KAI1对人胰腺癌MiaPaCa-2细胞自噬的影响

目的 观察感染Ad5-KAI1前后人胰腺癌细胞MiaPaCa-2自噬水平的变化,并初步探讨其机制.方法 应用无KAI1表达的人胰腺癌细胞MiaPaCa2,通过感染带有KAI1目的基因的复制缺陷型腺病毒Ad5-KAI1使细胞表达KAI1,以Ad5 -null感染作为阴性对照,亲本细胞为空白对照.用透射电镜观察细胞自噬小体,共聚焦显微镜观察自噬标志LC3颗粒.应用阻断剂PD98059和LY294002干预细胞,蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白beclin 1、LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ及ERK-1/2、磷酸化ERK-1/2(p-ERK-1/2)、AKT、p-AKT的表达.结果 以100 MOI Ad5-KAI1感染细胞24h,表达KAI1蛋白的细胞达(84.97±8.56)％;LC3颗粒从4个左右增加到20个以上;细胞线粒体肿胀、变性,胞质内双层膜样结构增加;Beclinl表达增加(1.4±0.3)倍,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达增加(8.00 ±2.78)倍.PI3K阻断剂LY294002预处理细胞后可以有效地抑制MiaPaCa-2细胞AKT的磷酸化(2.756降至1.516),但不能抑制LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值的增加(0.770增加到1.403).ERK阻断剂PD98059预处理细胞后不仅可以有效地抑制MiaPaCa-2细胞ERK的磷酸化(1.637降至0.403),而且可以抑制beclin 1蛋白表达的上调(2.377降至1.150)和LC3-Ⅱ/Lc3-Ⅰ比值的增加(2.225降至0.680).结论 KAI1明显促进MiaPaCa2细胞内自噬,它是通过ERK而不是AKT磷酸化途径促进自噬的.     

慢性氯化钴处理对Caspase-3凋亡基因在糖尿病大鼠心肌梗死区表达的影响

目的:探讨慢性氯化钴处理对GK糖尿病大鼠血糖及心肌细胞凋亡的影响。方法:应用体重200~250g的雄性GK糖尿病大鼠及其对照雄性Wistar大鼠,制作大鼠在体心梗模型,制作前测量血糖,手术成功后大鼠被分为六组:Wistar假手术组、Wistar心梗组、Wistar心梗+氯化钴组、GK假手术组、GK心梗组和GK心梗+氯化钴组,每组至少存活6只。3周后,测量血糖,剪取心脏,检测缺血坏死区Caspase-3凋亡基因的表达。结果:(1)术后3周,与GK假手术组及心梗组相比,GK心梗+氯化钴处理组血糖降低[(27.73±2.58)mmol/L、(27.87±3.18)mmol/L比(16.3±2.15)mmol/L],P均<0.05;(2)与GK心梗组相比,GK心梗+氯化钴处理组Caspase-3光密度值[(0.84±0.03)比(0.70±0.03)]及mRNA表达[(0.64±0.03)比(0.52±0.03)]显著减少,P均<0.05;(3)Wistar心梗组和Wistar心梗+氯化钴组血糖、Caspase-3光密度值及mRNA表达未见明显差异(P均>0.05)。结论:慢性氯化钴处理可降低GK糖尿病大鼠血糖,减少Caspase-3凋亡基因在缺血坏死区的表达。     

