鼻咽癌肿瘤细胞增殖与凋亡关系及其分子机制的研究

目的了解鼻咽癌肿瘤细胞增殖与凋亡的关系及ｂｃｌ２表达在发病机制中的作用。方法１５例癌旁组织,６５例鼻咽癌用免疫组化技术标记ｂｃｌ２、ＰＣＮＡ,ＨＥ染色中作核分裂像计数,并将后两者合并为增殖指数;用ＩＳＥＬ法显示４４例鼻咽癌及１５例癌旁组织中的细胞凋亡。结果①鼻咽癌ＰＣＮＡ、核分裂像、凋亡细胞数均显著高于癌旁组织,但均与组织分型无关。增殖指数与凋亡细胞数呈正相关。②ｂｃｌ２在鼻咽癌中高表达,与组织分型有关,与凋亡细胞数呈负相关。结论①鼻咽癌肿瘤细胞具有高水平增殖的同时也具有高水平的凋亡,其肿瘤本身是高水平基础上增殖与凋亡失衡的结果。②ｂｃｌ２不是调控肿瘤细胞凋亡的唯一因素,但其抑制细胞凋亡的功能在鼻咽癌发病机制中有重要作用。     

食管鳞癌组织中增殖细胞核抗原和bcl-2蛋白的表达及意义

目的　研究ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－２ 蛋白在食管鳞状细胞癌（ＥＳＣ） 中的表达及其意义。方法　应用免疫组化（ＬＳＡＢ）的方法,检测了６５ 例食管鳞癌和５３ 例癌旁鳞状上皮组织中ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－ ２ 蛋白的表达情况,探讨其与ＥＳＣ病理组织学分级、临床分期、淋巴结转移和预后的关系。结果　６５ 例ＥＳＣ 中ＰＣＮＡ 指数为３９－９３ ±１２－４５ ,明显高于５３ 例癌旁鳞状上皮组织中的ＰＣＮＡ指数８－３８±３－２０（Ｐ＜０－００１） ,ＰＣＮＡ 和ｂｃｌ－２ 蛋白的表达均与ＥＳＣ的分化程度呈负相关（ Ｐ＜ ０－０５）,且ｂｃｌ－ ２ 的表达与术后生存期呈负相关（Ｐ＜ ０－０５）。结论　ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－ ２ 蛋白均可能有促进ＥＳＣ肿瘤细胞增殖的作用,并影响ＥＳＣ的生物学行为。     

大肠癌中bcl-2和增殖细胞核抗原的表达及其临床意义

目的　研究大肠癌中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达及其临床意义,探讨其细胞凋亡和细胞增殖之间的关系。方法运用免疫组化法ＳＰ法检测５６例大肠癌组织中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达。结果５６例大肠癌中ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的阳性率分别为６０．７％和１００．０％。ｂｃｌ－２在侵及肌层和Ａ、Ｂ期的表达高于侵及浆膜及浆膜外和Ｃ、Ｄ期（Ｐ＜０．０５）,高、中分化癌高于低、未分化癌但无明显差异（Ｐ＞０．０５）;ＰＣＮＡ增殖指数在低、未分化癌,侵及浆膜及浆膜外和Ｃ、Ｄ期高于高、中分化癌,侵及肌层和Ａ、Ｂ期（Ｐ＜０．０１）;ｂｃｌ－２和ＰＣＮＡ的表达无相关关系（Ｐ＞０．０５）。结论大肠癌中ｂｃｌ－２的表达与浸润深度和Ｄｕｋｅｓ分期密切相关,而与分化程度无关,ＰＣＮＡ增殖指数与肿瘤分化程度、浸润深度和Ｄｕｋｅｓ分期有关。     

