氡诱发小鼠肺损伤与P53和Bcl-2、Bax蛋白表达的研究

目的 建立氡染毒小鼠肺损伤模型,观察不同剂量组小鼠肺组织损伤情况,分析氡对P53、Bcl-2、Bax在肺组织中表达的影响。方法 建立氡染毒小鼠模型,使染毒累积剂量分别达到30工作水平月(WLM)和60WLM;采用TUNEL法检测小鼠肺组织细胞凋亡程度;采用免疫组化SP法及Westernblot法,检测各组肺组织P53、Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 与正常对照组相比,氡染毒30和60WLM小鼠肺细胞凋亡指数均明显增加(t=18.11、-10.30,P<0.05);氡染毒30WLM组P53蛋白明显增加(t=-11.08,P<0.05);60WLM组P53蛋白和Bax蛋白表达明显增加(t=-7.00、-2.52,P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显下降(t=4.36,P<0.05);氡染毒30和60WLM与对照组相比,Bcl-2、Bax比值均明显下降(t=2.78、4.07,P<0.05)。结论 氡染毒可使小鼠肺损伤,出现肺细胞凋亡,P53、Bcl-2、Bax途径可能参与了肺细胞的凋亡调节。     

氡及其子体暴露小鼠肺组织p53基因表达及突变研究

目的 观察氡及其子体暴露对小鼠肺组织P53蛋白表达及基因突变的影响。方法 建立氡染毒小鼠模型,使染毒累积剂量分别为30和60工作水平月(WLM);采用TUNEL法,检测小鼠肺组织细胞凋亡程度;采用免疫组化S-P法、Western-blot法及实时荧光定量PCR法,检测各组肺组织P53蛋白表达情况;采用PCR-SSCP法检测p53基因的突变情况。结果 与正常对照组相比,氡染毒30和60 WLM小鼠肺细胞凋亡指数均明显增加(t=18.11、-10.30,P<0.05);氡染毒30和60 WLM组P53蛋白亦明显增加(t=-11.08、-7.00,P<0.05)。但整个实验未观察到p53基因突变。结论 p53与氡染毒诱发小鼠肺损伤密切相关。     

某氡温泉周围居民外周血淋巴细胞周期及其调控蛋白的表达

目的 观察某氡温泉周边居民外周血淋巴细胞周期各时相变化以及周期调控蛋白CDK1、CDK2、CDK4、CDK6、CyclinD1、CyclinE1、WEE1和CDC25A的表达。方法 简单随机抽样法抽取温塘镇氡温泉周边居民46人,抽取对照地区居民39人。流式细胞术分别检测细胞周期各时相的变化和周期调控蛋白的表达水平。比较两组细胞周期各时相的差异以及周期调控蛋白表达水平的差异,多重线性回归分析周期调控蛋白表达与氡暴露等因素的关系。结果 G₀/G₁期和S期细胞所占比例在两组比较中有差异（t=2.250、-2.382,P<0.05）;CDK1、CDK6和CyclinE1在氡温泉组中的表达水平显著下调（t=4.770、11.419、5.238,P<0.05）,并与氡暴露因素存在相关关系且呈负相关（t=-5.097、-11.128、-5.117,P<0.05）。CDK2、CDK4、CyclinD1、WEE1和CDC25A在氡温泉组表达均上调,但差异无统计学意义（P>0.05）。结论 氡周边居民外周血淋巴细胞S期比例增加,周期调控蛋白CDK1、CDK6和CyclinE1表达下调,可能与长期的氡暴露有关。     