自噬相关基因5下调抑制静脉桥血管狭窄

目的探讨自噬相关基因5(Atg5)在小鼠下腔静脉移植术后静脉桥血管狭窄过程中的作用。方法30只雄性C57BL/6小鼠及20只Atg5^+/-小鼠分为WT假手术组(10只),WT手术组(受体10只,供体10只),Atg5^+/-手术组(受体10只,供体10只)。复制小鼠下腔静脉移植模型。HE染色观察下腔静脉管腔面积,Real-time PCR检测下腔静脉组织中Atg5、LC3 mRNA表达;Westem-Blot检测下腔静脉组织中Atg5、LC3蛋白表达,免疫荧光共染明确平滑肌细胞中LC3表达。结果WT小鼠下腔静脉移植4周后出现管腔狭窄[(4.21±0.32)×10^4μm^2比(1.63±0.15)×10^4μum^2,P<0.05],Atg5[(0.51±0.17)×10^-3比(1.49±0.08)×10^-3]、LC3[(1.9±0.4)×10^-2比(3.8±0.9)×10^-2]mRNA表达均明显升高(均为P<0.05)。与WT小鼠相比,Atg5^+/-小鼠下腔静脉移植4周后Atg5[(0.39±0.05)比(0.16±0.08)]、LC3[(2.17±0.46)比(0.78±0.19)]蛋白表达均明显下降(均为P<0.05),平滑肌细胞中LC3蛋白表达显著下降(P<0.05),管腔狭窄明显减轻[(1.63±0.15)×10^4μm^2比(2.96±0.12)×10^4μm^2,P<0.05]。结论Atg5下调抑制小鼠下腔静脉移植术后静脉桥血管狭窄。     

组织金属蛋白酶抑制因子3重组蛋白诱导小鼠成骨细胞MC3T3-E1凋亡

目的 研究组织金属蛋白酶抑制因子3（TIMP-3）重组蛋白对MC3T3-E1成骨细胞凋亡的影响。方法 细胞存活率和凋亡分别用MTT及ELISA检测。Fas，FasL，Bcl-2，Bax，caspase-3，caspase-8，细胞色素c的表达以及JNK，p38，细胞外信号调节激酶（ERK）1／2的磷酸化水平用Western印迹检测。结果 MTT及ELISA检测提示TIMP-3降低MC3T3-E1细胞存活率，诱导MC3T3-E1细胞凋亡。TIMP-1增加Fas、FasL蛋白表达，对Bax、Bcl-2蛋白表达无影响，但可诱导细胞色素c的释放及caspase-8、caspase-3的活化。TIMP-3促进p38和ERK磷酸化，而PD098059（ERK阻断剂）和SB203580（p38阻断剂）消除p38和ERK的促凋亡作用。结论 TIMP-3诱导MC3T3-E1细胞凋亡的信号途径为凋亡受体Fas介导，并有p38、ERK信号转导途径参与。     

婴幼儿血管瘤组织中Caspase-3和survivin的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨凋亡调控基因Caspase-3和survivin在婴幼儿血管瘤组织中的表达及与细胞凋亡的关系.方法 采用原位杂交法检测血管瘤及正常皮肤组织中Caspase-3 mRNA的表达;用免疫组化SP法检测survivin;用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP生物素缺口末端标记技术(TUNEL)检测凋亡细胞.结果 Caspase-3 mRNA阳性表达率在增生期和消退期分别48.4%和87.5%,两者相比,P＜0.01,增生期与正常皮肤组织表达相比,P＞0.05.survivin阳性表达率在增生期和消退期分别77.4%和45.8%,两者相比,P＜0.01,消退期与正常皮肤组织相比,P＞0.05.Caspase-3 mRNA和survivin蛋白表达呈负相关(r=-0.018,P＜0.01).婴幼儿血管瘤增生期和消退期凋亡指数(AI)分别为30.15±10.62和80.16±6.88.AI与Caspase-3 mRNA的表达呈正相关(r=0.405,P＜0.01),AI与survivin的表达呈负相关(r=-0.362,P＜0.01).结论 Caspase-3基因与凋亡抑制基因survivin参与了血管瘤中细胞凋亡的调节.     

