SDF-1/CXCR4对大肠癌细胞株SW480增殖、迁移及侵袭的影响及意义

【摘要】目的探讨基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其特异性受体CXC趋化因子受体4（CXCR4）对大肠癌细胞SW480增殖、迁移及侵袭能力的影响及意义。方法取对数生长期大肠癌细胞SW480分为对照组(未经任何处理)、SDF-1组（加入100μg/L SDF-1）、SDF-1＋AMD3100混合组(向细胞中加入1mg/L AMD3100,孵育2h后加入100μg/LSDF-1)、AMD3100组（加入1mg/L AMD3100）。免疫组化法检测SW480细胞中CXCR4蛋白表达情况;RT-PCR法检测SW480细胞中CXCR4mRNA的表达情况,以及外源性SDF-1和AMD3100作用后CXCR4mRNA表达水平的变化;MTT增殖实验、Transwell迁移及侵袭实验分别检测SDF-1以及AMD3100对SW480细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果SW480细胞中CXCR4蛋白呈阳性表达（阳性率80%）。SW480细胞中有CXCR4mRNA的表达,100μg/LSDF-1促使CXCR4mRNA表达水平进一步上调,且能被1mg/L AMD3100阻断。SDF-1组细胞增殖活性(0.847±0.039）高于对照组(0.624±0.011)和SDF-1＋AMD3100混合组(0.607±0.016),AMD3100组(0.456±0.032)低于对照组和SDF-1＋AMD3100混合组(F=108.030,P＜0.05)。Transwell小室迁移及侵袭实验中SDF-1组穿膜细胞数(个：98.7±5.8、33.7±6.2)均多于对照组(21.0±2.2、6.1±2.3)、SDF-1＋AMD3100混合组(18.5±8.4、8.5±2.8)和AMD3100组(12.1±3.2、2.1±1.0),后3组间比较差异无统计学意义。结论SDF-1/CXCR4生物轴可促进大肠癌细胞SW480的增殖、迁移及侵袭。     

GLP-1 通过 SDF-1/CXCR4 信号通路调控人脐血内皮祖细胞增殖、 分化和凋亡

摘要:目的 探讨胰高血糖素样肽 1（GLP-1）调控人脐血内皮祖细胞（EPCs）增殖、 分化与凋亡的分子机制。方法 从健康孕妇脐带血分离和培养 EPCs, 以 2×105 密度接种于 6 孔细胞板, 分别转染空载体质粒（对照组）、 pcD⁃ NA3-GLP-1 质粒（GLP-1 组）、 pcDNA3-GLP-1 质粒+AMD3100（GLP-1+AMD3100 组）及单纯 AMD3100（AMD3100 组）。将 pcDNA3-GLP-1 质粒转染 EPCs, 以 25 μmol/L AMD3100 阻断体外培养的 EPCs 的基质细胞衍生因子 （SDF- 1） /趋化因子受体 4（CXCR4）信号通路 1 h。采用 RT-PCR 检测分化和凋亡相关基因 PPARγ、 C/EBPα与 Caspase-3 基因表达, MTT 比色法检测细胞增殖能力, Caspase-3 活性检测试剂盒测定 Caspase-3 活性。结果 与对照组相比, GLP-1 过表达显著提高了 C/EBPα及 PPARγ mRNA 表达, 促进了 EPCs 细胞增殖, 降低了 Caspase-3 mRNA 表达和 Caspase-3 活性 （均 P < 0.05）。当 SDF-1/CXCR4 信号通路被阻断后, GLP-1 对 C/EBPα及 PPARγ mRNA 表达、 EPCs 细胞增殖的促进作用, 以及对 Caspase-3 mRNA 表达和 Caspase-3 活性的抑制作用均明显减弱（均 P < 0.05）。结论 GLP-1 可通过调节 SDF-1/CXCR4 信号通路促进 EPCs 增殖与分化, 抑制其凋亡。     

白藜三醇对人外周血内皮祖细胞功能的影响

目的 观察白藜三醇(Res)对人外周血内皮祖细胞(EPCs)功能的影响.方法 密度梯度离心法获取人外周血单个核细胞,培养7 d后,收集贴壁细胞并加入Res(1、10、25、50 μmol/L)干预一定时间(6、12、24、48 h).激光共聚焦显微镜和流式细胞术鉴定EPCs,分别观察EPCs的增殖、黏附、迁移和体外血管生成能力.结果 Res促进外周血EPCs扩增,50 μmol/L Res作用24 h对EPCs数量的影响最为显著(P<0.01).Res也显著改善了外周血EPCs的增殖、黏附、迁移和体外血管生成能力.结论 Res可增加EPCs数量并改善其功能.     

