冷冻对同种异体鼠坐骨神经移植免疫反应的影响

目的:探讨应用冷冻法与免疫抑制剂法对同种异体鼠坐骨神经再生效果的比较。方法:实验分为新鲜自体神经移植组,新鲜异体神经移植组。供体神经冷冻后异体神经移植组.异体神经移植后应用免疫抑制剂组。于移植后3周各组分别进行电生理学、组织学、电镜、混合淋巴细胞培养(MLC)及迟发性超敏反应(DTH)检查神经移植效果。结果:各组神经移植效果由优至差排序为:新鲜自体神经移植组,供体神经冷冻后异体神经移植组,应用免疫抑制剂组.新鲜异体神经移植组。结论:周围神经的细胞成分可被低温保存,移植后可存活并具有功能,冷冻法优于应用免疫抑制剂法。     

FK506对同种异体神经移植后神经再生的影响

目的研究免疫抑制剂FK506对冷冻处理后的同种异体神经移植后神经再生的作用.方法选择成年的新西兰大白兔36只.4只作为供体,切取双侧坐骨神经,制成10 mm神经段,深低温冷冻储存2周.其余32只随机分为实验组和对照组.将兔左侧坐骨神经造成10 mm长缺损,用复温后的同种异体神经进行移植桥接.然后作以下处理实验组移植部位应用FK506(10 μg/d×14 d),对照组不做任何处理,任其自然生长.于术后12周进行组织学、电生理、超微结构、形态学定量分析、肌湿重以及免疫学等观察.结果在观察的时限内,实验组及对照组32只大白兔在进行同种异体神经移植后均未发生急性移植排斥反应.但实验组大白兔的移植部位运动神经传导速度(30.58±2.16)s明显快于对照组(21.78±2.43)s(P＜0.05).光镜及电镜检查发现实验组大白兔的有髓神经纤维数量、神经束膜间毛细血管及雪旺氏细胞细胞器等明显多于对照组(P＜0.05).结论免疫抑制剂FK506可促进冷冻处理后的同种异体神经移植后周围神经再生.     

神经生长因子对超低温冷冻异体神经移植的效果评价

目的研究神经生长因子（nerve growth factor,NGF）对超低温冷冻处理后的同种异体神经移植后神经再生的作用。方法选择Wistar大鼠作为动物模型,于建立动物模型三周前取5只大鼠作为供体,切取双侧坐骨神经,冷藏于-196℃液氮中。另取30只大鼠分为：A组,单纯冷冻异体神经移植组;B组,冷冻异体神经局部应用NGF缓释膜组;C组,自体神经移植组。术后12周进行大体观察、组织学、超微结构等测定。结果术后12周内,三组大鼠均未发生急性移植排斥反应。组织学、超微结构测定发现B、C组神经生长情况明显优于A组。结论超低温冷冻异体神经移植局部应用神经生长因子能更有效促进神经再生。     

骨骼肌桥接大鼠周围神经缺损的实险研究

分别用自体骨骼肌和坐骨神经修复34只Wistar大鼠的68根坐骨神经缺损。术后15、30、60天检测腓肠肌、比目鱼肌收缩力、再生轴索通过率及直径,并应用电子显微镜观察神经再生。术后60天,自体神经移植组有良好的功能恢复,自体骨骼肌移植虽有部分功能恢复,但与自体神经移植组的差异有显著的统计学意义。作者等认为,自体骨骼肌作为移植体桥接大鼠坐骨神经缺损虽可获得一定的神经再生,但能否用于修复周围神经缺损尚需进一步研究。     

诱导免疫耐受抑制小鼠异体坐骨神经移植排斥反应的实验研究

目的 探讨胸腺内注射异基因抗原对异体鼠坐骨神经移植存活的作用。方法 自供体C57BL／6小鼠脾细胞中提取MHC抗原，注入受体Balb/c小鼠胸腺内，2周后移植供体C57BL／6小鼠坐骨神经。同时另设4组对照组，即自体神经移植组，异体神经移植组，冷冻后异体神经移植组，应用免疫抑制剂异体神经移植组；3周后进行神经电生理检查、组织学的检测。结果 实验组优于异体神经移植组及冷冻后异体神经移植组；接近于自体神经移植组及应用免疫抑制剂异体神经移植组。结论 胸腺内注射供体MHC抗原可诱导特异性坐骨神经移植耐受。     