Parkin促进HepG2细胞自噬并抑制星型孢菌素诱导的细胞凋亡

目的 观察Parkin在星型孢菌素(staurosporine, STS)诱导的HepG2细胞凋亡及细胞自噬中的作用。方法 流式细胞仪检测STS作用前后线粒体膜电位变化;Western blotting检测经STS处理后HepG2细胞caspase3、caspase7、PARP、Parkin/PINK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、ATg5、Vps34表达水平;免疫荧光法检测线粒体细胞色素C的释放情况;双荧光mRFP-eGFP-LC3自噬指示系统检测细胞自噬率。在HepG2细胞中过表达重组载体Parkin-flag,经STS处理后,蛋白质印记法检测凋亡蛋白表达变化,双荧光mRFP-eGFP-LC3自噬指示系统检测细胞自噬率改变。结果 与对照组相比,STS下调线粒体膜电位并促进细胞色素C释放,同时上调凋亡蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase7及PARP表达水平。经STS处理后Parkin蛋白表达被抑制,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值及自噬相关蛋白ATg5、Vps34的表达下降。转染mRFP-eGFP-LC3后,STS组自噬体及自噬溶酶体形成明显减少。过表达Parkin...     

氟诱导成骨细胞MC3T3-E1自噬与凋亡及其相互作用分析

目的主要研究氟诱导成骨细胞MC3T3-E1发生自噬、凋亡及两者之间的关系。方法利用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测氟对成骨细胞MC3T3-E1的增殖活性影响,探寻氟引起凋亡的浓度;流式细胞术检测细胞凋亡;western blot免疫印记技术检测凋亡相蛋白;利用western blot免疫印记技术检测Beclin 1蛋白及LC3蛋白表达水平及变化。结果氟能明显抑制成骨细胞MC3T3-E1增殖,诱发细胞凋亡,其抑制作用呈时间、剂量依赖性;氟在促进细胞凋亡的同时也促进自噬产生;3-甲基腺素(3-MA)抑制自噬后,氟诱导的凋亡进一步增多。结论氟明显抑制MC3T3-E1细胞增殖,同时诱发细胞凋亡和自噬;氟诱导的自噬部分拮抗其诱导的凋亡。     

地塞米松通过加强自噬和抑制凋亡减轻海水吸入型肺损伤

目的 探讨海水吸入型肺损伤中自噬过程,以及地塞米松对其干预作用.方法 40只大鼠完全随机分为正常对照组、1、3、6、12 h海水处理组,每组8只.采用气管内滴注海水（3ml/kg）的方法制作海水吸入型急性肺损伤大鼠模型,观察病理变化,检测肺组织湿干比,western blot检测beclin-1的表达变化.体外实验A549细胞分为正常对照组、12 h海水组、地塞米松＋12 h海水组、3-MA＋ 12 h海水组,采用western blot检测beclin-1和bax的表达变化.结果 海水吸入后,大鼠肺部严重损伤,水肿明显,beclin-1随损伤时间延长表达量增加,在海水处理后12 h达到高峰.体外实验中海水刺激增加了beclin-1和bax的表达,然而与海水组相比,地塞米松预处理增加了beclin-1的表达,同时使bax的表达下降.3-MA预处理则效果相反.结论 自噬参与了海水吸入型肺损伤的修复过程,地塞米松能够通过加强自噬并且抑制凋亡减轻肺损伤.     

YB-1抑制三氧化二砷诱导的胃癌细胞自噬机制

目的研究YB-1抑制三氧化二砷(As2O3)诱导人胃癌BGC-823细胞自噬的机制。方法采用脂质体转染siRNA干扰YB-1和腺病毒转染pAd1Easy/YB-1过表达YB-1;实时荧光定量PCR检测Bcl-2和Beclin1基因转录;Western blot检测YB-1、Bcl-2、Beclin1、P62和LC3Ⅱ蛋白的表达;MDC染色、荧光显微镜观察自噬泡。结果与空病毒(AdGFP)组相比,pAd1Easy/YB-1(AdYB-1)组Bcl-2基因表达增高,而干扰质粒(siYB-1)组Bcl-2基因表达水平较空质粒(HK)组降低(P均<0.05),各组Beclin1基因表达比较无统计学差异。与AdGFP和HK组相比,AdYB-1组Beclin1和LC3Ⅱ蛋白减少,Bcl-2和P62蛋白增加(P均<0.01),siYB-1组Beclin1和LC3Ⅱ蛋白增加,Bcl-2和P62蛋白减少(P均<0.01)。与AdGFP组相比,AdYB-1组自噬泡聚集减少,加入Bcl-2抑制剂HA14-1后自噬泡重新聚集,Beclin1蛋白恢复表达,P62降解增加,LC3Ⅱ升高。结论 YB-1可能通过上调Bcl-2、抑制Bec-lin1,实现对As2O3诱导的BGC-823细胞自噬的抑制。     