神经纤毛蛋白1在辐射诱导肺上皮细胞转化中的调控作用

目的 通过利用神经纤毛蛋白1（NRP1）不同表达水平的肺上皮细胞模型，检测电离辐射诱导上皮-间充质转化（EMT）标志物及相关转录因子表达变化，探讨NRP1对辐射诱导肺上皮细胞EMT发生中的作用。方法 对人肺Ⅱ型上皮细胞（A549）构建NRP1过表达（NRP1^high-A549）和NRP1敲低（NRP1^low-A549）细胞模型，同时对小鼠正常肺上皮细胞（MLE-12）构建siNRP1-MLE-12细胞模型并进行验证。对NRP1^high-A549、NRP1^low-A549和siNRP1-MLE-12细胞模型分别进行单次10 Gy X射线照射，于照射后0、12、24和48 h提取总蛋白和总RNA。利用Western blot法和q-PCR法检测各组细胞模型中EMT标志物（β-catenin、N-cadherin和Vimentin）及相关转录因子（Twist和ZEB1）的变化。结果 野生型A549和MLE-12细胞照射后NRP1 mRNA和蛋白表达显著升高，间充质标志物（Vimentin和N-cadherin）显著升高（A549：t=2.917、7.361，P<0.01；MLE-12：t=9.652、31.357，P<0.01），ZEB1和Twist转录因子表达显著升高（A549：t=4.852、9.278，P<0.01；MLE-12：t=30.985、17.266，P<0.01）。NRP1^low-A549和siNRP1-MLE-12组受照后Vimentin和N-cadherin表达显著下降（NRP1^low-A549：t=10.077、15.707，P<0.01；siNRP1-MLE-12：t=5.745，P<0.01），上皮标志物（β-catenin）蛋白表达显著升高；而NRP1^high-A549组照射后N-cadherin和Vimentin显著升高（t=16.055、5.560，P<0.01），而β-catenin显著下降。检测NRP1^low-A549组Twist转录因子在照射后显著下降（t=3.987，P<0.01），而NRP1^high-A549组ZEB1和Twist转录因子照射后呈时间依赖性升高（t=11.289、2.903，P<0.01）；siNRP1-MLE-12细胞模型照射后ZEB1转录因子显著下降（t=13.449，P<0.01），siNRP1-MLE-12组ZEB1和Twist蛋白表达均低于对照组，呈时间依赖性下降。结论 NRP1可促进辐射诱导人和小鼠上皮细胞的EMT发生，而这种促进作用可能通过上调转录因子ZEB1和Twist的表达。     

抑制FOXD1基因表达增强结直肠癌细胞HCT116的放射敏感性

目的 研究抑制FOXD1基因的表达对结直肠癌细胞放射敏感性的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）和Western blot检测人结直肠癌组织和细胞中FOXD1 mRNA和蛋白的表达。对结直肠癌HCT116细胞行梯度剂量（0、2、4、6 Gy）X射线照射,qRT-PCR和Western blot检测各组细胞中FOXD1的表达。将siRNA阴性对照和FOXD1 siRNA转染至结直肠癌细胞中,分别记为si-NC组和si-FOXD1组,经4 Gy的X射线照射处理后记为si-NC+4 Gy组和si-FOXD1+4 Gy组,Western blot检测各组细胞中FOXD1的表达,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各组细胞的增殖活性,克隆形成实验检测各组细胞存活率,采用TECT DNA-PK试剂盒检测各组细胞中DNA-PK活性,将转染的结直肠癌细胞接种于BALB/c裸鼠建立移植瘤模型,进行射线照射后,检测各组肿瘤的体积和质量变化。结果 与癌旁正常组织相比,结直肠癌组织中FOXD1 mRNA和蛋白的表达均显著增加（t=5.579、4.816,P<0.05）,与结肠黏膜上皮细胞NCM460相比,结直肠癌细胞株中FOXD1 mRNA（t=5.85~17.62,P<0.05）和蛋白（t=9.04~11.42,P<0.05）表达均显著升高。结直肠癌细胞HCT116中FOXD1的表达量随着放射剂量增加而升高,呈现剂量依赖性,差异有统计学意义（t=9.13~44.15,P<0.05）。转染si-FOXD1能够有效地抑制结直肠癌细胞中FOXD1的表达（t=10.51,P<0.05）,FOXD1敲低后能够抑制结直肠癌细胞的增殖活性（t=10.41,P<0.05）,提高结直肠癌细胞的放射敏感性,放射增敏比为1.797,降低放射诱导的DNA-PK的活性（t=6.20,P<0.05）。抑制FOXD1的表达经射线照射后,裸鼠种植瘤体积和重量明显减小（t=11.29、3.69,P<0.05）。结论 抑制FOXD1基因的表达能够提高结直肠癌细胞的放射敏感性,抑制结直肠癌裸鼠移植瘤的生长,可为改善放射治疗对结直肠癌患者的治疗效果提供潜在的靶向基因。     

