藿次苷Ⅱ诱发的ICP变化(P<0.01),对两地那非诱发的ICP变化无影响(P>0.05).结论 淫羊藿次苷Ⅱ和淫羊藿苷呈剂量依赖性地提高大鼠阴茎勃起功能(ICP),淫羊藿次苷Ⅱ效价强度为淫羊藿苷的2.44倍,对平均动脉血压没有显著影响,其机制可能与增强阴茎海绵体NO-cGMP通路的活性有关.     

淫羊藿苷纳米微粒对大鼠成骨细胞成熟与矿化的影响

目的观察淫羊藿苷纳米微粒(ICA-NS)对出生48 h内的大鼠乳鼠颅骨成骨细胞成熟与矿化的作用。方法显微镜观察淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞形态的影响; Hoechst 3342/PI双染色法检测淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞的毒性反应;碱性磷酸酶检测试剂盒检测成骨细胞中碱性磷酸酶(ALP)活性;茜苏红染料对淫羊藿苷纳米微粒处理过的细胞进行染色,观察钙化结节的数量和面积;检测成骨细胞中与成骨相关的特异性蛋白表达情况。结果与淫羊藿苷组相比,淫羊藿苷纳米微粒组细胞形态无明显变化,且Hoechst 3342/PI双染色法结果进一步显示淫羊藿苷纳米微粒对成骨细胞无明显毒副作用;碱性磷酸酶活性测定结果显示淫羊藿苷纳米微粒显著提高了成骨细胞中碱性磷酸酶水平,而且淫羊藿苷纳米微粒组茜苏红钙化结节染色面积明显增大,颜色显著加深,成骨性相关蛋白的表达量也显著高于对照组。结论淫羊藿苷纳米微粒能显著促进成骨细胞的矿化与成熟,且对成骨细胞无明显毒副作用。     

淫羊藿苷对大鼠椎间盘退变的影响

[目的]研究淫羊藿苷(ICA)对大鼠尾椎椎间盘退变(IDD)的影响。[方法]体内实验部分,SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、空白对照组(IDD组)和3个淫羊藿苷处理组(ICAL、ICAM、ICAH)。制备椎间盘退变模型,给予相应处理,并行MIR和细胞因子检测。体内实验部分,自假手术与IDD动物椎间盘髓核分离细胞,体外培养,并给予淫羊藿苷处理(ICAL、ICAM、ICAH),检测细胞和上清的细胞因子等。[结果]体内实验表明,术后2周,与IDD组比较,ICAM组椎间盘T2加权信号强度高;术后6周,IDD组信号消失,ICAM组则无明显改变;ICAM组MRI的Pfirrmann评级均明显低于IDD组(P<0.05)。与Sham组比较,IDD组的IL-1β、IL-6蛋白表达显著增高(P<0.05);与IDD组比较,ICA组的IL-1β、IL-6蛋白表达显著降低(P<0.05)。体外实验显示:IDD组NP细胞增殖率明显降低(P<0.05);而ICA组的NP细胞增殖率明显升高(P<0.05)。与Sham组相比,IDD组NP细胞IL-1β、IL-6表达显著上调(P<0.05);与IDD组比较,ICA各组NP细胞IL-1β、IL-6表达显著下调(P<0.05)。与正常对照组相比,IDD组NP细胞Aggrecan和CollagenⅡmRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与IDD组相比,ICA各组Aggrecan和CollagenⅡmRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。[结论]淫羊藿苷可促进退变髓核细胞增殖、蛋白聚糖及II型胶原蛋白合成,减少IL-1β及IL-6表达,延缓椎间盘退变。     