鼻咽癌中抗凋亡基因bcl-2的表达及其与EB病毒的关系

为了探讨鼻咽癌（ＮＰＣ）中抗凋亡基因ｂｃｌ－２的表达及其与ＥＢ病毒的关系。用免疫组化方法对曾用ＥＢ病毒探针进行原位杂交的ＮＰＣ标本再进行ｂｃｌ－２检测。结果：非角化型鳞状细胞癌５４例，阳性５１例，阴性３例；角化型鳞状细胞癌１２例，阳性３例，阴性９例；腺癌３例，阳性１例，阴性２例；ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１１例，阳性９例，阴性２例；非ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１０例，阳性２例，阴性８例。ＮＰＣ各组织学类型中ｂｃｌ－２的表达与ＥＢ病毒原位杂交表达的结果相似。提示ｂｃｌ－２基因表达与ＮＰＣ组织学类型关系密切，非角化型大部分为阳性表达，角化型大部分为阴性表达，并提示ＥＢ病毒在ＮＰＣ的发生机制上可能与抑制细胞凋亡的基因有协同作用。     

鼻咽癌中抗凋亡基因hcl—2的表达及其与EB病毒的关系

为了探讨鼻咽癌中抗凋亡基因ｂｃｌ－２的表达及其与ＥＢ病毒的关系。用免疫组化方法对曾用ＥＢ病毒探针进行了原位杂交的ＮＰＣ标本再进行ｂｃｌ－２检测。结果：非角化型鳞状细胞癌５４例，阳性５１例，阴性３例；角化型鳞状细胞癌１２例，阳性３例，阴性９例；腺癌３例，阳性１例，阴性２例；ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１１例，阳性９例，阴性２例，非ＮＰＣ淋巴结转移性鳞状细胞癌１０例，阳性２例，阴性８例。     

凋亡相关基因P16、bcl-2及nm23与鼻咽癌相关性的研究

目的 探讨鼻咽癌（ＮＰＣ）凋亡相关基因Ｐ１６、ｂｃｌ－２及ｎｍ２３与ＮＰＣ的关系。方法 采用免疫组化Ｓ－Ｐ法对７３例ＮＰＣ、２０例无瘤ＮＰ组织的石蜡包埋标本中的Ｐ１６、ｂｃｌ－２及ｎｍ２３蛋白进行检测。结果 ＮＰＣ组织的Ｐ１６表达显著低于无瘤ＮＰ组织,而ｂｃｌ－２表达则显著高于无瘤ＮＰ组织（Ｐ〈０．０１）;Ｐ１６及ｂｃｌ－２蛋白表达与ＮＰＣ的临床分期相关（Ｐ〈０．０５）;ｎｍ２３与颈淋巴结转移相关     

骨巨细胞瘤中PCNA、p16、Rb与bcl-2基因表达及凋亡的检测研究

目的：探讨骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）的细胞学性质、肿瘤发生以及生物学行为。方法：用免疫组化法检测了５１例ＧＣＴ中ＰＣＮＡ、ｐ１６、Ｒｂ和ｂｃｌ－２蛋白的表达及用ＴＵＮＥＬ法检测其凋亡细胞。结果：全部标本ＰＣＮＡ阳性表达，其中典型多核巨细胞未见着色；ｐ１６、Ｒｂ和ｂｃｌ－２在ＧＣＴ中的阳性率分别为９２２％、９６１％和３３３％。Ｊａｆｅ分级间ＰＣＮＡ的表达具有显著性差异；ｐ１６和Ｒｂ在ＧＣＴ中的表达具有一定的负相关；ｂｃｌ－２在Ⅰ与Ⅲ级及Ⅰ与Ⅱ＋Ⅲ级间表达差异有显著性。ＧＣＴ的凋亡率（ＡＩ）为０８６％，多核巨细胞凋亡偶见。ＧＣＴ的ＡＩ与ｂｃｌ－２的表达呈显著负相关，ｂｃｌ－２表达与否的ＡＩ之间有显著的差异。结论：Ｊａｆｅ分级可以反映出ＧＣＴ内的增殖状态；多核巨细胞是一种静息细胞；ｂｃｌ－２在ＧＣＴ发展中可能起一定的作用；联合检测ＰＣＮＡ和ｂｃｌ－２可以作为判断其生物学行为的指标。     

