脑络欣通对局灶性脑缺血再灌注大鼠神经上皮干细胞蛋白巢蛋白表达的影响

目的观察益气活血治法代表中药复方脑络欣通及其拆方（益气方、活血方）对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠室下区（SVZ）神经干细胞增殖的影响。方法采用线栓大脑中动脉法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，分别观察益气活血、益气、活血3种治法及其代表方药在缺血2h后，分别再灌注1、3、7d的治疗效果；免疫组化染色SABC法检测神经上皮干细胞蛋白巢蛋白表达。结果各治疗组巢蛋白表达增加，但仅在缺血再灌注7d时与模型组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；益气活血法组表达明显增加，在缺血再灌注7d时与益气法组和活血法组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论经过脑络欣通（益气活血法）及其拆方（益气方、活血方）干预后，可使内源性神经干细胞的增殖明显增加，脑络欣通在促进神经干细胞增殖（7d）表达的效应上要优于其拆方（益气方、活血方）。     

益气活血口服液对局灶脑缺血再灌注模型脑组织中SOD MDA的影响

中风病是中老年人的常见病、多发病,缺血性中风约占脑卒中的70%,可导致很高的病死率和致残率。缺血性中风多在安静状态下起病,为气虚不能帅血,或气滞血瘀,滞阻脉络而发病,祖国医学以中药益气活血法治疗缺血性中风具有肯定的临床疗效。作者根据益气活血法而选用北芪、益母草、毛冬青等组成益气活血口服液,临床上治疗缺血性中风病疗效甚佳。我们经过研究发现益气活血口服液能减轻脑缺血再灌注早期所致的神经损伤症状,通过保护血管内皮细胞功能、基膜的完整性,改善微循环而减轻脑水肿,并对迟发性神经元坏死(DND)有保护作用,但对自由基的影响…     

电针对大鼠局灶脑缺血/再灌注后神经上皮干细胞蛋白表达的影响

目的研究电针“合谷”穴(LI4)对大鼠局灶脑缺血/再灌注后室下区(SVZ)神经干细胞增殖的影响。方法采用“线栓法”建立大鼠局灶脑缺血/再灌注模型,将88只Wistar大鼠随机分为正常对照组(4只)、假手术组(4只)、模型组和电针组,其中模型组和电针组按1、7、14、21、28天5个时间点分为5个亚组,每个亚组8只。取大鼠双侧“合谷”穴作为刺激部位,用电针治疗仪作连续刺激,每次刺激时间为15min,每天1次,7天为1个疗程。免疫组化法检测SVZ区神经上皮干细胞蛋白(Nestin)的表达。结果与正常对照组比较,模型组中再灌注1天时梗塞侧SVZ Nestin阳性细胞开始增加,7天达到高峰(P＜0．05),14天后开始下降,28天后接近正常；模型组7天梗塞灶周围出现大量Nestin阳性细胞。与模型组比较。电针组(SVZ)Nestin阳性细胞在再灌注后1天时开始增加,7天时达到高峰,与模型7天组比较,统计学分析显示增加约1．5倍(P＜0．05),14天后开始下降,28天后接近正常；电针刺激7天后梗塞灶周围Nestin阳性表达较模型7天组增强。结论脑缺血可激活内源性神经干细胞的自我增殖潜能,而电针刺激后可使内源性神经干细...     

