补骨脂的炮制研究：盐炙前后化学成分的比较

补骨脂传统应用均需盐炙。本文报道炮制前后补骨脂所含活性成分香豆精、黄酮化合物及挥发油等的变化。结果显示补骨脂所含成分在炮制前后无质的差别,而在量的方面略有差异;表明盐炙对补骨脂化学成分影响不大。     

基于UPLC-Q-TOF/MS技术的补骨脂盐炙前后化学成分变化研究

目的:探究补骨脂盐炙前后成分变化,从化学角度阐释补骨脂盐炙后缓和其“性本大燥毒”的机制。方法:采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)监测补骨脂炮制前后成分变化,结合Markerlynx软件分析。结果:补骨脂盐炙前后成分差异显著,盐炙品中补骨脂素(psoralen)、异补骨脂素(isopsoralen)、补骨脂二氢黄酮(bavachin)、补骨脂异黄酮(corylin)、异补骨脂查尔酮(isobavachalcone)、补骨脂查尔酮(bavachalcone)含量明显升高,补骨脂色酚酮(bavachromanol)、补骨脂酚(bakuchiol)含量明显下降。结论:补骨脂炮制前后成分变化是补骨脂盐炙后增效减毒和药性变化的物质基础。通过主成分分析法和正交偏最小二乘判别法分析盐炙前后指纹图谱的差异,得到潜在的化学标记物,鉴定为补骨脂二氢黄酮甲醚(bavachinin)、补骨脂查尔酮(bavachalcone)及补骨脂二氢黄酮(bavachin),可做为区分生品与炮制品的指标成分。本实验的研究成果对于研究补骨脂盐炙的炮制原理具有重要意义,同时也为补骨脂盐炙品药效物质基础的阐明提供了重要依据。     

益智盐炙前后挥发油化学成分及抗氧化活性的比较研究

目的:比较益智盐炙前后挥发油化学成分及抗氧化活性的差异,探讨盐炙对益智挥发油成分及抗氧化活性的影响。方法:采用水蒸气蒸馏法提取益智挥发油,气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对其定性分析,气相色谱(GC)对其中的有效成分圆柚酮进行含量测定,DPPH法测定其抗氧化活性。结果:益智生品检出77个峰,鉴定了其中的38个峰,盐炙品检出94个峰,鉴定了34个峰,生品与盐炙品有36个共有峰;生品和盐炙品挥发油中圆柚酮的含量分别为0.9659mg/g和0.6498mg/g,清除DPPH自由基的IC50分别为0.195g/ml和0.147g/ml(相当于生药量)。结论:益智盐炙后,药材中挥发油含量、组成和组分的相对含量,圆柚酮的含量均发生了较大的变化,抗氧化活性增加,研究为揭示其盐炙机理提供了一定的依据。     

知母盐炙前后滋阴作用比较

目的： 比较知母、盐知母对甲亢阴虚大鼠的影响,以阐明盐知母增强滋阴降火作用的炮制原理。方法： SD雄性大鼠,随机分为空白对照组,模型对照组,生知母、盐知母低剂量组（1 g·kg^-1）,生知母、盐知母高剂量组（2 g·kg^-1）;各组大鼠每天ig甲状腺素溶液（1.25×10^-2g·kg^-1）与相应样品水煎液（10 mL·kg^-1）,空白组ig等体积的生理盐水,模型组ig等体积的甲状腺素溶液和生理盐水,连续3周,眼眶取血,分离血清,抗原抗体反应法测游离三碘甲状腺原氨酸（FT3）,游离甲状腺素（FT4）,收集尿液,取上清液,紫外-可见光分光光度计（410 nm）测定17-羟皮质类甾醇（17-OHCS）的含量。结果： 与空白组比较,模型组的FT3,FT4均显著升高（P<0.01）;与模型组比较,除生品低剂量组的FT3外,其余各给药组的FT3,FT4均有显著性差异（P<0.05或P<0.01）;各给药组尿17-OHCS均有下降趋势,盐知母高剂量组与模型组比较有显著性差异（P<0.01）,优于生知母组;与生知母等剂量组比较,盐知母各剂量组FT3,FT4及尿17-OHCS均低于生知母组,其中盐知母高剂量组的17-OHCS较生知母有显著性差异（P<0.05）。结论： 知母、盐知母均有滋阴作用,盐炙后作用增强。     