淫羊藿不同提取物对去势大鼠PINP、NTx影响的实验研究

目的通过PINP、NTx指标的变化研究淫羊藿抗骨质疏松的作用机制。方法采用去卵巢方法诱发大鼠骨质疏松模型,淫羊藿不同提取物进行灌胃,检测PINP、NTx等相关指标的变化,评价淫羊藿抗骨质疏松的疗效。结果与空白对照组相比,模型组E2、PINP含量明显降低(P0.001),NTx水平升高(P0.001);与模型组比较,淫羊藿不同提取物各剂量组均可提高去势大鼠E2水平(P0.05),提高PINP水平(P0.05),降低NTx水平(P0.05);淫羊藿水煎液各组PINP和NTx含量高于其他各组,差异具有统计学意义。结论淫羊藿具有雌激素样作用,淫羊藿不同提取物均可改善去势大鼠骨质疏松症。     

淫羊藿苷对急性肾损伤向慢性肾脏病转化小鼠PPAR信号通路影响的研究

目的:探讨淫羊藿苷是否具有缓解缺血再灌注诱导急性肾损伤向慢性肾脏病转化的作用以及对PPAR信号通路的影响。方法:选用SPF级10周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,对照组(Control)、模型组(IRI)、模型+250 mg/kg淫羊藿苷组(IRI+I),每组6只,4周后小鼠处死,行病理染色,RT-PCR检测肾小管损伤和肾纤维化指标以及PPAR信号通路相关基因的变化。结果:Masson染色显示,IRI模型组肾间质纤维化严重,淫羊藿苷组与模型组相比肾间质纤维化程度明显改善(P<0.05),同时其肾损伤评分较模型组也有不同程度的改善(P<0.05);实时定量PCR显示,IRI组与Control组相比肾小管损伤、肾纤维化及炎症等基因Havcr-1、 FN、Col3a1、TGF-β₁、TNF-α表达量均增加(P<0.05),IRI+I组与IRI组相比肾小管损伤、肾纤维化及炎症等基因Havcr-1、FN、Col3a1、TGF-β₁、TNF-α表达量显著减少(P<0.05);与对照组相比,模型组Pparα mRNA、Cpt1...     

淫羊藿总黄酮对雄性大鼠生殖功能影响的初步研究

目的 研究淫羊藿总黄酮对雄性大鼠生殖内分泌功能的影响。方法 (1)观察淫羊藿总黄酮对未成年大鼠生殖器官重量的影响。淫羊藿总黄酮经灌胃给药7天后。腺垂体、睾丸、附睾及精囊腺称重；(2)观察相同剂量的淫羊藿总黄酮对不同年龄大鼠睾酮、雌二醇和黄体生成素的影响。睾酮、雌二醇和黄体生成素水平用放免法测定；(3)观察淫羊藿总黄酮在大鼠睾丸间质细胞体外培养中对睾酮的影响。结果 淫羊藿总黄酮可增加未成年大鼠腺垂体、附睾及精囊腺重量。提高睾酮、雌二醇和黄体生成素水平。能明显促进离体大鼠间质细胞睾酮基础分泌。结论研究表明。淫羊藿总黄酮对雄性生殖系统和生殖内分泌的功能具有促进作用。     

淫羊藿对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学及骨密度的影响

目的 观察淫羊藿提取液对激素性股骨头坏死大鼠血液流变学及骨密度的影响.方法 健康SD大鼠32只,雌雄各半,随机分为4组:空白组、模型组、淫羊藿高剂量组、淫羊藿低剂量组,每组8只.后3组采用臀肌注射醋酸泼尼松龙注射液制备激素性股骨头坏死模型,造模的同时淫羊藿高、低剂量组分别给予含生药浓度1.5、0.9 g/L的淫羊藿提取液10 ml/kg,模型组及空白组给予同等剂量的生理盐水,共6周.结果 经灌胃6周后,淫羊藿高剂量组和低剂量组全血高切黏度为(5.55±0.60)、(5.85±0.66) ms/s;血浆黏度为(1.88±0.10)、(1.93 ±0.17) ms/s;高于空白组相应指标[(4.48±0.56)、(1.64±0.11) ms/s,P＜0.05],淫羊藿高剂量组全血高切黏度、血浆黏度低于模型组相应指标[(6.66±0.65)、(2.11±0.21) ms/s,P＜0.05].淫羊藿高剂量组全血低切黏度、红细胞压积分别为(9.96±0.68)、(0.48±0.05)ms/s,均低于模型组[(12.21±1.11)、(0.60±0.07)ms/s,P＜0.05],且淫羊藿高剂量组低于淫羊藿低剂最组[(10.97±0.67)、(0.57±0.05) ms/s,P＜0.05].淫羊藿高剂量组和空白组骨密度高于淫羊藿低剂量组和模型组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 高剂量淫羊藿提取液对激素性股骨头坏死的作用机制可能与降低血液流变学的各项指标、保证组织有效灌注、改善股骨头的局部微循环,并能够抑制破骨细胞活性、促进体外成骨细胞的增殖和分化成熟、增强骨质密度有关.     