电针对大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马区内源性神经干细胞巢蛋白的影响

目的 分析电针治疗对成年大鼠局灶性脑缺血再灌注后不同时间段海马区内源性神经干细胞巢蛋白（nestin）表达的影响,探讨电针治疗脑缺血再灌注性脑损伤的作用机制。方法 采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血再灌注模型,Wistar大鼠共75只,随机分为对照组、模型组、电针组,针刺“大椎”、“百会”,并行电针干预,采用巢蛋白免疫组化法观察脑缺再在灌注后1、3、7、14与21d五个不同时相巢蛋白表达阳性的数量。结果 缺血侧：电针组在3d、7d、14、21d巣蛋白阳性细胞数量较同时相模型组有明显的增加（P＜0.05或P＜0.01）;缺血对侧：电针组只有在7d时巢蛋白阳性细胞数量较模型组有明显的的增加（P＜0.05）。结论 电针刺激大鼠“大椎”、“百会”可促进局灶性脑缺血再灌注后海马区巢蛋白阳性细胞数量的增加,提示这种作用可能是电针治疗急性脑缺血疾病的重要作用机制之一。     

不同时间针刺对局灶性脑缺血再灌注大鼠GDNF和bFGF蛋白表达的影响

目的观察局灶性脑缺血再灌注大鼠胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的情况及不同时间针刺对二者的影响。方法采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,并分别在造模后6,12,24 h开始针刺,运用免疫组化法观察不同时间段治疗组与模型组缺血半暗带的GDNF和bFGF蛋白表达情况。结果在半暗带,bFGF和GDNF在缺血再灌注6 h都开始表达,随着时间延长,bFGF表达逐渐增加,而GDNF表达逐渐减弱;不同时间开始针刺的各组与相应时段的模型组相比,GDNF和bFGF蛋白表达均明显升高(P均<0.05);不同时间进行针刺的各组之间,12 h组、24 h组与6 h组比较二者均有显著性差异。结论针刺可通过促进神经营养因子的表达而对缺血半暗区的神经细胞具有保护作用,针刺介入的最佳时机应在脑缺血的早期。     

脑络欣通对局灶脑缺血/再灌注大鼠胶质原纤维酸性蛋白GFAP表达的影响

目的探讨益气活血治法之代表中药复方脑络欣通及其拆方（益气方、活血方）对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠胶质原纤维酸性蛋白GFAP表达的影响以及在不同时间点局灶性脑缺血再灌注模型大鼠GFAP蛋白表达的特点。方法将健康的Wistar大鼠120只先饲养观察3天,随机分为假手术组、模型组、益气活血方（脑络欣通）组、益气方组和活血方组5组,每组24只,1天、3天、7天三个不同时间点各8只。采用线栓大脑中动脉法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,分别观察益气活血、益气、活血3种治法及其代表方药在缺血2h时分别再灌注1天、3天和7天的治疗效果;以免疫组化染色SABC法检测胶质原纤维酸性蛋白GFAP表达。结果缺血再灌注各时间点,假手术组无强阳性表达,模型组明显可见GFAP表达,与假手术组比较有显著性差异（P﹤0.01）;各治疗组GFAP阳性染色的阳性细胞总面积表达增加,与模型组比较,其中再灌注1天时无显著性差异（P〉0.05）,再灌注3天、7天时脑络欣通组和益气方组与模型组比较有显著性差异（P〈0.01或P〈0.05）;各治疗组间比较,1天无差异,3天脑络欣通组GFAP表达最高,与益气方组和活血方组比较有显著性差异（P﹤0.01）;7天各治疗组间无显著性差异（P〉0.05）。结论经过益气活血法（脑络欣通）及其拆方（益气方、活血方）干预后,脑络欣通在调节GFAP（3天上调、7天下调）表达的效应上要优于其拆方（益气方、活血方）。     

脑栓通注射液对局灶性脑缺血再灌注大鼠NO、iNOS的影响

目的:探讨脑栓通注射液抗脑缺血的作用机制。方法:采用大鼠线栓法致局灶性脑缺血模型,观察了脑栓通注射液对脑缺血再灌注大鼠脑组织NO的含量,HE染色观察缺血皮层组织形态学变化,免疫组化方法观察了对iNOS蛋白表达的影响。结果:脑栓通注射液可降低缺血再灌注大鼠脑组织NO的含量,病理学观察也表明,皮层神经细胞变性坏死的数目及变性程度均减轻,同时降低了脑缺血再灌注大鼠神经细胞iNOS蛋白表达。结论:脑栓通注射液的脑保护作用可能与其降低脑组织NO的含量,使皮层神经细胞变性坏死程度减轻,下调了iNOS蛋白的表达有关。     