补骨脂盐炙前后含药血清对人成骨细胞的影响

目的研究补骨脂盐炙前后含药血清对成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。方法采用从绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞,利用补骨脂生品和盐炙品含药血清干预,采用MTT法、碱性磷酸酶活性测定法、茜素红染色法研究其对成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。结果补骨脂生品和盐炙品含药血清均能促进人成骨细胞的增殖,提高碱性磷酸酶的活性,且血清体积分数为20%时,补骨脂盐炙品含药血清对成骨细胞增殖、分化的促进作用显著优于生品(P0.01);同时,补骨脂生品和盐炙品含药血清均能促进成骨细胞矿化的作用,且盐炙品要优于生品。结论补骨脂生品和盐炙品含药血清均具有良好的促进人成骨细胞增殖、分化和矿化的作用,其中盐炙品的作用显著优于生品。     

补骨脂盐炙对实验动物止泻作用影响的研究

目的：考察补骨脂盐炙前后止泻作用的差异,为临床治疗脾肾阳虚所致泄泻提供理论依据。方法：以补骨脂生品、水炙品、盐炙品醇水双提物分别灌胃给药,观察对番泻叶所致急性腹泻小鼠排便点数,大黄造成脾虚腹泻小鼠肠推进率和胃动素含量的影响。结果：补骨脂盐炙品10g/kg剂量能减少急性小鼠腹泻的稀便点数,15g/kg能抑制脾虚小鼠肠推进;水炙品和盐炙品均能促进胃动素的分泌。结论：补骨脂盐炙品对急性以及脾虚腹泻治疗作用优于生品及水炙品;盐炙后止泻作用增强可能与抑制胃肠运动、促进胃动素分泌有关。     

商陆醋炙前后化学成分和药效比较

目的: 比较商陆醋炙前后化学成分和药效的变化情况。 方法: 按2010年版《中国药典》商陆项下醋炙法制备醋商陆。采用硫酸-香草醛比色法测定总皂苷含量;HPLC-ELSD测定商陆皂苷甲含量,色谱条件为Lichrospher-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相甲醇-0.4% 乙酸(65:35),流速1.0 mL·min^-1,柱温40 ℃,进样量20 μL,ELSD条件为漂移管温度90 ℃,载气流速2.5 L·min^-1。SD大鼠随机分成生理盐水组、阳性药组(氢氯噻嗪)、生商陆组和醋商陆组,以生理盐水形成盐水负荷模型,用大鼠代谢笼法观察大鼠0~5 h尿量;ICR小鼠随机分成生理盐水组、阳性药组(芒硝)、生商陆组和醋商陆组,采用墨汁推进法比较生商陆和醋商陆对小鼠小肠推进率的影响。 结果: 商陆经醋炙后总皂苷质量分数由1.66% 升至1.91%,商陆皂苷甲质量分数由0.64% 增至0.82%,大鼠排尿量增多,小鼠小肠推动作用减弱。 结论: 商陆醋炙后总皂苷和商陆皂苷甲含量均升高,泻下作用缓和,长于利尿逐水。     