冷冻保存异体神经移植实验研究

目的：寻求异体神经移植修复周围神经缺损的可能性。方法：用－３０℃保存６０天的同种异体神经桥接大鼠坐骨神经１５ｍｍ缺损；术后进行神经传导速度检测，神经功能恢复检查及组织学观察。结果：异体神经移植与自体神经移植比较，在早期有非常显著的差异性，随着恢复期延长，其差异性逐渐缩小，到６个月时已无明显差别。结论：认为用冷冻保存的异体神经移植修复周围神经缺损是有效的方法。     

辐照含银同种异体神经移植的实验研究

目的观察辐照含银处理同种异体神经的体外抑菌效果及移植效果。方法①将同种异体神经分别行辐照含银、单纯辐照和低温冷冻处理，并对它们进行含银量测定、细菌培养及体外抑菌实验。②18只健康成年家兔，随机分为3组，分别移植辐照含银同种异体神经（A组）、新鲜异体神经（B组）和自体神经（C组）。通过观察移植后宿主的免疫排斥反应、组织形态学和光镜下组织结构变化来判断移植效果。结果①辐照含银处理神经含Ag^＋（193．2±10．3）μg／g；辐照含银神经组具有明显抑菌作用，与其他各处理组相比差别显著（P〈0．01）；②细胞毒实验显示A组淋巴细胞死亡率与C组无明显差异（P〉0．05）；术后12周，A组与C组腓肠肌萎缩好转，针刺可见回缩反应；光镜下可见雪旺细胞增生，新生轴索出现，轴索数量增加，B组移植神经溶解。结论辐照含银同种异体神经能解决降低抗原性、组织保存、神经再生效果和机能恢复、术后感染等问题，是较理想的神经移植材料。     

血管化同种异体神经复合体桥接修复兔坐骨神经缺损的实验研究

目的 探讨将经化学去细胞处理的同种异体神经复合体预血管化处理后移植修复兔长段坐骨神经缺损的可行性,以及早期血管化移植体对神经功能恢复的影响.方法 将雪旺细胞与血管内皮细胞联合培养后种植于经化学去细胞处理的同种异体神经段中,形成预血管化的神经复合体并将其用于修复兔坐骨神经缺损（实验组）,对照组移植体中单纯种植雪旺细胞无血管内皮细胞.术后4、8、16周对2组动物行肌电图检查,观察神经功能恢复情况,然后,手术取材,应用光镜、电镜观察坐骨神经再生和髓鞘形成情况,应用图像分析系统对髓鞘厚度以及有髓神经纤维轴突的直径、数目进行量化分析.结果 大体观察,术后4、8、16周2组动物全身及局部均未出现明显的排斥反应.无论是在足部溃疡恢复,还是在神经传导速度、再生神经纤维的数量、超微结构的恢复方面实验组均优于对照组.结论 应用预血管化的组织工程人工神经移植体修复兔坐骨神经缺损,能有效地促进受损神经的功能恢复.     

聚乳酸复合NGF/TGF -β1对同种异体神经移植修复周围神经缺损影响的实验研究

目的 研究外消旋聚乳酸(PDLLA)—神经生长因子(NGF)—转化生长因子β1(TGFβ1)药物缓释系统对同种异体神经移植修复神经缺损的影响.方法 32只大鼠随机分成A、B、C、D4组,每组8只,所有大鼠左侧坐骨神经段性切除后,移植经过化学脱细胞处理后的同种异体神经段,A组在移植区域应用PDLLA- NGF -TGFβ1缓释膜,B、C两组分别应用PDLLA-NGF缓释膜、PDLLA-TGFβ1缓释膜,D组为空白对照组,术后观察各组大鼠的大体形态、步态、关节活动情况.术后12w进行电生理、组织学、免疫学等各项指标观测.结果 A组大鼠坐骨神经的复合肌肉动作电位波幅、运动神经传导速度及小腿三头肌湿重恢复率均高于对照组;光镜观察A组再生神经纤维数量和口径及髓鞘厚度均优于其他三组(P＜0.05).结论 PDLLA- NGF- TGFβ1药物缓释系统在同种异体神经移植修复周围神经段性缺损中,具有明显促神经再生作用.     

