烟酸对3T3-L1脂肪细胞胆固醇流出的影响

目的观察烟酸对分化成熟的3T3-L1脂肪细胞胆固醇流出的影响,并探讨其机制。方法3T3-L1细胞促分化成熟后,给与不同浓度的烟酸(0～1.0mmol/L)干预24h后,收集细胞,逆转录聚合酶链反应测定脂肪细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1、B族Ⅰ型清道夫受体和过氧化体增殖物激活型受体γmRNA表达,采用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出。结果烟酸呈剂量依赖性增加脂肪细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1mRNA的表达,并促进载脂蛋白AⅠ介导的胆固醇流出,但对B族Ⅰ型清道夫受体表达无影响。过氧化体增殖物激活型受体γ在分化成熟的3T3-L1脂肪细胞有较高水平的表达,与空白组(0.38±0.29)比较,在1.0mmol/L浓度的烟酸干预时过氧化体增殖物激活型受体γ表达明显升高(3.15±0.96),为空白组的8.3倍。结论烟酸可通过上调过氧化体增殖物激活型受体γ表达,促进脂肪细胞载脂蛋白AⅠ—三磷酸腺苷结合盒转运体A1通路,加速细胞内胆固醇流出。这可能为解释烟酸升高高密度脂蛋白胆固醇的机制提供有用的线索。     

B族I型清道夫受体与高密度脂蛋白代谢

B族I型清道夫受体（SR—BI）是高密度脂蛋白（HDL）的受体，能够介导HDL胆固醇酯（CE）的选择性吸收。SR-BI介导的选择性吸收分为两个步骤：第一步是SR—BI和HDL结合；第二步胆固醇酯转移到胞膜。关于此过程已经提出了3种模型：①脂质融合；②疏水通道；③细胞内吞。进一步明确SR—BI介导的脂质吸收的过程与机制对胆固醇逆转运以及动脉粥样硬化的研究有重要意义。     

体外氧化修饰高密度脂蛋白对人单核细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出的影响

目的探讨体外氧化修饰后的高密度脂蛋白（ox-HDL）对人外周血单核细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出的影响。方法采用一次性密度梯度超速离心法从血浆中分离低密度脂蛋白（LDL）及高密度脂蛋白（HDL）,分别以Cu2+诱导法将其氧化修饰成ox-LDL及ox-HDL。采用密度梯度离心法和塑料吸附法从人外周血中分离出单核细胞,以50nmol/L佛波酯（PMA）刺激48h使之转化为巨噬细胞。细胞分为对照组（ox-LDL组）、阳性对照组（HDL组）及实验组（ox-HDL组）,对照组仅加入终浓度为80mg/L的ox-LDL;HDL组和ox-HDL组分别先加入终浓度均为50mg/L的HDL和ox-HDL共孵育1h后,再分别加入终浓度为80mg/L的ox-LDL,并于实验的0、6、12及24h测定细胞内总胆固醇（TC）、游离胆固醇（FC）及蛋白（Pro）含量。观察不同时间点各组细胞内TC/Pro比值的变化,并比较ox-HDL与HDL对细胞内TC/Pro比值影响的时效关系。结果成功地由体外氧化修饰了LDL及HDL并制备出理想的泡沫细胞模型。在实验的6、12及24h,ox-HDL组细胞内TC/Pro比值均较HDL组细胞高,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论体外氧化修饰后的HDL导致其胆固醇逆向转运（RCT）功能与效率的降低。     

高密度脂蛋白受体——清道夫受体BⅠ在脓毒症中的作用

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低被认为与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)的发生密切相关,其主要机制是高密度脂蛋白(HDL)水平降低导致胆固醇逆向转运的障碍。清道夫受体BⅠ(SR-BⅠ)是HDL的受体,在胆固醇转运过程中起到了关键性作用。近年来研究发现,SR-BⅠ在脓毒症中起保护作用,脓毒症病程中的炎症反应、内皮细胞损伤与动脉粥样硬化发生的内皮损伤和炎症过程有着相似的调节机制。本文对SR-BⅠ在脓毒症中的作用进行了综述,以期对动脉粥样硬化等心血管病的机制研究有启示作用。     

高密度脂蛋白胆固醇流出能力在冠状动脉粥样硬化性心脏病中的作用

高密度脂蛋白是心血管保护因子,与冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病和预后密切相关.高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化的主要机制是介导胆固醇逆向转移,其逆向转移功能可能受糖代谢、炎性状态等多种因素影响,并成为潜在的脂代谢紊乱治疗及监测靶点.     