盐炙对补骨脂吸收特性的影响

 目的通过考察炮制前、后补骨脂中主要成分补骨脂素和异补骨脂素胃肠道吸收参数的变化,研究炮制对补骨脂吸收特性的影响。方法以SD大鼠为模型动物,进行大鼠在体肠灌注实验。并分别考察高、中、低3个浓度下的药动学参数,以确定浓度对吸收的影响。采用t检验法考察生品和盐炙品中补骨脂素和异补骨脂素的药动学参数之间的差异。结果生品中补骨脂素在高、中、低3个浓度下的吸收速率常数为0.203,0.165,0.203 h^-1,异补骨脂素的吸收速率常数则分别为0.178、0.168,0.204 h^-1;而盐炙品中补骨脂素在高、中、低3个浓度下的吸收速率常数为0.326,0.377,0.369 h^-1,异补骨脂素的吸收速率常数则分别为0.373,0.371,0.329 h^-1。盐炙品的吸收速率明显高于生品,而不同浓度下的吸收速率常数没有明显变化。结论补骨脂生品和盐炙品在小肠中的吸收机制是简单的被动扩散,吸收呈现一级动力学过程;炮制可以增加补骨脂的吸收。     

益智仁盐炙前后缩泉丸指纹图谱的比较

目的比较益智仁Alpinia oxyphylla Miq.盐炙前后缩泉丸的指纹图谱。方法 HPLC法建立缩泉丸指纹图谱,确定色谱峰归属及其变化来源。结果益智仁盐炙前后,缩泉丸指纹图谱中有32个共有峰,其中25个来自于益智仁,5个来自于乌药,2个来自于山药。同时,1号峰发生显著变化,来自于益智仁,其含有量在盐炙后明显增加。结论益智仁盐炙后可使缩泉丸温肾缩尿作用明显增强,可能与该药材中成分含有量变化有关。     

补骨脂炮制前后化学成分的变化

目的:从炮制前后补骨脂素、异补骨脂素和微量元素含量的变化探讨补骨脂炮制的物质基础。方法:采用HPLC梯度洗脱法、电感藕合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)分别测定了补骨脂炮制前后的补骨脂素、异补骨脂素及六种微量元素的含量。结果:炮制使补骨脂中的微量元素Mn、Ca、Mg、Fe、Zn含量增加,但Cu含量变化不明显;补骨脂素、异补骨脂素含量增加。结论:炮制使补骨脂有效成分含量增加,提高了中药补骨脂整体生物活性。     

续断酒炙前后化学成分的UPLC-Q-TOF/MS比较研究

比较续断生品、酒品各项质控指标及化学成分的差异。按照《中国药典》2015年版标准,测定续断生品、酒品的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物,并建立UPLC-Q-TOF/MS方法比较续断不同炮制品主要化学成分的差异,考察方法的线性、精密度、稳定性、重复性及加样回收率。续断生品和酒品的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物测定结果均符合《中国药典》2015年版的要求,并运用高分辨质谱鉴定了20个主要差异化学成分。续断经酒炙后续断皂苷VI及其乙酰化类似物含量显著上升,而酚酸类成分中的二咖啡酰奎宁酸的含量显著降低,咖啡酸含量显著升高,可能发生了相互转化,上述化学成分的差异可能是2种炮制品临床功效不同的主要原因。     

补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及水通道蛋白表达的影响

目的观察补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及口腔唾液腺水通道蛋白5(AQP5)、结肠AQP4、肾脏AQP2基因表达的影响,分析阐明盐炙缓和补骨脂毒副作用的机制。方法采用sc氢化可的松的方法复制大鼠肾阳虚模型,以化学试剂法测定大鼠血清中总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)的量,荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定口腔唾液腺AQP5、结肠AQP4、肾脏AQP2 m RNA的表达。结果与模型组比较,补骨脂生品和盐炙品组大鼠血清中的ALT、AST量显著升高,Alb量显著降低(P0.05);补骨脂盐炙品组ALT、AST水平低于生品组;各给药组BUN及Scr水平显著高于模型组(P0.05)。q RT-PCR结果显示,与对照组比较,模型组大鼠AQP2、AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05),AQP5的m RNA表达明显增加(P0.05);与模型组比较,补骨脂生品组大鼠AQP4 m RNA表达显著升高(P0.05),AQP5 m RNA表达显著降低(P0.05);与补骨脂生品组比较,补骨脂盐炙品组AQP2、AQP5 m RNA表达明显升高(P0.05),AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05)。结论补骨脂盐炙后可缓解药物对肾阳虚大鼠肝肾功能的副作用;同时缓解生品的燥性,盐炙对药物燥性的缓解作用可能与其对体内AQP的基因表达调控有关。     

