大鼠视网膜标本石蜡切片的固定方法

目的探讨制备大鼠视网膜石蜡切片的固定方法。方法将大鼠眼球固定于4%多聚甲醛(PFA)和不同浓度(1%、5%、10%、20%)甲醇组成的混和固定液中并制成石蜡切片,经HE染色后在显微镜下观察。结果经4%PFA+不同浓度甲醇固定的眼球外形均无明显变形和收缩。用添加1%和5%甲醇固定液固定的标本未见明显的视网膜脱离,而用添加10%和20%甲醇固定液的眼球的周边部视网膜出现轻度脱离。显微镜下视网膜组织结构完整清晰,各层细胞排列紧密,无明显裂隙,染色鲜艳。相反,采用福尔马林固定的视网膜发生严重脱离。结论 4%PFA+甲醇的固定方法即可保持视网膜结构完整,无脱离,又能提高抗原保存性,效果优于福尔马林固定液,是适合大鼠眼球,尤其是视网膜固定的一种有效方法。     

利用醛复红染色法制作家兔皮下疏松结缔组织铺片标本

目的 探讨适用于家兔皮下疏松结缔组织铺片标本的制片方法。方法 家兔3只,分别经腹腔注射10g/L锥虫蓝生理盐水溶液10～12ml。每天1次,连续注射3d后,于第4天取皮下疏松结缔组织进行铺片。待铺片晾干后,用福尔马林-酒精固定液固定约6h。然后,分别入醛复红、核固红和伊红染色液进行染色。每步之间用自来水冲洗。最后,常规脱水、透明、封片。 结果 巨噬细胞呈不规则形,分布在纤维中间,胞质中可见粗大的锥虫蓝颗粒。细胞核呈红色。醛复红染色30～40min时,弹性纤维呈紫色或蓝紫色,胶原纤维呈浅红色。结论 该法操作步骤简单,结果稳定可靠,是制作家兔皮下疏松结缔组织铺片标本适宜的方法。     

流行性出血热伴慢性肾衰的病理改变

流行性出血热(EHF)在临床出现不同程度的慢性肾功能损害的病例已有文献报道,但在病理形态学上呈慢性肾损害的病例,国内外尚未见报道,现将收集的2例报道如下。材料与方法本组材料均为尸检病例,分别在死后立即解剖或死后储存于4℃冰库11h后解剖。取肾组织按电镜生物标本常规制片,国产DX4—10型电子显微镜观察,光镜切片标本用10%福尔马林固定,石腊切片,HE染色。病例报告     

用已固定组织制作冷冻切片体会

经福尔马林固定的组织不能直接做冷冻切片 ,为此作者经过反复试验 ,探索出一种利用液氮快速冷冻制作冷冻切片的方法 ,取得了满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法　　经常规福尔马林固定 1～ 2天的外检和动物标本 (骨和含钙组织除外 ) ;低温恒冷切片机、ＯＣＴ包埋剂、包埋托、涂有防脱片胶的载玻片、液氮一罐。将福尔马林固定的组织常规取材 ,用滤纸吸干周围水分 ,置包埋托上加ＯＣＴ包埋剂 ,入液氮 3～ 5ｍｉｎ后取出 ,置于冷冻切片机冷冻台上片刻 ,修切组织 ,切片 ,吹干 ,不需固定 ,直接ＨＥ染色。2　体会　　组织从液氮中取出不宜立即…     

鼻窦气房标本负压火棉胶包埋法探讨

为研究蝶窦外侧壁相关结构的形态、大小、位置、毗邻的相互关系 ,我们选取 1 0 %福尔马林固定的离体完整颅底正常的头颅标本 ,应用火棉胶包埋法和组织学切片方法对含气易碎标本做连续断层切片制作。1　材料和方法1 1　大体标本制作　选取经 1 0 %福尔马林多年固定的 1 2个全头     

610例卵巢肿瘤临床和病理分析

本文根据卵巢的组织发生学和WHO卵巢肿瘤分类标准,将我院1964年至1982年的18年期间收治的610例卵巢肿瘤进行分析讨论: 材料与方法610卵巢肿瘤病例(瘤样病变除外)中,良性瘤489例,占80.2%;恶性瘤98例,占16.1%;交界性肿瘤23例,占3.7%。手术标本全部经病理检查,用10%福尔马林固定,石腊切片,苏木素—伊红染色,部     

铺片在结膜杯状细胞研究中的应用

眼结膜杯状细胞对维持视觉功能起着十分重要的辅助作用。由于结膜受损 ,尤其是其中的杯状细胞减少或缺乏 ,将导致干眼症 ,甚至失明。目前 ,有关结膜杯状细胞的研究报道很少。为了解结膜杯状细胞的分布规律和正常生理变化 ,我们采用结膜切片、铺片和特殊染色方法 ,对结膜杯状细胞进行了初步研究。材料与方法 :标本取材于不同年龄的胚胎和成人尸体 ,处理如下 :1切片 :在球结膜和穹窿结膜的四个区域 (鼻、颞、上、下侧 )及上、下睑各取 1～ 3个组织块 ,分别用 1 0 %甲醛和 Carnoy固定液固定 ,常规石蜡包埋 ,切片厚 6 μm,分别用 HE、阿利新蓝…     