大肠瘤-癌序列中细胞凋亡及其相关调控基因表达的生物学意义

为探讨细胞凋亡状态及其相关调控基因表达水平与人大肠癌演进的关系,作者分别采用ＦＣＭ检测短期原代培养的人大肠粘膜、腺瘤及癌细胞不同时相凋亡频率;ＴＵＮＥＬ技术检测２５例腺瘤和７７例腺癌组织中原位凋亡指数（ＡＩ）;免疫组化ＡＢＣ法检测原位增殖指数（ＫＩ）及ｂｃｌ－２、ｂａｘ、ｗａｆ１及ｐ５３基因表达。结果显示：体外培养癌细胞生长期凋亡频率明显低于粘膜细胞;体内瘤－癌组织中ＡＩ与ＫＩ相平衡;高分化和早期癌中ｂｃｌ－２呈高表达,癌前腺瘤、癌栓及远处转移病例中ＡＩ／ＫＩ增高并与ｂａｘ阳性表达和ｗａｆｌ缺失表达有一定联系,ｐ５３突变与高增殖水平有关。从而提示凋亡易感性改变可能在结直肠肿瘤形成早期起着重要作用;ＡＩ可能是一个反映增殖活性的指标;Ｂｃｌ家族基因与大肠癌细胞自发性凋亡及生物学行为有密切关系。     

鼻咽癌细胞株裸鼠移植癌中癌细胞增生凋亡及其相关基因的表达

目的：研究鼻咽癌细胞株ＣＮＥ－１、ＣＮＥ－２裸鼠移植瘤中癌细胞增生,凋亡及其与肿瘤生长速度的关系,探讨移植癌中肿瘤细胞凋亡的机理。方法：将鼻咽癌细胞株ＣＮＥ－１,ＣＮＥ－２分别接种于裸鼠皮下,并连续在体内传９代。对每一代肿瘤进行ＨＥ染色,ＴＵＮＥＬ法（原位细胞死亡死亡末端标记法）检测原位细胞凋亡及免疫组化法检测ＰＣＮＡ、ｂｃｌ－２、ｂａｘ和ｐ５３的表达。结果：ＣＮＥ－２移植瘤生长速度快于ＣＮＥ－１     

Bcl—2和p53蛋白表达对肝硬变和肝细胞癌中细胞增殖和凋亡的 …

利用原位ＤＮＡ末端转移酶标记技术及Ｓ 疫组织化学方法检测了肝硬变和肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中凋亡细胞,ｐ５３,ｂｃｌ－２蛋白和ＰＣＮＡ的表达。结果显示：ＨＣＣ与肝硬变组织比较,凋亡细胞密度低,ＰＣＮＡ阳性细胞密度高ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白阳性强度高,且均与ＨＣＣ分化程序有关。提示ｐ５３和ｂｃｌ－２蛋白可能是通过其过度表达影响细胞增殖和细胞凋亡失衡,并以“选择性细胞增殖”形式导致的发生和发展。     

VP—16诱导PC—3细胞凋亡和bcl—2及kc—myc基因表达的研究

目的 研究ＶＰ－１６诱导ＰＣ－３细胞凋亡和癌基因ｂｌｃ－２及Ｃ－ｍｙｃ表达的关系。方法 用末端标记法（ＴＵＮＥＬ）和流式细胞术（ＦＣＭ）研究ＰＣ－３细胞凋亡,以免疫组化方法研究ｂｃｌ－２及Ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。结果 ＴＵＮＥＬ和ＦＣＭ检测表明,ＰＣ－３细胞的凋亡率随ＶＰ－１６作用浓度增加和作用时间延长而升高;免疫组化结果显示：ｂｃｌ－２和ｃ－ｍｙｃ基因表达的阳性百分率随ＶＰ－１６作用浓度增加和作用     

鼻咽癌不同组织类型中bcl-2及c-myc的表达

目的 检测鼻咽癌不同组织类型中ｂｃｌ－２及ｃ－ｍｙｃ的表达,探讨其与鼻咽癌组织分化的关系。方法 按１９９１年,ＷＨＯ鼻咽癌组织分类标准,随机选取低分化鳞状细胞癌（ＰＤＳＣ）２７例、分化型非角化性癌（ＤＮＫＣ）３５例及未分化型非角化必副产品（ＵＮＫＣ）３８例活检存档标本,用免疫组化方法检测鼻咽癌细胞中ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ的表达。结果 ｂｃｌ－２在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的阳性率分别为８５．２％、８０％及８４．２％;ｃ－ｍｙｃ在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的阳必表达率８１．５％、７６．５％及７８．９％,其中包括细胞核或细胞浆染色阳性。ｂｃｌ－２、ｃ－ｍｙｃ在ＰＤＳＣ、ＤＮＫＣ及ＵＮＫＣ中的表达差异无统计学意义（Ｐ〉０．０５）。结论 鼻咽癌不同组织类型中ｂｃｌ－２及ｃ－ｍｙｃ的表达无显著性差异,提示ｂｃｌ     