高胆固醇血症患者血小板B族Ⅰ型清道夫受体表达的变化

目的 通过观察高胆固醇血症患者B族Ⅰ型清道夫受体表达的变化,探讨B族Ⅰ型清道夫受体在动脉粥样硬化发生中的作用及其表达变化的机制.方法 随机选取健康对照60例和高胆固醇血症患者80例,肘静脉取血,分离血清、血浆并提取血小板,放射免疫法检测血浆血管紧张素Ⅱ水平,硝酸还原酶法检测血清一氧化氮含量,实时定量聚合酶链反应和免疫印迹法分别检测血小板B族Ⅰ型清道夫受体的mRNA和蛋白表达水平.结果 高脂组的血浆血管紧张素Ⅱ水平和血清一氧化氮水平均较对照组明显升高(P<0.01).高脂组血小板B族Ⅰ型清道夫受体的mRNA和蛋白表达均较对照组明显降低(P<0.05和0.01).高脂组的血管紧张素Ⅱ水平与B族Ⅰ型清道夫受体的表达呈显著负相关(r=-0.488,P<0.05).结论 高胆固醇血症患者血小扳B族Ⅰ型清道夫受体表达的降低与血管紧张素Ⅱ的刺激有关.     

过氧化体增殖物激活型受体γ和δ在高密度脂蛋白介导细胞胆固醇流出中的作用

为探讨过氧化体增殖物激活型受体γ和δ在高密度脂蛋白介导的细胞胆固醇流出中的作用。取新鲜抗凝血浆 ,用超速离心机进行密度梯度离心 ,收集密度为 1 .0 6 3～ 1 .2 1 0组分。U937细胞用 5 0～ 4 0 0nmol L反义过氧化体增殖物激活型受体γ和δ预处理细胞 1 2h。培养U937细胞与 0 .2 8mCi L [3H] 胆固醇乙醇液共孵育 2 4h ,15 0 0r min离心 1 0min ,收集细胞 ,PBS漂洗 2次 ,RPMI 1 6 4 0重悬细胞 ,加HDL继续培养 0～ 4 8h。液体闪烁计数仪测细胞相对放射活性。Westernblot检测过氧化体增殖物激活型受体γ和δ蛋白表达水平。不同浓度HDL处理后细胞胆固醇流出具有明显差异 ,呈剂量 -效应关系。用 1 0 0nmol L反义过氧化体增殖物激活型受体γ处理 2 4h后 ,HDL介导的细胞胆固醇流出减少 (4 5 78± 2 0 6 ) ,与对照组 (4 0 2 4± 385 )比较差别有显著性。过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂ciglitizone预处理后 ,HDL介导的细胞胆固醇流出增加 ,用 0、2 5、5 0、1 0 0、2 0 0 μmol Lciglitizone处理的放射活性分别为 4 371± 2 4 3、386 9± 2 1 2、346 9± 2 0 9、31 5 6± 31 5和 30 2 0± 2 96。反义过氧化体增殖物激活型受体δ处理后 ,HDL介导的细胞胆固醇流出略有增加 ,处理浓度达 4 0 0nmol L时的放射活     

B族Ⅰ型清道夫受体基因外显子1多态性与冠心病、血脂水平的关系

目的 探讨B族Ⅰ型清道夫受体（SR-BⅠ）基因外显子1和内含子5单核苷酸多态性对中国天津地区汉族人群血脂水平和冠心病发病易感性的影响。方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析方法,测定370例冠心病患者和143例正常对照者SR-BⅠ基因外显子1的AluI酶切基因型及内含子5的ApaI酶切基因型,分析其与血脂水平、冠心病及冠状动脉造影结果的关系。结果 两组研究对象中内含子5均仅发现CC基因型。SR-BⅠ外显子1等位基因G、A频率在冠心病组和对照组分别为0.988、0.012和0.997、0.003。基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。外显子1 AluI酶切多态性基因型频率、等位基因频率组间比较均无显著性差异（P>0.05）。在冠心病组男性患者中,外显子1基因多态性变异组（GA＋AA基因型亚组）的血清高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AⅠ水平高于无变异组（GG基因型亚组）。结论 SR-BⅠ基因外显子1多态性可能与中国天津汉族人群冠心病发病易感性及冠心病病变严重程度无关,但冠心病患者SR-BⅠ基因外显子1 A等位基因可引起男性血清高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白AⅠ水平升高。     