高良姜的盐炙工艺及其盐炙前后HPLC指纹图谱对比研究

目的：优选盐炙高良姜的炮制工艺,并对比研究其盐炙前后的HPLC指纹图谱变化。方法：以外观性状、含水量、水溶性浸出物百分含量及高良姜素含量为评价指标,采用单因素试验,以切片厚度、炒制温度和炒制时间为指标,设计正交试验优选盐炙高良姜的炮制工艺。采用HPLC法测定盐炙前后高良姜样品的高良姜素含量和HPLC指纹图谱。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2004 A版）”进行相似度评价,并应用SIMCA＿P+12.0软件进行主成分分析。结果:优选的盐炙高良姜最佳炮制工艺为用5%食盐水浸润至药透汁尽,然后120℃炒制6 min;盐炙后的高良姜样品中高良姜素含量与生品比较,差异无统计学意义（P>0.05）;盐炙后的高良姜样品中水溶性浸出物百分含量均高于生品（P<0.01）;盐炙后的高良姜化学成分种类少于生品;虽然它们的指纹图谱相似度较高,但以其指纹图谱峰面积为变量进行OPLS-DA分析可以快速地将盐炙前后的高良姜样品区别开。结论：优选的盐炙高良姜炮制工艺稳定可行,可为生产盐炙高良姜饮片提供实验依据;盐炙前后的高良姜饮片内在化学成分发生了变化,这从化学成分的角度揭示了盐炙高良姜的炮制机理...     

远志蜜炙前后化学成分的对比研究

目的比较远志蜜炙前后总皂苷和浸出物的含量;初步比较远志蜜炙前后化学成分的异同。方法以远志皂苷元为对照品,采用香草醛-高氯酸显色法于560 nm波长处分别测定生远志和蜜远志中远志总皂苷的含量;采用药典方法测定和比较远志蜜炙前后70%乙醇浸出物的含量;采用薄层鉴别方法比较生远志和蜜远志正丁醇提取部位化学成分的异同。结果生远志中的远志总皂苷含量为2.096%、蜜远志中的远志总皂苷平均含量为2.207%;蜜远志的浸出物为50.50%,生远志的浸出物为36.53%。生远志正丁醇部位色谱和蜜远志正丁醇部位色谱基本一致:紫外灯(365 nm)下二者在相应位置呈相同颜色荧光,香草醛硫酸乙醇溶液显色后二者在相应位置的几个斑点均呈紫罗兰色,且远志皂苷元对照品斑点呈紫罗兰色,而在与其相应位置生远志供试品和蜜远志供试品均未检视到相应斑点。结论远志蜜炙后化痰止咳作用增强的原因在于蜜炙能增加总皂苷的溶出和有效成分的浸出量,蜜炙对远志化学成分的影响在于量变而非质变。     

基于盐炙前后成分煎出差异与止泻作用相关性探讨补骨脂丸增效机制

目的 探讨盐炙对补骨脂丸中代表性成分煎出的影响,以及成分与止泻药效的相关性。方法 采用HPLC-MS法测定补骨脂丸及3种补骨脂丸模拟品水煎液中13种代表性成分的含量差异,并结合不同给药组对脾肾阳虚泄泻模型大鼠的胃肠激素和下丘脑-垂体-肾上腺轴相关指标的影响,采用灰色关联分析法,对代表性成分与止泻药效进行相关性分析,寻找药效贡献较大成分。结果 与3种模拟品（模拟I～III号）相比,补骨脂丸水煎液中黄酮类成分如芦丁、异补骨脂二氢黄酮、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄酮、补骨脂宁、异补骨脂查耳酮及补骨脂二氢黄酮甲醚的含量较高,挥发油类成分如茴香醛、反式茴香脑及补骨脂酚的含量较低;与模拟II、III号相比,香豆素类成分如补骨脂素及异补骨脂素的含量较低。不同成分对止泻药效的贡献具有差异,黄酮类和挥发油类成分与止泻药效的关联度较高,香豆素类成分（如补骨脂素与异补骨脂素）与止泻药效的关联度较低。结论 补骨脂、小茴香盐炙后组成补骨脂丸,能促进黄酮类成分煎出,抑制挥发油类、香豆素类成分煎出,这可能是盐炙增强其止泻作用的关键环节之一。     