重构型天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达载体诱导人肺腺癌细胞凋亡的意义

目的构建天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase3)表达载体,观察Caspase3表达载体对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法应用基因重组方法,建立重构型Caspase3基因的真核表达系统pcDNA3.1revCaspase3质粒和野生型pcDNA3.1Caspase3质粒。将实验细胞分为3组转染pcDNA3.1revCaspase3质粒组,转染pcDNA3.1Caspase3质粒组,转染pcDNA3.1质粒空白对照组。前2组用Caspase3抑制剂DEVDfmk干预。应用Caspase3酶活性分析、流式细胞仪及甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测A549细胞Caspase3酶活性变化及细胞凋亡和增殖情况。结果(1)pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组的A549细胞Caspase3酶活性分别是(11.87±0.92)%、(5.34±0.38)%(t=16.02,P<0.01);用Caspase3抑制剂DEVDfmk干预后,pcDNA3.1revCaspase3质粒组酶活性为(7.04±0.48)%,仍明显高于野生型pcDNA3.1Caspase3质粒组的(4.51±0.20)%(t=11.86,P<0.01)。(2)流式细胞分析结果显示,pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组和pcDNA3.1质粒组的A549细胞凋亡率分别是(20.1±3.5)%、(7.8±2.8)%、(1.4±0.3)%,3组差异有统计学意义(F=44.01,P<0.01)。(3)MTT比色检测显示pcDNA3.1revCaspase3质粒组、pcDNA3.1Caspase3质粒组和pcDNA3.1质粒组的A549细胞生存率分别是(35.7±1.1)%、(72.8±2.9)%、(85.4±4.8)%,转染pcDNA3.1revCaspase3质粒组生存率明显低于其他两组(F=375.07,P<0.01)。结论pcDNA3.1revCaspase3在A549细胞内有较强的自身活化能力,对Caspase3抑制剂抵抗作用较强,可明显诱导A549细胞凋亡并抑制A549细胞生长。     

肿瘤坏死因子α及caspase-3表达与暴发性肝衰竭细胞凋亡

目的　研究肿瘤坏死因子α(TNFα)与caspase 3表达在实验性暴发性肝衰竭 (FHF)中对肝细胞凋亡的作用。方法　用脂多糖和D 氨基半乳糖制备FHF小鼠模型 ;ELISA和逆转录PCR法检测血清TNFα水平及肝组织TNFαmRNA表达 ;原位杂交法检测肝组织内caspase 3表达 ;DNA琼脂糖凝胶电泳和末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)检测肝细胞凋亡。结果　用药后 2h开始 ,TNFαmRNA表达增加 ( 0 91± 0 75 ,正常值 0 32± 0 10 ) ,血清TNFα水平升高 [( 32 0 5 0± 86 5 7)ng/L ,正常值 ( 16 6 6± 7 0 1)ng/L],caspase 3少量表达 ;8h后 ,血清ALT和总胆红素 (TBil)水平显著增加 [分别为 ( 5 6 0 6 6± 6 0 2 0 )U/L和 ( 16 3 6 6± 34 5 1) μmol/L ,正常值为 ( 2 3 5 6± 8 0 3)U/L和 ( 14 90± 4 80 ) μmol/L],caspase 3表达至最高峰 ,并出现典型的肝细胞凋亡改变 ;12h后 ,血清ALT和TBil水平达最高峰 ,caspase 3表达较 8h减少 ,肝细胞坏死和凋亡同时存在。抗TNFα单抗阻断试验后 ,肝细胞凋亡和坏死明显减轻 ,TUNEL和caspase 3表达显著减少。 结论　TNFα有促进肝细胞凋亡与坏死作用 ,肝细胞凋亡与caspase 3的激活有关 ,在时间上肝细胞凋亡先于坏死。     