大肠瘤—癌序列中细胞凋亡及其相关调控基因表达的生物？…

为探讨细胞凋亡状态及其相关调控基因表达水平与人大肠癌演进关系。作者分别采用ＦＣＭ检测短期原代培养的人大肠粘膜,腺瘤及癌细胞不同时相凋亡频率,ＴＵＮＥＬ技术检测２５例腺瘤和７７例腺癌组织中原位凋亡指数（ＡＩ）,免疫组化ＡＢＣ法检测原位增殖指数（ＫＩ）及ｂｃｌ－２,ｂａｘ,ｗａｅｆ１及ｐ５３基因表达,结果显示,体外培养癌细胞生长期凋亡频率明显低于粘膜细胞,体内瘤－癌组织中ＡＩ与ＫＩ相平衡;高分化和早期     

原发性肝癌中Bcl—2及Bax蛋白表达与细胞凋亡指数的关系

对２２例人肝细胞癌及癌旁组织分别进行Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ的免疫组织化学研究和ＴＵＮＥＬ技术标记,探讨肝细胞癌中凋亡调控蛋白的表达与凋亡指数的。在肝细胞癌中ＢＣＬ－２蛋白的表达率为２２．７３５,与癌旁组织相比无差异;Ｂａｘ蛋白呈低表达,表达率为４５．４５％,与癌旁组织相比有显著差异;肝癌组织中凋亡指数为９．５５％,低于癌旁组织１５．６８％,二者有显著差异,肝细胞癌的发生民细胞凋亡受到抑制有关,Ｂａｘｆ     

增殖细胞核抗原及Bcl—2癌基因蛋白在鼻咽癌的表达及与预后的关系

用单克隆抗体ＰＣ１０及抗Ｂｃｌ－２蛋白对６６例鼻咽癌进行回顾性免疫组化研究。结果，增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）增殖指数（ＰＩ）分级在生存期长短两组之间差异显著（Ｐ＜０．０１），而在非角化鼻咽癌亚型之间无明显差异（Ｐ＞０．０５）；Ｂｃｌ－２蛋白在４８／６３例鼻咽癌中呈阳性表达，在不同生存期及不同亚型非角化鼻咽癌中的表达均无明显差异。结果表明：ＰＣＮＡ增殖指数可反映鼻咽癌的增殖状态，是较好的判断预后的指标，ＰＩ分级高者预后较差，低者预后较好。Ｂｃｌ－２蛋白可做为鼻咽癌较好的肿瘤标记物，在鼻咽癌的发生上可能起重要作用。     

大肠癌不同部位粘膜细胞中增殖细胞核抗原表达的研究

探讨增殖细胞核抗原在大肠癌及癌周不同部位粘膜细胞中的表达及意义。方法采取正常大肠１０例,大肠癌远旁、近旁和癌粘膜各３０例。用免疫组化染色（ＳＰ法）检测增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ,ＰＣＮＡ）的表达。结果ＰＣＮＡ染色阳性物质主要定位于细胞核。ＰＣＮＡ阳性细胞在大肠癌组织中的分布呈不同程度的异质性。正常大肠和大肠癌粘膜细胞中ＰＣＮＡ阳性细胞数分别为２．     

用TRAP PCR ELISA及TRAP PCR PAGE测定鼻咽癌端粒酶活性的比较

目的：比较ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ及ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＰＡＧＥ检测鼻咽癌端 酶的活性。方法：分别采用ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ及ＴＲＡＰ ＰＣＲ ＰＡＧＥ检测了３８例鼻咽癌（ＮＰＣ）、１５例癌旁组织、１９例慢性鼻咽炎和鼻咽癌ＨＮＥ１细胞株、其它２种癌细胞株及３种正常细胞的端粒酶表达,并探讨了在不同数量的ＨＮＥ１细胞中端粒酶表达的灵敏度及ＨＮＥ１细胞株、５例ＮＰＣ活检组织经热灭活后端粒酶检测的     