TLR2下游辐射防护关键miRNA筛选及miR-21功能验证

目的 筛选Toll样受体2（Toll-like receptor 2, TLR2）通路下游与辐射防护调控相关的关键miRNA,并探讨miR-21功能。方法 以⁶⁰Co γ射线对野生型（wild type, WT）、TLR2 KO小鼠分别进行6.0、7.0、8.0 Gy全身照射,观察小鼠生存情况;通过转录组测序筛选骨髓细胞内TLR2通路下游关键miRNA,并通过QT-PCR验证其表达。过表达/敲低该miRNA后检测其生物学功能。结果 6.0、7.0、8.0 Gy全身照射后,TLR2 KO小鼠较WT小鼠辐射敏感性增加（χ²=4.490、13.100、7.928,P<0.05）,骨髓移植实验证明TLR2 KO小鼠辐射敏感性增加与照射后骨髓细胞损伤有关（χ²=4.291,P<0.05）。转录组测序筛选到差异基因55个（[log2 Fold Change]>0.95,Q<0.05）,其中上调基因28个,下调基因27个;定量PCR实验确定TLR2 KO（t=9.420,P<0.01）与MyD88 KO（t=10.700,P<0.01）小鼠骨髓细胞内miR-21表达下调。PAM3CSK4刺激后小鼠骨髓细胞内白介素6（IL-6）（t=13.790,P<0.05）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）（t=14.280,P<0.05）表达量上调且依赖于TLR2。miR-21过表达可以促进EL4（t=5.951,P<0.05）和NIH/3T3（t=4.786,P<0.05）辐射后细胞活力,抑制WT小鼠（t=4.842,P<0.05）和TLR2 KO小鼠（t=10.520,P<0.05）BMCs辐射后细胞凋亡。miR-21敲低后降低EL4（t=4.815,P<0.05）和NIH/3T3（t=4.042,P<0.05）辐射后细胞活力。结论 miR-21在TLR2辐射防护进程中具有关键调控作用,其作用机制可能与上调IL-6与TNF-α有关。     

沉默Rev1基因对人结肠癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨沉默Rev1基因对人高分化结肠癌细胞THC8307 X射线照射后增殖、凋亡的影响。方法 利用RNA干扰技术将Rev1基因的特异性片段转染THC8307细胞,用实时荧光定量PCR和Western blot检测转染后细胞中目的基因的表达;实验分空白对照组、阴性对照组、Rev1 siRNA组。分别给予0、6 Gy X射线照射,运用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测不同时段（0、24、48、72、96 h）细胞增殖情况,并绘制增殖曲线;流式细胞仪（FCM）检测不同剂量X射线处理后的细胞凋亡;Western blot检测各组PCNA、γ-H2AX、P53、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 与空白对照组相比,6 Gy X射线照射后,沉默Rev1基因组细胞增殖速率明显降低（t=7.53,P<0.05）,凋亡明显增加（t=6.23,P<0.05）,增殖细胞抗原（PCNA）表达下降（t=4.39,P<0.05）,γ-H2AX表达升高（t=5.48,P<0.05）,P53表达升高（t=5.09,P<0.05）、Bax表达升高（t=3.32,P<0.05）、Bcl-2表达降低（t=6.13,P<0.05）。结论 沉默Rev1基因,抑制了X射线作用下的结肠癌细胞THC8307的增殖,促进了凋亡,增加了其对X射线的放射敏感性。     

沉默细胞周期检测点激酶1(Chk1)对宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响

目的 探讨siRNA沉默细胞周期检测点激酶1（Chk1）基因对宫颈癌HeLa细胞放射敏感性的影响。方法 合成Chk1基因的小分子干扰RNA（si-Chk1）,将si-NC或者si-Chk1分别转染到宫颈癌HeLa细胞中,0、2、4、6、8、10 Gy剂量的X射线照射细胞,RT-qPCR和Western blot检测转染后Chk1的mRNA水平和蛋白水平的表达,MTT方法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡,克隆形成实验检测转染后HeLa细胞放射敏感性,Western blot检测转染后P21蛋白和抗凋亡基因Bcl-2蛋白的表达水平。结果 si-Chk1转染到HeLa细胞后,HeLa细胞Chk1基因的mRNA和蛋白表达水平均显著下降（t=2.12~5.86,P<0.05）,沉默Chk1的表达抑制了宫颈癌HeLa细胞的增殖（t=3.15~6.36,P<0.05）,同时降低宫颈癌HeLa细胞克隆形成能力（t=1.58~6.36,P<0.05）,上调P21（t=4.35,P<0.05）、下调Bcl-2蛋白（t=2.37,P<0.05）的表达水平。结论 siRNA沉默Chk1表达能够增强HeLa细胞放射敏感性。     