淫羊藿苷减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用及机制研究

目的 探讨淫羊藿苷对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响及其机制.方法 实验分为3组.实验组采用SD大鼠制备单侧肾脏缺血再灌注损伤模型,从术前2d开始至术后12d采用淫羊藿苷灌胃,剂量为100 mg·kg-1·d-1;对照组也采用模型大鼠,用溶剂灌胃;假手术组仅游离肾蒂,不用任何药物.检测术后14d内各组大鼠的体重和肾功能变化.术后24 h取大鼠肾组织,检测丙二醛和氧自由基代谢酶的水平.术后3d和14 l行肾组织病理学检查.结果 术后3、7、11和14d,实验组大鼠肌酐清除率均高于对照组(P＜0.01).术后3d,实验组大鼠肾小管损伤Paller评分低于对照组(P＜0.01).术后24 h,与对照组相比较,实验组丙二醛含量降低(P＜0.05),谷胱甘肽还原酶水平和还原型谷胱甘肽含量升高(P＜0.05),过氧化氢酶和双氧化物歧化酶水平升高(P＜0.05).结论 淫羊藿苷可减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤,其机制可能是通过影响氧自由基代谢酶系统而减轻氧化应激损伤.     

淫羊藿对骨质疏松型骨折局部骨形成蛋白mRNA表达的影响

目的 研究淫羊藿对骨质疏松型骨折局部骨形成蛋白-2(Bone morphogenetic protein-2,BMP-2)表达的影响.方法 取4月龄雌性大鼠78只,随机分成实验组(切除双侧卵巢)57只,对照组(切除卵巢周围少许脂肪组织)21只,术后10周,电镜观察证实实验组骨质疏松动物模型已制备成功后,取实验组54只及对照组18只大鼠,制作右侧股骨远端骨折,共分为4组,即:(1)磷酸钙骨水泥(Calcium Phosphate Cement,CPC)治疗组(简称A 组);(2)CPC-淫羊藿复合物治疗组(以下简称C组);(3)CPC+口服淫羊藿组(简称B组);(4)非骨质疏松组(简称D组)分别于术后第4、8、12周行实时荧光定量RT-PCR检测骨折局部BMP-2 mRNA的表达.结果 实验组各时间点BMP-2的mRNA表达水平均低于非骨质疏松组,但淫羊藿治疗组第4、8周的表达量高于CPC组,其中尤以CPC-Y组增高明显.结论 局部应用淫羊藿能更为有效诱导骨质疏松型骨折局部内源性BMP-2mRNA的表达.     