槲皮素通过调控PI3K/Akt信号通路对血管内皮祖细胞发挥保护作用

目的探讨槲皮素(quercetin,Que)对氧化应激情况下血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的保护作用及其作用机制。方法分离并诱导分化人脐血EPCs,随机分为对照组;过氧化氢(H_2O_2)组:加入500μmol·L~(-1)的H_2O_2,建立氧化应激损伤EPCs模型;Que干预组:先分别加入浓度为60、90μmol·L~(-1)的Que预处理30 min后,再加500μmol·L~(-1) H_2O_2共同培养,培养12、24、48 h后,WST-1法观察EPCs增殖情况;Western blot检测Akt、磷酸化Akt的表达水平;实时荧光RT-PCR法检测PI3K、Akt3 mRNA的表达水平。结果与空白对照组对比,经过H_2O_2处理的EPCs增殖能力明显降低,且EPCs的Akt蛋白表达明显下降,PI3K、AKT3 mRNA明显下降(P<0.01,P<0.05)。加入60、90μmol·L~(-1) Que处理12、24、48 h后,损伤的EPCs细胞增殖能力明显增加,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。同时明显升高EPCs磷酸化Akt的蛋白表达(P<0.05),以及PI3K、AKT3 mRNA表达(P<0.01)。结论槲皮素对H_2O_2诱导血管EPCs氧化应激损伤起到修复作用,其作用机制可能是通过激活PI3K/Akt信号通路,减少氧化应激对脑血管病灶的影响,促进脑血管EPCs增殖和分化。     

基质细胞衍生因子-1对外周血内皮祖细胞功能影响的研究进展

<正>基质细胞衍生因子-1(SDF-1)是CXC亚家族的一种趋化因子,在干/祖细胞归巢等方面发挥了重要的作用。最新研究表明[1],SDF-1唯一的受体CXCR4可在内皮祖细胞(EPCs)表面高度表达,SDF-1与CXCR4结合后形成SDF-1/CXCR4轴,促使EPCs沿SDF-1的浓度梯度发生黏附、增殖、迁移并抑制其凋亡,从而改善EPCs功能。EPCs能增殖分化为成熟血管内皮细胞,参与血管新生,其是缺血组织的血管新生,利用EPCs的血管新生能     

钙离子对骨髓间充质干细胞CXCR4表达的影响

目的 探讨钙离子对骨髓间充质干细胞(BMSCs) CXCR4表达的影响.方法 用含不同浓度钙离子的DMEM培养液体外培养大鼠BMSCs:A组为无钙离子培养基;B、C、D组分别加入1、2、4mM氯化钙;E、F和G组为C组中分别加入钙敏感受体特异性抗体、AMD3100和抗CXCR4抗体.采用RT-PCR和Western blot检测CXCR4 mRNA水平和蛋白表达,采用迁移实验测定BMSCs向基质细胞衍生因子1(SDF-1)的趋化效应.结果 CXCR4mRNA转录水平与蛋白表达水平:与A组相比,B、C、D组显著上升呈浓度依赖性(P＜0.05);与C组相比,E组显著下调(P＜0.05).与A组相比,C组向SDF-1的迁移细胞数增加;与C组相比,E、F、G组向SDF-1的迁移细胞数减少(P＜0.05).结论 钙离子可促进BMSCs的CXCR4转录和表达,并促进BMSCs向SDF-1的趋化迁移,从而可能促进BMSCs的靶向归巢.     