lncRNA CCAT1靶向miR-130b-3p对人胰腺癌细胞PANC-1放射敏感性的影响

目的 探讨lncRNA CCAT1和miR-130b-3p对体外培养的胰腺癌细胞PANC-1放射敏感性的影响。方法 采用Real-time PCR检测胰腺癌组织及其细胞系和2 Gy X射线照射后PANC-1细胞中CCAT1和miR-130b-3p的相对表达水平。沉默CCAT1表达、抑制miR-130b-3p表达后,应用流式细胞仪、Caspase 3活性检测试剂盒及克隆形成实验检测细胞凋亡率、Caspase 3活性和细胞存活分数,并绘制单击多靶模型拟合曲线;利用starBase v2.0在线预测、荧光素酶报告基因、RNA结合蛋白免疫沉淀实验（RIP）及Real-time PCR实验,验证CCAT1和miR-130b-3p的靶向关系。结果 在放射抵抗的胰腺癌组织、胰腺癌细胞系和2 Gy照射的PANC-1细胞中,CCAT1表达均上调（t=6.322~8.555,P<0.05）,miR-130b-3p表达下调（t=3.950~18.795,P<0.05）。2 Gy照射并沉默CCAT1,PANC-1细胞存活分数降低（t=2.929、5.047、5.234、5.125,P<0.05）,细胞凋亡率增加（t=6.953,P<0.05）,Caspase 3活性升高（t=6.836,P<0.05）。发现CCAT1能靶向调控miR-130b-3p表达,抑制miR-130b-3p表达,PANC-1细胞存活分数增大（t=4.564、6.736、8.656,P<0.05）,细胞凋亡减少（t=5.234,P<0.05）,Caspase 3活性降低（t=10.440,P<0.05）。结论 沉默CCAT1表达能够促进miR-130b-3p表达,从而增加PANC-1细胞放射敏感性。     

辐射诱导线粒体功能障碍激活转化生长因子β1通路促进胰腺癌细胞上皮间质转化

目的 研究X射线照射后胰腺癌细胞上皮间质转化的发生特点,探究线粒体功能障碍及其诱导的转化生长因子β1（TGF-β1）表达增加在上皮间质转化中的作用。方法 采用6 MV X射线多次（2 Gy×20次或4 Gy×10次）照射胰腺癌细胞株PATU1 988 t,利用transwell小室检测细胞迁移性,采用实时荧光定量方法检测上皮间质转化（EMT）相关因子E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和MMPs家族（MMP2、MMP9）及线粒体复合体I的关键亚基及TGF-β1的转录水平变化。应用线粒体氧化磷酸化解偶联剂碳酰氰基-对-氯苯腙（CCCP）破坏线粒体膜电位,检测复合体亚基、TGF-β1含量及EMT相关分子的变化。应用小干扰RNA抑制TGF-β1的表达后,检测上皮间质转化及迁移变化。结果 多次照射后,存活肿瘤细胞迁移数增加（t=21.90、35.64,P<0.05）,上皮间质转化增强,表现为上皮间质转化分子E-cadherin表达下降（t=8.37、6.77,P<0.05）,N-cadherin （t=4.42、4.77,P<0.05）、Vimentin （t=4.57、3.02,P<0.05）、MMP2（t=7.27、26.08,P<0.05）和MMP9（t=13.26、7.29,P<0.05）表达均增加,TGF-β1（t=90.49、35.17,P<0.05）的含量也增加。沉默TGF-β1后细胞上皮间质转化及迁移性下降（t=38.66、11.54,P<0.05）。细胞发生线粒体功能障碍,具体表现为线粒体膜电位（t=6.94、29.71,P<0.05）和复合体相关亚基的表达量下降;加入CCCP破坏线粒体膜电位后（t=16.51,P<0.05）,复合体亚基含量下降,TGF-β1的表达量增加（t=47.93,P<0.05）,上皮间质转化增强。结论 辐射破坏了线粒体功能,进而激活了TGF-β1的表达,诱导胰腺癌细胞发生上皮间质转化,迁移性增强。     

肿块深度对乳腺超声弹性成像检查结果的影响分析

目的探究超声弹性成像(UE)中肿瘤深度对于判断乳腺肿物的良、恶性影响。方法选取本院2017年1月~2018年10月间收治的178例因乳腺肿块行手术切除患者为观察对象,纳入病灶200个。依据肿瘤深度不同分4组。对所有的患者在术前均予以常规超声检查以及超声弹性成像检查,对比不同深度肿瘤的UE成像情况、分析诊断效能(准确度、特异度、灵敏度以及阴、阳性预测值),对比良恶性乳腺肿瘤UE成像检查的阳性率。结果诊断良性病灶114个、恶性病灶86个;D组成像效果与A、B、C组相比的UE成像效果更差(P<0.05);A组特异度与B、C、D组的对比差异有统计学意义(P<0.05);A组准确度显著高于D组,差异有统计学意义(P<0.05),UE成像技术对恶性病灶的诊断阳性率显著更高(P<0.05)。结论在乳腺超声弹性成像检查中,对于乳腺肿物的良、恶性成像质量,诊断的特异度与准确度均受到肿瘤深度的影响。     