肺癌1764例活体组织的病理分类

我院4791例纤维支气管镜活体组织检查中,有1764例肺癌活体组织检查标本,本文通过组织学观察,对其病理组织学进行分析。材料和方法我院1976.6～1985.5期间,应用Olympus Bp-B_3型纤维支气管镜行支气管粘膜直视下活检或盲检、X线电视胸透下的肺活检的标本4791例,活检组织2～6块,标本经10%福尔马林固定,石蜡包埋,常规切片或间断连续深切片,作苏木素—伊红染色,部分进行了粘液卡红、AB—PAS、Gomori网状纤维、Grimelius嗜银染色,切片按照WHO肺癌分类进行。     

乌鲁木齐地区1000例甲状腺疾病标本的临床病理分析

选取我院1957年11月～1988年7月接受的乌鲁木齐地区1000例甲状腺切除活检标本,均以10%福尔马林固定,石蜡包埋切片,HE染色,部分病例做了网状纤     

甲状旁腺的血供在甲状腺手术中的意义

100例病解颈部标本,经动脉灌注有色乳胶和福尔马林固定。甲状旁腺均经组织学切片验证。上、下甲状旁腺主要由甲状腺下动脉供血者,分别占77.05%和90.22%;其次,由甲状腺上动脉供血者占15.30%和5.43%;而由甲状腺上、下动脉的吻合血营养者,为7.10%和0.54%。上甲状腺由甲状腺中动     

心肌中小动脉增生性病变的观察

近年来,一些学者重视研究各种疾病时心肌中小冠状动脉的病损。本文对149例尸检心脏切片标本做了组织学观察,探讨小冠状动脉增生性病损的意义。材料与方法收集心脏性猝死尸检35例,又无选择地连续观察尸检心脏标本114例,共计149例。常规从左、右心室游离壁各取一块包括各层的心肌组织,有的还自室间隔切取一块标本。全部标本均用10%福尔马林液固定,石蜡切片,HE染色,光镜观察。在此基础上,再挑选有和没有小冠状动脉增生性病损的各5例,每例选一个组织做连续切片,每隔10片染一片,进行系列观     

30例肾上腺嗜铬细胞瘤临床病理分析

选取我科1970～1988年2月18年间诊断明确、资料较完整的肾上腺嗜铬细胞瘤30例进行临床病理分析。所有病理标本均经10%福尔马林固定,常规石蜡切片,HE染色。部份病例进行了随访。     

HB防腐固定液对尸体固定效果的观察

目的探讨HB防腐固定液(HB液)是否能够取代福尔马林用于尸体防腐固定。方法检测HB液中的挥发性有害成分,观察单纯使用HB液和福尔马林固定后以及先用福尔马林固定再用HB液浸泡固定尸体的防腐效果(肉眼、组织学、病原学检查)及其对尸体的长期保存效果。结果 HB液中的挥发性有害成分明显低于福尔马林,但对新鲜标本的固定效果不良且易发生腐败;先经福尔马林固定的标本再用HB液浸泡固定能够有效地防止尸体腐败、保存组织结构、保持标本的弹性、韧性和完整性;HB液长期浸泡固定标本的效果与福尔马林的固定效果相同。结论使用HB液能够取代福尔马林进行尸体防腐,降低空气中挥发性有毒物质的含量,减少甲醛对师生们的刺激。但HB液不能直接用于新鲜标本的防腐固定。     

改良快蓝焦油固紫染色法

改良快蓝焦油固紫(Luxol Fast Blue—CresylViloet)染色是根据Diamond法改良而建立的联合染色方法.可以同时在一张切片上观察神经细胞、神经胶质细胞和髓等结构.该方法具有两个突出优点:(1)使用冰冻切片法,制作时间周期短.染色方法简便,切片不易破碎.可制直径>2厘米的连续切片,对脑切片尤为适宜,便于科研工作中的连续观察.(2)集神经细胞,神经胶质细胞和髓鞘于一体.结构清晰,容易分辨.可使用于中枢神经系统的研究和教学中.1 方法1.1固定10%福尔马林液灌注或直接固定.10%盐水福尔马林用碳酸镁饱和液再固定14～20天.中间更换新固定液一次.1.2 冲洗 组织流水冲洗1小时,入20%蔗糖内至组织块下沉.1.3 切片 冰冻切片20～40μm.收集切片于20%酒精溶液中,便于展平切片.     