动脉粥样硬化研究的新靶点:B族Ⅰ型清道夫受体

B族Ⅰ型清道夫受体(SRBI)作为高密度脂蛋白(HDL)受体,能与HDL结合,参与HDL胆固醇酯的选择性摄取和代谢,以及介导游离胆固醇在脂蛋白和细胞之间的双向运动,并通过多种机制对动脉粥样硬化的发生起保护性作用。体内SRBI功能的分析不仅证实了SRBI在HDL代谢中的重要性,而且也为研究动脉粥样硬化发生机制提供了一种新的动物模型。     

高密度脂蛋白胆固醇水平与高密度脂蛋白功能:孰是孰非？

早期流行病学研究发现降低的高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平与增加的冠心病风险密切相关,这促使了高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化假说的提出:相对于低密度脂蛋白胆固醇而言,HDLC是"好"的胆固醇,提高血清HDLC水平可能降低心血管事件风险。然而新的研究发现:升高HDLC水平并不能减少临床心血管事件的发生。这使得高密度脂蛋白抗动脉粥样硬化假说遭到质疑。近来,高密度脂蛋白功能而非HDLC水平与动脉粥样硬化的关系被更多地关注。本文就高密度脂蛋白最新相关研究进行综述。     

High-Density Lipoprotein Cholesterol Efflux Capacity as a Novel Prognostic Surrogate for Coronary Artery Disease

Aim: We examined the impact of baseline high-density lipoprotein cholesterol efflux capacity (CEC) on major cardiac adverse events (MACE) in patients with coronary artery disease (CAD) during a long-term secondary prevention. Method: CEC was measured using a cell-based efflux system in (3)[H]-cholesterol-labeled J774 macrophages in apolipoprotein B-depleted plasma between January 2011 and January 2013. Patients with CAD were divided into 2 groups as a boundary CEC value of 1: 0.19 ≤ CEC ＜1 (impaired CEC group, mean CEC of 0.76±0.16, n =136), and 1 ≤ CEC ≤ 2.08 (enhanced CEC group, 1.20±0.19, n =44). MACE, comprised the incidence of cardiac death, non-fatal myocardial infarction, and any revascularizations (RV) without restenosis approximately 1 year after vascularization, was retrospectively investigated at September 2019. Impact of enhanced CEC on MACE among 22 variables was examined by applying a Cox proportional hazard model. Result: The frequency of MACE in impaired CEC group (16.9%, mean observational interval of 2111±888 days) was significantly higher than that in enhanced CEC group (2.3%, 2,252±685, p =0.013), largely driven by the significantly higher RV incidence (14.0 % versus 2.3 %, p =0.032). Enhancement of CEC was the significant predictor of MACE (hazard ratio: 0.11; 95% CI: 0.013-0.879; p =0.038). Conclusion: A baseline CEC level of more than 1 in patients with CAD brought favorable long-term clinical outcomes, suggesting that CEC is a useful prognostic and therapeutic surrogate for secondary prevention of CAD.     