不同浓度雌激素对急性期高血压脑出血患者的内皮祖细胞功能及衰老的影响

目的分析不同浓度的雌激素干预急性期高血压脑出血患者的内皮祖细胞(EPCs)后其功能变化及对衰老的影响。方法选取2015年3月至2016年6月在我院神经内科进行治疗的男性患者80例,平均分为5组,一组向其培养液中添加等量0.9%氯化钠注射液,作为对照组,3组分别添加浓度为10nmol/L、100nmol/L、1μmol/L的雌激素,作为雌激素组,最后一组先用磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)抑制剂干预1h后,再用1μmol/L的雌激素干预。分别观察分析雌激素对EPCs的功能及衰老的影响。结果 EPCs形成集落的数量与雌激素的浓度呈正比(t=0.314,P=0.004);EPCs细胞的黏附能力、增殖能力、迁移能力随着雌激素浓度的增加而增加(P值分别为0.003、0.004、0.004);EPCs细胞的血管内皮生长因子(VEGF)蛋白质表达效果和抗衰老能力与雌激素浓度呈正比,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。拮抗剂LY对雌激素有抑制作用。结论雌激素可以促进急性期高血压脑出血患者的EPCs集落,可增强其黏附能力、增殖能力、迁移能力,有利于EPCs VEGF蛋白质的表达,可以很好地抑制EPCs衰老。     

Exendin-4对Ⅰ型糖尿病小鼠内皮祖细胞功能及AKT/eNOS信号通路的影响

目的探讨Exendin-4对Ⅰ型糖尿病小鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖、迁移、黏附、衰老的影响及对AKT/eNOS信号通路的影响。方法采用密度梯度离心法分离并培养6月龄Ⅰ型糖尿病小鼠EPCs,并用不同浓度的Exendin-4(1、5、10、25μmol·L^-1)处理EPCs,观察EPCs体外克隆形成及增殖能力。同时观察其对糖尿病小鼠EPCs迁移、黏附及衰老的影响。Western blot检测Exendin-4处理对EPCs蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(AKT/eNOS)信号通路的影响。结果Exendin-4处理可增加Ⅰ型糖尿病小鼠EPCs克隆形成及增殖能力,尤以10μmol·L^-1时作用效果最佳。Exendin-4处理可增加Ⅰ型糖尿病小鼠EPCs的体外迁移、黏附功能,并抑制细胞衰老。Western blot结果显示,Exendin-4可增强AKT及eNOS磷酸化水平,而GLP-1R抑制剂Exendin-9-39和AKT抑制剂MK-2206则可以阻断这种效应。结论Exendin-4可改善Ⅰ型糖尿病小鼠EPCs增殖、迁移、黏附能力并抑制细胞衰老,其机制可能与调控AKT/eNOS信号通路有关。     

SDF 1α对大鼠骨髓源性内皮祖细胞克隆形成能力及增殖的影响

目的观察基质细胞衍生因子-1α（SDF-1α）对体外培养的大鼠骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）动员和增殖的影响。方法微孔法获取大鼠骨髓EPCs并采用荧光显微镜和流式细胞术鉴定EPCs特异性标记物。不同浓度SDF-1α处理EPCs后,采用细胞培养、MTT检测EPCs的克隆形成、细胞增殖。结果通过MTT法检测,对照组与（1、10、100μg/L）SDF-1α处理组的OD值分别为0.311±0.054、0.587±0.072、0.813±0.056、1.029±0.078,通过统计学方法分析,对照组与SDF-1α处理组比较差异均有统计学意义（n=5,P〈0.05）;100μg/LSDF-1α处理组次级内皮祖细胞集落单位数目是对照组近3倍（4.67±1.577比14.33±3.055,n=5,P〈0.01）。结论SDF-1α剂量依赖性地促进EPCs增殖,并显著增强EPCs克隆形成能力。     

丹参酮ⅡA对2型糖尿病患者外周血中SDF-1／CXCR4的影响

目的探讨丹参酮ⅡA（Tan ⅡA）对2型糖尿病（T2DM）患者外周血中基质细胞衍生因子-1（SDF-1）和其受体CXCR4的影响。方法62例T2DM患者随机分为对照组和实验组。对照组采用常规治疗;实验组在常规治疗基础上加用TanⅡA 40mg·d^-1,持续2周。测定治疗前后所有对象的外周血中SDF-1浓度、内皮祖细胞（EPCs）数量及其表面CXCR4阳性率。结果治疗前,两组各项参数比较差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗前后比较,对照组各参数差异无统学意义（P〉0．05）。实验组治疗后较治疗前SDF-1、CXCR4、EPCs上升,差异有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）;且EPCs与SDF-1呈显著性正相关（r=0．223,P〈0．05）。结论Tan ⅡA可升高T2DM患者外周血中SDF-1水平和上调CXCR4的表达,从而增加EPCs数量,改善内皮功能。     