肥大细胞中前列腺素合成酶的组织化学观察

用正常成年豚鼠20只、大鼠10只,颈椎脱臼或重击头部处死后,立即取胸腺、淋巴结和小肠,部分材料投入-70℃液氮速冻,部分材料入10%甲醛和纯甲醇固定,石蜡切片,HE和肥大细胞特殊染色;肠系膜铺片经氮气吹干后,与液氮速冻的组织块一并置-70℃低温冰箱保存。可随时取出做恒冷箱切片,部分冰冻切片及肠系膜铺片用Janszen和Nugteren前列腺素合成酶组织化学法显示,以此法同步显示家兔肾脏。每种切片均用酶的特异抑制剂消炎痛作对照。部分连续冰冻切片,做HE和肥大细胞特殊染色。结果表明,前列腺素合成酶活性存在于肥大细胞的胞质内,颗粒和胞核为阴性。家兔肾脏集合管恒为阳性。消炎痛抑制反应极弱。确证前列腺素合成酶的组织化学方法可靠并且具特异性。前列腺素合成酶阳性反应的细胞,见于大鼠和豚鼠的小肠粘膜及粘膜下层、胸腺被膜和胸腺隔的结缔组织以及胸腺髓质、淋巴结被膜和小梁结缔组织及深皮质区;散布于肠系膜铺片上的细胞多呈椭圆形。以上所示酶活性细胞的分布,与肥大细胞的其他特殊染色结果相符。证明酶反应确是在肥大细胞内。本文用组织化学技术,证实肥大细胞内存在前列腺素合成酶,此酶是衡量前列腺素合成的敏感指标,可考虑用此方法研究肥大细胞的生理和病理。     

正常人脑垂体的动脉供应

作者对50例新鲜的含原位脑垂体及完整垂体柄和下丘脑的蝶骨标本块,在手术显微镜下剖出垂体的各动脉,用不能通过毛细血管的造影剂作选择性地灌注后,以福尔马林固定标本,冰冻并锯成连续切片,最后作 X-线摄片显示垂体上、中、     

10%福尔马林与中性福尔马林的比较

传统上我们都采用 1 0 %福尔马林固定组织。福尔马林系甲醛液的俗称 ,是由甲醛 ( Formaldeny de HCHO)气体饱和于水而成。一般市售的福尔马林含甲醛 37%～40 %。配法 :取 40 %甲醛液 1 0 ml与蒸馏水90 ml混合 ,即得 4%甲醛 ,亦即 1 0 %福尔马林。由于福尔马林久存则氧化产生甲酸 ,呈酸性 ,固定标本不适宜 ,特别是需长期固定的组织更不适合 ,故我们主张采用中性福尔马林固定组织标本。其配法如下 :40 %甲醛 1 0 0 ml酸性磷酸钠 (或无水磷酸二氢钾 ) 4.0 g磷酸氢二钠 6 .5 g蒸馏水 90 0 ml因中性福尔马林中加入了磷酸缓冲液 ,不易被氧化 ,能…     

介绍一种将科研培养细胞制作成细胞块的方法:琼脂糖模具法

<正>细胞块技术的基本操作过程是将液体样品离心形成沉淀物,使用或不使用细胞块支架,再经10%中性福尔马林固定、常规脱水、包埋、切片并染色进行诊断。细胞块技术为细胞学标本进一步检查提供良好的媒介。细胞是科研工作的重要工具,然而细胞块制作方法少有报道。传统实验中常将贴壁细胞进行爬片以行HE染色、免疫细胞化学、FISH等检测,爬片细胞具有浪费试剂、增加耗材、背景不干净等缺点,因此将临床病理的细胞块技术引入科研工作中,我们通过总结实际工     

间接原位RT—PCR方法检测组织中轮状病毒

我们应用间接原位ＲＴ ＰＣＲ方法检测了 1例因轮状病毒腹泻并发心力衰竭、呼吸衰竭而死亡的患儿存档 3年组织切片 ,标本经 10 %福尔马林固定、石蜡包埋切片。使用ＰＥＲＫＩＮ ＥＬＭＥＲＳｙｓｔｅｍ 10 0 0原位ＰＣＲ仪 ,并在实验方法上进行了一些改进 ,成功地从小肠、肾脏等组织中检测出轮状病毒颗粒 ,为轮状病毒的肠道外感染问题提供了直接的证据。1　材料与方法1 1　试剂和器材的准备　所用物品需经处理灭活ＲＮＡ酶 :切片所用刀片、试验所用镊子、吸头、盖玻片等均经 0 1%ＤＥＰＣ水浸泡 2 4ｈ以上 ;玻片、玻璃容器经清洁液洗、酸泡…     

激光照射豚鼠皮肤的形态学改变

<正> 用CO_2激光照豚鼠背部皮肤,右侧为照射区,左侧非照区;在照射前三周取左,右侧皮片,照射20次及40次后分别切取左,右侧皮片。固定于Bouin液,常规制片,分别作H.E及Weigert弹性纤维染色。电镜材料用0.25%戊二醛固定,锇酸后固定,Epon812包埋,超薄切片,醋酸铀