他汀类药物对急性冠脉综合征患者高密度脂蛋白功能的影响

目的 探讨他汀类药物对急性冠脉综合征患者高密度脂蛋白(High density lipoprotein, HDL)功能的影响。方法 选取经临床及冠脉造影诊断的急性冠脉综合征患者80例,分为服用他汀组(35例)和未服用他汀组(45例),选取同期经冠脉造影证实的非冠心病患者23例作为对照组,以患者血浆诱导巨噬细胞胆固醇外流,评估他汀类药物对胆固醇外流的影响;通过检测去除apoB血浆中的脂蛋白相关磷脂酶A2(LpPLA2)浓度,探讨他汀类药物对HDL抗氧化功能的影响。结果 急性冠脉综合征患者胆固醇外流率较对照组显著降低(18.77%±5.94% vs 23.68％±6.63%,p=0.001),但服用他汀组与未服用他汀组患者胆固醇外流率差异无统计学意义(18.19±5.85% vs 19.24±6.05%,p=0.450),且不受服用他汀种类的影响;服用他汀组患者比未服用他汀组患者血浆HDL-LpPLA2浓度有升高趋势,但差异无统计学意义(10.08±5.54ng/ml vs 7.55±4.89ng/ml,p=0.134)。结论 急性冠脉综合征患者HDL促胆固醇外流功能减低,他汀类药物不能改善HDL经ABCA1途径的胆固醇外流功能,对高密度脂蛋白抗氧化功能具有一定增强趋势。     

高密度脂蛋白胆固醇与冠心病的关系（附600例临床分析）

本文通过６００例临床分析发现并确认：（１）冠心病心梗组的ＨＤＬ－ｃｈ平均浓度为３８．４０～４１．３１ｍｇ％，非冠心病组的ＨＤＬ－ｃｈ平均浓度为４９．５２～５２．７９ｍｇ％，前者明显低于后者；（２）ＨＤＬ－ｃｈ值都在３９ｍｇ％以下；（３）６０岁以上的人群中ＴＣ水平与冠心病之间可能没有肯定的关系，而ＴＣ／ＨＤＬ－ｃｈ比值升高较单纯ＴＣ的升高对诊断ＡＳ更有意义，该比值＞４：１较比值＜４：１时，冠心病的比例明显增加：（４）吸烟，肥胖者ＨＤＬ－ｃｈ值较不吸烟，体重正常者明显降低，提示吸烟，肥胖也是通过降低ＨＤＬ－ｃｈ促成ＡＳ病变的；（５）通过增加体育活动，减轻体重，停止吸烟，以及使用某些降脂药，均可提高血清ＨＤＬ－ｃｈ水平，这有利于预防和控制ＡＳ的发生和发展。     

高密度脂蛋白对3T3-L1脂肪细胞分泌白细胞介素8的影响

分别用不同浓度高密度脂蛋白(HDL,0、10、50和100μg/ml)孵育3T3-L1脂肪细胞16 h,再加入100 ng/ml脂多糖共同孵育6 h.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组脂肪细胞培养液中的白细胞介素8水平,半定量逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)测定脂肪细胞PPARγmRNA的表达.结果 显示,脂多糖刺激使脂肪细胞分泌白细胞介素8增加(P＜0.05).不同浓度HDL干预的脂肪细胞分泌的白细胞介素8水平均低于脂多糖刺激组,并且呈剂量依赖性.不同浓度HDL干预的脂肪细胞PPARγmRNA表达较单用脂多糖刺激组显著升高.这些结果提示HDL可能通过上调PPARγ的表达、抑制脂肪细胞分泌白细胞介素8分泌.     

SR-BI Associates with ABCG1 and Inhibits ABCG1-mediated Cholesterol Efflux from Cells to HDL3

Reverse cholesterol transport(RCT)is assumed to play a critical role in the pathogenesis of atherosclerosis.Cellular cholesterol efflux,by which cholesterol is transported from peripheral cells to high-density lipoprotein(HDL)acceptor     