红芪减方不同组分促周围神经再生作用的初探

目的 观察淫羊藿苷和按红芪减方由淫羊藿苷、红芪多糖、地龙水提液组成的混药对大鼠周围神经再生的促进作用.方法 制备浓度为0.005 g/mL的淫羊藿苷溶液和浓度约等于1 g(原药材)/mL的由淫羊藿苷、红芪多糖、地龙水提液组成的混药.取体重为(200±10)g的雄性SD大鼠20只,随机分为4组(n=5),分别为假手术组(A组)、模型组(B组)、淫羊藿苷组(C组)和混药组(D组).A组仪暴露左侧坐骨神经后缝合皮肤,不钳夹神经:B、C和D组以钳夹左侧坐骨神经的方式制备大鼠周围神经损伤模型:右侧不作任何处理.于次日开始每日定时灌胃给药,A组和B组给予生理盐水;C组给予淫羊藿苷溶液,D组给予混药,均为2 mL/d.给药后观察大鼠一般情况,给药后第21天检测神经功能指数、坐骨神经传导速度和有髓坐骨神经纤维形态及数量.结果 术后各组大鼠存活至实验完成,一般状况良好.第21天,A、B、C及D组大鼠体重分别为(366.94±14.0)、(370.14±16.3)、(373.3±19.6)及(374.0±11.4)g,各组间差异无统计学意义(P＞0.05).坐骨神经功能指数测定A组与D组、B组与C组间差异无统计学意义(P＞0.05),余各组间差异有统计学意义(P＜0.05);胫神经功能指数,A组与B、C、D组间差异有统计学意义(P＜0.05),B组与C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05);腓总神经功能指数,A组与C、D组间、B组与C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05).A、B、C和D组坐骨神经传导速度分别为(45.0±2.9)、(8.0±2.6)、(13.4±6.8)及(19.6±9.3)m/s,B组与C组间差异无统计学意义(P＞0.05),A组与B、C、D组间,B组与D组间差异有统计学意义(P＜0.05).锇酸染色观察B、C、D组的再生有髓坐骨神经纤维较A组细;B、C、D组再生有髓坐骨神经纤维数分别为A组的93.3%±35.6%、90.6%±37.1%和115.4%±40.6%,各组间差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 淫羊藿苷和混药具有良好的安全性,混药促周围神经再生作用较淫羊藿苷显著,提示应整体研究红芪减方,以期发现有效部位或多个化合物以固定配比组成的有效成分群.     

淫羊藿苷对高重力环境下成骨细胞黏附和细胞骨架的影响

目的通过高加速度离心加载装置建立高重力加载模型,探讨不同高重力加载环境对成骨细胞黏附及细胞骨架的影响,并且分析淫羊藿苷对高重力加载后细胞黏附和细胞骨架的影响。方法将MC3T3-E1细胞按2×105个/cm2的密度接种于细胞培养皿中。实验共分为6组:对照组、单纯给药组、10 G加载组、10 G给药组、40 G加载组、40 G给药组。加载组应用高加速度离心加载机对细胞施行加载,连续加载3 d,每天30 min。对照组和单纯给药组暴露于正常重力情况下,其余条件与实验组无差别。给药组淫羊藿苷均采用10-7 mol/L浓度,且按预防给药的方法实验。通过茜素红染色、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定、CCK-8细胞增殖实验、细胞骨架鬼笔环肽染色、qPCR和Western Blot等相关分子生物学技术检测淫羊藿苷对高重力环境下成骨细胞integrinα5、integrinβ1和F-actin的影响。结果所有模型均成功制备。茜素红染色:淫羊藿苷可促进成骨细胞钙化结节形成,10 G加载可促进成骨细胞矿化,而40 G加载则抑制成骨细胞的矿化。ALP活性检测:单纯给药组、10 G加载组、40 G加载组的检测OD值分别为0.246、0.331、0.163,与对照组的0.207相比,差异均有统计学意义(P<0.05);10 G给药组和40 G给药组分别为0.373和0.180,与各自加载组的差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8增殖实验:单纯给药组OD值为0.650,与对照组0.551的差异有统计学意义(P=0.031);10 G加载组和40 G加载组OD值分别为1.193和0.245,与对照组的差异均有统计学意义(P<0.05);且10 G给药组和40 G给药组1.300和0.310,与各自加载组的差异有统计学意义(P<0.05)。鬼笔环肽染色:10 G加载细胞促进的数量增加,但细胞形态及骨架未见明显变化,40 G加载则抑制,淫羊藿苷对细胞形态无影响,但对加载损伤后的细胞有一定修复作用。QPCR和Western Blot实验结果一致证实,淫羊藿苷作用后,integrinα5、integrinβ1和F-actin的mRNA和蛋白表达上调,10 G加载可促进integrinα5、integrinβ1和F-actin mRNA和蛋白的表达,40 G加载则明显抑制其mRNA和蛋白的表达。结论10 G条件和淫羊藿苷干预均可促进成骨细胞的生长发育、细胞黏附及细胞骨架的稳定,而40 G则具有明显抑制作用。     