脑络欣通对局灶脑缺血/再灌注大鼠胶质原纤维酸性蛋白GFAP表达的影响

目的 探讨益气活血治法之代表中药复方脑络欣通及其拆方(益气方、活血方)对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠胶质原纤维酸性蛋白GFAP表达的影响以及在不同时间点局灶性脑缺血再灌注模型大鼠GFAP蛋白表达的特点.方法 将健康的Wistar大鼠120只先饲养观察3天,随机分为假手术组、模型组、益气活血方(脑络欣通)组、益气方组和活血方组5组,每组24只,1天、3天、7天三个不同时间点各8只.采用线栓大脑中动脉法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,分别观察益气活血、益气、活血3种治法及其代表方药在缺血2h时分别再灌注1天、3天和7天的治疗效果;以免疫组化染色SABC法检测胶质原纤维酸性蛋白GFAP表达.结果 缺血再灌注各时间点,假手术组无强阳性表达,模型组明显可见GFAP表达,与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01);各治疗组GFAP阳性染色的阳性细胞总面积表达增加,与模型组比较,其中再灌注1天时无显著性差异(P＞0.05),再灌注3天、7天时脑络欣通组和益气方组与模型组比较有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05);各治疗组间比较,1天无差异,3天脑络欣通组GFAP表达最高,与益气方组和活血方组比较有显著性差异(P＜0.01);7天各治疗组间无显著性差异(P＞0.05).结论 经过益气活血法(脑络欣通)及其拆方(益气方、活血方)干预后,脑络欣通在调节GFAP(3天上调、7天下调)表达的效应上要优于其拆方(益气方、活血方).     

大蒜素对局灶性脑缺血再灌注血液流变学改变的影响

目的：探讨大蒜素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血液流变学改变的影响。方法：用栓线法复制大鼠局灶性脑缺血(MCAO)再灌注模型,于脑缺血2 h,再灌注24 h时,观察不同剂量大蒜素对脑缺血再灌注大鼠的神经功能评分、脑梗死体积、脑含水量及血液流变学改变的影响。结果：与模型对照组比较,大蒜素高、中剂量(15,25 mg·kg^-1)能明显提高大鼠脑缺血再灌注的神经功能学评分,减轻大鼠脑缺血再灌注后的脑组织含水量的增加,减小脑缺血再灌注后大鼠的脑梗死体积；大蒜素高、中剂量(15,25 mg·kg^-1)对脑缺血再灌注后大鼠全血黏度、高切还原黏度、高切相对黏度、低切相对黏度的升高有显著的抑制作用。结论：大蒜素对局灶性脑缺血再灌注损伤具有良好的保护作用,其机制可能与其抑制脑缺血再灌注后血液流变学改变有关。     

补肾活血与泻下及开窍活血方药对老龄大鼠脑缺血再灌注神经肽的影响

从内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)的变化方面研究益元活血丹与大黄及血栓心脉宁对老龄大鼠脑缺血再灌注损伤防护作用的机制。结果表明,与老龄模型组比较,尼莫地平组和益元活血丹小剂量组血浆中CGRP水平和老龄对照组、益元活血丹大小剂量组脑组织中CGRP均增高。老龄模型组血和脑组织中ET高于老龄对照组,益元活血丹大剂量组与血栓心脉宁组及大黄组血中ET、尼莫地平组和血栓心脉宁组脑组织ET均较老龄模型组降低。与老龄模型组比较,对照组、大黄组、益元活血丹大剂量组及尼莫地平组脑组织中NPY均降低;大黄组和血栓心脉宁组脑组织NT降低,而益元活血丹大剂量组和尼莫地平组增高。提示脑缺血再灌注老龄大鼠脑组织损伤与血浆和脑组织以ET占优势的CGRP与ET平衡失调和脑组织NPY与NT间以NPY占优势的平衡失调有关。各组药物通过调节CGRP与ET间和NPY与NT间平衡失调而保护脑组织,其中以益元活血丹和血栓心脉宁对CGRP与ET间平衡的作用和尼莫地平和益元活血丹改善NPY与NT间的平衡效果较全面。     

牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后 Nestin表达的影响

目的 :探讨牛珀至宝微丸对局灶性脑缺血再灌注后神经干细胞Nestin表达的影响。方法 :采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血再灌注模型 ,应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞巢蛋白 (Nestin)的表达 ,观察牛珀至宝微丸对脑缺血后神经上皮干细胞巢蛋白的影响。结果 :脑缺血再灌注后 ,牛珀至宝微丸组缺血侧室管膜、室管膜下区、皮层和纹状体Nestin阳性细胞数显著多于缺血对照组 (P <0 0 5 ) ,且神经病学评分明显低于缺血对照组 (P <0 0 5 )。结论 :牛珀至宝微丸能持续上调脑缺血再灌注后Nestin的表达 ,这可能是其治疗缺血性脑血管病的机理之一。     

滋阴潜阳法治疗脑梗死的安全性研究

目的探讨滋阴潜阳法治疗脑梗死的安全性。方法选取2014年1月—2014年12月期间在我院接受治疗的脑梗死患者100例,将患者随机分为观察组与对照组,每组患者50例。其中对照组患者实施常规西药治疗,观察组患者在此基础上联合滋阴潜阳法进行治疗,对比两组患者治疗前后的肝功能、肾功能、血常规、尿常规等检验结果。结果组间比较,两组患者在上述观察指标上并无明显差异(P0.05)。结论滋阴潜阳法治疗脑梗死具有较高的安全性,并未对患者的肝肾功能等造成不良影响,临床上可推广使用。     

滋阴潜阳法治疗原发性高血压阴虚阳亢证机理探讨

阴虚阳亢证是原发性高血压的常见病理类型,阴液亏虚、亢阳上扰是其基本病机,临床表现既有亢阳上扰“上实”的症状、又有阴液亏虚“下虚”的症状,滋补阴液、平肝潜阳是其基本治法,天麻钩藤饮、三甲复脉汤、建瓴汤是其常用的方药。     

脑梗死患者应用滋阴潜阳法治疗的有效性及安全性初评

目的研究脑梗死患者应用滋阴潜阳法治疗的有效性及安全性。方法病例资料来源于我院2014年4月—2015年11月就诊的70例脑梗死患者。随机分组方法:随机数字表法。70例患者分为常规西医组和滋阴潜阳组。常规西医组给予西医治疗;滋阴潜阳组在常规西医组基础上应用滋阴潜阳法治疗。比较治疗有效性、治疗安全性、干预前和干预后患者红细胞聚集指数、血浆黏度、红细胞压积、神经功能缺损评分、血脂水平的差异。结果滋阴潜阳组对比常规西医组治疗有效性更高,P0.05;滋阴潜阳组对比常规西医组治疗安全性更高,P0.05;干预前两组红细胞聚集指数、血浆黏度、红细胞压积、神经功能缺损评分、血脂水平相似,P0.05;干预后滋阴潜阳组对比常规西医组红细胞聚集指数、血浆黏度、红细胞压积、神经功能缺损评分、血脂水平改善更显著,P0.05。结论脑梗死患者应用滋阴潜阳法治疗的有效性及安全性高,可有效改善患者血液流变学、神经功能和血脂水平,值得推广。     