miRNA-638对巨噬细胞内胆固醇外流的影响及其发生机制研究

背景流行病学研究表明生活方式、饮食结构等外部因素的改变与遗传因素相互作用导致人体脂代谢紊乱,而胆固醇逆转运过程能够维持体内胆固醇稳态。目的探讨miRNA-638对巨噬细胞内胆固醇外流的影响及其发生机制。方法实验于2016年9月-2017年9月完成。采用100 ng/ml佛波酯诱导人髓系白血病单核细胞(THP-1)贴壁并分化为巨噬细胞,根据预实验结果选取浓度为20 nmol/L的miRNA-638模拟物及其阴性对照物进行转染。采用NBD-胆固醇分别检测转染miRNA-638模拟物及其阴性对照物巨噬细胞经载脂蛋白AI(ApoAI)、高密度脂蛋白(HDL)及标准血清外流液介导的胆固醇外流率;采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测转染miRNA-638模拟物及其阴性对照物巨噬细胞中三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、三磷酸腺苷结合盒转运体G1(ABCG1)和极低密度脂蛋白受体(VLDLR)mRNA及其相对表达量。结果转染miRNA-638模拟物巨噬细胞经ApoAI外流液介导的NBD-胆固醇外流率低于转染阴性对照物巨噬细胞(P<0.05);转染miRNA-638模拟物巨噬细胞与转染阴性对照物巨噬细胞经HDL、标准血清外流液介导的NBD-胆固醇外流率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。转染miRNA-638模拟物巨噬细胞的ABCA1、ABCG1、VLDLR mRNA相对表达量低于转染阴性对照物巨噬细胞(P<0.05)。转染miRNA-638模拟物巨噬细胞中ABCA1、ABCG1相对表达量低于转染阴性对照物巨噬细胞(P<0.05);转染miRNA-638模拟物巨噬细胞与转染阴性对照物巨噬细胞中VLDLR相对表达量比较,差异无统计意义(P>0.05)。结论miRNA-638可减少由ApoAI介导的巨噬细胞内胆固醇外流,该作用可能是通过调控ABCA1/ABCG1的表达实现的。     

巨噬细胞修饰低密度脂蛋白对细胞受体活性的影响及前列腺素E_2的作用

为研究低密度脂蛋白经细胞修饰后对细胞受体的影响及前列腺素E2的作用，利用免疫细胞化学和生物亲和素-酶联免疫吸附法分别检测小鼠腹腔巨噬细胞清道夫受体、小鼠皮肤纤维母细胞低密度脂蛋白受体的结合活性，结果发现修饰组的巨噬细胞胞浆及胞膜有强阳性黄褐色颗粒，而药物组仅中度着色；修饰组低密度脂蛋白与其受体结合量（54±13μg／g细胞蛋白）较对照组（144±μg／g细胞蛋白）显著下降（P＜0．01）；药物组受体结合量（100±11μg／g细胞蛋白）较修饰组明显提高（P＜0．05）。表明细胞修饰低密度脂蛋白能够刺激清道夫受体活性，抑制低密度脂蛋白受体活性；前列腺素E2（20mg／L）可对抗细胞修饰低密度脂蛋白对此二种受体的作用。     

High-Density Lipoprotein Cholesterol and Cardiovascular Events in Patients with Stable Coronary Artery Disease Treated with Statins: An Observation from the REAL-CAD Study

Aim: The association between high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) level after statin therapy and cardiovascular events in patients with stable coronary artery disease (CAD) remains unclear. Thus, in this study, we sought to determine how HDL-C level after statin therapy is associated with cardiovascular events in stable CAD patients. Methods: From the REAL-CAD study which had shown the favorable prognostic effect of high-dose pitavastatin in stable CAD patients with low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) ＜120 mg/dL, 9,221 patients with HDL-C data at baseline and 6 months, no occurrence of primary outcome at 6 months, and reported non-adherence for pitavastatin, were examined. The primary outcome was a composite of cardiovascular death, non-fatal myocardial infarction, non-fatal ischemic stroke, or unstable angina requiring emergent admission after 6 months of randomization. Absolute difference and ratio of HDL-C levels were defined as (those at 6 months–at baseline) and (absolute difference/baseline)×100, respectively. Results: During a median follow-up period of 4.0 (IQR 3.2–4.7) years, the primary outcome occurred in 417 (4.5%) patients. The adjusted risk of all HDL-C-related variables (baseline value, 6-month value, absolute, and relative changes) for the primary outcome was not significant (hazard ratio [HR] 0.99, 95% confidence interval [CI] 0.91–1.08, HR 1.03, 95% CI 0.94–1.12, HR 1.05, 95% CI 0.98–1.12, and HR 1.08, 95% CI 0.94–1.24, respectively). Furthermore, adjusted HRs of all HDL-C-related variables remained non-significant for the primary outcome regardless of on-treatment LDL-C level at 6 months. Conclusions: After statin therapy with modestly controlled LDL-C, HDL-C level has little prognostic value in patients with stable CAD.