异体羊膜复合神经生长因子桥接周围神经缺损的实验研究

目的 :探讨同种异体羊膜材料复合应用神经生长因子替代神经材料桥接周围神经缺损的可行性。方法 :4 8只健康SD大鼠制备坐骨神经缺损模型 ,随机分为 4组 ,即自体神经原位移植组 (A组 )、异体神经移植应用环孢菌素A(CSA) 5mg/(kg·d) 5周组 (B组 )、异体羊膜材料桥接缺损复合应用神经生长因子组 (C组 )、单纯异体神经移植组 (D组 )。 6只Wistar大鼠取双侧坐骨神经作为供体。于术后 12周取移植段神经行光镜、电镜形态学观察 ,测定神经运动诱发电位潜伏期、神经运动诱发电位峰值、神经传导速度和振幅积分、腓肠肌最大收缩力 ,再生轴突计数及髓鞘厚度测定。结果 :12周时A、B、C组的各项检测指标明显优于D组 (P <0 0 5 ) ,A、B、C 3组间差异无显著性 (P >0 0 5 ) ,再生神经形态与功能恢复良好。结论 :对于长段周围神经缺损 ,应用异体羊膜复合神经生长因子进行桥接可以有效促进神经再生及功能恢复     

同种异体神经移植中环孢素A的最短有效时间

目的 :研究同种异体神经移植中环孢素A(cyclosporinA ,CSA)的最短有效时间。方法 :72只SD鼠分为A组 ,自体原位移植 ;B组 ,异体移植应用CSA免疫抑制 3周 ;C组 ,异体移植应用CSA免疫抑制 4周 ;D组 ,异体移植应用CSA免疫抑制 5周 ;E组 ,异体移植应用CSA免疫抑制 6周 ;F组 ,异体移植无免疫抑制。各组分别于术后 6周和 12周对实验动物的功能学指标 (步态分析 )、电生理学指标 (潜伏期、运动神经传导速度 )、形态学指标 (腓肠肌湿重 ,坐骨神经光镜、电镜观察 )进行检测。结果 :6周时各组实验动物神经再生不完全 ,功能未恢复。 12周时A ,D ,E组动物在功能学指标、电生理指标及光镜、电镜指标上均优于其它各组。而A ,D ,E组间在上述各指标上无显著性差异。结论 1.0cm缺损的异体神经移植动物实验中 ,应用CSA 5mg/ (kg·d) 5周为最短有效疗程     

利用神经再生室观察FK506促进神经再生的实验研究

目的探讨免疫抑制剂FK506促神经再生的作用及药物应用方法。方法将雄性SD大鼠60只随机分成3组,每组20只,切断双侧坐骨神经制成坐骨神经再生室模型。A组在再生室内注入生理盐水;B组在再生室内注入盐水,颈后皮下注射FK5061mg／kg,连续14d;C组在再生室内注入1μg／mlFK506。观察神经损伤局部的免疫反应、检测腓肠肌湿重、组织形态学及图像分析、电生理学。结果B、C组大鼠神经损伤局部淋巴细胞浸润程度较A组轻微。6周时大鼠腓肠肌湿重为：A组平均579mg,B组平均725mg,C组平均761mg,B、C组大鼠腓肠肌湿重明显优于A组;组织形态学观察与图像分析显示,有髓神经纤维总数为：A组平均720根,B组平均778根,C组平均772根,在有髓神经纤维密度、平均轴突直径、髓鞘厚度等指标中,B组结果明显优于A组。结论（1）大鼠全身应用FK506后具有神经保护和神经营养作用,可加快神经功能的恢复。（2）局部应用FK506对早期损伤神经有一定的保护作用。     