鼻咽癌细胞株裸鼠移植瘤中癌细胞增生凋亡及其相关基因的表达

目的：研究鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２裸鼠移植瘤中癌细胞增生、凋亡及其与肿瘤生长速度的关系,探讨移植瘤中肿瘤细胞凋亡的机理。方法：将鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１、ＣＮＥ２分别接种于裸鼠皮下,并连续在体内传９代。对每一代肿瘤组织进行ＨＥ染色,ＴＵＮＥＬ法（原位细胞死亡末端标记法）检测原位细胞凋亡及免疫组化法检测ＰＣＮＡ、ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达。结果：ＣＮＥ２移植瘤生长速度快于ＣＮＥ１移植瘤;ＣＮＥ２移植瘤内肿瘤细胞分裂指数和细胞增生指数明显高于ＣＮＥ１移植瘤,而细胞凋亡却相对较少;移植瘤组织中的凋亡主要表现为“皱缩性坏死”和“凋亡小体”的形成;所有移植瘤组织中都有ｐ５３蛋白积聚和ｂａｘ过表达,但却未见ｂｃｌ２的表达。结论：ＣＮＥ１和ＣＮＥ２细胞株移植于裸鼠皮下后,生长速度的差异是由于肿瘤细胞增生凋亡比例不同所致;裸鼠移植瘤组织中瘤细胞的死亡主要表现为凋亡,凋亡的途径可能是不依赖于野生型ｐ５３,而由ｂａｘ所介导的     

p53,p21及—c—erbB—2蛋白在大肠粘膜和肿瘤中的表达

目的探讨ｐ５３、ｐ２１、及ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白与大肠癌发生和发展的关系。方法运用免疫组化方法检测ｐ５３、ｐ２１、及ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在６８例大肠癌、１１例大肠腺瘤、２６例癌旁粘膜及１５例正常大肠粘膜中的表达情况。结果①正常粘膜及癌旁粘膜中无ｐ５３蛋白过度表达。大肠癌ｐ５３蛋白表达率比腺瘤高（Ｐ＜０．０５）。正常粘膜ｐ２１及ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的阳性表达率比癌、腺瘤及癌旁粘膜低（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。②正常粘膜以３种蛋白全部阴性者为多，癌旁粘膜以１种蛋白阳性或全阴者为多。③ｐ５３及ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性的大肠癌和腺瘤的ＰＣＮＡ（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｕｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）增殖指数高（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５），而ｐ２１蛋白阳性及阴性的大肠癌和腺瘤的ＰＣＮＡ指数无明显差别（Ｐ＞０．０５）。ｐ２１及ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白阳性对癌旁粘膜及正常粘膜的ＰＣＮＡ增殖指数无明显影响。结论癌基因和抑癌基因蛋白协同表达可能与大肠腺瘤和癌的发生有关，尤其与ｐ５３蛋白的关系较为密切，似通过导致细胞过度增殖而使肿瘤发生和恶性转化。     

肝癌与癌旁组织中细胞凋亡,增殖及凋亡相关蛋白表达

目前 ,ｂｃｌ 2 ,ｐ53、Ｆａｓ与ｃ ｍｙｃ是最引入关注的凋亡相关基因蛋白 ,系统研究它们在肝细胞癌中的表达及作用的报道极少 ,收集我院 1990～ 1997年间原发性肝癌新鲜手术标本 4 9例 ,均带有癌旁组织 ,研究应用原位未端标记技术和兔疫组化ＬＳＡＢ法 ,检测肝细胞癌与癌旁组织中的细胞凋亡、增殖与凋亡相关蛋白的表达与分布 ,以期揭示它们在肝细胞癌发生、发展中的作用和意义。发于细胞核 ,呈棕黄色颗粒状或网状 ,范围与核等大并与染色质分布一致。在癌组织中ＰＣＮＡ阳性细胞在Ｆａｓ和ｃ ｍｙｃ是与细胞凋亡有关系较密切的基因蛋白。ｂ…