钙激活中性蛋白酶在脓毒症小鼠心肌半胱氨酸蛋白酶-3活化中的作用及其机制

目的 探讨钙激活中性蛋白酶(calpain)在脓毒症小鼠心肌半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活化中的作用及其机制.方法 (1)体内实验:腹腔注射脂多糖(LPS,4 mg/kg)建立脓毒症小鼠模型.Western blot检测心肌组织中calpain、caspase-3活性和calpain-1、calpain-2、calpain特异性抑制蛋白calpastatin水平以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bid水平及剪切片段,TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,Langendorff灌注装置评价小鼠心脏的收缩和舒张功能.(2)体外实验:成年大鼠心肌细胞给予LPS(1μg/ml)处理4 h,或同时予以calpain抑制剂calpain inhibitor-Ⅲ(10 μmol/L)干预后,检测心肌细胞calpain和caspase-3活性,Bcl-2、Bid蛋白水平以及心肌细胞凋亡情况.结果 (1)体内实验:在脓毒症小鼠心肌组织中,calpain活性增高2.7倍,caspase-3活性增高1.8倍,给予calpain-inhibitor-Ⅲ或PD150606,均可抑制caspase-3活性的增高.脓毒症小鼠心肌组织calpain-1、calpain-2、calpastatin以及Bcl-2、Bid蛋白水平未见改变,亦未检测到Bcl-2、Bid剪切片段.Calpain inhibitor-Ⅲ则可使脓毒症小鼠心室最快压力上升速率和心室最快压力下降速率分别增加34.5%和34.6%,从而改善脓毒症小鼠心功能障碍.(2)体外实验:LPS可诱导成年大鼠心肌细胞calpain和caspase-3活性增高,给予calpain inhibitor-Ⅲ则可抑制caspase-3活性的增高,心肌细胞Bcl-2、Bid蛋白水平未见改变.体内外实验均未发现LPS可诱导心肌细胞凋亡的增加.结论 脓毒症小鼠心肌calpain活性增高,可活化心肌caspase-3,但未导致心肌细胞凋亡,其机制与凋亡蛋白Bcl-2和Bid无关.     

脂多糖对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响

目的研究脂多糖（LPS）对大鼠胰岛素瘤细胞INS-1自噬和凋亡的影响及其可能机制。方法取处于对数期生长的INS-1细胞用于实验,分别用0．1、1．0、10．0mg／LLPS处理细胞,24h后用磺酰罗丹明B（SRB）染色法检测LPS对INS-1细胞增殖的影响,用二氯荧光素双醋酸盐（DCFH-DA）作为荧光探针检测细胞内活性氧的水平变化,应用Western blotting法检测细胞自噬体膜上自噬标志分子微管相关蛋白1的轻链3-Ⅱ（Map1LC3-Ⅱ）和凋亡标志蛋白聚腺苷二磷酸-核糖多聚酶（PARP）切割带的变化。将INS-1细胞的自噬必需基因7（A增7）通过siRNA介导的RNA干扰手段进行沉默,然后以1．0mg／LLPS处理细胞,24h后应用Western blotting检测细胞中Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割带的水平。先用400μmoL／L的活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）处理INS-1细胞,1h后加入10．0mg／L的LPS,24h后应用Western blotting法检测细胞Map1LC3-Ⅱ蛋白和PARP切割蛋白的水平。组间数据比较采用方差分析和t检验。结果与对照组（0．755±0．030）比较,0．1、1．0、10．0mg／LLPS组INS-1存活率降低,差异有统计学意义（分别为0．658±0．042、0．658±0．015、0．634±0．029,F=30．98,P〈0．01）;与对照组（0．447±0．012）相比,0．1、1．0、10．0mg／LLPS组Map1LC3-Ⅱ蛋白水平增加,差异有统计学意义（分别为0．992±0．030、0．949±0．020、0．982±0．013,F=525．79,P〈0．01）;与对照组（0．055±0．001）相比,0．1、1．0、10．0mg／LLPS组PARP切割蛋白水平增加,差异有统计学意义（分别为0．313±0．007、0．390±0．011、0．500±0．033,F=327．09,均P〈0．01）;与对照组比较,10mg／LLPS组活性氧产生明显增多。与对照组比较,转染Atg7siRNA组Atg7、Map1LC3-Ⅱ和PARP切割蛋白水平均显著下降,差异均有统计学意义（t=156．069、123．154、103．246,均P〈0．01）。与LPS10．0mg／L组比较,LPS10．0mg／L＋NAC组Map1LC3-Ⅱ和PARP切割蛋白水平均显著下降,差异均有统计学意义（t=66．37、26．84,均P〈0．01）。结论LPS可诱导INS-1细胞的自噬和凋亡,且其所诱导的凋亡依赖于自噬的发生;活性氧参与了LPS诱导的INS-1细胞的自噬和凋亡。     