二氢睾酮对大鼠坐骨神经损伤后功能恢复的影响

目的观察皮下注射二氢睾酮（DHT）对坐骨神经损伤后功能恢复的影响的实验研究。方法实验于在山大一院骨科实验室完成。选用健康雄性SD大鼠40只,制备大鼠右侧坐骨神经挤压伤模型。实验动物随机数字表法分为五组,每组8只（一个对照组,四个不同用药时长组）,术后每周行坐骨神经功能检查（SFI）,术后8周时检测坐骨神经运动神经传导速度、小腿三头肌复合肌肉动作电位的波幅、潜伏期及形态学观察神经再生情况。结果坐骨神经功能指数在各时间点,用药组明显优于对照组;复合肌肉动作电位（CMAP）的潜伏期（LTP）,用药组明显小于对照组（p〈0.05）;神经传导速度和波幅用药组好于对照组（p〈0.05）。组织学检查：有髓神经纤维数在术后8周时用药组明显多于对照组（p〈0.05）;有髓神经纤维直径及髓鞘厚度,用药组明显优于对照组（p〈0.05）。超微结构观察：用药组再生神经的有髓纤维数,髓鞘厚度,髓鞘的成熟度明显好于对照组。而所有测量结果中,各不同用药时长组之间没有统计学差异。结论二氢睾酮对神经的再生和功能恢复有一定的作用。二氢睾酮对神经的恢复作用主要在损伤早期。     

冷冻保存神经后自体和异体移植的实验研究

目的：探讨冷冻保存神经自体和异体移植对神经再生的影响。方法：４０只ＳＤ大鼠用反复冷冻、复温的神经和未经任何处理的坐骨神经移植体,进行自体和异体移植。Ａ组为冷冻神经移植于自体原位中;Ｂ组为冷冻神经移植于异体中;Ｃ组为未冷冻神经移植于异体中;Ｄ组为未冷冻神经移植于自体原位中。术后６,１２周光镜、电镜下行组织学观察,检测各项电生理指标。结果：Ａ 组可见到较多的再生轴突通过移植体;Ｂ组可以看到炎性细胞侵润,但仍可见再生轴突通过移植体;Ｃ组可见到大量炎性细胞侵润,有极少量再生轴突通过移植体;Ｄ组可见到大量再生轴突通过移植体。电生理指标和伸趾长肌恢复率Ａ,Ｄ两组明显好于Ｂ,Ｃ两组。结论：神经冷冻处理可以降低抗原性,本实验为同种异体神经移植提供理论依据。     

壳聚糖复合他克莫司缓释鞘管促进大鼠坐骨神经再生的实验研究

目的观察壳聚糖复合他克莫司(FK506)缓释鞘管结合3mm小间隙桥接神经对神经再生的影响。方法将45只雄性SD大鼠,随机分成3组,切断双侧坐骨神经制成坐骨神经再生室模型,并保留断端间隙为3mm。实验所用得桥接材料分别是:硅胶管、壳聚糖鞘管、壳聚糖复合FK506缓释鞘管。分别于术后6、8、12周观察桥接材料周围的瘢痕形成及吸收情况,并行神经电生理、组织学观察、图象分析、腓肠肌湿重检测比较各组大鼠坐骨神经的再生与功能恢复情况。结果术后大体标本观察显示:对照组再生室与周围组织粘连较重;壳聚糖鞘管组、壳聚糖复合FK506鞘管组神经桥接处较易与周围组织剥离,粘连轻微。6周时各组再生室均尚存;8周时壳聚糖鞘管组、壳聚糖复合FK506鞘管组桥接材料开始吸收;12周时壳聚糖鞘管组、壳聚糖复合FK506鞘管组桥接材料不完整或仅有碎片残留,神经连续性建立,且与周围组织无明显粘连。评估神经再生的运动神经传导速度、复合肌肉动作电位、潜伏期检测指标,壳聚糖复合FK506鞘管组(10.2m/s±0.8m/s、4.3mV±0.3mV、1.9ms±0.4ms)明显优于对照组(4.2ms±0.5ms、1.2mV±0.3mV、7.5ms±0.4mV)、壳聚糖鞘管组(9.5ms±0.3ms、2.7mV±0.3mV、3.1ms±0.4ms),P<0.05。壳聚糖鞘管组虽然各指标均数优于对照组,但之间差异无统计学意义。结论应用壳聚糖复合FK506缓释鞘管桥接大鼠坐骨神经,在体内稳定2个月以上开始降解,能够明显促进神经再生与功能恢复,且降解产物为多糖类,不影响神经再生微环境。     