淫羊藿对大鼠溃疡性结肠炎的治疗机制研究

目的:观察淫羊藿对大鼠溃疡性结肠炎的治疗效果以及对结肠组织中相关炎症因子表达的影响。方法:雄性SD大鼠84 只,随机分为空白对照组、模型组、淫羊藿高、中、低剂量组、柳氮磺吡啶(SASP)组及联合治疗组,每组12 只。采用疾病活动指数(DAI)、结肠大体损伤评分、结肠组织病理学评分、结肠组织TNF-α、IFN-γ 和IL-6 免疫组化表达情况评价其治疗作用。结果:在实验处理第4 天开始,各实验组大鼠与模型组比较体重增加,实验第7 天联合组大鼠与SASP组比较体重增加,且差异均有统计学意义(P <0.05);第5 天开始各实验组与模型组比较,DAI 评分升高,差异有统计学意义(P <0.05);各实验组结肠损伤程度与模型组比较,联合组的结肠溃疡面积及结肠重量与长度比减小,淫羊藿高、中、低剂量组及联合组的结肠损伤程度减轻,联合组的结肠溃疡面积小于SASP 组,差异均有统计学意义(P <0.05);与模型组比较,淫羊藿高剂量组结肠组织病理学评分显著降低(P <0.01);各实验组大鼠结肠组织中TNF-α、IFN-γ 和IL-6 表达水平,联合组及SASP 组与模型组比较显著降低(P <0.01),联合组较SASP 组显著降低(P <0.01)。结论:淫羊藿可改善溃疡性结肠炎大鼠的精神状态、减轻结肠损伤程度,其治疗作用可能与其减少TNF-α、IFN-γ 和IL-6 细胞因子表达有关。     

淫羊藿苷对兔股骨MEG3、H19和DANCR表达的影响

目的研究淫羊藿苷对去卵巢新西兰白兔不同部位骨中长链非编码RNA母系表达基因3 (maternally expressed gene 3,MEG3)、H19、DANCR/ANCR(anti-differentiation ncRNA)和骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)的表达情况。方法选取48只新西兰白兔(7月龄)制作骨质疏松组模型,根据体重随机分为假手术组、去卵巢模型组(OVX)和淫羊藿苷治疗组(OVX加治疗)。淫羊藿苷治疗组于术后第4周开始采用淫羊藿苷[20 mg/(kg·d)]灌胃给药,去卵巢模型组与假手术组每天给予等量的生理盐水灌胃,持续8周。术后12周通过μCT图像进行三维重建来评价骨质疏松模型的建立以及股骨的BV/TV、Tb·Th、Tb·N、BS/BV、Tb·Sp等的变化;术后12周时通过qRT-PCR检测股骨、椎骨、颅骨组织中长链非编码RNA MEG3、H19、DANCR的表达水平以及Runx2的mRNA表达水平;通过免疫组化检测股骨石蜡切片中BMP2的表达情况。结果与去卵巢模型组相比,淫羊藿苷通过降低长链非编码RNA MEG3、H19和DANCR的水平提高了骨质疏松兔股骨的骨小梁体积,其对椎骨中三种lncRNA的影响表现为使MEG3的表达水平降低了(P0.05),对颅骨的影响集中在DANCR的表达变化方面。接受淫羊藿苷治疗的兔的股骨,BMP2的表达情况最高。结论研究淫羊藿苷对lncRNA的影响,对骨质疏松的治疗具有指导意义。