Beclin 1 knockdown retards re-endothelialization and exacerbates neointimal formation via a crosstalk between autophagy and apoptosis

Objective

Endothelial regeneration is an essential process for the prevention of excessive neointimal formation following endothelial denudation. Beclin 1, a mammalian autophagy gene, is a link between autophagy and apoptosis. We hypothesized that the interference of Beclin 1 can influence re-endothelialization and ultimately affect neointimal formation by regulating autophagy and apoptosis.

Methods

A rat carotid injury model of endothelial denudation was used, and small interfering RNA of Beclin 1 was perivascularly administered. Neointima was evaluated by morphological analysis. von Willebrand factor, Beclin 1, LC3, autophagic substrate p62 and caspase-3 levels were detected by immunofluorescence or Western blotting. Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated digoxigenin–dUTP–biotin nick-end labeling assay was performed to evaluate apoptosis.

Results

Carotid injury induced an upregulation of Beclin 1 protein which was down regulated by more than 50% with small RNA interference. Beclin 1 knockdown significantly retarded re-endothelialization 7 days after injury and subsequently augmented neointima by more than 2 folds at 14 and 21 days. Autophagy and apoptosis were detected to reveal the regulatory effect of Beclin 1. The injury-activated autophagy, shown by the increased levels of punctate LC3 and LC3II as well as decreased p62 expression, was significantly inhibited by Beclin 1 knockdown. Meanwhile, the apoptotic endothelial cell number was increased and caspase-3 was up-regulated, though the expression of truncated BID was not significantly influenced.

Conclusion

Beclin 1 knockdown exacerbated neointimal formation after rat carotid injury, associated with retarded re-endothelialization due to enhanced apoptosis, while simultaneously prohibiting autophagic activation. The data suggested an essential role of Beclin 1 as a regulator between autophagy and apoptosis in the setting of neointimal formation.     

ARHI基因转染PANC1细胞后对细胞凋亡和自噬相关基因表达谱的影响

目的 观察ARHI基因转染PANC1细胞后对细胞凋亡和自噬相关基因mRNA表达谱的影响.方法 采用脂质体法将表达ARHI基因的质粒pIRES2-EGFP-ARHI、空质粒pIRES2-EGFP转染胰腺癌PANC1细胞.采用基因芯片RT2ProfilerTM PCR Array行实时定量PCR,分析转染细胞的基因表达谱,包括84个与凋亡和自噬相关基因.结果 ARHI基因转染组PANC1细胞有9个基因mRNA表达下调,38个基因mRNA表达上调,37个基因mRNA表达变化无意义.在与凋亡相关的基因中有8个促凋亡基因表达显著上调（＞6倍）,主要为TNFR/TRFSR家族基因（TNFSF8、TNFRSF10B、TNFRSF11B、TNFRSF9）、CIDE家族基因（DFFA）、CASP家族基因（CASP10、CASP8）和死亡结构域家族基因（DAPK1）,其中以DAPK1上调尤为明显,达42.83倍;抗凋亡基因中3个基因（CD27、BCL2L10、BIRC4）表达显著上调（＞6倍）,3个基因（BCL2、BAD、BAG4）表达轻度上调（＞2倍）,1个基因（BCL2L1）表达轻度下调（＜-2倍）.在与自噬相关的基因中3个促自噬基因（TNFRSF10B、DAPK1、CASP10）表达显著上调（＞6倍）,4个基因（TNFRSF10A、FADD、TP53、TP53 BP2）表达轻度上调（＞2倍）;3个抑制自噬基因（BCL2、CASP8、FAS）表达轻度上调（＞2倍）,1个基因（MCL1）表达轻度下调（＜-2倍）.结论 ARHI基因显著上调细胞凋亡及自噬重要调控基因Caspase-8和DAPK1.     