芪棱汤对大鼠脑缺血再灌注后nestin蛋白表达的影响

目的观察芪棱汤对脑缺血再灌注后nestin蛋白表达的影响,为益气养阴活血法治疗缺血性中风提供实验依据。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、芪棱汤去养阴药组及芪棱汤组,采用颈内动脉线栓加环扎法复制大鼠脑缺血再灌注模型。于再灌注后不同时间点进行神经学评分,用免疫组化法检测nestin蛋白表达。结果假手术组神经学评分均正常,其余各组大鼠神经功能评分差异均有显著性,芪棱汤组明显优于其他组;假手术组未见nestin蛋白表达,模型组、芪棱汤去养阴药组和芪棱汤组nestin蛋白表达差异有显著性,芪棱汤组nestin蛋白表达明显高于其他各组。结论芪棱汤可以促进nestin蛋白表达,从而对缺血再灌注所导致的脑损伤起保护作用。     

侯氏黑散对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后神经生长因子表达的影响

目的:研究侯氏黑散对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织神经生长因子(NGF)表达的影响.方法:栓线法阻断大脑中动脉建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,术后观察动物神经行为学变化并进行神经病学评分,采用免疫组化与医学图像分析相结合的方法检测假手术组、模型组、侯氏黑散各组大鼠缺血脑组织NGF的表达.结果:与模型组缺血侧比较,侯氏黑散组大鼠神经功能缺损得到改善,皮质及海马区NGF的阳性细胞数及面积光密度值比模型组明显增加(P＜0.05).结论:侯氏黑散可上调脑缺血再灌注后缺血脑组织内源性NGF的表达,而起到脑保护作用.     

川芎嗪对脑缺血再灌注后皮质Bax mRNA表达的影响

目的探讨川芎嗪对脑缺血再灌注皮质Bax mRNA表达的影响。方法采用Wistar雄性大鼠30只，随机分组。A组为正常对照组，B组为模型对照组，C组为川芎嗪治疗组。采用原位杂交与医学图像分析技术检测Bax mRNA阳性细胞数目、平均灰度值。结果大脑皮质Bax mRNA在B组阳性神经元多、着色深，平均数密度值高而平均灰度值低；A组中着色浅、阳性细胞数少，平均灰度值大，二者差异较显著（P〈0．01）。C组与B组比较，Bax mRNA阳性神经元少，平均灰度值升高（P〈0．05）。结论脑缺血再灌注后Bax mRNA表达增强；川芎嗪可使其表达下降，在脑缺血再灌注损伤中起到神经保护作用。     

血红素加氧酶在局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑组织表达测定

[目的]测定血红素加氧酶(HO)在局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑组织表达。[方法]使用随机平行对照方法,将SPF级雄性大鼠20只随机分为两组,缺血组15只参照Zea-logue方法造大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注24h模型,假手术对照组5只采用同样方法暴露颈动脉后缝合切口。观察脑组织形态结构,测定HO-1表达。[结果]假手术组脑组织形态结构正常,模型组大鼠大脑缺血区组织明显水肿。HO-1表达相同部位缺血组明显高于假手术组(P<0.01)。[结论]局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑血HO升高,HO-1参与了局灶性脑缺血再灌注损伤。     

局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的代谢组学研究

目的利用基于硅烷基衍生化反应的气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）的代谢组学测定方法,获得局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的血浆代谢物指纹图谱,初步揭示局灶性脑缺血再灌注损伤的生物标志物,为脑缺血药物筛选提供新的方法。方法通过硅烷基化反应,将生物样品中的氨基酸、脂肪酸、有机酸、糖类和固醇类物质制成热稳定性强、易挥发的硅烷酯或醚,通过优化色谱条件对大鼠血浆中内源性代谢物进行分析测定。结果利用已建立的GC-MS测定方法,获得了大鼠血浆代谢物指纹图谱,并鉴定了其中29个主要色谱共有峰,并通过主成分分析方法比较正常和模型组的指纹图谱差异。结论通过正常组和模型组大鼠血浆代谢物指纹图谱的比较分析,发现与脑缺血相关的生物标志物。