输尿管镜联合尿道切开镜治疗9例尿道狭窄

目的探讨输尿管镜联合尿道切开镜治疗尿道狭窄的疗效。方法骶管麻醉下用F8/9.8输尿管镜检查尿道狭窄情况,直视下将导丝通过狭窄段尿道置入膀胱。如尿道狭窄段无小孔通道,可从膀胱造瘘管内注入美蓝液,再用力按压膀胱,同时观察闭锁远端有无蓝色液体渗出。改尿道切开镜循导丝的后尿道于12点处切割狭窄环,前尿道于6点方向切开,边切割边推进尿道镜,直至24F尿道内切开镜进入膀胱。术后常规留置F18～F22三腔气囊导尿管4～6周,运用抗生素治疗,拔管后定期行尿道扩张1～3月。结果本组患者手术均一次切开成功。本组手术时间35～83 min,平均46 min。术后住院5～8 d。留置导尿管拔出后l周内排尿通畅,19～21F尿道扩张器通过顺利。无尿失禁、尿外渗、继发性出血,尿道热等发生。结论输尿管镜直视下留置安全导丝,再行尿道切开镜治疗尿道狭窄可有效减少尿道穿孔或假道的发生,是一种并发症少、创伤小、住院时间短、恢复比较快的手术方法。     

36例腮腺炎合并胰腺炎的护理干预

目的 探讨护理干预对腮腺炎合并胰腺炎患者的预后的影响.方法 选取本院2008年6月-2010年6月收治的腮腺炎合并胰腺炎患者36例,将其随机分为对照组和观察组;两组均给予抑制胰酶活性及胰腺分泌药物,抗病毒治疗和禁食、补充电解质等对症支持治疗;对照组采用常规护理,观察组采用综合护理干预,观察两组患者的疗效及预后.结果 观...     

加替沙星相关血糖异常临床病例分析

目的:了解加替沙星对住院患者血糖水平的影响。方法:通过计算机管理系统进行回顾性研究,对2005年6月1日至2006年6月1日732例应用加替沙星患者及32例应用红霉素患者的血糖数据进行分析与比较,并采用排除法结合病例分析对加替沙星致血糖异常的因果关系与危险因素进行评估。结果:加替沙星引起血糖异常35例,其中高血糖27例(3.69%),低血糖8例(1.09%)。此外,35例中,非糖尿病患者为24例(68.57%),老年患者(>60岁)为27例(77.14%)。所有患者在停药及相应治疗后均恢复正常。32例应用红霉素患者未出现血糖异常。结论:加替沙星可引起血糖异常,尤其是老年患者。临床医师应了解该不良反应的风险,对使用加替沙星的患者进行血糖监测以保障患者安全。     

肺结核合并呼吸衰竭患者机械通气治疗的护理

目的对机械通气治疗肺结核合并呼吸衰竭患者的护理方法和效果进行分析和研究,探讨其优势和不足,总结经验,以更好的指导临床护理的进行。方法随机选择我院近3年采用机械通气治疗的70名肺结核合并呼吸衰竭患者,有针对性的对患者进行密切的护理,观察病情和护理效果,并加以总结。结果对机械通气治疗肺结核合并呼吸衰竭患者进行适当护理后,患者得到较好恢复,病情有所缓解,成功脱离呼吸机,同时有效减少其他并发症状的出现,具有较好的护理效果。结论适当的护理,能够使采用机械通气治疗的肺结核合并呼吸衰竭患者较快恢复,摆脱呼吸器帮助,病情得到有效缓解,有效率较高,同时,能有效减少并发症发生率,具有较高的临床使用价值和推广价值。     