知母中牡荆素的分离及盐炙前后含量比较

目的：对知母化学成分进行研究,建立测定知母中牡荆素含量的方法,比较盐炙前后牡荆素含量差异。方法采用硅胶柱色谱等技术对知母70%乙醇提取物进行分离、纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。采用高效液相色谱法测定,Ecosil 色谱柱（4.6 mm±150 mm,5μm）,乙腈-0.2%冰醋酸溶液（14.5∶85.5）为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长340 nm。结果该化合物为牡荆素,在0.0398～1.99μg范围内线性关系良好,r＝0.9998,平均回收率为98.02%,RSD＝0.21%。生知母中牡荆素含量为0.0085%,盐知母含量为0.0081%。结论从知母中首次分离得到牡荆素,所建立的方法准确、专属性强、灵敏度高,知母盐炙后牡荆素含量略降低。     

川芎酒炙前后整体化学成分变化研究

目的：研究川芎酒炙前后化学成分的整体变化。方法：取川芎生品和酒炙品,分别用甲醇和水提取。将提取液进行高效液相色谱分析。比较川芎生品和酒炙品醇提液和水煎液的色谱图。结果：酒炙品川芎化学成分发生了明显的量的和质的变化。结论：川芎酒炙品药性的显著变化正是其化学成分整体变化所导致．的,有效成分溶出增加,药效增强。     

益智仁盐炙前后指纹图谱对比研究

目的 建立益智仁盐炙前后高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,探讨盐炙对益智仁内在成分的影响.方法 对益智仁生品、盐炙品饮片进行HPLC/UV指纹图谱分析,色谱柱采用Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈和水梯度洗脱,检测波长为260 nm,柱温:35℃,流速:1.0 ml/min.结果 益智仁盐炙后有两个新的色谱峰出现,7个特征峰相对含量发生变化.结论 益智仁通过盐炙后化学成分既有量的变化,也有质的变化.     

狼毒醋炙前后毒性比较研究

目的:比较狼毒醋炙前后对动物胃黏膜的刺激性变化情况。方法:比较狼毒醋炙前后单次大剂量给药后小鼠脏器病理切片,观察其对小鼠消化系统脏器的重量与PGE2含量的影响。结果:病理切片显示狼毒对小鼠胃黏膜有明显刺激性。狼毒经炮制后对小鼠胃体重量、PGE2含量的影响较生狼毒明显减轻。结论:经过醋炙后狼毒对动物胃黏膜的刺激性比生品时显著减弱。     

益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸的缩尿部位指纹图谱比较

目的:通过比较益智仁盐炙前后组成缩泉丸缩尿部位的指纹图谱,从物质基础上揭示益智仁盐炙后增强缩泉丸缩尿药效的原因。方法:采用HPLC,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长230 nm。记录10批益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸的石油醚部位HPLC图谱,建立相应指纹图谱,标定特征共有峰并比较其平均相对峰面积和平均相对保留时间。结果:益智仁盐炙后组成缩泉丸时,有11个共有峰平均相对面积明显增加,包括对缩尿药效贡献较大的1号,4号(teuhetenone A),5号(7-表-香科酮),7号色谱峰,增加率分别为123.08%,90.91%,53.33%,43.75%。结论:对缩尿作用贡献较大的4个成分含量的明显增加极有可能与缩泉丸缩尿作用的增强紧密相关,此外其他7个成分含量也有明显增加。