联合应用NGF和CNTF对大鼠坐骨神经损伤后功能恢复的影响

目的 探讨联合应用神经营养因子（Nerve growth factor,NGF）和睫状神经营养因子（Ciliary neurotrophic factor,CNFT）对大鼠坐骨神经损伤后再生及功能恢复的影响。方法 用硅胶管桥接120只大鼠左侧坐骨神经长6mm缺损，随机分为4组，分别行NGF＋CNTF、CNTF、NGF、生理盐水（NS）靶肌肉注射。术后行坐骨神经功能指数（SFI）、电生理检测、病理学检查。结果 联合应用NGF和CNTF组SFI恢复率、各项电生理及轴突图像分析指标明显优于单独用药组。结论 联合应用NGF和CNTF可明显促进大鼠坐骨神经损伤后再生与功能恢复。     

Favorable Effect of Local VEGF Gene Injection on Axonal Regeneration in the Rat Sciatic Nerve

This study is to investigate the effect of local phVEGF165 injection on sciatic nerve re- generation in the rats and to search for a new way in the further treatment of peripheral nerve injuries. Forty-five adult male Wistar rats received a neurotomy to bilateral sciatic nerves, which were subse- quently reconnected with 10/0 epineurial nylon sutures. The injured segments was locally injected with normal saline (group A), or 25 μg of phVEGF165 (group B) or 50 μg phVEGF165 (group C). Nerve conduction and regeneration were evaluated in terms of the histological changes, weight of gastrocnemius muscles, electrophysiology and morphometric results. Our study demonstrated that rats of group C showed the best results in terms of nerve regeneration, followed by group B and group A. Our findings suggested that local injection of phVEGF165 can facilitate nerve regeneration and promote functional recovery in a dose-dependent manner.     

自体神经-变性骨骼肌并联复合桥接物修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

目的:研究自体神经-变性骨骼肌并联复合桥修复大鼠坐骨神经缺损的效果及可行性。方法:成年Wistar大鼠54只,雌雄不限,随机分为3组。各组动物均切除一段坐骨神经形成10mm缺损,A组(n=18)行缺损远端神经原位束间分离后,切取10mm一束,与经过热变性处理的自体骨骼肌条“并联”形成复合桥桥接缺损坐骨神经;B组(n=18)行自体神经桥接;C组(n=18)行单纯变性骨骼肌桥接。术后24周,对各组胫前肌湿重恢复率,桥体再生神经纤维数目、直径和髓鞘厚度进行图像测量分析。结果:胫前肌湿重恢复率、桥体单位面积再生有髓神经纤维数量(密度)、纤维直径和髓鞘厚度统计学分析显示:A、B两组与C组相比有统计学差异(P<0.05),A、B两组再生效果优于C组;A、B组的胫前肌恢复率和单位面积再生有髓神经纤维数目比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:损伤神经远端束间分离自体神经与变性骨骼肌“并联”复合桥修复大鼠坐骨神经缺损效果接近自体神经,优于变性骨骼肌桥,有深入研究的必要。     

经皮电刺激对大鼠周围神经端侧吻合效果的影响

目的观察和探索经皮电刺激促进神经端侧吻合后神经再生的效果及其临床价值。方法选取雄性SD大鼠32只,随机分为正常对照组(A组),肌皮神经损伤后端端吻合至尺神经组(B组),肌皮神经损伤后端侧吻合至尺神经组(C组),肌皮神经损伤后端侧吻合至尺神经+术后经皮电刺激组(D组)。观察各组大鼠患侧肢体的肌力恢复情况以及神经纤维的再生情况。结果 C组和D组大鼠振幅、传导速度低于A组,潜伏期高于A组;而D组大鼠振幅、传导速度低于C组,潜伏期高于C组;B、C、D三组大鼠肱二头肌湿重比以及肌纤维横截面积均低于A组,且C组肌肉恢复最差;B、C、D三组大鼠NF-200表达明显低于A组,D组NF-200表达明显强于C组,但仍显著少于B组,差异均具有显著性(P0.05)。电镜检查显示B组神经纤维髓鞘成熟,C组以无髓神经纤维为主,髓鞘成熟度差。D组髓鞘增生情况较C组好转,但仍有部分无髓神经纤维存在。结论神经端侧吻合术后经皮电刺激能有效促进神经轴突再生以及延缓靶肌的失神经萎缩,尽管较之神经端端吻合存在差距,仍不失为临床修复周围神经损伤的有效方法之一。