藻酸双酯钠对血粘度增高症的疗效观察

本文选择血粘度增高症住院患者60例,随机分成两组,分别用藻酸双酯钠与蝮蛇抗栓酶进行治疗。结果表明藻酸双酯钠组降血粘度有效率为80％,蝮蛇抗栓酶组为86.7％,两组均有明显降血粘度作用(P<0.01)。     

多巴胺联合卡托普利治疗小儿肺炎合并心力衰竭疗效观察

目的：探讨多巴胺联合卡托普利在肺炎合并心力衰竭患儿中的应用价值。方法：选取2016-2018年湖北省随州市中心医院住院治疗的肺炎合并心力衰竭患儿92例,按随机数表法分为对照组和研究组各46例。对照组患儿给予常规治疗,研究组患儿给予多巴胺联合卡托普利治疗,观察两组患儿临床症状体征、心肌酶水平改善情况,评价疗效及用药安全性。结果：与对照组相比,研究组治疗后心率（HR）、呼吸频率（RR）、乳酸脱氢酶（LDH）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）均降低,而血氧饱和度（SaO2）升高;研究组住院时间、HR及RR恢复正常时间、听诊肺部啰音及喘促消失时间均短于对照组（P均<0.05）。两组患儿不良反应发生率比较差异无统计学意义。结论：多巴胺联合卡托普利可显著缓解小儿肺炎合并心力衰竭的临床症状体征,改善心肌酶水平,缩短住院时间,且用药安全性较高。     

类风湿关节炎合并肺间质纤维化的临床特征研究

目的 对类风湿关节炎合并肺间质纤维化患者的临床特征进行分析,为今后的临床诊治工作提供可靠的参考依据.方法 选取2010年1月-2013年3月我院收治的类风湿性关节炎患者102例,按照是否合并肺间质纤维化分成合并组和单纯组,而后对这两组的临床观察指标进行对比分析.结果 合并组患者的男性所占比例、吸烟者比例、患者年龄、发病年龄、抗环瓜氨酸抗体、类风湿因子、C反应蛋白水平以及骨破坏发生率均较单纯组高.结论 类风湿关节炎患者合并肺间质纤维化可能与诸多临床指标均存在较大的相关性,临床应给予关注,采取有效措施进行预防和治疗.     

胸腺肽治疗重症肺炎合并脓毒血症的疗效研究

目的探讨胸腺肽治疗重症肺炎合并脓毒血症的疗效。方法收集2013年12月~2015年10月期间我院收治的重症肺炎合并脓毒血症患者共82例,随机分为观察组和对照组,每组41例,对照组给予常规治疗;观察组在给予常规治疗的基础上皮下注射胸腺肽治疗,两组患者均连续治疗5d。比较两组临床疗效、机械通气时间及ICU住院时间、IL-6、TNF-α、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+。结果观察组临床治疗显效率(95.12%)明显高于对照组(80.48%),机械通气时间及ICU住院时间均少于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后观察组和对照组IL-6、TNF-α、CD8~+水平与治疗前比较均出现明显降低,CD4~+、CD4~+/CD8~+与治疗前比较均出现明显升高,观察组IL-6、TNF-α、CD8~+水平低于对照组,CD4~+、CD4~+/CD8~+高于对照组,两组差异有统计学意义(P0.05)。结论胸腺肽治疗重症肺炎合并脓毒血症临床疗效较好,可使患者的临床症状得到明显改善,免疫功能明显提高,可作为一种治疗重症肺炎合并脓毒血症有效的方法在临床推广应用。     

洁尔阴治疗尖锐湿疣48例

本文就洁尔阴治疗本院门诊的尖锐湿疣患者48例总结分析如下：回资料与方法l．l临床资料近5年本院JI诊收治的尖锐湿疣86例,其中阴道发病48例（558％）;诊断依据：患者本人或性伙伴有不洁性生活史,肉眼检查阴道粘膜有大小不等的、淡红色赘生物,质较脆,易出血,形状有乳头状、菜花状、疣状。1．2治疗方法患者取卧位,自行将洁尔阴原液10～20ml用阴道冲洗器注入阴道深部,抬高臀部防止药液流出,保持约10分钟,然后起立,让药液流出,每天1～2次,1周为1个疗程。2结果用药2个疗程,治愈35例（729％）;部分病灶消失43例（89．6％）;无效5…