脊髓损伤治疗干预对细胞自噬及凋亡影响的相关研究进展

脊髓损伤是脊柱外科常见的严重疾患之一,其治疗一直是世界性难题。脊髓损伤后继发性损伤所引起的后果更严重,细胞自噬与凋亡在其调控过程中起重要作用。该文对近年来脊髓损伤治疗干预对细胞自噬及凋亡影响的相关研究进展作一综述。     

p73和p51基因在结直肠癌中的表达和意义

背景：p53基因是一种肿瘤抑制基因，其家族成员p73和p51在结构上与p53具有高度同源性，影响细胞转录和凋亡的功能与p53相似。目的：研究p73和p51基因在结直肠癌中的表达及其与细胞凋亡和肿瘤临床病理特征的关系，探讨两者在结直肠癌发生、发展中的可能作用。方法：以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测60例结直肠癌组织和相应癌旁组织中p73、p51mRNA表达，以原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡。结果：结直肠癌组织p73、p51AmRNA表达阳性率显著高于相应癌旁组织（p73：71．7％对5．0％，P〈0．01：p51A：46．7％对11．7％，P〈0．01）：p51B mRNA在结直肠癌组织与相应癌旁组织中的相对表达量无明显差异（0．7318±0．3628对0．6836±0．3516，P〉0．05）。p73、p51A mRNA表达阳性者肿瘤细胞凋亡指数分别显著低于p73、p51A mRNA表达阴性者（p73：3．2％±2．5％对5．5％±2．8％．P=0．003；p51A：2．6％±2．3％对4．9％±2．7％，P=0．001）。p73mRNA表达与结直肠癌的分化程度、TNM分期和淋巴结转移相关（P〈0．05），p51A mRNA表达仅与淋巴结转移相关（P〈0．05）。结论：结直肠癌中p73、p51A基因表达上调，两者可能通过抑制肿瘤细胞凋亡而参与了结直肠癌的发生、发展。p73过表达可能与结直肠癌预后不良有关。     

抑癌基因RRM1在胃癌发生、发展中的表达及其临床意义

背景:RRM1可能参与肿瘤的发生、发展。有研究发现RRM1抑制细胞移行和转移的功能部分是通过诱导抑癌基因PTEN的表达来调节的。目前,RRM1在胃癌中的研究还相对较少。目的:探讨RRM1表达在胃癌发生、发展中的作用及其临床意义。方法:应用免疫组化技术检测57例慢性非萎缩性胃炎(CNAG)、43例慢性萎缩性胃炎(CAG)、30例异型增生(DYS)胃黏膜以及51例胃癌组织中RRM1和PTEN的定位和表达,并分析RRM1表达与PTEN表达和胃癌临床病理特征的关系。结果:CNAG、CAG、DYS胃黏膜和胃癌组织中RRM1和PTEN表达均逐渐下降(P<0.05),且两者表达呈正相关(P<0.01)。胃癌组织RRM1表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤浸润深度、Lauren分型、淋巴结转移、TNM分期无关,而与肿瘤分化程度相关(P<0.05)。结论:抑癌基因RRM1表达在胃癌发生、发展的不同阶段呈进行性下调或缺失,且与PTEN表达呈正相关,并与胃癌分化相关。RRM1可能参与了胃癌的发生和发展,其发挥抑癌基因作用的机制可能是通过诱导PTEN表达来实现的。