大气压变化对咽鼓管通气阻力的影响及耳气压伤的预防

目的探讨咽鼓管通气阻力(VRET)是否随大气压变化而变化,并了解呼气压大于咽鼓管通气阻力的正压呼吸能否预防耳气压伤。方法8名健康男性,咽鼓管通气阻力<6kPa,在海拔28m和1180m高度的大气压条件下,用咽鼓管通气阻力测量仪测量VRET,比较其相对值和绝对值。另在压力舱内做增压试验:每2人一组,互为试验者和对照者。试验组经面罩予以6kPa的呼气正压,对照组正常呼吸。高压舱以0.5kPa/s增压速率增压至5kPa,两组均不进行其他任何主动或被动开放咽鼓管的措施,测鼓室腔压力。以同样速率增压至50kPa,试验组条件不变,对照组可进行主动或被动开放咽鼓管的措施,测鼓室压。结果在海拔28m,测量的VRET相对值是3.7kPa(27.75mmHg);在1180m高度,测量的VRET相对值是3.8kPa(28.50mmHg)。经t检验,两地高度VRET的相对值差异无显著性意义,高压舱增压至5kPa时,试验组和对照组鼓室压差值162.1±75.4daPa(P<0.01)。增压至50kPa时,试验组和对照组鼓室压差值2.86±6.19daPa(P>0.05)。结论当人体的环境气压发生变化时,VRET相对值无显著变化。经面罩提供大于VRET的压力,可以使咽鼓管被动开放,预防耳气压伤。     

Reinventing the apprenticeship: the hot seat in the digital era

RATIONALE AND OBJECTIVES: Describe new interactive digital teaching methods for medical student education in radiology and evaluate student responses. MATERIALS AND METHODS: Third- and fourth-year medical students on radiology clerkship were taught using either film-based "hot seat" format, digital "hot seat," or didactic slide-based format. Digital hot seat included direct projection of full-resolution images and use of digital tablet for annotation. Students completed surveys commenting on each method. RESULTS: Before 2003-2004, comments were available from general course surveys. Only positive responses were made regarding digital hot seat format. Dedicated surveys of teaching methods since July 2003 (23 students) showed 100% gave high ratings to digital hot seat methods (1 or 2 on a scale from 1 to 5), citing easier visibility of findings and ability to draw on images as positive features. Fifty-two percent rated film hot seat method <3, with limited visibility as the main complaint. Didactic slide teaching was rated <3 by 74%. Eighty-three percent chose digital hot seat as their favorite format overall. CONCLUSIONS: Students overwhelmingly favor digital hot seat teaching over film-based or didactic slide presentations. Digital hot seat methods preserve the best features of case-based interactive teaching while improving visibility of findings.     

Transverse anastomoses of the veins at the base of the brain

Summary Venous anastomoses at the base of the brain are represented by the anterior and posterior communicating veins. The anterior communicating vein anastomoses with the anterior cerebral veins. The posterioir communicating veins join the basal veins through the interpenduncular veins. The functional value of these venous anastomoses is less important than that of the arterial polygon of Willis. This anastomotic function depends on anatomical constancy and on the calibre of these transverse veins. Under certain pathological conditions the variations of intracranial pressure result in contralateral venous drainage through these anterior and posterior anastomotic veins.Presented at the 5th Congress of the European Society of Neuroradiology-GEILO (Norway), 4–6 September 1975.     

乳腺病变X线立体定位钢丝置入移位的分析

目的分析乳腺立体定位下钢丝置入移位的表现、原因、处理方法，提高术前定位的准确性。方法行立体定位置入钢丝患者79例，96个病变，发生钢丝移位13例。结果立体定位中发生钢丝移位5例，原因分别来自于患者和操作医师；立体定位完成后钢丝移位5例，原因是局麻注射药物过多，导致乳腺Z轴的深度与计算机提示的实际深度不符合、放置定位针的方法不正确、拔出钢丝外套针套时疏忽钢丝是否已锚定病变。处理方法：可按照钢丝提示位置向病变方向移位2cm以内进行手术，重新放置第2根钢丝，将双J型钢丝收入针套并取出体外，重新定位。手术中钢丝脱出2例，因术后过分提拉钢丝所致，放射科医师放置钢丝后应向外科医师准确描述深度、方向，并从距离钢丝头端距离皮肤最近处取切口手术。术后标本未见钙化1例，与钙化位于手术电刀破坏的腺体内有关，可扩大范围切除并短期复查，证实钙化是否完整切除。结论正确认识乳腺X线立体定位下钢丝移位的表现，熟练掌握其处理方法，可提高对不可触及的乳腺病变的定位准确性，正确引导外科手术。